人类呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F蛋白)为病毒表面结构蛋白,可以刺激机体产生保护性抗体.因此对F蛋白的深入研究将有助于了解病毒感染的机理,从而为诊断试剂和亚单位疫苗的研制提供帮助.本文就F蛋白结构及结构与功能关系的研究进展进行简要综述.
作者:范行良;周铁群 刊期: 2004年第04期
本文介绍了牛血清的分类,牛血清中的主要蛋白成分及其在体外细胞培养中的作用,疫苗中残余牛血清的检测.
作者:潘殊男;刘保奎 刊期: 2004年第04期
本文就基因治疗相关产品这一类新制品的热原检测问题进行了分析讨论.将现有的国家法规规定的家兔热原检查法和内毒素检查法对该类产品的检测中存在的缺陷进行了分析,提出了热原检测对该类制品检测时面对的三个挑战;并将国外正在研究、发展的一种新的体外热原检测方法的优势进行了介绍.
作者:谭德讲;张河战;白东亭 刊期: 2004年第04期
葡萄球菌肠毒素是引起细菌性食物中毒的主要原因之一,葡萄球菌肠毒素按照血清学的方法可分为SEA、SEB、SEC1-3、SED和SEE等七个经典肠毒素.但仍有5%未知的新型肠毒素存在,其编码基因有 seg、sei、sej、sek、sel 等.葡萄球菌肠毒素也是一种超抗原,能刺激非特异性T细胞的大量增殖.本文对葡萄球菌肠毒素结构、编码基因和功能等方面的研究进展作了简要综述.
作者:彭力荇;万成松 刊期: 2004年第04期
乙肝疫苗是目前唯一应用基因工程技术表达成功的商品化疫苗,大量、长期的人体免疫接种充分证明了其免疫效果和安全性.然而,约5%~10%免疫人群呈现抗体无/低应答.影响无/低应答的因素较为复杂,其中人白细胞抗原系统(HLA)可能起重要作用.本文对接种乙型肝炎疫苗无/低应答与HLA关联的研究进行综述.
作者:梁争论;李河民;张华远 刊期: 2004年第04期
随着基因工程技术的发展,蛋白质类药物的应用越来越受到人们的青睐.但蛋白质类药物具有血浆半衰期较短、有一定的免疫原性等不足之处,在一定程度上限制了其临床应用.由于聚乙二醇(PEG)具有与蛋白质相容的特性,用其对蛋白质类药物进行化学修饰已经成为医学和生物工程领域的热门课题.本文重点介绍了PEG的特性以及应用其修饰蛋白质类药物的原理和存在的一些问题.
作者:徐静;倪道明;张振龙 刊期: 2004年第04期
急性呼吸窘迫综合征是一种严重的呼吸系统疾病,呼肠病毒感染小鼠可致ARDS,本文就该小鼠实验动物模型中所出现的临床征候、病理学变化和病毒在肺部的复制及清除进行综述,以期对人类ARDS的研究有所启示.
作者:王争强;朱虹;端青 刊期: 2004年第04期
本文综述MHCⅡ抗原提呈的分子机制,并着重对MHCⅡ抗原提呈通路中的分子伴侣恒定链(Invariant chain,Ii)的结构、功能研究的近期进展作了回顾,对近年来开展起来的利用Ii链作为内源性靶向载体,将目的抗原表位内源性靶向MHCⅡ抗原结合凹槽的研究进行了简单的综述,内源性靶向为疫苗设计提供了很好的思路,可以应用于病原微生物、肿瘤和变态反应性疾病的治疗和预防中.
作者:高明;王海平;王全立 刊期: 2004年第04期
为了观察SARS冠状病毒在SARS患者粪便中的存在规律,建立了检测SARS冠状病毒RNA的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,并应用该方法检测了241份SARS患者粪便样本.部分PCR产物应用测序技术进行验证.RT-PCR 的灵敏度为10-10稀释度的病毒原液(原液为108TCID50/ml).241份粪便样本的总体检出率为24.1%(58/241),其中发病后的前10d和20d的检出率均为50.0%.随着发病时间的延长,阳性检出率呈下降趋势.应用RT-PCR从粪便中检测SARS冠状病毒是可行的,在发病50d以后仍有17.0%左右的阳性检出率,提示SARS恢复期患者具有排毒的可能性,给后续的卫生防疫措施提供了一定的参考数据.
作者:戴二黑;李京湘;杜宗敏;吴清发;王效义;杨玲;刘海洪;庞昕;韩延平;翟俊辉;江凌晓;陈泽良;邱茂锋;王津;王宏霞;郭兆彪;汪建;杨瑞馥 刊期: 2004年第04期
作者通过鲎试验法检测多种来源、多个批号的药用明胶中细菌内毒素含量并进行合格批号的干扰试验,证明明胶对鲎试剂有干扰作用,其作用表现为浓度越高干扰越大.抗增液无助于消除明胶对鲎试剂的干扰,而有效的稀释可克服这种干扰.并对明胶及含明胶成份的生物制品在细菌内毒素检测中的限值确定及其试验影响进行了讨论.
作者:何星;张雪平;田盛举;薛峰;王荫椿 刊期: 2004年第04期
建立西尼罗病毒敏感、特异、快速的RT-PCR检测方法用于实验室诊断和流行病学监测.采用一步RT-PCR和套式PCR法对西尼罗病毒感染的乳鼠脑和细胞培养上清进行扩增,并对扩增产物进行序列测定.两种方法均可分别从两种组织中扩增出与预期大小相一致的片段,套式PCR法比一步RT-PCR法更为敏感,该扩增片段与西尼罗病毒埃及Eg101株相应序列的同源性为99%.
作者:邓永强;姜涛;范宝昌;于曼;祝庆余;秦鄂德 刊期: 2004年第04期
经实验建立了一种用于检测血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量的微量测定法,并与比色法(传统赖氏法)进行了比较.用两种方法检测定值血清、室内质控及样品并比较标准曲线后,结果无显著性差异,同时微量法重复性较好,结果表明微量法测定ALT酶活力可以替代比色法测定血浆中ALT含量,适合大批量血浆ALT含量的快速检测.
作者:边兴国;胡军;尚立群;邸世铮;周海云;刘向明 刊期: 2004年第04期
为了建立一种简便快速的胶体金免疫层析法(GICA)用于检测沙门氏菌,将抗沙门氏菌多抗用抗原吸收法封闭与其他肠道杆菌的交叉反应,标记胶体金溶胶制成探针,采用多膜复合的方法制成免疫层析条.结果表明:该层析条灵敏度为2.1×106cfu/ml,不与其他肠道杆菌反应,37℃放置33天,检测结果无差异.该方法灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,有良好的开发应用前景.
作者:王中民;李君文;王新为;郑金来 刊期: 2004年第04期
在以原代地鼠肾细胞培养生产狂犬病疫苗工艺的基础上,通过对病毒收获液的浓缩倍数﹑灭活方式的改进及优化﹑冻干稳定剂的筛选﹑冻干曲线的确立,制备出了冻干疫苗,其质量及稳定性较液体疫苗有了整体水平的提高,各项检定结果均符合<中国生物制品规程>(2000版).
作者:邹勇;李红芳;郭锡雷;张锡云;龚健;王莫非;陈继军;张邦利;李帆;朱玉梅;王玉琳 刊期: 2004年第04期
观察重组(汉逊酵母)乙肝疫苗免疫儿童的副反应和抗体应答.按0、1、6月免疫程序,分别应用2批重组汉逊酵母疫苗和2批重组酿酒酵母疫苗,免疫221名6至12岁儿童,其中汉逊酵母疫苗1批(A)接种102人,另一批(B)接种26人,重组酿酒酵母疫苗1批(C)和另1批(D)分别接种74和19人.观察每次接种后的副反应和全程免疫一月后(T7)的抗体应答.儿童接种汉逊酵母疫苗后副反应发生率低,有个别出现发热反应,但均低于37.8℃,且为一过性.T7时4组儿童抗-HBs血清阳转率均在96%以上,GMT范围在229.98~338.83IU/L之间.免疫A批疫苗儿童组抗体滴度(GMT)显著高于免疫C批疫苗组(270.33、229.98IU/L; P <0.05).汉逊酵母乙肝疫苗具有较好的安全性,免疫儿童抗体应答水平较高.
作者:吴小音;李艳萍;梁争论;农艺;李河民;李荣成;杨继业;张华远 刊期: 2004年第04期
为了探讨国产甲型肝炎灭活疫苗在儿童中应用的免疫效果,选择2~15岁抗-HAV阴性健康易感儿童91名作为接种对象,采用0、6程序接种国产甲型肝炎灭活疫苗250U/剂,观察免疫后的局部反应和全身反应,并于全程免疫后一个月检测抗-HAV 阳转率和抗体GMT.结果91例观察对象在初免和加强免疫后均未见即时副反应,只在8~72小时内出现轻微的一过性局部和全身反应.全程免疫后一个月抗-HAV阳转率为100%.抗体GMT为14 407mIU/ml.国产甲肝灭活疫苗在儿童中应用具有良好的安全性和免疫原性,采用0、6个月程序可获得高滴度抗体.
作者:张元强;孙相明;吕作芝;张萍;贾秀岩 刊期: 2004年第04期
通过对蔗糖梯度离心法纯化Vero细胞乙脑疫苗的纯化工艺进行分析,发现现行工艺中收取的病毒组分中,不同蔗糖浓度中病毒的纯度是不同的,而呈峰型且与病毒效力峰及蛋白浓度峰不重合.实验结果对今后工艺的改进具有指导意义.另外应用Sephacry1-s-1000凝胶层析法对乙脑病毒进行了纯化研究和分析,发现蔗糖梯度离心法和层析法纯化的病毒的纯度及回收率分别为291.46 u/mg、96.01%和309.41 u/mg 65.08%,Sephacry1-s-1000凝胶层析法同样可以获得较高的纯度和收率.
作者:杨立清;张晋;卢立新;李红;石男 刊期: 2004年第04期
以伤寒Vi多糖疫苗及结合物含量分别为20%、40%、60%的伤寒Vi-rEPA结合疫苗经皮下免疫小鼠后眼眶采血分离血清,用ELISA法测血清抗体浓度.血清抗体分析表明,伤寒Vi多糖疫苗和伤寒Vi-rEPA结合疫苗均有良好的免疫原性,但伤寒Vi-rEPA结合疫苗的免疫原性优于伤寒Vi多糖疫苗;伤寒Vi多糖疫苗无加强免疫应答效应,而伤寒Vi-rEPA结合疫苗有加强免疫应答效应;不同高分子结合物含量的伤寒Vi-rEPA结合疫苗免疫小鼠,其结合物含量为40%、60%的伤寒Vi-rEPA结合疫苗比结合物含量为20%的结合疫苗具有更好的免疫原性,而前二者的免疫原性无显著性差异.
作者:蒲江;杜琳;谭小梅;侯亚莉;蒋奕;金学敏;谢贵林 刊期: 2004年第04期
采用分子克隆技术,将铜绿假单胞菌PA103株编码的外毒素结构域Ia(Domain Ia)的基因重组于原核表达载体pET-42b(+)上,构建了pET-EPA103蛋白表达载体.转化感受态大肠杆菌DE3.经IPTG诱导表达,初步纯化表达蛋白,用以免疫BALB/c纯系小鼠.制备小鼠脾淋巴细胞悬液,经刀豆素A(ConA)刺激后,用MTT比色法检测特异性淋巴细胞增殖反应.通过rEPA皮下注射BALB/c小鼠耳廓,诱导小鼠迟发型过敏反应(DTH).采用特异性淋巴细胞增殖反应和DTH试验来检测pET-EPA103表达蛋白所引起的小鼠细胞免疫应答水平,淋巴细胞增殖情况与DTH均可间接反映细胞免疫应答水平,进而评价重组铜绿假单胞菌外毒素(rEPA)Domain Ia蛋白片段的佐剂功效.
作者:马超;应莲芳;雷清;马亚茹;蒋琳 刊期: 2004年第04期
以DMEM:F12(1:1)为基础培养基,通过观察细胞生长状态和检测乙肝表面抗原的表达量作为评价指标,筛选适合于CHO工程细胞生长的生长因子,如:胰岛素、转铁蛋白、氢化可的松、硒酸钠,丁二胺等.并且建立了J5SFM培养基.该培养基与商品化的无血清培养基比较,能够使细胞生长维持较长的时间,表产物分泌量也相对较高.
作者:李萍;蒋琳;黄思扬;杨军;李薇;沈心亮 刊期: 2004年第04期
作者对破伤风抗毒素精制效果进行了比较研究.结果表明,采用改进方法精制的3批制品F(ab′)2含量平均达到79%,而IgG含量则降为无检出;3批制品的比活性与常规法相比平均提高14%.
作者:尚小萍;李景玉;李秋菊;孙淑滨;石岩;张玉加 刊期: 2004年第04期