肺炎支原体是引起儿童和成人支气管炎和原发性非典型肺炎的一种重要病原体,快速准确的确定病原体是诊断疾病的关键.本文就目前美国用于诊断支原体肺炎的5种商品化检测试剂盒检测结果作一简要评价.
作者：张美玲；端青 刊期： 2006年第01期
疫苗自从被广泛应用以来,在人类抵抗致病微生物的战斗中发挥了越来越重要的作用.传统的疫苗开发方法是通过培养微生物,从中分离具有免疫保护作用的有效抗原,费时费力,且有很大局限性.近年来,基因组学和生物信息学方法的联合,促成了反向疫苗学(Reverse vaccinology)的产生,即从致病微生物的基因组中用生物信息学方法预测得到一批可能的保护抗原,然后通过生物化学、免疫学以及微生物学方法加以验证,大大加快了寻找保护性抗原的速度.迄今为止,人们已经多次成功地运用了反向疫苗学,其中在脑膜炎奈瑟球菌B疫苗开发研制上的成功应用成为一个里程碑式的事件,为以后的疫苗开发工作奠定了良好的基础.
作者：王涛；刘纯杰 刊期： 2006年第01期
传统抗生素的广泛运用导致了耐药菌株的大量增加,迫切要求新型抗生素的出现.抗菌肽是广泛存在于生物体内的小分子多肽,是天然免疫系统的重要组成部分.它不仅具有广谱杀菌作用,甚至能够抑杀真菌、寄生虫、含包膜病毒以及肿瘤细胞.抗菌肽通过与致病菌胞膜的结合形成跨膜离子通道,导致了细胞内外的离子交换终引起细胞死亡.由于它作用迅速,选择性强,而且很少有耐药性的发生,很有可能成为新一代的抗菌药物.本文简述了抗菌肽的结构特点,抗菌作用机制,生物学功能和临床应用方面的新进展以及进一步就抗菌肽作为新型抗生素所面临的问题进行了探讨.
作者：彭智；安云庆 刊期： 2006年第01期
免疫系统中,细胞凋亡调节着体内免疫细胞群的合适比例,制约免疫应答的过程及强度,决定免疫耐受和免疫记忆的产生.本文将综述细胞凋亡在淋巴细胞发育中的作用,淋巴细胞凋亡的途径及调控因素.
作者：余海燕；刘淑芸 刊期： 2006年第01期
RNAi是一种高度特异化的mRNA降解过程,能在哺乳动物细胞中诱导特异的基因沉默.这一发现为人类某些疾病的治疗研究开辟了新的途径.随着研究的不断深入,RNAi在抗病毒研究中受到越来越多的关注.本文拟就RNAi的机制、siRNA靶系列的选择及制备和抗病毒研究现状作一综述.
作者：王丰平；李明远 刊期： 2006年第01期
噬菌体抗体库技术的出现为抗体工程的研究带来了革命性的变化,本文总结了当前国内外抗体工程,特别是单链抗体方面的研究进展.
作者：闭兰；余模松 刊期： 2006年第01期
由脑膜炎奈瑟菌引起的流行性脑脊髓膜炎是一种对人类危害严重的传染性疾病,曾在全球引起多次大流行,所以关于其预防引起了全世界的高度重视.目前应用和研究的脑膜炎奈瑟菌疫苗主要有荚膜多糖疫苗、多糖与蛋白结合疫苗、B群改良疫苗、去毒脂多糖结合疫苗等,本文就以上疫苗的研制情况进行综述.
作者：肖丽君；方艳辉；程露阳；孔健 刊期： 2006年第01期
PE类重组免疫毒素是将经过修饰加工后失去与细胞结合能力的PE分子与导向分子(载体)通过DNA融合技术而成的新型导向药物.因其可特异性识别、结合和杀伤靶细胞,因而被用来治疗肿瘤、自身免疫性疾病以及AIDS等疾病.目前有许多种PE类免疫毒素正在进行临床试验,尤其治疗恶性肿瘤方面已取得显著的疗效,预期这些药物在未来几年将取得更长足的发展.本文对目前PE重组免疫毒素的研究进展作一综述.
作者：祁志荣；李虹 刊期： 2006年第01期
应用酶联免疫法(ELISA)和间接血凝法(IHA)对1014份破伤风类毒素全程免疫后人血浆进行抗体水平检测,比较两者的收浆率、收浆符合率以及与动物实验的相关性.结果表明两者收浆率均达80%.ELISA法与IHA法的合格浆符合率达92%,与动物实验的相关性更好.ELISA法操作简便快速,结果判读客观明确,优于传统的IHA法,可作为人破伤风类毒素免疫血浆筛选的常规方法.
作者：朱华松；周志军；尹斌；李健 刊期： 2006年第01期
对新生牛血清中的抗乙型脑炎病毒的抗体进行检测,并且建立一种有效可行的检测方法.以四个厂家共16批新生牛血清用蚀斑减少中和法(PRNT)对其中的乙脑抗体进行了检测.结果显示该方法检测出部分批次的新生牛血清中含有抗乙脑病毒抗体,且乙脑抗体阳性牛血清可将乙脑病毒抗原中和,对蚀斑数有较明显影响.证明作为检测牛血清中乙脑抗体的有效方法,PRNT法具有灵敏度高、重复性好的优点.以上检测说明新生牛血清中存在乙脑抗体,能将乙脑病毒中和.用于乙脑减毒活疫苗生产的新生牛血清除按照<中国生物制品主要原辅材料质控标准>进行质控外,还应进行乙脑抗体的检测.
作者：王静；李裕惠；栗克喜 刊期： 2006年第01期
从表达rF1抗原的大肠杆菌中以Superdex-200凝胶过滤层析纯化rF1抗原,电泳扫描显示纯化率＞90%.SDS-PAGE及琼脂免疫双扩散结果显示纯化的rF1抗原具天然F1抗原的活性.将此纯化的rF1抗原用于间接ELISA分析免疫动物血清中抗F1抗体的水平,并与天然F1抗原相比较,证明rF1抗原优于天然F1抗原分析结果,可用于鼠疫的血清学检测.
作者：王革；常娅莉；万艳；马超；王秉翔 刊期： 2006年第01期
利用PCR技术从铜绿假单胞菌PA103株DNA中扩增到铜绿假单胞菌外毒素A(EPA)全基因,选择合适位点插入pBV221 PLPR启动子下游,构建分泌性表达载体;转化宿主E.coli DH5α、JM109后,热诱导表达;SDS-PAGE分析表明表达产物占菌体总蛋白量的17%左右,分子量69kD左右;分离细胞组分蛋白发现仅有少量重组蛋白以成熟毒素形式分泌到宿主菌的周质间隙,并能检测到Vero细胞毒活性,其余大部分以包涵体形式存在.免疫印迹检测显示,表达产物与兔抗EPA多抗有特异性反应.此项工作为重组EPA的研制建立了有用的技术方法.
作者：赵志强；方悦群；杜琳；谢贵林 刊期： 2006年第01期
通过分析比较部分16S/23S rDNA序列,对现有保存的9株国内衣原体流行株进行了分子遗传学鉴定.虽然这些分离株分离自不同的动物,但它们的16S/23S扩增部分完全相同,经16S/23S rDNA序列同源性比较可以一致鉴定国内流行株为鹦鹉热嗜衣原体.
作者：宋立华；何君；朱虹；张浩杰；张国珍；端青 刊期： 2006年第01期
实验成功的构建了含有pp65与gB主要抗原决定簇基因的表达质粒pET-pp65、pET-gB;表达产物通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、间接酶联免疫等一系列鉴定试验进行了分析.表达蛋白经初步纯化后免疫BALB/c小鼠,经0、2、4周免疫三次,免疫后2、4、6周眼眶采血收集抗血清,进行中和试验和ELISA检测.动物试验表明两种表达蛋白具有免疫原性,并可在小鼠体内诱导产生特异性抗体,其中用重组gB蛋白免疫小鼠后得到的抗血清在体外试验中能抑制天然病毒感染细胞.同时将这两种表达蛋白作为诊断用抗原,对临床94份血清进行检测,证实pp65具有较好的特异性,为今后研制HCMV诊断试剂提供了科学依据.
作者：蒋韬；谢溱；蒋琳；雷清；李启明；马亚茹；蒋烈；沈心亮 刊期： 2006年第01期
构建单纯疱疹病毒2型包膜糖蛋白D成熟肽基因毕赤酵母表达载体,并对序列进行分析,为进行高抗原性的真核表达重组gD蛋白奠定基础.采用PCR扩增HSV2-gD成熟肽基因,将该段基因克隆于pGEM-T克隆载体,转化鉴定后,与巴斯德毕赤酵母表达载体(pPIC9K)酶切连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选测序确定构建了pPIC9K-gD的真核表达载体,对克隆的序列进行分析,预测表达产物的理化特性及抗原性.结果显示,获得的重组的酵母表达载体pPIC9K-gD,测序结果证实为HSV2-gD成熟肽基因,序列分析其高度保守,预测蛋白分子量40.63kD,等电点pI为7.15,包含完整成熟肽分值达1.7的多个抗原决定簇.成功构建了HSV2-gD成熟肽基因的毕赤酵母表达载体.
作者：刘毅；韩金祥；邵金辉；朱波；朱有名 刊期： 2006年第01期
为研究腺相关病毒载体介导的内皮抑素(Endostatin)及K1-5蛋白抗肿瘤血管生成协同作用,实验中用含有Endostatin及K1-5基因的重组病毒rAAV-hE和rAAV-K5分别感染BHK-21细胞,并表达分泌出内皮抑素和K1-5蛋白,EIA法测定培养液上清中内皮抑素浓度达36.42ng/ml,免疫斑点印迹实验表明rAAV-K5可介导K1-5的体外表达.重组腺相关病毒(rAAV)介导所表达的内皮抑素和K1-5蛋白对血管内皮细胞增殖具有抑制作用.二者对人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的抑制率分别为68.1%和63.1%,对牛毛细血管内皮细胞(BCE)的抑制率分别为41.6%和34.0%.同时二者还有协同效应,用rAAV-hE和rAAV-K5同时感染BHK-21细胞,表达产物对人脐静脉内皮细胞和牛毛细血管内皮细胞的抑制率分别为70.8%和43.8%.动物实验表明,重组病毒rAAV-hE和rAAV-K5转入荷有人肺肿瘤细胞的裸鼠,对肿瘤细胞生长具有抑制作用,同时二者具有协同抗肿瘤作用.
作者：高雪军；李启明；朱莉萍；吴小兵 刊期： 2006年第01期
以制备适用于疫苗生产检定中病毒鉴别试验和外源因子检查的高效价腮腺炎病毒抗血清为目的.用腮腺炎病毒接种SPF鸡胚尿囊腔,培养收取病毒尿液免疫SPF鸡,采集抗血清.腮腺炎病毒接种Vero细胞,培养病毒抗原经PEG沉淀,超速离心法纯化后免疫家兔采集抗血清.比较两种免疫方法所得病毒抗血清效价.结果显示SPF鸡抗腮腺炎病毒血清中和抗体GMT为1:1716,兔抗腮腺炎病毒血清中和抗体GMT为1:732.两种动物抗血清均适用于疫苗生产相关检定.免疫SPF鸡制备的病毒抗血清无特定病原及抗体污染,是毒种外源因子检测和疫苗鉴别试验的理想试剂.免疫SPF鸡制备病毒抗血清的程序简单,结果易于验证,有利于生物试剂标准化.
作者：刘松友；金潇；李淑云；苏巧玲；张国强 刊期： 2006年第01期
为了获得高纯度的破伤风毒素,用疏水层析和离子交换层析纯化破伤风毒素.破伤风毒素培养滤液经Phenyl Sepharose疏水层析除去大部分杂质,再经DEAE Sephadex离子交换层析进一步纯化.经两步层析纯化后,毒素纯度达到2000Lf/mg PN以上,回收率为52%～73%.用此方法,连续纯化五批毒素,均获得高纯度的破伤风毒素.试验证明破伤风毒素经疏水层析和离子交换层析可得到有效纯化.
作者：顾洁；苏林；耿其秀；刘志；袁昌志；张珂；李萍；李俭生；罗亮 刊期： 2006年第01期
