霉菌在自然界中分布广泛,与人们的日常生活极为密切.自从弗莱明发现青霉素以来,国内外对霉菌的研究引起众多学者的关注,本文对目前霉菌的应用现状作一综述.
作者：樊卫萍；吉顺福；王雄清 刊期： 2006年第04期
肺炎嗜衣原体是严格的细胞内寄生菌,具有独特的发育周期,是重要的呼吸道疾病病原菌,与动脉硬化等慢性心血管疾病也有关系.在肺炎嗜衣原体感染中,热休克蛋白60(Cp-HSP60)是重要的致病因素,对树突状细胞、上皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞的正常功能都有影响,能够促进T细胞向Th1型分化.经过基因序列分析及氨基酸序列比对,Cp-HSP60与其他衣原体HSP60具有很高的同源性.由于HSP60高度保守,Cp-HSP60与人的HSP60在慢性疾病病理过程中是否存在交叉反应仍存在争议.疫苗是控制传染的有效措施,应用重组Cp-HSP60和表达Cp-HSP60的DNA疫苗在小鼠实验中对肺炎嗜衣原体的感染有一定的保护作用,在肺部能产生免疫记忆.
作者：李岩伟；端青 刊期： 2006年第04期
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)是引起医院和社区人群感染的主要病原菌.由于其异质性和多重耐药,使临床治疗非常棘手.对mecA与femA基因及耐药性的相关研究,在临床用药和防止播散意义重大.
作者：马晓波；陈端 刊期： 2006年第04期
本文综述了基于16S rRNA序列(16S rDNA)检测、鉴定双歧杆菌的方法.包括基因探针法、荧光原位杂交法、PCR扩特异性片段法、多重PCR法、荧光定量PCR法和PCR-DGGE/TGGE法等.
作者：许恒毅；魏华；曾明 刊期： 2006年第04期
b型流感嗜血杆菌(Hib)疾病危害严重,分布广泛,在已使用Hib结合疫苗的国家中,Hib疾病均得到有效控制.我国Hib疾病的发病情况基本与国外相似,但Hib结合疫苗的使用率非常低.本文综述了Hib结合疫苗的特点以及在使用过程中的一些具体问题.
作者：吴昕；贾作民；黎明强 刊期： 2006年第04期
肺炎嗜衣原体(Cpn)是20世纪80年代新发现的一种重要的病原体,它不仅可以引起急慢性呼吸道感染,而且可能通过直接或间接的机制参与冠心病的发生与发展,因而受到了人们越来越多的关注.而Cpn感染的诊断正是人们关注的焦点之一.近年来,Cpn感染的诊断技术有了很大的进展,由十分困难的分离培养法到血清学检测方法发展成为今天的分子生物学诊断技术.毫无疑问,诊断方法的进展在便利Cpn感染诊治的同时,也将为人们更好的了解Cpn奠定基础.本文就Cpn感染的检测方法的研究进展作综述如下.
作者：刘广超；吴移谋 刊期： 2006年第04期
分别采用五种不同条件鉴定重组CHO-C28 细胞染色体.对其影响因素如用秋水仙素处理时间的长短、固定液的使用方法等进行了试验,选择出了细胞分散好、染色体形态正常、边缘清晰、便于鉴定的两种佳条件.此方法操作简单、成功率高,适于CHO-C28 细胞染色体鉴定.
作者：张岩锐；段丽娟；苟凝虹；徐枫 刊期： 2006年第04期
为了研制百日咳抗体酶联检测试剂盒以调查吉林省2～8岁儿童百日咳、白喉及破伤风抗体水平.采用百日咳菌液经硫酸铵盐析、PBS溶液浸提及蔗糖密度梯度离心提取的PT和FHA作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG,作为抗体制备ELISA试剂盒.并经敏感性、特异性、重复性试验考查该试剂盒质量.结果显示,试剂盒敏感性可达0.0036 IU/ml;重复性较好,CV＜4% .试剂盒置于37℃3d敏感性无明显变化.吉林省2～8岁儿童白喉、破伤风的抗体水平较高,百日咳的抗体水平相对较低.此方法制备的百日咳抗体酶联检测试剂盒的质量符合要求,可应用于临床检验与流行病学监测.
作者：魏辉；陈子扬；赵斌；林明旭；张勇；吴枚；杨丽华；郭凤云 刊期： 2006年第04期
研究用ELISA法直接定量检测细胞培养液中的重组人活性蛋白C(rhAPC).用改良双抗体夹心酶联免疫检测法进行定量分析.用棋盘滴定法对包被抗体、反应一抗和辣根过氧化物酶(HRP)标记二抗的适宜工作浓度进行了选择,并对实验条件进行优化,参考品标准曲线线性相关性较好.改良双抗体夹心酶联免疫检测法可用于直接定量分析细胞培养液中的rhAPC水平.
作者：李征；毕跃东 刊期： 2006年第04期
为了建立测定抗天花免疫球蛋白效价的检测方法,采用抗天花免疫球蛋白50%中和100PFU痘苗病毒的稀释度来确定其效价.通过与NIBSC提供的抗天花人免疫球蛋白标准品进行的对比试验,结果显示基本一致,证明该方法是可行的.
作者：过琴媛；安焕宇；范淑兰；高炬 刊期： 2006年第04期
用地高辛标记引物酶显色法,检测了63例e抗原阴性慢性肝炎HBV基因多态性.结果突变率为53.9%(34/63).前C/C区1896位突变率高为49.2%(31/63),1814位38.1%(24/63);BCP区1762位、1764位均为39.7%(25/63),552位突变率为14.3%(9/63).该检测方法灵敏度高,简便易行.严格控制杂交温度及显色温度是检测操作的关键.
作者：许培仁；孙建华；朱艳荣；赵建龙；唐向荣 刊期： 2006年第04期
通过采用银染法鉴别短串联重复序列聚合酶链式反应(STR)位点的PCR产物来鉴别人二倍体细胞MRC-5株主细胞库、工作细胞库及限制代细胞.运用PCR方法对细胞库的9个STR位点(CSF1PO、TPOX、TH01、F13A01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317)和性别鉴别位点Amelogenin进行扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染法显影技术,检测MRC-5主细胞库、工作细胞库及限制代细胞的遗传标记.与ATCC公布的MRC-5的荧光STR图谱的8个STR位点和Amelogenin位点相比,MRC-5主细胞库、工作细胞库、限制代细胞的银染STR图谱的9个STR位点和Amelogenin位点,荧光法和银染法重叠的8个位点(CSF1PO、TPOX、TH01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317 和Amelogenin)数据完全吻合,说明细胞鉴别试验成立.STR图谱作为细胞鉴别的方法简单、易行、准确.
作者：丁筱骏；许文婷；何春艳 刊期： 2006年第04期
实验中比较了以不同糖蛋白比结合的5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的免疫原性.以氨还原法制备的不同糖蛋白比的5型多糖结合疫苗分别经腹腔注射NIH小鼠,共免疫3次,间隔2周.末次免疫2周后采血分离血清,以间接ELISA测定血清抗体,t检验统计分析数据.结果显示,生理盐水组(R组)无免疫原性;5型荚膜多糖组(H组)免疫原性低,无免疫加强效应;结合疫苗M组、N组第1、2针有免疫加强效应,第2、3针无免疫加强效应,而F组和Q组的两针次间均有明显的免疫加强效应.说明5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的糖与蛋白比较高时能获得较好的免疫原性.
作者：陈晓航；王剑虹；任克明；孔素娟；张勇；沈荣 刊期： 2006年第04期
将C群脑膜炎球菌粗多糖的纯化改进为用1:1容量冷酚提取的生产工艺.结果表明,改进后的方法去除蛋白质效果同样能够达到《中国药典》2005版(三部)的要求,总体结果优于改进前.同时能扩大处理量而降低了生产成本,适合规模化生产.
作者：杨明；陈作江；曹鑫；王志军；崔萱林 刊期： 2006年第04期
研究短棒状杆菌外用剂型,为体外用药开辟新途径.将短棒状杆菌接种在适宜培养基上,连续扩增传代,培养终液稀释成不同浓度.依照新药管理办法,在动物体内进行各种安全性试验.结果显示:经急性毒性试验、长期毒性试验、生殖毒性试验,皮肤光敏试验、局部刺激试验等测定,在动物体内未见到毒性反应.该试验为短棒状杆菌外用制剂的开发提供了安全性依据.
作者：杨琳；白春杰；闫素志；丰沧玉；王桂荣 刊期： 2006年第04期
通过对鼠伤寒沙门菌LH株的发酵培养,热酚水法提取脂多糖LPS,1%乙酸沸水浴水解90min脱毒,Superdex 200柱层析,收集第一峰为鼠伤寒O-SP抗原;然后用CDAP对O-SP活化、ADH衍生后,在EDAC的缩合作用下,结合到破伤风类毒素TT上,制备出鼠伤寒结合疫苗;用含2.5μg多糖鼠伤寒结合疫苗免疫小鼠,以2.5μgO-SP多糖生理盐水溶液以及生理盐水溶液为对照组,间隔14天,免疫三针;以LPS为包被抗原,用间接ELISA法测定血清中抗鼠伤寒LPS IgG抗体.鼠伤寒结合疫苗三针免疫后,小鼠血清抗鼠伤寒LPS IgG抗体效价达到1:80以上的比例为84.2%,而总的几何平均滴度(GMT)达到796;说明制备的鼠伤寒结合疫苗有良好的免疫原性,而且鼠伤寒结合疫苗在小鼠和豚鼠体内有良好的安全性.
作者：杨朝晖；赵志强；计永莉；马庆华；杜琳；谢贵林 刊期： 2006年第04期
实验设计针对森林脑炎病毒的特异性引物,以被森林脑炎疫苗株病毒感染的鼠脑组织中提取的总RNA为模板,用PCR方法分段逆转录合成、扩增序列并测序,应用DNASTAR软件比较分析.结果表明,该病毒疫苗株的全基因组由10782个核苷酸组成,编码3414个氨基酸.森林脑炎疫苗株病毒全基因序列的测定,为研究该病毒疫苗株的生物学特性提供了分子基础.
作者：宋宗明；赵大鹏；刘双军；王晓宏；赵建；李彤 刊期： 2006年第04期
采用PCR定点突变技术对睫状神经营养因子(CNTF)基因进行改造,获得了CNTF衍生物(CNTF-D)基因序列分析证明其核苷酸序列符合设计要求,并在大肠杆菌中获得高效表达,CNTF-D表达量超过40%,复性后,经Q-Sepharose HP纯化,其纯度超过95%,体内法测定发现能明显降低实验小鼠的体重.表明CNTF-D在体内具有良好的生物学活性,为下游开发奠定了基础.
作者：张振龙；徐静；郭秀梅；孙成金；王涛；郭鹏 刊期： 2006年第04期
用已经构建的含有HCV的Core-NS3(C33c)嵌合基因的表达质粒pGEX TL1-2在大肠杆菌中进行了高效表达,表达产物纯化后通过SDS-PAGE、Western-blot、ELISA等一系列鉴定试验进行了分析,结果表明,该嵌合抗原具有高度特异性和良好的抗原活性,为研制诊断用HCV抗原奠定基础.
作者：彭祥兵；周志军；桑爱军；余健；黄仕和；余模松 刊期： 2006年第04期
以源自国外的重组白喉毒素表达质粒H21G-his为模板,利用PCR技术,扩增H21G-his的基因并测定核苷酸序列,确证重组白喉毒素表达质粒H21G-his的突变位点;对表达载体多克隆位点上下游的功能序列进行测定,确定组氨酸标签位置;在基于对载体正确分析的基础上,改造质粒,除去组氨酸标签,表达天然蛋白;利用pET表达系统重新构建新的非融合表达载体,并对表达量进行比较,为该蛋白作为载体用于多糖结合疫苗奠定基础.
作者：胡海涛；赵志强；杜琳；谢贵林 刊期： 2006年第04期
兰州生物制品研究所研制的流行性感冒病毒裂解疫苗于2003年9月～12月在广西进行Ⅰ～Ⅲ临床试验,对疫苗的安全性和免疫原性进行考核评价.试验中随机选取852人(6月龄～67岁)接种试验疫苗,227人接种对照疫苗.6～36月龄的婴幼儿接种2针,每次0.25ml,间隔28天;成人接种0.5 ml.所有接种对象均未见红肿和硬结等局部反应;发生低热反应(37.1℃～37.5℃)率为3.5%,均于48小时内恢复正常.疫苗接种后易感人群的HI抗体总阳转率为100%,非易感人群的HI抗体几何平均效价增长7.1～16.8倍,抗体4倍增长率为73.1%～91.7%.证实该疫苗具有良好的安全性和免疫原性.
作者：包红；余黎；胡广宏；安红；陈汉泉；周旭；方捍华；刘淑贞；李长贵 刊期： 2006年第04期
探讨白介素-6(IL-6)和C-反应蛋白(CRP)在冠心病(CHD)的发生发展中所起的作用及其之间的相互关系和临床意义.对70例住院冠心病患者采用ELISA和散射比浊法分别测定其血清中的IL-6、CRP水平的变化并与同期体检健康者34例作对照.显示患者CRP、IL-6值均明显高于对照组,差异显著(P＜0.01).炎症反应在冠心病的发生发展中起着重要的作用.如果能够在测定病人CRP及IL-6水平的同时建立患者的个体标准,则可以对患者病变程度及预后提供更好的临床依据.
作者：朱晓芳；孔玮；李芳 刊期： 2006年第04期
