RNA复制子疫苗利用源自病毒能够自主复制的RNA,结构蛋白基因由外源抗原基因取代,保留了非结构蛋白基因, 非结构蛋白可控制载体RNA 在胞浆中高水平复制和外源基因的高水平表达.RNA复制子疫苗克服了传统疫苗和普通DNA疫苗存在的缺点,具有免疫效果显著、安全性好、应用范围广等优点,具有很好的应用前景.用于RNA复制子疫苗的载体主要源自甲病毒,本文以甲病毒载体为例, 简要阐明RNA 复制子疫苗的基本原理和特点,并对其应用作一综述.
作者:王红仁;李明远 刊期: 2007年第02期
流感病毒与细胞凋亡的相关研究近年来一直是流感研究的热点,流感病毒可使MDCK细胞,呼吸道细支气管细胞,淋巴细胞以及绒毛膜细胞和胎膜细胞发生凋亡,弄清楚流感病毒与细胞凋亡相互间的关系无疑对流感病毒的致病机制及抗感染免疫的研究有着积极的促进作用,本文仅对近几年来,流感病毒与MDCK细胞以及其它相关细胞的凋亡情况或关系的研究作一综述.
作者:张衡;李康生 刊期: 2007年第02期
诱导器官移植受者对供者抗原的免疫耐受是防治同种异型移植排斥反应的理想途径.目前认为,免疫耐受形成的主要机制包括:胸腺及骨髓阴性选择引起的克隆清除(Clonal deletion)、组织特异性自身抗原低表达引起的克隆忽视(Clonal ignorance)、阻断T细胞共刺激信号引起的克隆无能(Clonal anergy)、嵌合体(Chimerism)的形成、调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)介导的克隆抑制(Clonal suppression)等.近年来CD4+ CD25+ Treg细胞的研究已成为免疫学界的热门课题之一.已知CD4+ CD25+ Treg细胞存在于小鼠、大鼠和人体中,是机体自然存在的具有主动调节活性的T细胞,对维持自我耐受和控制自身免疫病发挥着重要作用.本文着重就CD4+ CD25+ Treg细胞的免疫调节机制及其在诱导移植免疫耐受方面的研究进展做一综述.
作者:李冬妹;胡永秀 刊期: 2007年第02期
差减杂交技术是一种用于寻找基因组之间差异的有效的方法.其通过去除被比较的两组基因组之间的共有序列,富集差异序列的方法来达到寻找差异基因的目的.其操作简便,价格低廉,且避免了已知细菌基因组信息匮乏对其应用的限制,从而在细菌学方面得到了广泛的应用,包括鉴定可能与毒力有关的致病基因岛/遗传岛、查找细菌的致弱机理、鉴定可移动的遗传成分、寻找毒力基因、寻找与导致宿主差异有关的基因、检测基因表达上的变化等多个方面.从而为病原的鉴定,疾病的诊断,预防,细菌的致病机理等方面的研究奠定了坚实的基础.
作者:田云;蔡冬 刊期: 2007年第02期
空气微生物气溶胶的研究方法很多,包括培养计数法、生物发光法、化学发光法、直接镜检法、免疫学方法、分子标志法、生物传感器和分子生物学方法(基因探针和PCR法).分子生物学方法由于特异性强、操作简便、快速,尤其是新发展的定量PCR的方法还可以实现对DNA或RNA的绝对定量分析,因此在空气微生物气溶胶的研究中有很好的发展前景.本文对应用PCR和实时定量PCR(QPCR)在空气微生物气溶胶领域的研究进行了综述,指出了传统PCR和QPCR的优缺点,着重对QPCR在空气微生物领域的应用进行了比较全面的分析,指出了应用QPCR检测空气微生物气溶胶还应解决的问题和前景.
作者:温占波;李劲松 刊期: 2007年第02期
杆状病毒表达载体系统为一种真核表达系统,在生物制药方面具有多种优势.测定杆状病毒滴度对病毒的扩增和重组蛋白的表达是非常必要的.本文系统地综述了蚀斑检测、测定β- 半乳糖苷酶活性、终点稀释法、定量定时PCR、免疫染色检测法、使用微流控生物分析仪、测活细胞大小及用比色指示剂等8种方法测定杆状病毒滴度,各有其优缺点.
作者:黄仕和;余模松 刊期: 2007年第02期
人致病支原体实验感染动物模型的建立对于研究支原体感染的发病机制,宿主的免疫反应,以及研发防治支原体感染新的抗生素和疫苗是不可缺少的.目前国内外已成功建立多种人致病支原体的动物模型,并且各具特色.选择一个适合的实验动物模型,是实验能否成功的关键.
作者:潘展砚;黄峥烨;叶元康 刊期: 2007年第02期
细胞因子是机体产生的一系列免疫效应和免疫调节蛋白.在近几年,质粒型细胞因子作为能增强DNA疫苗免疫应答的佐剂已引起了研究者广泛的关注.本文就细胞因子的生物学机制、T细胞分化和利用质粒型细胞因子佐剂优化DNA疫苗等方面的进展进行了讨论.
作者:马涛;刘勇;孙茂盛 刊期: 2007年第02期
宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒(HPV)感染密切相关.HPV E2蛋白能特异性抑制病毒基因E6、E7的表达,从而抑制它们的致癌作用,并可通过与p53、Caspase等相互作用影响细胞增殖,在HPV感染及致病过程中具有重要作用.
作者:彭俊;万艳平 刊期: 2007年第02期
人类免疫缺陷病毒是导致艾滋病的病原,艾滋病在全球迅速传播,艾滋病防治的需要促使HIV诊断试剂不断发展.20年来HIV诊断试剂的敏感性不断提高,窗口期逐渐缩短,并且HIV诊断试剂的品种日益丰富.本文就HIV诊断试剂的品种及发展情况作一综述.
作者:王晓娟;廖雪雁;李河民 刊期: 2007年第02期
反向疫苗学是现代疫苗学研究的一种新的策略,随着生物信息学的不断发展,疫苗学的研究进入了一个新的时期,通过对基因组序列分析,来筛选重要保守抗原序列,从而鉴定具有一定免疫原性特征的蛋白质.这种方法可以提高疫苗筛选效率.因此,反向疫苗学对于传统方法无法制备的疫苗提供了一种新的研究方法和思路,具有十分重要的意义.本文就此作一综述.
作者:杜联峰;孙万邦;黄俊琼 刊期: 2007年第02期
佐剂是疫苗开发的一部分.Toll样受体是一类重要的模式识别受体,能通过识别不同病原体的PAMP在连接固有免疫与特异性免疫的关键环节发挥着极为重要的作用.早发现并作为佐剂使用的TLR配体是CpG.CpG通过TLR9介导对免疫系统的激活作用,从而发挥诱导Th1偏倚的Th1/Th2混合反应的佐剂效应,已经受到了广泛的关注和应用.近年来,研究发现一类具有免疫调节作用的抗病毒治疗的药物Imidazoquiline(咪唑并奎琳衍生物)是合成的TLR7/8的配体,也具有佐剂活性,但效果还存在争议.TLR配体作为佐剂的使用为佐剂的研发开拓出一条新的思路,带来了新的希望.
作者:肖文珺;周育森 刊期: 2007年第02期
DNA疫苗能够诱导机体产生特异性体液和细胞免疫反应,而且与传统疫苗相比具备诸多优点.DNA疫苗能够在小鼠体内诱导有效的免疫应答,但是其效力在灵长类动物和人体内却不尽人意.目前已经有很多方法用于增强DNA疫苗的免疫原性,本文就增强DNA疫苗免疫效应常用方法的新进展作一综述.
作者:胡刚;李扬秋 刊期: 2007年第02期
禽流感病毒M2蛋白是由97 个氨基酸残基组成的同源四聚体, 大量表达于感染细胞的表面,具有对病毒脱壳和出芽起重要作用的离子通道活性.M2蛋白不仅可诱导机体产生抗体,而且是CTL的靶抗原,因此可作为研究流感亚单位疫苗的靶蛋白.
作者:管洁;周育森 刊期: 2007年第02期
高危人乳头瘤病毒16型的感染与宫颈癌的发病密切相关.HPV16E6和E7蛋白在大多数HPV16相关宫颈癌及其癌前病变中持续表达,因此E6和E7蛋白可作为制备HPV16相关肿瘤及其癌前病变治疗性疫苗的靶抗原[2].采用套式PCR方法,从宫颈癌患者组织中扩增出E6、E7基因并成功构建了包含E6、E7的表达质粒PET-E6、PET-E7.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting分析结果表明,外源基因E6,E7在T7启动子控制下可获得稳定表达.
作者:余黎;韩平;安静;姜英;周旭 刊期: 2007年第02期
为探索一种大量表达功能性重组肺炎链球菌表面黏附素A(rPsaA)的方法,用PCR和基因重组技术将基因psaA的先导序列替换为伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OspA)信号肽基因序列,并在大肠杆菌中表达.表达产物用SDS-PAGE检测,Western blot分析抗原性.结果表明,rPsaA表达量明显提高且有较好的抗原性.
作者:何斌;朱虹;端青 刊期: 2007年第02期
为了探讨p27Kip1蛋白和CyclinD1蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义,收集临床手术切除的非小细胞肺癌组织蜡块64例及正常肺组织10例,应用免疫组化(S-P法)检测组织中p27Kip1蛋白和CyclinD1蛋白的表达,结合临床病理资料和随访资料进行回顾性研究.实验发现NSCLC组织中p27Kip1蛋白表达和CyclinD1蛋白表达均明显不同于正常肺组织(P<0.01).p27Kip1蛋白表达降低与NSCLC肿瘤大小、病理分级、分期增加、淋巴结转移之间有相关性(P<0.05),但与肿瘤组织学分型无相关性(P>0.05).CyclinD1蛋白过表达与组织学分型、肿瘤大小、病理分级、临床分期、淋巴结转移无相关性(P>0.05).p27Kip1蛋白表达与CyclinD1蛋白表达之间呈显著负相关(P<0.01).cox单因素及多因素分析,p27Kip1蛋白低表达及CyclinD1过表达是影响NSCLC患者预后的主要因素.实验结果显示,NSCLC组织中,p27Kip1蛋白表达降低,而CyclinD1过表达,二者与NSCLC的发生发展机制有关,可作为预后指标,有利于NSCLC患者预后判断及个体化治疗.
作者:陶红艳;张启昆;万毅新 刊期: 2007年第02期
为了避免玫瑰红钠培养基平皿法计数验证时细菌在培养基上生长而干扰真菌计数的准确性这一问题,采用在该培养基中选加了0.08g/L、0.10g/L和0.12g/L三种不同浓度的氯霉素的方法.结果证实,在玫瑰红钠培养基中加入浓度为0.10g/L的氯霉素可完全抑制供试大肠杆菌CMCC(B)44102株的生长,但又不影响供试真菌如白色念珠菌CMCC(F)98001、黑曲霉CMCC(F)98003的培养生长.因此,在微生物限度检查时的玫瑰红钠培养基中加入氯霉素适宜的有效浓度为0.10g/L.
作者:李静 刊期: 2007年第02期
为检测注射用重组人干扰素β1b半成品中外源性DNA残留量,以重组人干扰素β1b工程菌基因组DNA为模板,用地高辛标记探针,并以此探针进行点杂交.结果证明,该方法检测灵敏度较好,特异性较强,操作较安全简便,可用于重组人干扰素β1b制备过程中的质量监控及半成品的检定.
作者:刘君;张振龙 刊期: 2007年第02期
研制破伤风类毒素抗体酶联双抗原夹心法定量检测试剂,用于破伤风免疫血浆抗体效价检测.以精制破伤风类毒素经Sephacryl S-300柱层析纯化后作为包被抗原,用辣根过氧化物酶以改良过碘酸钠法标记精制破伤风类毒素作为酶标记抗原,以破伤风人免疫球蛋白国家标准品采用小鼠中和试验法标定试剂盒定量标准品,制备双抗原夹心法定量检测试剂;进行试剂盒检测范围、特异性、重复性、精密度及稳定性考核,并与小鼠中和试验法、琼脂双扩散法及国外破伤风类毒素抗体酶联试剂盒进行比较.结果显示,试剂盒的检测范围为10~150mIU/ml,灵敏度为10mIU/ml,线性好(r>0.996),板内孔间变异度小(CV<8%),特异性强(100%),重复性好(CV<13%),于37℃放置6天测定结果无明显差异,与小鼠中和试验法、英国Biding Site酶联试剂有良好的一致性.试验证明所研制的试剂盒适用于破伤风免疫血浆中的破伤风抗体效价定量检测.
作者:张燕;叶小书;陈寒柏;陈小波;刘蓉丽;曾飞翔 刊期: 2007年第02期
为了研究不同年份生产的乙型脑炎减毒活疫苗病毒E蛋白基因稳定性,从分子水平控制乙型脑炎减毒活疫苗质量,确保疫苗安全性,本研究分析了不同年份生产的乙脑活疫苗病毒E蛋白基因核苷酸序列及编码的氨基酸序列,并与该疫苗原始种子、主种子、工作种子、乙脑病毒强、弱毒株进行比较.结果显示不同年份生产的乙脑活疫苗病毒E蛋白基因核苷酸序列与其原始种子、主种子、工作种子和基因库中登录的乙脑病毒弱毒株SA14-14-2的相应序列完全一致,与乙脑病毒强毒株SA14的E蛋白氨基酸序列比较有9个位点氨基酸发生了改变.不同年份生产的乙脑活疫苗病毒E蛋白基因稳定性表明该疫苗质量稳定、安全.
作者:吴永林;杨会强;刘杰;汪伟;孙艳;李玉华 刊期: 2007年第02期
为了考核新生儿接种国产重组(酵母)乙型肝炎(乙肝)疫苗后的免疫效果,并与血源乙肝疫苗效果比较.对1997年出生并接种重组(酵母)乙肝疫苗的新生儿隔年随访一次,采血检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg),乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc),1998年以后对乙肝免疫人群开展急性乙肝发病监测.显示五年期间3次随访检测HBsAg阳性率平均为1.5%,较免前本底的HBsAg阳性率呈较大幅度下降,疫苗保护率为83%(95%可信区间为76.97%~89.02%),无论母亲HBsAg阳性或阴性,使用不同乙肝疫苗的儿童HBsAg阳性率没有统计学差异.接受重组(酵母)乙肝疫苗免疫的对象中,无一例急性乙肝病例报告.重组(酵母)乙肝疫苗有较好的近期保护效果和免疫原性,与以前使用血源乙肝疫苗效果相当.
作者:孙超美;姜铭波;吴维寿;张国华;周宁;张焕珠;宿飞;汪萱怡;徐志一 刊期: 2007年第02期
依照2005年版《中国药典》和2003年版《国家药品标准》,考察注射用胸腺肽制剂的热稳定性.将注射用胸腺肽制剂成品3批样品,于温度60℃±2℃、水浴自然光条件下,放置10h,多时段取样,观察其外观、多肽含量、酸碱度、可见异物和生物学活性.结果表明三批供试品的的各项指标均符合国家药品标准规定.注射用胸腺肽具有良好的热稳定性.
作者:夏天瑶;白春杰;杨琳;张金岩;惠琦 刊期: 2007年第02期