多重PCR-质谱联用技术是自2000年以来新开发的可用于病原体检测的技术,目前,根据此技术原理开发出的病原体检测平台有Mass Tag PCR和MassARRAY.本文分别介绍了Mass Tag PCR和MassARRAY用于病原体检测的工作原理及应用,并对两者进行比较,进而阐释新技术用于病原体检测的优势及发展潜力.
作者:王晓宏;熊正英 刊期: 2011年第04期
Toll样受体(Toll - like receptor,TLR)是在天然免疫与获得性免疫应答中发挥重要作用的模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs).TLR识别来源于病原体或机体损伤产生的“危险信号”,介导多种炎症因子释放,激发机体对病原体的免疫反应,启动固有免疫并进一步活化适应性免疫应答,在抗感染及自身组织修复中起重要作用.近年来研究发现,TLR信号通路异常活化可导致或加剧血吸虫性肝纤维化、病毒性肝纤维化、酒精性肝纤维化等疾病.本综述主要介绍TLR信号通路在肝纤维化中的作用.
作者:彭莉;肖建华 刊期: 2011年第04期
LGG作为世界上研究得多的菌株之一,很多文献报道该菌有各种临床疗效,但随着研究的深入,越来越多经科学设计的人体临床试验得以开展,以前宣称的很多疗效并未在人体试验中得到证实,本综述目的是通过对近年发表的文献进行综述,主要从临床疗效的角度和安全性的角度来阐述论证LGG应用研究的可能性,本文综述了近几年关于LGG疗效的正反两方面的信息,希望能为中国的相关研发单位和企业提供一些风险警示,以防过于乐观地进行相关的药品研发或产业化.
作者:张水华;何询 刊期: 2011年第04期
世界卫生组织(WHO)认为预防接种是经济、有效、方便的预防儿童传染性疾病的公共卫生措施之一.为探讨预防接种不同反应的研究进展,从预防接种反应发生原因、分类及应对策略三个方面分别进行阐述.通过研究,找出预防接种异常反应及应对策略方面的不足,以便在发生预防接种异常反应( AE FI)时,采取快速适当的应对策略,有助于为在今后实际工作中避免其对国家免疫规划项目造成负面影响.
作者:魏红玲;宋宏剑 刊期: 2011年第04期
脂寡糖是淋病奈瑟菌的致病因素之一,它可以介导淋球菌粘附和侵入宿主细胞,并在淋球菌逃避宿主免疫防御机制中发挥重要作用.近年来,国内外学者对脂寡糖的研究取得了不少进展,这为淋病疫苗的研究提供了一个新的方向.
作者:闫晓亮;胡四海 刊期: 2011年第04期
鹦鹉热嗜衣原体广泛分布于世界各地,能感染禽鸟、哺乳动物及人类,严重威胁人类健康,并对世界各国的禽类养殖业造成巨大影响.传统的血清学分型法由于其特异性低、敏感性差等缺点几乎已被淘汰,随着分子生物学技术的发展,基因分型法凭借其高特异性、高敏感性、高分辨率等优点,有效地弥补了血清学分型的不足.本文就Cps分型方法的研究进展进行了综述.
作者:陈俊;吴移谋 刊期: 2011年第04期
树突细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(DC - SIGN)首先是在DC表面发现的Ⅱ型跨膜凝集素受体,能够与细胞间黏附因子2(ICAM-2)和ICAM -3结合,并能识别结合富含甘露糖的碳水化合物和含岩藻糖的多糖结构(如Lex,Ley,Lea及Leb)等病原相关分子模式,一方面可以通过受体介导的内吞、摄取、处理、提呈可溶性抗原,诱发机体对病原体的免疫应答;另一方面DC - SIGN诱发的信号通路能下调宿主免疫应答,导致病原体扩散、传播、免疫抑制和持续性感染.近年来,人们通过对许多病原体的免疫逃逸现象进行的大量研究工作,发现DC - SIGN与病毒的糖蛋白、细菌和真菌的荚膜多糖(CPS)等结合,使病原体藏匿于DC细胞而逃避溶酶体的降解,促进病原体传播实现免疫逃逸.
作者:刘紫玲;朱翠明 刊期: 2011年第04期
奈瑟菌属孔蛋白作为免疫佐剂在B细胞和其他抗原提呈细胞活化中发挥作用.PorB能镶嵌在宿主细胞膜和线粒体膜上,引起线粒体一系列变化,导致宿主细胞发生病变.PorB通过TLR2转导其效应,可与补体抑制剂C4b结合蛋白结合,拮抗补体介导的杀伤作用.PorB活化细胞的转录因子NF - κB,可增加宿主细胞抗凋亡因子的表达.淋球菌PorB作为主要外膜蛋白,其致病性一直都是国内外研究的热点.
作者:张小娟;胡四海 刊期: 2011年第04期
为了确定用细胞工厂生产口服轮状病毒活疫苗的工艺参数和质控点,将原代牛肾细胞按20×104个/cm2接种到细胞工厂培养,待形成良好单层后按4×104个/cm2连续传代2次后接种轮状病毒,并与转瓶作对照.结果显示,用细胞工厂生产口服轮状病毒活疫苗与转瓶培养无差异,细胞工厂可用于改进口服轮状病毒活疫苗的生产.
作者:刘学平;魏至栋;谢澎;庞兴;任雅萍 刊期: 2011年第04期
流感疫苗血凝素含量检测方法为单向免疫扩散试验,其抗血清通常由WHO参比实验室提供,通过纯化病毒、蛋白酶切获得血凝素主要抗原片段,然后再免疫动物获得抗血清.该方法制备时间较长,是制约流感疫苗研发及检测的主要因素.以RT-PCR方法获取甲型H1N1流感病毒血凝素中主要抗原片段基因,构建重组质粒并在大肠杆菌中表达,表达产物经纯化、复性后,以蛋白电泳及免疫印迹方法进行了鉴定.以纯化蛋白免疫家兔,制备了相应的抗体,初步证明可用于常规的单向免疫扩散试验.以该法可以快速获得抗血清,尤其是在大流行流感疫苗的研发中,加快疫苗研发进程.
作者:顾琴;李娟;徐康维;邵铭;廖国阳;李卫东;李长贵 刊期: 2011年第04期
研究许昌市麻疹流行特征,为消除麻疹提供科学依据.对许昌市2010年麻疹疫情进行描述流行病学分析.结果显示2010年全市共报告麻疹确诊病例158例,报告发病率为3.74/10万;流行毒株为麻疹病毒H1a基因型.3-5月份是发病高峰;0~3岁龄儿童为主,其中小于8月龄病例占报告发病数的32.91%;8- 17月龄病例,68.08%无麻疹类疫苗免疫史;18月龄及以上病例,30.65%无麻疹类疫苗免疫史.分离出麻疹病毒H1a基因型,对指导麻疹疫苗免疫和疫情的防控意义重大;常规免疫接种率低,免疫空白、原发或继发性免疫失败是造成麻疹高发的主要原因;提示麻疹防控任务艰巨,应进一步做好麻疹疫苗常规免疫和查漏补种,规范开展病例监测与管理,有效控制麻疹疫情.
作者:俎炳灿;赵鸣 刊期: 2011年第04期
分析百色市2010年各种疫苗引起的疑似预防接种异常反应(Adverse Events Following Immunization,AEFI)的发生特点和AEFI监测系统运转情况.通过疑似预防接种异常反应信息管理系统收集报告的AEFI个案数据,采用描述性流行病学方法对监测资料进行分析.百色市2010年共报告疑似预防接种异常反应84例,其中,一般反应占59.52%,异常反应占36.90%,以过敏性皮疹(51.61%)为主,偶合症占3.57%;,其中≤1岁儿童占63.10%,男女性别比为1.47∶1;55.95%的疑似异常反应发生在接种后24h内.因而,仍需不断提高AEFI监测系统的及时性和敏感性.
作者:余水兰 刊期: 2011年第04期
分析正阳县2007年麻疹的流行病学特点,为有效的控制麻疹发病提供依据.按卫生部《全国麻疹检测方案(试行)》规定的诊断标准进行诊断,并采用描述流行病学方法进行研究.2007年1月份发现麻疹病人51例,2月份302例,3月份20例,4月份1例,5月份7例,6月份3例,分别占总病例的13.25%、78.44%、5.19%、0.26%、1.82%、0.78%.0-7月龄婴儿发病人数为52人,占所有发病人数的13.51%;大于20岁的人群中共发病59例,其中男30例,女29例,发病人数较多.提示搞好基础免疫提高人群免疫力仍是当前的主要任务,特别是对育龄妇女的疫苗接种,一方面可以降低成人感染麻疹的机会,另一方面也可以降低0-7月龄婴儿的发病率.
作者:贺春民;王震一;宋继阳 刊期: 2011年第04期
2011年,由于在免疫学研究领域的开创性的研究,Ralph Steinman,Jules Hoffmann和Bruce Beutler获得了诺贝尔生理学医学奖.Ralph Steinman发现了树突细胞及其主要功能;Jules Hoffmann和Bruce Beutler发现Toll样受体在固有免疫应答中的作用.他们的工作改变和丰富了人们对固有免疫应答和获得性免疫应答的认识,也对新型疫苗及佐剂的研究产生了巨大的推动作用.
作者:于永利 刊期: 2011年第04期
应用免疫学原理,将伤寒沙门菌O901、H901和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌分别制成全菌体抗原,免疫实验兔获取免疫血清.依据伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌的抗原成分的异同性,选择适当的吸收菌除去免疫血清中的交叉反应抗体和类属凝集素,而保留其特异性的抗体.通过对诊断菌液的验证试验,证实吸收充分的免疫血清具有质控血清的特性.具备可靠性能的质控血清,适用于伤寒沙门菌与副伤寒沙门菌的菌种检定及其效价检测;亦有利于肥达氏诊断菌液的质量控制.
作者:陈国怀;赵奋公;赵涛;罗广;王志东;席仲兴 刊期: 2011年第04期
建立了高效液相色谱法测定A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖的含量.样品经离心除去多糖后,采用阳离子交换柱分离,外标法定量分析.该法线性相关系数大于0.9999,回收率为98.8%,成品测定的CV值为1.2%(<2%),该法定量准确,重复性好,适于对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量进行快速检测.
作者:雒丽红;冯潇;魏然;朱莉萍 刊期: 2011年第04期
为了对多糖活化剂——1 -氰基-4-二甲基氨基-吡啶四氟化硼(CDAP)的残余水平进行有效监控,本研究建立了基于高效阳离子交换层析的简便易行的检测方法,进行验证后的结果表明,该法具有良好的专属性、准确度、精密度,检出限可低至16 μg/L,在20 ~ 100 μg/L的范围内具有良好的线性.
作者:马庆华;傅元欣;冯潇;魏然;高雪军;朱莉萍 刊期: 2011年第04期
为了提高虫草无性型蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali菌丝体中的腺苷含量,采用响应面法对其液体发酵培养基配方进行了优化.首先采用Plackett-Burman设计法对影响蝙蝠蛾拟青霉腺苷收率的8个相关因素进行了筛选,从中确定其主要影响因子为马铃薯和蚕蛹粉.然后用陡爬坡试验逼近上述2个因素的大响应区域,并通过中心组合设计和响应面分析法,确定了主要影响因子的佳浓度.优化后的培养基组成为:马铃薯8.25%,蔗糖1%,玉米粉1%,蛋白胨0.5%,蚕蛹粉0.81%,KH2 PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.1%,(NH4)2 SO40.1%.该配方所产生的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中腺苷含量由优化前的2.15 mg/g(干重)提高到3.44 mg/g(干重).
作者:巩伯梁;董冰雪;李长杰;张丽萍;李刚 刊期: 2011年第04期
通过制备A型肉毒聚合类毒素,研究获得较好的免疫原性和反应原性的方法.通过碳二亚胺法,聚合A型肉毒类毒素,免疫小鼠,用ELISA检测抗体,成功地制备了A型肉毒聚合类毒素,免疫小鼠获得高效价免疫血清,且该免疫血清具有中和活性,研究A型肉毒聚合类毒素抗原的作用机制,获得具有中和活性的保护性抗体,对肉毒毒素中毒的防治具有重要意义.
作者:曹馨匀;何彦林;高建军;刘卫涛;张廷芬;陈晓航;罗树权 刊期: 2011年第04期
应用分子生物学技术,选择鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,C.psittaci,Cps)6BC株的CPAF蛋白的免疫优势区基因,进行构建pGEX6p-2/CPAFm重组质粒与重组菌,使用IPTG诱导重组蛋白的表达并分析诱导温度、诱导剂剂量及诱导时间对蛋白表达的影响.重组蛋白以GST琼脂糖凝胶FF进行纯化,用SDS - PAGE和免疫印迹( Western blot)进行鉴定.为建立Cps的快速诊断和富集Cps诊断抗原奠定良好的试验基础.
作者:王绍胜;吴移谋 刊期: 2011年第04期