人凝血酶原复合物( Human prothrombin complex concentrate,PCC)是由健康人混合血浆中分离制备的一种血浆蛋白制剂,主要含有依赖于维生素K的凝血酶原(FⅡ)、凝血酶原转化因子(FⅦ)、抗乙型血友病因子(FⅨ)和自身凝血酶原(FX).在临床上,PCC主要用于治疗乙型血友病和因维生素K缺乏或患肝病而引起的出血症状.近年来,随着PCC分离技术的发展和安全性的提高,PCC的使用量正在逐年增加.本文综述了PCC的制备工艺研究现状、临床使用和安全性.
作者:文圆 刊期: 2012年第04期
汉坦病毒感染人类可导致肾综合征出血热和汉坦病毒肺综合征,其包膜糖蛋白(GP)是重要的结构蛋白,本文就汉坦病毒糖蛋白的结构和功能的研究进展作一综述.
作者:于蒙蒙;于澜 刊期: 2012年第04期
纳米颗粒已得到广泛的应用,同时其潜在的毒性及生物学效应也引起了广泛的关注.许多文献证实纳米颗粒对生物体具有毒性作用,但在分子水平上对其毒性机制的研究较少.本文对近年来纳米颗粒与生物大分子相互作用的新研究进行了综述,包括纳米颗粒与蛋白质、脂类、核酸等生物分子间的相互作用.
作者:吕颖;方丽 刊期: 2012年第04期
抗菌肽是一类小分子肽,具有广谱的抗菌活性.以往对抗菌肽抗菌机制的研究主要集中在细菌细胞膜的作用上,包含“桶板”模型、“毯式”模型,“环形孔”模型和“凝聚”模型.近年来相继发现某些抗菌肽可以作用于细菌细胞内部,与核酸物质结合,阻断DNA复制、RNA合成;影响蛋白质合成;抑制隔膜、细胞壁合成,阻碍细胞分裂;抑制胞内酶的活性.本文从胞内机制和胞外机制两个角度对抗菌肽的抗菌机制进行综述,以期阐明各类抗菌肽的作用机制,为进一步研究菌株耐药性、杀菌效果及其杀菌机制提供科学根据.
作者:王兴顺;耿艺介;李文楚 刊期: 2012年第04期
肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)为手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)和相关疾病的主要病原体,多感染婴幼儿,少数病例可以并发呼吸道感染和心肌炎、无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹等严重疾病,可致残、致死.因此EV71实验室诊断对EV71引起疾病的治疗和防控具有重要意义.本文将从核酸检测、抗体检测及其他检测等三部分对EV71的实验室诊断方法研究进展进行了综述.
作者:吴星 刊期: 2012年第04期
沙眼衣原体具有广泛的致病谱,不仅是感染性致盲的首要病因,也是性传播疾病的主要病原体.持续性炎症反应与沙眼衣原体感染致病密切相关.NALP3炎性体是一种细胞内多蛋白复合物,在Ct感染所致的持续炎症反应中发挥重要作用.本文就NALP3炎性体的结构和功能及其在沙眼衣原体感染中的作用作一综述.
作者:曹文娟 刊期: 2012年第04期
目的 建立双抗体夹心ELISA法,对A群流脑多糖抗原进行特异性定量测定.方法 制备抗A群多糖的特异性多克隆抗体,所得抗血清经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记多克隆抗体.分别以抗A群多糖多克隆抗体作为包被抗体及酶标二抗,建立双抗体夹心ELISA法,优化反应条件,对A群多糖抗原进行特异性定量测定.结果 一系列验证试验表明,该法特异性较好,未检出与C、Y、W135群多糖的交叉反应;1.25 ~ 20 ng/mL多糖浓度范围的剂量反应曲线线性佳,相关系数大于0.98,经实验内10次及不同试验间以16、8、4 ng/mL测定3次A群多糖中的含量,变异系数在6.3% ~11.5%间,回收率在91.8%~105.9%之间,符合常规质控要求,检测限量为4 ng/mL.采用该法测定3批ACYW135群四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖含量、分子大小及回收率的结果均符合规程草案质量标准.结论 建立的双抗体夹心ELISA法可尝试用于ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖的关键质量指标的检测.
作者:肖詹蓉;潘殊男;张霖阳;王宇星;史雨舟;李工;张萍 刊期: 2012年第04期
目的 建立百日咳组分疫苗丝状血凝素(FHA)抗原含量监控的ELISA检测法.方法 制备的多克隆抗血清,经辛酸硫酸铵法纯化抗体,用过碘酸钠氧化法辣根过氧化物酶标记,以棋盘滴定法确定佳包被抗体及酶标抗体的浓度配伍,建立了双抗体夹心ELISA检测法.结果 对双抗体夹心ELISA法的特异性、佳线性范围、检测限度、精密度、准确度、测定限量、适用性的一系列验证试验表明,该方法与百日咳组分疫苗中PT和Prn无明显交叉反应,特异性较好.在0至20 ng/mL测量区间有佳线性,相关系数大于0.99;经实验内12次及不同试验间3次测定16、8、4 ng/mL中的FHA含量,变异系数在0.2%~11.4%间,回收率在96.9% ~ 114.5%间,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,因此测定限量为4 ng/mL.结论 该方法能有效检测出百日咳杆菌培养上清中的FHA含量,可用于百日咳组分疫苗生产过程的中间品质量控制.
作者:潘殊男;肖詹蓉;史雨舟;张霖阳;王宇星;李世慧;韩凝;张萍 刊期: 2012年第04期
目的 以经典重配技术制备高产H1N1流感疫苗病毒株.方法 以野生型A1/云南昆明/03/2009( H1N1)作为HA及NA基因的供体株,以WHO疫苗株A/Perth/16/2009( H3N2)作为高产基因供体株,共同感染SPF鸡胚,经抗H3及抗N2血清中和筛选法及终末稀释法筛选高产重配H1N1病毒.结果 获得一株重配H1N1流感病毒株,病毒血凝滴度为1∶4 096,病毒滴度为7.8 lg EID50/mL,显示为鸡胚高产病毒株;血凝抑制结果为1∶1024,单向免疫扩散试验结果为阳性,证明抗原性与野生株一致;基因测序结果表明重配株的HA及NA基因序列与野生株序列一致.结论 构建了高产重配H1H1流感疫苗病毒株,并应用经典重配技术建立了制备高产流感疫苗病毒株的技术平台.
作者:邵铭;宋绍辉;徐康维;刘书珍;廖国阳;李长贵 刊期: 2012年第04期
目的 比较肌内注射法和基因枪法对免疫效果的影响.方法 将携带HCV NS3/4A基因的质粒pcDNA3.1-NS3/4A,分别肌内注射和基因枪免疫BALB/c小鼠.基因枪免疫采用2μg/只和10μg/只两种剂量,肌内注射免疫的剂量为100 μg/只,共免疫3次.分别于第3次免疫后10 d和20 d,收集小鼠血清、分离脾细胞;ELISA法检测小鼠血清中特异性抗体水平;ELIspot检测小鼠IFN-γ、IL-2和IL-4;非放射性细胞毒性试验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用,从而比较肌内注射和基因枪法激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答的影响.结果 免疫后第10 d检测结果表明,2 μg/只和10 μg/只基因枪法免疫产生的抗体效价分别为1∶500和1∶1000,100 μg/只肌内注射免疫产生的抗体效价为1∶1 000.第20 d再次检测,基因枪法产生的抗体效价仍为1∶500和1∶1000,肌内注射降低为1∶500.2μg/只和10 μg/只基因枪免疫产生的IFN-γ和IL-2均高于100 μg/只肌内注射免疫.但这两种免疫方法均未激发IL-4的水平.在不同的效靶比情况下,10 μg/只和2μg/只基因枪免疫激发的CTL细胞杀伤活性均高于100 μg/只肌内注射免疫.结论 基因枪法免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答均显著高于肌内注射免疫.
作者:姚敏;尹文;雷迎峰;杨敬;黄小军;康健;吕欣 刊期: 2012年第04期
目的 了解韶关市2008-2011年手足口病流行特征,为降低该病的发病率提供决策依据.方法 依据卫生部2008年版下发的手足口病诊断标准、防控指南,进行诊断、流行病学调查、标本采集.用描述流行病学方法对手足口病病例进行分析,并对人份标本进行逆转录酶反应(RT-PCR)核酸测定.结果 韶关市4年共报告手足口病例14 076例,手足口病发病有明显的季节性,4~6月为发病高峰期,占全年报告总数的63.34%.发病人群以男性(男∶女=1.89∶1)5岁以下散居儿童为主,占总发病数的93.11%.4年的手足口病主要由EV71和其他肠道病毒混合感染引起,死亡病例主要由EV71感染引起.聚集性病例主要发生在个体托幼机构,占77.46%.散居或家庭聚集性病例占22.54%.结论 当前手足口病是严重危害韶关市低年龄组儿童身体健康和生命安全的重要公共卫生问题,要不断加强环境及个人卫生条件的改善,普及健康教育.
作者:康怀雄;梁晶;黄辉 刊期: 2012年第04期
目的 了解平顶山市百日咳发病流行规律,为有效防控百日咳提供科学依据.方法 采用描述流行病学方法分析,对平顶山市法定传染病报告系统和近年对百日咳疫情监测资料进行分析,对百日咳的时间分布、疫苗效果等进行比较.结果 自实施计划免疫以后,百日咳发病率和死亡率大幅度下降,年均发病率由20世纪60 ~ 70年代的93.08/10万降至目前的1/10万以下;流行范围逐步缩小,春夏为高发季节,主要集中在5~8月份,病例10岁以下儿童共88例,占病例总数的98.88%,主要集中在7岁以下的为57例,占64.05%.城市高于农村,两者发病率差异有统计学意义.女性多于男性.职业以散居、托幼儿童为主,占发病总人数的57.30%;其次为学生,占41.58%.结论 防治百日咳应进一步提高和保持高水平的百白破混合制剂常规免疫接种率,控制局部地区的爆发,并加强监测和传染源的管理.
作者:张俊杰;李宗瑾;杨恒丹;崔振铎;王晓明;魏海涛;杨秋锋;赵克娜 刊期: 2012年第04期
目的 评价广州市2001-2011年15岁以下人群乙肝疫苗查漏补种效果,为制定乙肝免疫策略提供依据.方法 对广州市2001年、2008年和2009-2011年15岁以下儿童乙肝疫苗查漏补种项目实施效果进行评价.结果 3次乙肝疫苗查漏补种实施,可调查儿童6 973 ~319 478人,2001年、2008年和2009-2011年实施乙肝疫苗查漏补种项目首针及时接种率分别为90.88%、95.1%和96.92%,全程接种率分别为92.44%、97.14%和99.08%.2009-2011年乙肝疫苗首针及时接种率比2001年、2008年分别提高了15.21%和88.70%;2009-2011年乙肝疫苗全程接种率比2001年、2008年分别提高了15.27%和88.71%.结论 乙肝疫苗查漏补种项目的实施,显著提高了乙肝疫苗首针及时接种率和全程接种率,起到了良好的预防作用.
作者:李志群;王鸣;蔡衍珊;许建雄;陈健 刊期: 2012年第04期
目的 了解潍坊市儿童预防接种个案信息化管理情况,为免疫规划管理提供科学依据.方法 采用《金苗免疫助手系统》软件,建立儿童预防接种个案数据库,通过磁卡识别系统进行接种.结果 截至2010年儿童接种个案信息常住与流动儿童分别录入794 015和117 192人,录入管理率分别为99.80%、96.11%;流动儿童建卡、证信息化电子网络管理前后相比具有统计学意义(x2= 4.52,0.01<P<0.05),“七苗”全程及乙肝疫苗首针及时接种率有统计学意义(x2= 125.34,P <0.01,x2=278.16,P <0.01).结论 实施网络化管理后提高了流动儿童接种率和乙肝疫苗首针及时接种率,有效地解决了流动人口异地接种难的问题,通过先进的服务系统及时为儿童家长提供接种信息,有效地防止了漏种、错种和重复接种现象的发生.
作者:邱德山;郑恩兴 刊期: 2012年第04期
目的 研制有效防治铜绿假单胞菌感染的疫苗.方法 用热酚水法提取铜绿假单胞菌6型( IATS 6)菌株的脂多糖(LPS),去除类脂A并纯化O-特异性多糖(O-SP),用CDAP活化O-SP,己二酸二肼作连接臂,在EDAC作用下,与破伤风类毒素结合制备出O-SP -TT结合物并对该结合物进行小鼠免疫原性试验和免疫保护性试验.结果 制备的结合物在小鼠免疫原性试验中,产生了高效价的IgG抗体,与O-SP试验组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);免疫保护性试验表明,结合物免疫小鼠能很好的保护5~10 LD50活菌的腹腔攻击.结论 该结合物有望成为防治IATS 6型铜绿假单胞菌感染的有效疫苗.
作者:谢茂超;陈明拓;姜晓;杨硕;王学林;葛永红 刊期: 2012年第04期
目的 通过菌株传代方法观察携带致死因子(lf)基因的重组大肠杆菌pET-28(a)/LF/BL21的传代稳定性.方法 将重组菌株pET-28(a)/LF/BL21在含有卡那霉素的LB培养基中连续传代至100代,比较第1、10、20、50、100代菌株的菌落形态、细菌形态、生化特性、质粒保有率、生长速度等的差异;取各代次菌株提取质粒DNA且分别进行双酶切及PCR鉴定、DNA测序;诱导表达各代次菌株,比较各代次菌株的重组rLF蛋白的表达水平及免疫反应性.结果 各代次菌株菌落形态、生化特性、生长速度等方面与原始种子库无明显差异;在传至100代时的质粒保有率为76%;各代次菌株重组质粒电泳图谱、酶切图谱、PCR图谱未改变,未见lf基因变异;各代次菌株的总蛋白电泳图谱、rLF蛋白表达量、rLF蛋白的免疫反应性与原始种子库无明显差异.结论 重组大肠杆菌pET-28 (a)/LF/BL21具有较好的传代稳定性.
作者:李睿;王革;钱秋娟;王秉翔 刊期: 2012年第04期
目的 评价ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗在昆明健康人群接种的免疫原性,为流脑防治策略提供依据.方法 2010年对昆明市2岁~、3岁~、4岁~、5岁~、6岁~、10岁~、≥15岁共7个年龄组分层随机抽取筛选出654名健康人,分别采集免前和免后1个月血清.用微量杀菌力试验(TTC法)分别检测血清中抗A、C、Y和W135群脑膜炎球菌杀菌抗体的水平.结果 免后1个月抗A、C、Y和W135群脑膜炎球菌的杀菌抗体阳转率分别为96.99%、96.37%、88.43%和87.07%,抗A、C、Y和W135群膜炎球菌血清的杀菌抗体几何平均滴度(GMT)分别为1∶297.99、1:195.80、1∶72.74和1∶45.95.结论 ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗在≥2岁以上的健康人群中有较好的免疫原性.
作者:张辉;胡树梅;姜强;马兰辉;冯金华 刊期: 2012年第04期
目的 评价H-FABP快速检测试剂盒对急性心肌梗死(AMI)的早期诊断效果.方法 比较H-FABP、CK、CK-MB和cTnT四种心肌标志物在AMI发作后6h内的敏感性、准确性和时效性;比较H-FABP快速检测试剂盒对AMI患者和非AMI患者诊断的特异性.结果 H-FABP快速检测试剂盒的检测结果与临床诊断结果符合率为100%;在AMI发作后6h内,H-FABP的敏感性和准确性优于CK、CK-MB,与cTnT相当.8例肾衰竭患者100%显示阳性,心源性疾病中主动脉关闭不全有1例(2.44%),房间隔缺损有2例(4.88%)显示阳性.结论 AMI发作后6h内,H-FABP快速检测试剂盒对其具有较好的诊断价值.
作者:刘筱泉;白峰;李天成;梁昭红;蒋知新;陈平纡;吴强 刊期: 2012年第04期