利用野生型病毒株研究病毒的生物学特性及其与宿主细胞相互作用的机制是病毒学领域常用的研究方法,但前提条件是此类病毒能够在体外培养,且传染性和致病性低,对人身安全和环境不构成威胁.对于一些传染性强、致死率高,体外培养难以获得,且需在高级别生物安全实验室操作的病毒,如H7N9、H5N1、SARS和埃博拉病毒等,体外研究其生物学特性有较大的困难和局限性.因此,寻求一种替代真病毒的方法来研究特定病毒特性势在必行.体外构建假病毒由于具有生物安全性高、宿主嗜性广、稳定性强等优点,受到人们的关注,已广泛应用于疫苗研发、病毒与宿主细胞之间的相互作用、病毒敏感细胞的筛选、中和抗体和中和抗原表位研究等方面,这是一种非常安全有效的研究手段.现就此进行综述,并总结相关领域的研究进展.
作者:董占柱 刊期: 2014年第02期
人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPVs)是一种嗜人体皮肤和黏膜的DNA病毒,约80%有性行为的女性可能感染HPV.宫颈癌是常见的恶性肿瘤之一,是女性肿瘤中仅次于乳腺癌的第二个常见的恶性肿瘤,高危型HPV感染是其主要致病因素,则宫颈癌是目前唯一病因明确的妇科恶性肿瘤.HPV感染亦与其他恶性肿瘤的发生、发展密切相关,可引起除宫颈癌外的其他泌尿生殖道肿瘤,以及消化道系统、呼吸道系统、眼科、皮肤等其他系统或器官肿瘤.对HPV感染所致肿瘤的相关研究进展进行了综述,为肿瘤病因和发生机理的研究提供了新的思路.
作者:刘志敏;唐双阳 刊期: 2014年第02期
疫苗安全性是公众及药品监管机构非常关注的问题.由于疫苗生产原材料如组织、细胞基质、血清、胰蛋白酶等来源于动物,因此疫苗产品存在外源病毒污染的风险.外源病毒对人有潜在危害,实施系统性的检测和采取严格的预防措施可以有效降低外源性因子污染的风险.几十年来,某些经典的检测法已经成为广谱筛查外源病毒污染的标准方法,但其存在一定的局限性.随着大规模基因并行测序、微阵列等分子生物学检测新方法的建立,疫苗外源因子检测方法日趋多样化,增加了检测疫苗外源因子污染种类和概率.
作者:贺倩 刊期: 2014年第02期
目前获准上市的流脑疫苗主要有A群、A+C群脑膜炎球菌疫苗及A,C,W-135及Y群的四价脑膜炎球菌疫苗,B群脑膜炎球菌疫苗尚未研制成功.近年来,研究人员以疫苗外膜蛋白为基础,应用反向疫苗学技术对B群脑膜炎球菌疫苗进行了大量研究,现重点对B群脑膜炎球菌多组分疫苗的研究进展予以综述.
作者:李开铭;彭杰;钟美珍 刊期: 2014年第02期
昆虫杆状病毒表达载体系统具有安全性好、重组蛋白表达量高、能同时表达多个基因、重组蛋白翻译后加工完整等特点,因而得到了广泛的应用.随着重组杆状病毒构建技术的不断发展,昆虫杆状病毒表达载体系统的操作在逐渐简化,重组杆状病毒获得的效率也在不断提高.昆虫细胞培养技术的改进和转基因昆虫细胞系的发展,进一步推动了昆虫杆状病毒表达载体系统在商品化药物、治疗性抗体、生物农药研发和基因治疗中的应用.尽管仍存在着重组蛋白降解的问题,但随着分子生物学技术的发展,对杆状病毒载体的研究与改造也会更加深入,未来昆虫杆状病毒表达载体系统的应用将更为广泛.
作者:凌同 刊期: 2014年第02期
食品安全问题在中国范围内频发,严重威胁民众的健康和安全.为防止此类问题发生,对于由微生物污染食品所产生的危害,可通过添加抗菌剂有效降低安全隐患,随着食品安全法的不断完善,抗菌剂的添加量也愈加严格和规范.香兰素是一种具有抗菌性的传统食品添加剂,但是目前缺乏对其抗菌机制的全面理解,因此,限制了香兰素在抗菌特性方面的广泛应用.有鉴于此,现对香兰素的结构、功能与抗菌活性的相关性及其抗菌机制研究进展予以综述,并对具有抗菌特性的香兰素衍生物进行探讨.
作者:陈朋;李素岳;严晓娟;王宁波;李红玉;梁宁 刊期: 2014年第02期
目的 了解甲型H3N2流感暴发流行特征,为制定预防措施提供依据.方法 对和温村小学239名学生流感发病及流感疫苗接种情况进行调查,对发病者逐一个案调查登记,采集患者咽拭子标本送百色市疾病预防控制中心实验室检测确诊.结果 该校学生流感发病33例,发病率为13.81%,学前班及1~6年级共7个班均有病例发生,发病班级为100%.发病者中,男性18例,女性15例,男女性别比为1.2∶1,男女发病率分别为14.52%(18/124)、13.04% (15/115),(x2=0.11,P>0.05),男女发病率差异无统计学意义.患者咽拭子标本5人份,经实验室检测甲型H3 N2流感病毒核酸阳性率为100%.结论 该校学生无流感疫苗免疫接种史,易感人群积累,是本次甲型H3 N2流感暴发流行的根本原因.应在每年秋冬流感流行季节前一个月,加强中小学校学生流感疫苗接种,提高易感人群免疫力,防止甲型H3N2流感扩散蔓延.
作者:王福春 刊期: 2014年第02期
目的 了解深圳市脊髓灰质炎疫苗相关病例(VAPP)发生情况及流行病学特征,为消灭脊髓灰质炎后期脊灰疫苗免疫策略的研究提供基础数据.方法 采用流行病学方法对深圳市2005-2012年残留麻痹急性弛缓性麻痹AFP病例个案资料、病原学检测结果、VAPP病例进行分析.结果 2005-2012年共报告残留麻痹病例55例,其中VAPP病例8例,占15.54%;深圳市VAPP病例均为小年龄组小于6月龄的儿童,总发生率0.20/10万,无接触者VAPP病例,其中首次服苗的VAPP发生率为0.51/10万;无明显的地区和时间分布聚集性.结论 VAPP的发生是接种脊髓灰质炎减毒活疫苗难以克服的弱点,为减少VAPP病例及防止脊灰疫苗衍生病毒的发生,应在消灭脊髓灰质炎后期科学、合理地调整消灭脊髓灰质炎的免疫策略.
作者:杨洁;黄芳;张世英;杨卫红;卢紫燕 刊期: 2014年第02期
目的 构建人乳头瘤病毒16型(HPV16) E7基因密码子优化后的原核表达系统,通过特异性抗体制备评价E7融合蛋白的免疫原性.方法 人工合成优化后的HPV16 E7基因,利用特异引物扩增HPV16 E7基因.将E7基因连接至原核表达载体构建重组表达质粒pMAl-c2X-E7,转化至感受态细胞DE3后,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物E7融合蛋白.纯化后的E7融合蛋白免疫动物,采用ELISA检测动物血清效价.结果 E7基因PCR产物的测序结果与优化后的目的基因序列比对一致.表达的E7融合蛋白经SDS-PAGE分析表明:在相对分子质量50 000处有特异性表达带,与预期相符.以E7融合蛋白制备的多克隆抗体其血清效价可达1∶64 000.结论 成功构建的重组表达质粒pMAl-c2X-E7可有效表达MBP-E7融合蛋白,E7融合蛋白具有良好的免疫原性.
作者:李菁华;史红艳;韩放;逯茵茵;徐国全;于丽;孙延波 刊期: 2014年第02期
目的 分析平顶山市麻疹病例发生的原因,为加速控制和消除麻疹提供科学依据.方法 对平顶山市2013年法定传染病疫情报告资料和麻疹监测资料进行流行病学分析.结果 平顶山市2013年共报告麻疹104例,年发病率为2.11/10万,2~4月为发病高峰;男女发病率差异有统计学意义,发病以3岁以下儿童居多,占发病总数的86.54%;其中8月龄~<1岁者多,占39.42%;14岁以上者9例,占8.65%,其他年龄组发病率随年龄增大而逐步下降.从病例就诊、住院时间上推断其感染方式可能以医院内感染为主.结论 常规免疫接种率和首针及时接种率不高是麻疹高发的主要原因,医院内交叉感染是麻疹的传播因素,提高易感人群麻疹疫苗接种率,控制院内感染是控制、消除麻疹的有效手段.
作者:张俊杰;李宗瑾;杨恒丹 刊期: 2014年第02期
目的 了解荔湾区2008-2012年水痘疫情的流行情况,为制定水痘疫情防制措施提供科学依据.方法 对2008-2012年荔湾区报告的水痘病例及水痘暴发数据,采用Excel2003软件整理后,进行描述性流行病学分析,并结合当前有关文献资料提出今后水痘防制的建议.结果 2008-2012年广州市荔湾区共报告水痘5 814例,年均发病率为129.46/10万.年发病率为83.50/10万~165.33/10万,其间2008年高,2012年低;全区22条街都有病例发生;全年12个月均有病例发生,呈冬春季高发态势;发病主要集中在儿童和青少年,学生占42.89%;男女比例为1.4∶1,报告病例中20岁以下者4 690例,占总数80.67%(4 690/5 814);集体单位聚集性疫情13起,其中暴发疫情4起.结论 荔湾区近年水痘疫情主要发生在冬春季节,学生和托幼儿童及散居儿童是水痘的高发人群.建议加强普及防控水痘基本知识,提高水痘疫苗第1剂接种率,落实应急接种的同时,开展水痘疫苗第2剂接种程序的研讨,确保水痘疫情的有效控制,保护公众健康.
作者:何国宽;曾祥越;梁志钦;谢晰文;杨翠辉 刊期: 2014年第02期
目的 建立用Vero细胞检测柯萨奇病毒A组16型(CA16)滴度的方法,并对其适用性进行初步验证.方法 通过对细胞种类的选择、细胞接种浓度和细胞病变判定时间的优化,建立测定CA16滴度的半数细胞感染剂量法(CCID50法),并对其进行初步验证.结果 通过对病毒感染后细胞病变情况的观察,确定了以Vero细胞作为CA16病毒滴度检定用细胞.Vero细胞的佳接种浓度和结果判定时间分别为5×104 ~ 1×105细胞/mL(即96孔板内每孔加入的终细胞量为5×103 ~ 1×104细胞)和7d.由4组人员对6批CA16病毒液进行重复检测,实验结果表明不同实验人员测定结果的变异系数(CV)在1.739% ~4.974%之间,说明该方法测定结果重复性好,准确度高.结论 该法简便、稳定,可以灵敏、准确地检测CA16病毒的滴度,可用于相关疫苗生产过程中的质量控制.
作者:曾献武;陈平;李玫颖;孙艳;范凤鸣;何敏;刘杰 刊期: 2014年第02期
目的 评估不同饮用水对地鼠生长发育的影响.方法 将104只25日龄地鼠随机以每组雌雄各半分为4组,分别饲喂酸化水和高压水、过滤水和普通水,在饲养过程中分别量取体重、水消耗量,水pH值,胎间隔、成活率、脏器系数和骨髓细胞微核数,并对组间数据结果进行统计学处理.结果 4种饮用水量与体重呈线性正相关;酸化水在抑制细菌方面优于其他饮用水;骨髓细胞微核试验、地鼠脏器系数在各组无显著变化.结论 酸化水在抑制细菌生长优于其他饮用水;过滤水适宜地鼠生长繁殖.
作者:邵青;周小江;何军礼;张新创 刊期: 2014年第02期
目的 评价EV71和CA16双价灭活疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答.方法 分别应用EV71和CA16双价疫苗、EV71和CA16单价疫苗按单针、两针(0,14 d)的程序免疫小鼠,采用细胞病变法检测血清第1针免疫后21 d时中和抗体效价,应用LUMINEX液相芯片技术检测小鼠脾单个核细胞体外经抗原刺激分泌细胞因子的水平.结果 双价疫苗与EV71单价疫苗单针、两针免疫相比,EV71中和抗体几何平均值相近(118.8∶84.0;159.5∶156.8,P>0.05).双价疫苗与CA16单价疫苗单针免疫诱导的CA16中和抗体均为阴性;两针免疫CA16中和抗体几何平均值一致(30.0∶26.9,P>0.05).加强免疫7d后,小鼠脾MNC经EV71抗原刺激,双价疫苗较EV71单价疫苗诱导Th2类缅胞因子IL-4、5、6、10和炎症因子TNF-α的分泌水平显著增高(P=0.020,P=0.027,P =0.038,P=0.019,P=0.026);MNC经CA16抗原刺激,双价疫苗与CA16单价疫苗相比诱导细胞因子水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 双价疫苗可诱导与单价疫苗相似的中和抗体应答水平,并可提高Th2类细胞因子应答,研究为EV71和CA16双价灭活疫苗的研发提供了实验依据.
作者:王轩;高帆;毛群颖;王一平;王超;邵杰;游松;安文琪;徐苗 刊期: 2014年第02期
目的 分析甘肃省2010年和2011年麻疹减毒活疫苗(Measles vaccine,live MV)强化免疫活动中疑似预防接种异常反应(Adverse events following immunization,AEFI)发生特征,评价AEFI监测工作.方法 收集2010年和2011年甘肃省AEFI监测系统报告数据,采用描述性流行病学方法对相关数据进行分析.结果 甘肃省2010年和2011年MV强化免疫活动共报告AEFI病例346例,报告发生率为14.17/100万,男性略多于女性.一般反应报告发生率为12.82/100万,异常反应报告发生率为1.19/100万,异常反应主要以过敏性皮疹为主.接种MV后,发生AEFI的时间多在1d之内,占总报告病例数的76.41%,并呈现随着年龄增大发生率逐渐降低的趋势.结论 两次MV强化免疫活动AEFI报告发生率较低,接种MV后的1d之内需要重点监测,加强主动监测,提高AEFI的预防和处理水平.
作者:唐宇;李慧;梁雪枫;张晓曙;高丽 刊期: 2014年第02期
目的 建立鼠疫菌噬菌体噬菌斑效价测定方法.方法 通过分析细菌接种浓度、孵育吸附时间及培养温度等参数,建立鼠疫菌噬菌体效价测定方法,并分析其精密性;建立鼠疫活疫苗鉴别及纯菌检查用噬菌体效价质量标准.结果 经优化后确定细菌接种浓度为7×108/mL,不需孵育吸附,培养温度为29℃,所建立的检测方法精密性较好,用于鼠疫活疫苗鉴别及纯菌检查用噬菌体效价质量标准应不低于1×106 PFU/mL.结论 建立了鼠疫菌噬菌体噬菌斑效价测定方法,为鼠疫菌噬菌体及疫苗质量控制奠定了基础.
作者:魏东;陈成;解晓露;王国治;李恪梅 刊期: 2014年第02期
人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染是引起宫颈癌的致病因素之一.HPV基因组是一个约8 kb的双链环状DNA,编码8个病毒蛋白,其中编码E6和E7蛋白的开放阅读框被认为是主要的HPV癌基因.E6和E7在宫颈癌和癌前病变组织中表达;因此,这些蛋白作为研制新型HPV治疗性疫苗的潜在靶标而被广泛研究.在此我们回顾了E6和E7在病毒生长周期和肿瘤发生过程中的表达和功能.我们也探索了其他HPV蛋白的表达和功能,包括那些具有致癌性质的蛋白,同时就这些分子作为治疗性靶标的可能性进行了讨论.
作者:李雄雄 刊期: 2014年第02期