梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种严重危害人类健康的性传播疾病,选择敏感性高、特异性强的检测方法对于梅毒的确证和临床指导应用均具有很重要的意义.当前,有多种梅毒实验室检测方法,其中直接检测法在近十年的临床诊断中仍被经常使用,血清学检测法仍然是目前梅毒实验室诊断的主要方法,以各类PCR技术为代表的梅毒分子生物学检测方法因其具有高度的特异性和敏感性已被广泛应用于临床检验.对梅毒实验室检测技术中直接法、血清学检测法及PCR检测法三类方法的研究进展进行了综述.
作者:邓美霞 刊期: 2016年第01期
衣原体是一类严格真核细胞内寄生、具有独特发育周期的原核细胞型微生物.其分布于世界各地,感染宿主广泛,引起人和动物多种疾病,临床表现复杂,需要寻找一种有效疫苗来加强免疫保护以预防衣原体感染.以亚单位疫苗及相关新策略为重点,就衣原体疫苗的研究状况作一简要介绍.
作者:梁明星 刊期: 2016年第01期
PYHIN家族亦称为HIN-200蛋白家族/干扰素诱导P200蛋白家族(IFI-P200家族),目前已经鉴定出人的PYHIN家族成员有AIM2 、IFI16、IFIX和MNDA四种.近几年来研究发现,PYHIN家族在转导固有免疫信号时扮演重要角色,一些成员如AIM2、IFI16、IFIX等已被证实作为DNA传感器识别外源DNA分子进而启动机体自我保护机制.就人类PYHIN家族成员在DNA传感器研究和固有免疫信号转导等的研究进展作一综述.
作者:朱晨 刊期: 2016年第01期
沙眼衣原体是一类具有独特发育周期的革兰阴性病原体,能够引起人类多种疾病.沙眼衣原体感染的宿主细胞能够抵抗多种凋亡刺激,并且通过抑制宿主细胞凋亡从而完成自身的复制与发育.其抗凋亡机制可能与其参与调节宿主细胞MAPK信号途径、抑制线粒体细胞色素c的释放、上调凋亡抑制蛋白IAPs和降解促凋亡蛋白等多种机制有关.新研究发现沙眼衣原体可以通过HDM2/MDM2与p53相互作用,促进p53蛋白水解,抑制细胞凋亡,从而导致持续性感染.
作者:雷文波;何战胜 刊期: 2016年第01期
LIMK1是一种存在于真核生物中的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,Cofilin是存在于真核生物中的一种低相对分子质量的肌动蛋白结合蛋白.LIMK1磷酸化并使Cofilin失活,磷酸化Cofilin的肌动蛋白结合活性降低,从而导致肌动蛋白聚合并使其稳定.LIMK1/Cofilin信号通路调节细胞骨架蛋白,并且参与微丝肌动蛋白应力纤维和黏附斑形成,进而调节微丝骨架系统影响肿瘤细胞的转移.根据目前国内外的各项研究成果,就LIMK1/Cofilin信号通路与肿瘤的研究进展予以综述.
作者:吴南芳 刊期: 2016年第01期
目的 了解河南省2009-2014年水痘疫情的流行病学特征,为控制水痘暴发和流行提供依据.方法 数据获自中国疾病预防控制信息系统中河南省2009-2014年水痘个案病例及暴发疫情信息,采用描述性流行病学方法进行分析.结果 河南省2009-2014年共报告水痘84 029例,年平均发病率为14.85/10万;春、冬季高发;患者发病年龄主要集中在3~10岁的儿童,占62.75%;同期共报告暴发疫情35起,主要集中在学校和幼托机构.结论 儿童为水痘的高发人群,水痘发病具有明显的季节性,应提高高发人群水痘疫苗的接种率,加强对暴发疫情的监测.
作者:李军;史鲁斌;肖占沛 刊期: 2016年第01期
目的 建立肠道病毒71型(EV71)抗原ELISA定量检测方法,用于EV71疫苗生产工艺中抗原定量检测.方法 选取抗EV71单克隆抗体作为包被抗体,HRP标记抗EV71多克隆抗体作为酶标二抗,建立EV71抗原ELISA定量检测方法.该方法经系统验证后,应用于定量检测2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的抗原含量.结果 验证结果显示,该方法的线性范围为3.125 ~50.000 U/mL,样品回收率为92.0%~110.0%,变异系数小于8.8%;孵育时间及温度在一定范围内偏差的样品回收率为100.8%~113.8%;检测其他肠道病毒中抗原其A值均小于cut-off值;试剂于37℃孵育3d后的检测样品回收率为101.4% ~ 112.4%;2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的适用性检测中,抗原回收率为92.1%~114.9%.结论 建立并验证EV71抗原ELISA定量检测方法,其准确度、精密度、耐用性均优良,特异性强、稳定性好,适用于不同细胞基质的EV71疫苗及多价手足口病疫苗生产工艺过程的质量控制.
作者:陈晓琦;王继麟;季雅琦;郭长福;杨明;游磊;叶程;肖慧;明平刚 刊期: 2016年第01期
目的 通过优化培养工艺提高狂犬病病毒CVS-11株的滴度.方法 BSR细胞(1.5×106个细胞/孔)以不同感染复数(MOI 0.100、0.050、0.010、0.005和0.001)接种CVS-11,培养72 h收获,测定病毒滴度;以0.005和0.001MOI,分别接种不同密度的BSR细胞(1×105、2×105、3×105、4×105、5×105、6×105、8×105和10×105个细胞/孔)培养CVS-11,于72 h收获,测定病毒滴度;以5×105个细胞/9.6 cm2和0.001 MOI,分别在48、72、96、120和144 h收获病毒,测定病毒滴度;并通过正交实验获得佳培养条件;由6孔板(9.6 cm2/孔)放大到T75 cm2瓶培养,验证正交实验结果.结果 细胞密度对CVS-11病毒滴度有一定的影响,以4×105细胞/9.6 cm2获得的CVS-11病毒滴度高.以相同的细胞数量和收获时间,CVS-11病毒的滴度随着MOI的减小而增大.固定细胞数和MOI,病毒滴度在培养早期随时间的延长而增加,直至96 h后,随着时间的延长滴度下降.正交实验的结果表明3个因素对滴度的影响顺序是MOI>细胞数量>收获时间,放大培养验证了正交试验的结果.结论 以4×105个细胞/9.6 cm2,0.001MOI,培养96 h获得的CVS-11滴度高.
作者:周兰贞;刘永娣;戴美兰;郑芳如;张剑平 刊期: 2016年第01期
目的 分析四川地区2013-2014年供血浆人群的血液检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV阳性率与年龄和性别的相关性,为制定从低危供血浆人群中招募策略及安全供血提供依据.方法 收集2013年1月至2014年12月四川地区10家单采血浆公司采集的111 816名供血浆者年龄、性别资料及血浆样品HBsAg、抗-HCV、抗-HIV确证检测结果,比较分析不同年龄、性别的供浆人群的病毒指标阳性率差异.结果 2013年和2014年总体阳性率分别为0.58%和0.52%,抗-HIV阳性率由2013年的0.02%下降到2014年的0.01%;2013年和2014年总体阳性率随年龄增加呈递减的趋势;HBsAg不合格率随年龄增加而降低,抗-HCV不合格率在41 ~55岁年龄段高于18 ~ 40岁年龄段,抗-HIV不合格率在18 ~ 40岁年龄段高于41 ~ 55岁年龄段;女性供血浆者总体阳性率为0.43%,男性为0.77%,女性低于男性;女性HBsAg、抗-HIV阳性率分别为0.35%和0.01%,低于男性的0.67%和0.03%.结论 女性、较年长的供血浆者为供浆低危人群,应该作为重点招募稳定供献血浆的对象,同时应进一步提高献浆前问询技巧,增强对高危人群的评估辨别能力,从而更有效的减少不必要的血浆报废,保证血浆采集安全性,促进采浆事业科学可持续发展.
作者:李贻娟;林涛;叶小书;董蓉;王婧;唐诗佳;罗萍;付道兴 刊期: 2016年第01期
目的 分析许昌市2010-2014年疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,评价AEFI监测系统运转质量.方法 通过国家AEFI信息管理系统,收集2010-2014年报告的AEFI个案数据,用描述流行病学方法进行分析.结果 许昌市2010-2014年国家AEFI信息管理系统共收到305例个案,其中一般反应260例占比85.25%;异常反应29例占比9.51%;偶合症16例占比5.25%,无疫苗质量事故和接种事故.不良反应中,一般反应以发热、红肿、硬结为主,异常反应以过敏性皮疹为主.涉及22种疫苗,总报告发生率为3.65/10万剂.报告例数多的疫苗为吸附无细胞百白破联合疫苗87例,占比28.52%.各项监测指标逐年上升,但3d内调查表报告率、调查报告7d内上传率均未达到90%的指标要求.结论 许昌市2010-2014年AEFI系统敏感性逐年提高,导致疫苗安全性和预防接种服务质量的改进.加强基层人员培训,提高AEFI病例报告的灵敏度,做到及时报告及妥善处置是今后全市AEFI监测与处置的重点工作.
作者:从克 刊期: 2016年第01期
目的 通过几组试验,分析热原试验中存在常见影响试验数据的几个要素,并提出解决建议.方法 对供试品、预选周期、基础体温、家兔的休息周期等多个方面进行统计,总结影响热原数据变化因素.结果 家兔升温总和均值随着连续注射批次的增加而有所降低,体温灵敏度变差;合格家兔在4周以内再次预选,合格比例85%以上,6周符合要求的比例为79.1%,9周合格比例降至66.6%;基础体温38.0 ~38.4℃及39.3 ~ 39.6℃区间家兔实验中体温波动幅度≥0.6℃的动物例数较多,38.0~38.4℃区间家兔降温<0℃动物数达到50.0%,39.3 ~39.6℃区间家兔大升温≥0.4℃的动物数比例较高;家兔冬季基础体温略低于夏季(约0.2℃),休息72 ~ 96 h后对家兔基础体温均值、异常体温动物的数量有较好的控制.结论 热原检查应尽量采用不同品种供试品交替试验,并通过控制预选兔的使用周期及合理安排家兔实验休息周期,选择基础体温适中的家兔进行试验,以保证热原试验数据的准确性.
作者:王慧;符欣蕙 刊期: 2016年第01期
目的 对生物制品生产过程中使用的牛源材料(牛血清、牛源细胞等)进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测以保证制品的生物安全性.方法 参照制药质量体系Q10(ICH Q10)对杂质的定性检测要求,采用一步法RT-PCR检测BVDV的5'-UTR保守区,并对其特异性、敏感性和重复性进行验证,然后将其应用于牛源材料中BVDV的检测.结果 扩增产物为250 bp的目的片段,测序后经序列比对分析软件BLAST比对,同源性达99%,且与其他5种牛源病毒均无相关性;敏感度达1CCID5o/mL.应用该方法对牛血清、牛鼻甲骨细胞(BT)、牛肾原代细胞、MDBK细胞等样品进行检测,15份为阳性,阳性检出率为12%.结论 一步法RT-PCR检测BVDV,特异性强、重复性好、敏感性高,可用于牛源材料中BVDV的快速检测.
作者:郭敏;鱼轲;刘军;刘艳;魏至栋 刊期: 2016年第01期
目的 分析BHK21细胞对蚀斑法检测乙型脑炎减毒活疫苗系统的影响,降低检测系统误差.方法 比较BHK21细胞以不同频次传代培养时的细胞生长状态,以及以不同接种浓度进行疫苗病毒滴度检测时,对检测系统稳定性的影响.结果 BHK21细胞培养4d传代,其形态良好、边缘光滑、胞质透光性好、细胞分散均匀、细胞活率达到95%以上;BHK21以105细胞/mL浓度接种时,乙型脑炎减毒活疫苗及其病毒滴度参考品的变异系数小,分别为0.66%和0.64%.结论 BHK21细胞培养4d传代、以105个/mL浓度接种时用蚀斑法检测病毒滴度系统稳定,可供乙型脑炎减毒活疫苗滴度检测参考.
作者:吕文利;张雪;袁瑾;赵新华;肖健 刊期: 2016年第01期
目的 比较C群脑膜炎球菌多糖蛋白质结合物(简称结合物)的相对分子质量大小和免疫剂量对其在小鼠体内免疫原性的影响,为结合物的分子大小的质控和结合疫苗成品免疫剂量的选择提供实验依据.方法 利用CDAP活化法制备C群脑膜炎球菌结合物,通过硫酸铵盐析进行纯化,然后利用Sepharose CL-4B凝胶过滤层析分析,并根据化学检测结果将结合物分为KD0-0.2(组分1)、KD0.2-0.4(组分2)、KD0.4-0.7(组分3)等3个不同相对分子质量组分,每份分别采用1.0 μg、0.2 μg的免疫剂量免疫小鼠,并对血清进行ELISA分析.结果 采用1.0μg免疫剂量时,3种不同相对分子质量的C群脑膜炎球菌结合物均能产生较高水平的抗体,具有典型的加强效应,第2剂免疫即可产生高水平的抗体,而第2、3剂免疫后的抗体水平差异无统计学意义;采用0.2 μg免疫剂量时,三种不同相对分子质量的C群脑膜炎球菌结合物只有在第3剂免疫后才能产生较高水平抗体,第1、2剂免疫后的抗体水平差异无统计学意义,组分1和组分2在第3剂免疫后产生的抗体水平优于组分3;对于相同相对分子质量结合物,用1.0 μg免疫小鼠产生的抗体水平优于0.2 μg免疫组,而且有显著的统计学意义.结论 高剂量时,多糖相对分子质量大小对C群脑膜炎球菌结合物的免疫原性没有显著性影响;低剂量时,小相对分子质量结合物对其免疫原性有影响.同等相对分子质量时,1.0 μg比0.2 μg的免疫剂量可以激发更高的抗体水平.
作者:孔素娟;袁菲;王欣茹;王晶;刘爱萍;于旭博;吴兵;罗树权;侯亚莉 刊期: 2016年第01期
目的 分析钦州市麻疹疫苗强化免疫(简称强免)前后麻疹流行病学特征,为消除麻疹提供依据.方法 以2009年9月1日为分界点,对2005-2014年麻疹病例按强免前后采用Excel进行数据录入和SPSS19.0进行统计分析.结果 强免前后性别分布差异有统计学意义,人群年龄分布总体差异有统计学意义,但8月龄~5岁组差异无统计学意义;职业分布总体差异有统计学意义,但散居儿童组差异无统计学意义;免疫史分布差异无统计学意义.强免前后麻疹高发人群都是以8月龄~5岁组儿童及散居儿童为主.结论 根据钦州市麻疹流行特征,提高适龄儿童含麻疹成分疫苗接种率、及时接种率,加强查漏补种,并有计划开展麻疹疫苗强化免疫,这些措施是降低麻疹发病率、终消除麻疹的关键.
作者:符发怡;吴桂良;玉家权;裴桂 刊期: 2016年第01期
目的 筛选出适合冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的热稳定性好、无明胶的稳定剂配方.方法 以水分、外观、效价、热稳定性效价为指标,尤其是效价和热稳定性效价,对A、B、C、D、E、F、G等6种稳定剂配方进行系统的优化组合筛选,6种稳定剂配方分别含有蔗糖、乳糖、人血白蛋白、甘氨酸、精氨酸、明胶、尿素、甘露醇、右旋糖苷,其中A为现行疫苗生产配方.运用单因素五元设计法,筛选出优稳定剂组合.结果 方差分析结果显示D组配方对冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的M-ABT结果13.95,37℃放置4周M-ABT结果13.05;NIH效价1.94,37 c℃放置4周NIH效价1.56.结论 D组配方对冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)有较好的保护作用.
作者:马超;陆俭;孙燕;陈军;刘鹏;李守丽;于滢;张轶 刊期: 2016年第01期
目的 用毕赤酵母表达系统表达恶性疟原虫环子孢子蛋白(CSp),便于恶性疟疾疫苗的进一步研究.方法 根据GenBank得到恶性疟原虫7G8的基因序列,选取该序列628 ~1 194位基因,以密码子佳化为原则合成基因后构建酵母表达载体CSP/pGAPZaA,电转毕赤酵母菌PDI-GS115,获得酵母重组体.三角瓶规模表达重组菌,获得表达上清.结果 经SDS-PAGE电泳、Western blot检测表达上清,均显示有目的蛋白表达.结论 在毕赤酵母中实现了CSP基因的表达,为恶性疟疾疫苗的研发作了必要的补充.
作者:雷清;梁凌宇;王爱秀;陈俏丽;李刚;陈勇;蒋琳 刊期: 2016年第01期