从铝佐剂诞生至今,佐剂发挥着免疫调节、抗原递送的作用.新型人用疫苗佐剂陆续批准上市,以弥补疫苗免疫原性较弱的缺点.然而,人体免疫系统、病原体、佐剂之间的作用机制尚未完全清楚,佐剂诱导的自身免疫/炎性综合征( autoimmune /inflammatory syndrome induced by adjuvants,ASIA) 及相关不良反应,限制了人用疫苗佐剂的大量使用,这些均引起了人们对佐剂安全性的高度关注.现就7种已上市人用疫苗佐剂( 铝佐剂、MF59、AS03、 ISA51、病毒体佐剂、AS01及AS04) 的作用机理、应用情况及其安全性问题作一阐述,为新型人用疫苗佐剂合理、可靠的分析与评价提供思路.
作者：孙晓敏 刊期： 2018年第01期
肠道病毒( enterovirus) 作为危害婴幼儿健康的主要病原体之一,给世界各国带来沉重的医疗和经济负担.近年来,随着对肠道菌群研究的不断深入,越来越多的证据表明,肠道菌群在肠道病毒感染过程中发挥着重要作用.本文就肠道菌群对肠道病毒感染的影响及其相关机制作一综述,为深入开展肠道病毒感染的防控研究提供参考.
作者：王三元；董俊芳 刊期： 2018年第01期
传统观点认为,巨噬细胞对胰岛β 细胞的存活和功能不利,从而导致I型糖尿病( type 1 diabetes,T1D) 中β 细胞功能衰竭,是T1D的主要发病机制之一.然而,近研究发现,巨噬细胞不仅能在胰腺炎期间保护β 细胞,还可在β 细胞损伤后调节β 细胞增殖和再生.研究显示,巨噬细胞在不同环境中具有向不同功能表型转化的潜力,因此,对T1D的不同作用很可能是其异质性所致.现主要就目前对巨噬细胞的来源和功能的异质性、以及其在胰腺发育和T1D中的作用作一综述.
作者：罗亚东 刊期： 2018年第01期
环磷酸鸟苷-腺苷合成酶( cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate synthase,cGAS,又称为MB21D1或C6orf150) 是一种胞质DNA感受器,能识别胞质中的双链DNA( double strand DNA,dsDNA),并形成2 ∶ 2型复合物,催化腺苷三磷酸( adenosine triphosphate,ATP) 和鸟苷三磷酸( guanosine triphosphate,GTP) 形成环鸟苷酸腺苷酸( cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate, cGAMP).cGAMP作为第二信使激活干扰素基因刺激分子( stimulator of interferon gene,STING),进而产生Ⅰ型干扰素及其他细胞因子.近年来,多项研究表明, cGAS-STING通路在病毒感染免疫中发挥重要作用,包括人类免疫缺陷病毒( human immunodeficiency virus,HIV) 、人乳头瘤病毒( human papilloma virus,HPV) 和乙型肝炎病毒( hepatitis B virus,HBV) 等,但关于cGAS在细菌感染中的作用的研究较少.就近年来国内外对cGAS及cGAS在细菌感染中的作用作一综述,为其在细菌感染相关的应用研究提供思路和借鉴.
作者：陈柠 刊期： 2018年第01期
呼吸道合胞病毒( respiratory syncytial virus,RSV) 是一种引起严重下呼吸道感染的病原体,易感人群为婴幼儿、老年人及免疫功能低下者.目前尚无有效的抗病毒药物和预防疫苗.RSV融合蛋白( fusion protein,F蛋白) 具有高度保守性,其诱导的抗体可同时抑制A型和B型两个亚型的RSV感染.因此,以F蛋白作为靶抗原的RSV亚单位疫苗、颗粒样疫苗和病毒载体疫苗是目前研究的主要策略.现就基于F蛋白的RSV疫苗研究进展作一综述.
作者：瓦晓霞 刊期： 2018年第01期
肠道病毒71型( enterovirus 71,EV71) 全病毒灭活疫苗的研发成功,对严重影响婴幼儿健康的手足口病( hand, foot and mouth disease,HFMD) 的流行提供了防控手段.在婴幼儿目标人群中大量推广疫苗接种,有望降低HFMD的重症和死亡病例的发生率,具有重大的公共卫生意义.本文旨在分析中国EV71疫苗上市后所产生的结果和影响、HFMD的防控形势及疫苗应用策略等,从而对有关HFMD流行的防控策略进行探讨.
作者：卞莲莲；苏瑶 刊期： 2018年第01期
肠道不仅是消化吸收的场所,而且是人体重要的免疫器官.益生菌通常被认为是胃肠道共生菌,摄入适量时,可对宿主产生益处.现就益生菌可调节肠道屏障功能,并通过固有免疫和适应性免疫反应来调节肠上皮细胞介导的免疫反应的相关研究作一综述,为开发新型益生菌制剂,抑制肠道病原菌提供了研究思路.
作者：杜仁佳；张瑶 刊期： 2018年第01期
目的 了解员工暴露前接种人用狂犬病疫苗后的免疫效果,并对比使用两种不同试剂盒检测抗体阳转率是否存在差异.方法 采集员工接种人用狂犬病疫苗( 地鼠肾细胞) 以及冻干人用狂犬病疫苗( Vero细胞) 共计172例,分别使用两种狂犬病毒抗体检测试剂盒( 试剂盒A、B) 进行检测,统计血清中狂犬病毒IgG抗体的水平,计算阳转率并比较差异.结果使用试剂盒A检测接种人用狂犬病疫苗( 地鼠肾细胞) 者血清样本的阳转率为91.7％,接种冻干人用狂犬病疫苗( Vero细胞) 者血清样本的阳转率为51.0％;使用试剂盒B检测接种人用狂犬病疫苗( 地鼠肾细胞) 者血清样本的阳转率为100.0％,接种冻干人用狂犬病疫苗( Vero细胞) 者血清样本的阳转率为74.5％.使用试剂盒B检测接种人用狂犬病疫苗( 地鼠肾细胞) 者血清样本的阳转率比试剂盒A高8.3％,使用试剂盒B检测接种冻干人用狂犬病疫苗( Vero细胞) 者血清样本的阳转率比试剂盒A高23.5％.结论两种不同试剂盒上检测的抗体阳转率都反映出人用狂犬病疫苗( 地鼠肾细胞) 比冻干人用狂犬病疫苗( Vero细胞) 的免疫效果好;使用两种不同试剂盒检测抗体阳转率的差异均具有统计学意义.
作者：王真；陈燕花；邓芳芳；赵佳丽 刊期： 2018年第01期
目的 评价福氏志贺菌两种血清分型方法.方法使用传统血清分型方法和多重PCR血清分型方法对255株福氏志贺菌进行血清型分析.结果传统血清分型方法的分型率为98.4％( 251 /255),多重PCR血清分型方法分型率为96.1％( 245 /255),两种方法的分型率经卡方检验,差异无统计学意义( χ2 = 2.644,P＞0.05).有46株菌( 18.0％, 46 /255) 通过这两种血清分型得到的结果不一致.结论两种血清分型方法的分型率差异无统计学意义,但部分结果判断有不同.多重PCR更适用于大量样本的检测,传统血清分型方法可以与其互为补充.
作者：徐潇；石继春；王春娥；杨越；郑锐；李康；黄洋；陈翠萍；叶强 刊期： 2018年第01期
目的 测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,并评价其醇提物的体外抗肿瘤活性.方法采用高氯酸显色法测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,采用磺酰罗丹明B蛋白染色法( sulforhodamine B, SRB) 评价灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉醇提物对宫颈癌HeLa细胞、结肠癌HCT-116细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞的体外抗肿瘤活性.结果研究的灵芝子实体中三萜质量分数为0.92％,破壁灵芝孢子粉供试品中三萜质量分数实测值为2.95％,但是灵芝孢子粉中脂肪油对高氯酸显色法有极大的干扰,因此破壁灵芝孢子粉三萜的实测值可能远高于实际值.活性评价结果显示,灵芝子实体的醇提物在100 μg /mL时,其对人宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞表现出了较强的抑制作用,抑制率分别为94.54％和71.30％;对结肠癌HCT-116细胞表现出较弱的抑制作用,抑制率为20.68％.破壁灵芝孢子粉的醇提物在100 μg /mL和10 μg /mL时,其对宫颈癌HeLa细胞表现出了弱的抑制作用,对另外2种细胞系仅在100 μg /mL时表现出较弱的抑制作用.结论灵芝子实体的醇提物含有三萜并具有较好的抗肿瘤活性,可以将其开发为辅助治疗癌症的药物或保健品.含有脂肪油的灵芝孢子粉直接采用高氯酸比色法测定会高估其三萜的含量,需要进一步开发准确、可行的测定方法.
作者：谭洪升；李翔；巩伯梁；李刚 刊期： 2018年第01期
目的 采用SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺过程中工程细胞株抗体基因的稳定性.方法取灌注培养0、7、14、21、28、35 d的CHO细胞,用SYBR Green实时定量PCR分析其抗体基因稳定性.使用标准曲线相对定量法分析CHO细胞中β-肌动蛋白和抗体基因拷贝数,以抗体基因拷贝数与β-肌动蛋白基因拷贝数的比值表示工程细胞中抗体基因水平.结果 工程细胞株工作种子、发酵罐中不同时间点样品抗体基因拷贝数保持稳定,抗体基因拷贝数相对β-肌动蛋白基因为0.93±0.10,抗体基因相对含量与培养时间之间不相关( P = 0.938).结论抗体工程细胞株在灌注培养过程中抗体基因保持稳定.
作者：陈继军；安晨；秦海艳；乔玉玲；南建军；宋兰兰；熊颖；姜英；王建锋；房世娣；毛晓燕 刊期： 2018年第01期
目的 用双抗原夹心ELISA检测静注人免疫球蛋白( pH4) ( human immunoglobulin for intravenous injection, IVIG) 中抗-乙型肝炎病毒表面抗体( HBs) 效价并进行方法验证.方法依据2003年版《药品生产验证指南》,对用双抗原夹心ELISA进行专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度、范围、耐用性的验证;并与放射免疫方法测定抗-HBs效价的结果进行比对.结果专属性验证中,6次独立试验的回收率在83.7％～ 101.1％区间内;重复性试验中10、40、80、160 IU/L 4个浓度的3次重复检测结果的RSD均＜20％;中间精密度验证结果显示,两位分析人员不同时间各测定6次,检测结果的RSD= 5.2％,均＜20％.F检验显示,人员和时间两因素在α = 0.05水平上对检测结果均无统计学意义( P= 0.41＞0.05,F= 2.19);线性验证中,抗-HBs免疫球蛋白国家标准品和IVIG成品各重复3次的相关系数r分别为0.984 3、0.990 7、0.982 2、0.991 7、0.988 3、0.992 5,均＞0.980 0;在准确度验证中,3次重复检测结果的回收率为84.10％～ 114.10％;耐用性结果显示,在试验加入终止液后0、3、6、9、12 min的测定结果均与0 min无统计学意义( Dunnett t test,α= 0.05,P＞ 0.05,t( 3) = 1.35＜t0.05,t( 6) = 0.37＜t0.05,t( 9) = 0.99＜t0.05,t( 12) = 1.31＜t0.05). ELISA和放射免疫方法对IVIG中抗-HBs效价检测的结果差异无统计学意义( paired t test,α = 0.05,P = 0.07＞0.05, t = 2.27).结论经验证,用双抗原夹心ELISA检测IVIG中抗-HBs效价,其专属性、重复性、中间精密度、线性、准确性、范围和耐用性均符合要求,该方法准确可靠、简便快速,可替代放射免疫法( radioimmunoassay,RIA) 用于IVIG中抗-HBs效价的测定.
作者：李青；潘孟姣；刘莉娟；赵小洁；钱秋娟；张继鹏；何彦林 刊期： 2018年第01期
目的 验证抗CD52单克隆抗体( 单抗) 中残留蛋白A( ProteinA,ProA) ELISA定量检测方法.方法使用Cygnus公司的Mix-N-Go ProteinA检测试剂盒,对抗CD52单抗中的ProA残留量进行检测,并验证该方法的专属性、准确度、精密度、线性及定量限.结果亲和填料( MabSelect SuRe) 稀释1 000倍后仍检测到含有ProA 1.9 ng /mL;制剂及抗CD52单抗细胞发酵液中未检出ProA;3种不同ProA加标质量浓度6次试验的加标回收率均在80％ ～ 120％之间;3种不同ProA加标质量浓度重复性检测结果及中间精密度检测结果RSD均＜20％;分别对3次ProA残余检测结果绘制的四参数标准曲线,R2均＞0.990;定量限为0.16 ng /mL.结论经验证,抗CD52单抗中ProA残留量的ELISA定量检测方法专属性好,准确度、精密度高且线性良好.
作者：乔玉玲；黄峥；秦海艳；陈继军；曾晨；安晨；赵祖波；庄超；毛晓燕 刊期： 2018年第01期
目的 研究抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单克隆抗体( 单抗) 被动免疫BALB/c小鼠后的抗鼠疫保护效果,确认鼠疫抗体治疗依据,探索鼠疫免疫学治疗的评价手段.方法将BALB/c小鼠随机分组,用不同剂量的抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单抗4C6和2D2分别进行免疫,再分别用不同剂量的鼠疫强毒菌攻击,通过小鼠的存活率和存活时间,判定F1单抗免疫小鼠被动保护其抵抗鼠疫强毒菌攻击的有效性和剂量相关性.结果在14 d的观察期内,在100.0 MLD鼠疫强毒菌攻击下,4C6单抗400.0 μg组、200.0 μg组、100.0 μg组、50.0 μg组和25.0 μg组小鼠的存活率分别为100％、83％、50％、50％和0％,平均存活时间分别为15.00 d、14.67 d、13.00 d、13.50 d和9.67 d;2D2单抗400.0 μg组、200.0 μg组、100.0 μg组、50.0 μg组、25.0 μg组小鼠的存活率分别为83％、50％、50％、33％和0％,平均存活时间分别为14.83 d、13.33 d、12.67 d、12.33 d和8.00 d.在10.0 MLD鼠疫强毒菌攻击下,4C6单抗50.0 μg组、 25.0 μg组和12.5 μg组小鼠的存活率分别为83％、83％和17％,平均存活时间分别为14.17 d、14.50 d、9.83 d;2D2单抗50.0 μg组、25.0 μg组、12.5 μg组小鼠的存活率分别为100％、33％和33％,平均存活时间分别为15.00 d、12.33 d和11.67 d.2.0 MLD和1.0 MLD攻击的未免疫对照组小鼠全部死亡,平均存活时间分别为6.1 d和6.7 d.F1抗原单抗的免疫剂量与小鼠的平均存活时间和存活率有比较明显的相关性( P＜0.05).结论用抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单抗被动免疫小鼠,在受到鼠疫强毒菌攻击时,对小鼠具有免疫保护作用.
作者：吴智远；焦磊；徐兵；辛有全；常娅莉；张青雯；祁芝珍；卜培英；王秉翔 刊期： 2018年第01期
目的 从百日咳鲍特菌中提纯百日咳丝状血凝素( filamentous hemagglutinin,FHA),并对其进行初步鉴定.方法采用珍珠岩吸附层析和羟基磷灰石吸附层析相结合的方法,从百日咳鲍特菌培养上清中纯化FHA;SDSPAGE电泳和PAGE电泳分析样品纯度,并经斑点免疫印迹法对其进行鉴定.结果纯化样品的纯度达到95％以上,斑点免疫印迹中和FHA单抗有反应斑点,与百日咳毒素( pertussis toxin,PT) 单抗无反应斑点.结论珍珠岩吸附层析和羟基磷灰石吸附层析相结合的方法可作为一种快速有效的纯化手段提取纯度较高的FHA,有望作为参考品用于百日咳FHA抗原含量检测、抗FHA血清抗体滴度检测及抗原纯度检测.
作者：熊小培；袁军；孙晓芳；潘聪；李新国 刊期： 2018年第01期
目的 获得在昆虫细胞中有效表达脊髓灰质炎病毒P1基因和3CD基因的重组杆状病毒,为制备脊髓灰质炎病毒样颗粒疫苗提供了科学依据.方法 将I型脊髓灰质炎病毒( Mahoney株) 的P1基因和3CD基因构建到供体质粒中,通过flashBAC ULTRATM系统制备重组杆状病毒;将Mahoney株的P1基因与Sabin株Ⅲ 型的3CD基因组合,用同样方法构建重组杆状病毒.通过接种昆虫细胞草地贪夜蛾细胞( sf-9细胞) 对两种病毒进行扩增,再接种昆虫细胞粉纹夜蛾细胞( High five细胞) 扩大培养,并通过定量PCR对P1和3CD基因的表达进行验证,利用Western blot检测P1蛋白的表达及被3CD蛋白酶剪切的情况.结果 获得了两株稳定表达脊髓灰质炎病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒.其中,重组杆状病毒( BacU-Mahoney-P1-3CD) 在感染细胞后,3CD蛋白酶表达量较低,不能有效剪切P1前体蛋白;而重组杆状病毒( BacU-Mahoney-P1-Sabin PV3 3CD) 感染细胞后,3 CD蛋白酶的表达量和对P1前体蛋白的剪切效力都有明显提高( P＜0.05).结论将Mahoney株P1基因和Sabin株Ⅲ 型的3CD基因的组合构建重组杆状病毒,可有效地在昆虫细胞中表达P1和3CD基因,并且Sabin株Ⅲ 型的3CD蛋白酶可有效地剪切Mahoney株的P1前体蛋白.
作者：马金；李军强；莘春林；段静留；朱涛 刊期： 2018年第01期
现有的获批肺炎疫苗,它们基于荚膜多糖的血清分型,能有效预防肺炎链球菌引起的侵入性疾病,但对于非细菌性肺炎和急性中耳炎( AOM) 效果不佳.此前我们报道过,一种三价肺炎链球菌蛋白重组疫苗( PPrV) 能够让小鼠模型抵御肺炎.在此,作者使用乳鼠模型,评估了肺炎链球菌蛋白重组疫苗( PPrV) 抵御急性中耳炎的保护效果.
作者： 刊期： 2018年第01期
儿童和婴幼儿接种口服肠道疾病疫苗后,免疫应答情况会受到多种因素的影响,如年龄、接种疫苗前曾接触( 感染) 过相关微生物、母乳喂养等.本项研究旨在通过不同临床样本,确定佳时间点,评估口服肠道疫苗的免疫应答状况.应答状况的确定,是通过检测接种后不同天数的抗体分泌细胞( ASC) 应答和粪便抗体应答来完成,所用疫苗为一种已获批的模式疫苗———口服霍乱疫苗Dukoral,其中包含重组霍乱毒素B 亚单位( rCTB) 和灭活霍乱弧菌菌体.
作者： 刊期： 2018年第01期
疫苗接种是一种提高人类寿命和健康质量的成功的免疫学方法.疫苗的原料包括病原体的抗原和增强疫苗接种效果的佐剂.以多种不同的标准对疫苗进行分类,包括疫苗的原料和接种方式.传统上,疫苗经由针头注射.然而,考虑到大多数病原体首先感染黏膜表面,因此研究者们对通过黏膜途径接种获得具有保护性的黏膜免疫的研究兴趣逐渐增加,就目前的黏膜疫苗研发进展及其相关佐剂作简要概述.
作者：王斌 刊期： 2018年第01期
