目的探讨19S调节复合体蛋白在烫伤大鼠骨骼肌蛋白降解中的作用机制. 方法利用层析技术,分离、纯化大鼠骨骼肌19S调节复合体,并常规免疫制备其抗体.制作Wistar大鼠烫伤模型,随机分为烫伤组,设伤后1、2、3、5、7 d时相点(每时相点8只),另取8只正常大鼠设为对照组.用固相免疫印迹法测定19S调节复合体含量的变化.另取64只烫伤大鼠,行19S抗体注射实验,分为:注射组,由尾静脉分两次注射纯化的19S抗体(3 mg/kg),分别于注射后第1、2、3天处死;对照组;尾静脉注射相同体积等渗盐水,其余处理同注射组.测定烫伤大鼠骨骼肌中酪氨酸的释放速率结果获得了纯度较高的19S调节复合体.从烫伤后第1天起,与对照组比较,大鼠骨骼肌中的19S调节复合体含量开始明显增加,骨骼肌蛋白质降解速率也在伤后第2天显著增强,19S抗体则能明显抑制蛋白质降解的增加.结论烧伤刺激可上调骨骼肌19S调节复合体的蛋白水平,从而激活26S蛋白酶复合体对蛋白质的降解作用,这可能是烧伤后负氮平衡的发生重要原因.
作者：谭银玲；汪仕良；董燕麟 刊期： 2003年第01期
目的探讨超声检测技术在深度电烧伤诊断中的应用价值.方法以12例深度电烧伤患者25个患肢的创面及创面近心端5～15 cm处为对象,采用彩色及脉冲多普勒超声检测技术,观察该处皮下组织、肌肉组织及血管的损伤情况(共检测血管56条),得出血流动力学定量指标.结果(1)经二维超声检测,深度电烧伤后各种组织的受损范围不同:血管＞肌肉组织＞皮下组织;创面段血管内膜未显示者7条,内膜水肿者12条,管腔闭塞者4条,血栓形成者5条.(2)彩色多普勒检出,受测部位血管走行变异屈曲者共12条,管腔狭窄者21条,管腔增宽者¨条,均与随后手术治疗时所见情况一致.(3)脉冲多普勒检出,狭窄段血管收缩期峰值流速增高,每分血流量减低.结论超声检测技术具有无创的特点,可直观地显示深度电烧伤后皮下组织、肌肉组织、血管的形态学改变,以利准确判断损伤程度,了解受损部位的血流动力学变化,为临床诊治提供依据.
作者：陈越秀；徐颖；郭振荣；柴家科；胡晓娟；张忠梅；李利根 刊期： 2003年第01期
目的分离纯化一种新型的内毒素结合蛋白,并初步观察其生物学特性.方法建立兔烧伤合并内毒素血症模型,采其血清,经二步离子交换层析及凝胶过滤分离纯化,并经流式细胞仪分析、绵羊红细胞凝聚试验、氨基末端氨基酸残基测序等方法鉴定.将所获蛋白质作用于体外培养的人单核细胞(U937),观测其分泌TNFα等细胞因子的状况.结果所获蛋白质的分子量为48kDa(48×103),其N端10个氨基酸序列为GSQGTFTSEE,与美国国立图书馆蛋白质库中有关兔的氨基酸序列进行比较,未发现相同序列,暂命名为P48.它具有与内毒素结合蛋白相似的功能,能促进极低浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)与外周血单核细胞(PBMC)结合,并促进U937分泌TNFα.结论从兔血清中能够分离纯化出带有生物学活性的新型内毒素结合蛋白P48,它具有与脂多糖结合蛋白(lipoplysaccharide binding protein,LBP)相似的生物学活性,并可促进炎症反应的发生.
作者：葛晓冬；刘友生；王晓东；潘峰；周萍 刊期： 2003年第01期
目的动态观察烧伤血清对体外肠上皮细胞(IEC)骨架和细胞生物力学(粘弹性)的影响.方法培养大鼠肠上皮细胞株IEC-6,用烧伤血清刺激后,通过细胞骨架免疫组化、细胞ELISA法定量分析以及粘弹性测定技术,动态观察IEC致伤前后的变化.结果IEC在烧伤血清作用早期,骨架蛋白的表达即明显降低,微丝、微管蛋白阳性信号减弱,细胞粘弹性下降.结论细胞骨架的损伤可引起细胞脆性增加、粘弹性下降,导致细胞生物力学特性的改变.这种变化,可能直接参与烧伤后肠上皮细胞损伤的发生.
作者：陈军；唐鏖；吴泽志；秦健；肖光夏 刊期： 2003年第01期
目的建立烧伤患者深Ⅱ度创面成纤维细胞体外培养方法.方法切取正常人皮肤及烧伤患者伤后5、10、14、21、28、35 d的深Ⅱ度创面组织(各3例).去除非真皮组织,用2.5 g/L的洗必泰溶液浸泡后,剪碎并用胰蛋白酶-EDTA(终浓度分别为1.25 g/L、0.1 g/L)消化.离心收集细胞、接种培养.细胞生长近100%融合时,按常规方法进行多次传代培养、冻存与复苏.培养期间随时进行细胞形态学观察,计算细胞贴壁存活率和倍增时间.结果原代培养的创面成纤维细胞纯度较高,活力较好;原代、继代培养的及经冻存复苏后的细胞在生长特性、大体形态等方面能够保持稳定;经多次复苏的创面成纤维细胞贴壁存活率保持在80%以上.结论该细胞体外培养方法的建立,可为深入探讨瘢痕的形成机制及防治瘢痕提供良好的研究手段.
作者：李永林；陈璧；汤朝武；徐明达 刊期： 2003年第01期
近年来,笔者单位应用足跟外侧皮瓣修复邻近小面积软组织缺损,取得较好的效果,现报道如下.
作者：王雪峰；曹国恒；坚桂珍；丁祥麟 刊期： 2003年第01期
一般资料:本组36例,男21例、女15例,年龄12～62岁.烧伤总面积1%～71%TBSA,面部烧伤以深Ⅱ度为主.
作者：王庆利；刘涛；王景峰 刊期： 2003年第01期
作为电接触的出口通路,足部电损伤创面组织毁损局限,但软组织破坏严重,常合并骨、关节、肌腱及神经血管的外露,是皮瓣修复的佳适应证.
作者：陈国华；忻向荣；李梅 刊期： 2003年第01期
笔者单位自1992年1月～2000年11月,收治烧伤后难愈创面35例,经全身及局部治疗,取得良好的效果,现报告如下:
作者：李罗珠；于益鹏；孙步梅；陈传俊；陈玉林 刊期： 2003年第01期
1994年以来,笔者单位应用皮肤软组织扩张术,修复电烧伤后头皮缺损及颅骨外露9例,将创面修复与后期整形一次完成,在治疗新鲜创面的同时避免了秃发、畸形等并发症.
作者：潘云川；陈彦堃；马心赤；张燕翔；陈汉东 刊期： 2003年第01期
传统随意皮瓣操作简便、效果可靠,但由于皮瓣血液供应受长宽比例的限制,影响临床应用范围.自1997年以来,笔者单位采用超比例随意皮瓣修复电烧伤及压迫性溃疡骨外露创面,效果满意.
作者：秦巍；石团元；罗军复；候舒；朱正鹏 刊期： 2003年第01期
一般资料:1963～1997年间,笔者单位共收治烧伤患者6 220例,男性4 092例占65.8%,女性3 218例占34.2%.14岁以下小儿2 870例占44.7%,15～54岁中青年3 154例占50.7%,55岁以上老人196例占4.9%.
作者：刘久春；孙海宁；张景华；刘立杰；仲伟新；包立平 刊期： 2003年第01期
1995年以来,笔者应用一侧颞浅动脉岛状全额皮瓣修复高压电烧伤致颅顶巨大头皮缺损、颅骨外露3例,手术一次完成,皮瓣全部成活,术区愈合良好.现报告如下:
作者：刘帅明；李津军；李辉建；林学顺；李德昌 刊期： 2003年第01期
临床资料:患者男,23岁,左小腿被热轧螺纹钢缠绕烧伤,伤后1 h入院.查体:小腿踝关节至小腿中下1/3处有环形焦痂,跟腱断裂,足背肿胀(图1).
作者：朱雄翔；徐明达；刘亚玲；姚庆君；胡大海 刊期： 2003年第01期
患者男,24岁,二甲苯爆炸烧伤后1 h入院.查体:体温35.5℃,心率142次/min,呼吸36次/min,意识清楚,精神差,口渴、烦躁、声音嘶哑、双肺呼吸音粗,心音有力.
作者：张树堂；李树仁；田社民；赵春安；牛希华；赵耀华；吕涛 刊期： 2003年第01期
特重度烧伤合并成人呼吸窘迫综合征(ARDS)患者死亡率较高.近3年来笔者单位治愈特重度烧伤合并ARDS患者5例,报告如下.
作者：薛宝升；王丽洁 刊期： 2003年第01期
患者,女,7岁.不慎被热水烫伤,伤后在当地医院外涂湿润烧伤膏及中草药等处理.伤后5 d开始排黑便及红色水样便,每天1～3次.
作者：朱小平；黄巧洪；苏为 刊期： 2003年第01期
近年来随着干细胞研究的不断深入,除胚胎干细胞外[1,2],研究者们已能在体外分离培养多种组织干细胞,包括由皮肤表皮基底层中分离出的表皮干细胞(epidermal stem cells)和位于表皮之下毛囊隆突处的毛囊干细胞(follilar stem cells)[3,4].
作者：高艳红；裴雪涛 刊期： 2003年第01期
自1981年Evans等[1]首次成功地从小鼠胚泡内层细胞团中分离出胚胎干细胞以来,干细胞的研究已成为生命科学活跃和有影响的领域之一.
作者：王正国 刊期： 2003年第01期
作者：陈蕾；邓诗琳；梁建伟；曹丽萍；高志刚 刊期： 2003年第01期
作者：余朝恒；韩春茂；陈伟平；贺肖洁 刊期： 2003年第01期
作者：丁韧；陈玉英；易静；汤雪明 刊期： 2003年第01期
作者：刘志国；李刚；肖仕初；刘旺；夏照帆 刊期： 2003年第01期
作者：唐建兵；陈璧；汤朝武；胡大海；董茂龙 刊期： 2003年第01期
烧伤患者合并单纯疱疹病毒(HSV)感染发生率较高,深度烧伤患者尤其容易受到HSV感染[1].笔者采用HSV-PCR法检测了57例烧伤患者的HSV感染率,现报道如下.
作者：赵一博；陶白江；杨民；刘东兴；郭学瑛 刊期： 2003年第01期
随着社会的发展和科技的进步,在基本完成加速受创皮肤解剖修复之后,如何重建和恢复受创皮肤的功能已成为组织修复领域需要解决的重大问题.
作者：付小兵；李建福；盛志勇 刊期： 2003年第01期
目的探讨人胎儿表皮干细胞体外分离培养的方法以及作为体外基因转染靶细胞的可行性.方法利用Ⅳ型胶原快速贴附法分离人胎儿表皮干细胞,以人胎儿成纤维细胞条件培养液配制表皮干细胞培养基,通过角蛋白19(K19)和整合素β1免疫组化染色、细胞周期分析及克隆形成率测定,对培养细胞进行鉴定.采用脂质体介导法,以含血管内皮细胞生长因子165(VEFG165)基因片段的真核表达载体pcDNA3.1(pcDNA3.1/VEGF165)转染培养细胞;采用病毒载体介导法,以含报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺相关病毒载体(raav/GFP)转染培养细胞.应用免疫组化染色及荧光显微镜观察检测转染效果.结果人胎儿表皮干细胞呈明显克隆性生长,克隆形成率高,G1期细胞比例明显高于普通基底层角质细胞,K19和整合素β1免疫组化染色呈强阳性.pcDNA3.1/VEGF165转染的表皮干细胞VEGF165免疫组化染色阳性,raav/GFP转染的表皮干细胞呈现强荧光.结论利用Ⅳ型胶原快速贴附法及人胎儿成纤维细胞条件培养基,可初步实现人胎儿表皮干细胞的分离培养.以脂质体为介导或以腺相关病毒为载体进行人胎儿表皮干细胞的体外基因转染是可行的.
作者：丁国斌；陈璧；韩军涛；汤朝武；王波涛 刊期： 2003年第01期
目的观察成人正常皮肤和瘢痕组织中表皮干细胞定位与β1整合素和角蛋白19、14、10(K19、K14、K10)的表达,探讨两种组织表皮干细胞表达特征的差异. 方法取6例大面积深度烧伤患者伤后1年的增生性瘢痕组织,另取6例健康志愿者对应部位的全层皮肤.采用免疫组织化学Elivision两步法,检测表皮干细胞、短暂扩充细胞特异表达的β1整合素和K19以及分化表皮细胞表达的K14和 K10.结果瘢痕组织表皮基底层表达β1整合素与K19的阳性细胞数较正常皮肤明显减少,阳性强度降低,其表皮中表达K14的阳性细胞仅位于表皮底部2～3层,而K10表达阳性细胞则较正常皮肤分布广泛;瘢痕组织皮肤的分化过程亦不相同,处于有丝分裂后分化阶段的细胞比例降低,而终末分化细胞的比例明显增高.结论瘢痕组织表皮的修复能力下降,细胞的分化行为紊乱,可能是导致瘢痕组织表皮结构与功能改变、愈合能力下降的原因之.
作者：赵志力；付小兵；孙同柱；陈伟；孙晓庆 刊期： 2003年第01期
目的探讨间接抗原递呈途径在体外培养的同种异体表皮细胞免疫原性中的作用.方法体外分离、培养人表皮细胞(HEC)、异体人外周血淋巴细胞(PBL)和单个核细胞(PBM,含单核细胞).采用人源毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4Ig)腺病毒表达载体转染HEC,观察CTLA4Ig的表达情况.未转染及已转染的HEC中,均加入异体PBL或PBM共培养,并以单独培养的PBL或PBM为对照.应用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法,测定各培养体系中PBL、PBM增殖情况.结果CTLA4Ig腺病毒表达载体能成功转染HEC并使其表达相应蛋白.未转染的HEC能刺激异体PBL轻度增殖(P＜0.05),以及含单核细胞的异体PBM明显增殖(P＜0.01);经CTLA4Ig基因修饰的HEC刺激PBL、PBM后,两者的增殖反应明显减弱(P＜0.05).结论间接抗原递呈途径在HEC免疫原性中发挥了重要作用,CTLA4Ig能明显抑制该作用.
作者：陈希炜；吴军；罗高兴；罗奇志；王锡华；易绍萱；贺伟峰；马兵；王儒鹏；唐进 刊期： 2003年第01期
目的分离培养胎鼠的表皮干细胞及毛囊乳头层细胞,通过动物模型观察两者复合移植后,上皮形成及毛囊的再生情况.方法采用Ⅳ型胶原分离培养胎鼠表皮干细胞,检测β1整合素及角蛋白15的表达水平,测定其细胞周期及克隆形成率(以角质细胞为对照);分离培养毛囊乳头层细胞,并接种在纤维蛋白胶中,与表皮干细胞膜片复合形成全层皮肤等同物,移植在裸鼠全层皮肤缺损创面作为实验组,同时将胎鼠成纤维细胞替代乳头层细胞作为对照组,8～10周后观察创面及毛囊的组织学变化.结果胎鼠表皮干细胞表达高水平的β1整合素及角蛋白15;细胞周期分析显示,G1期细胞百分率为94.9%,S期为3.5%,提示为慢循环细胞周期;角质细胞的G1期细胞百分率为74.1%,S期为17.5%;表皮干细胞的克隆形成率为15.3%,明显高于对照组的6.7%;裸鼠创面愈合后8～10周,实验组可见新生毛囊形成,对照组未见到此现象.结论能初步实现对胎鼠表皮干细胞的体外分离培养;在毛囊乳头层细胞的诱导下,胎鼠表皮干细胞可参与形成新的毛囊结构.
作者：韩军涛；陈璧；张晓辉；王哲；李峰 刊期： 2003年第01期
目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为肉芽组织中血管内皮细胞的可能性,及其参与创面修复的可能机制.方法抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后,应用溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记技术标记细胞.于已抽取骨髓的小型香猪背部制作全层皮肤缺损创面,即刻以纤维蛋白胶为载体,将已标记的MSC回植到供体动物创面上.术后2、4、6、8、12用切取创面组织,行BrdU和因子Ⅷ(FⅧ)免疫组织化学染色,进行对比观察. 结果BrdU阳性的MSCs多聚集在创面肉芽组织中的小血管周围,日有个别血管内皮细胞也呈现BrdU阳性.部分BrdU阳性的MSCs胞浆中亦有FⅧ表达. 结论创面愈合过程中,MSCs与肉芽组织中小血管的形成密切相关.在创面微环境下,MSCs可分化为血管内皮细胞,并参与创面修复.
作者：方利君；付小兵；孙同柱；李建福；程飚；杨银辉；王玉新 刊期： 2003年第01期
作者：黄立峰；贾赤宇 刊期： 2003年第01期
作者：黄立峰；贾赤宇 刊期： 2003年第01期
