目的：研究丹酚酸A对培养的大鼠肝星状细胞增殖与胶原生成的影响．方法：用链酶蛋白酶与胶原酶对肝脏进行原位灌流消化，Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞，传一代培养．MTT法与[3H]TdR掺人法测定细胞增殖．丽春红染色、图象分析法半定量细胞胶原沉积量，ELISA法测定细胞培养上清中I型胶原分泌量，检测细胞层总蛋白量校正细胞数．RT-PCR法分析前胶原α2(I)基因的表达．结果：丹酚酸A 100 μmol／L引起部分细胞脱壁与死亡，有一定毒性反应．丹酚酸A0．1一10 μmol／L对细胞形态无明显影响．丹酚酸A l一100 μmol／L浓度依赖性抑制细胞增殖，降低胶原沉积量与I型胶原分泌量．丹酚酸A 1-10 μmol／L对前胶原α2(I)mRNA表达均有明显抑制作用．结论：丹酚酸A抑制肝星状细胞增殖与胶原表达，是丹参抗肝纤维化的主要有效成分之一，抑制肝星状细胞活化是其抗肝纤维化的主要作用机制．
作者：刘成海；刘平；胡义扬；徐列明；谭英姿；王臻楠；刘成 刊期： 2000年第08期
目的：观察硫酸多糖(DPS)对肾血管性高血压大鼠的降压作用并对其机制进行初步探讨．方法：(1)急性降压实验：DPS单次舌下静脉注射给药，给药前后以颈总动脉插管法测定大鼠动脉血压和心率．(2)口服预防给药实验：在肾血管性高血压大鼠造模第二天起口服预防给药五周，每日一次．于给药前、后第三周和第六周分别以大鼠尾动脉测压法测定动脉血压和心率．实验结束前，将大鼠断头取血，测定血清中一氧化氮(NO)的含量；用放射免疫法测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和内皮素-1(ET-1)的含量．血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利作为口服预防给药实验阳性对照药．结果：在急性降压实验中，DPS能够显著降低肾血管性高血压大鼠的收缩压和舒张压且其降压强度呈剂量依赖性，降压的同时伴有心率减慢．DPS口服预防给药五周，剂量依赖性抑制大鼠的收缩压和舒张压升高，DPS50mg／kg的降压效果与卡托普利14 mg／kg相当．DPS给药五周，可显著增加血清中NO的含量和降低血浆中ET-1的含量；亦降低血浆中AngⅡ的含量．结论：硫酸多糖DPS对肾血管性高血压大鼠具有良好的降压作用．其降压机制可能与其促进体内NO生成或释放、降低ET-1和AngⅡ的含量有关．
作者：朱海波；耿美玉；管华诗；张均田 刊期： 2000年第08期
目的：研究来曲唑(Letr)药动学性别差异性．方法：ig Letr 2 mg／kg后，测定在雄、雌性大鼠血浆、组织中浓度及粪、尿中回收率．结果：ig Letr 6 h以后，雄鼠中血药浓度显著低于雌鼠，如给药24，36，48和72 h，雌鼠血药浓度分别为雄鼠的3．3，5．6，10．5和7．4倍．雄鼠AUC也仅为雌鼠的1／3，其半衰期分别为10．5和40．4 h．120 h内，雌鼠尿和粪中排泄分数分别为5．78％±1．40％和6．61％±1．10％，而雄鼠仅分别为1．30％±0．59％和0．87％±0．31％；给药后24 h，雌鼠组织中药物浓度显著高于雄鼠．结论：Letr在大鼠体内的药动学存在较大的性别差异．
作者：刘晓东；谢林；钟雁；李长喜 刊期： 2000年第08期
目的：在体外研究人肝微粒体中尼莫地平代谢的酶动力学及选择性的细胞色素P-450(CYP450)酶抑制剂对尼莫地平代谢的影响．方法：采用人肝微粒体研究尼莫地平脱氢酶的代谢动力学，运用Eadie-Hof-stee方程估算其动力学参数．在体外运用CYP450酶的选择性抑制剂探讨其对尼莫地平代谢的影响及人肝微粒体中参与尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢的CYP450酶．结果：尼莫地平在人肝微粒体中的代谢存在较大的个体差异，尼莫地平脱氢酶的Km为(36±11)μmol，其Vm为(17±7)μmol·g-1·min-1．酮康唑和三乙酰竹桃霉素竞争性地抑制尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢，其Ki值分别为0．59和122．2μmo1．非那西丁、奎尼丁、DDC、Sul和Tra对尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢没有明显的影响．结论：尼莫地平在体内的药物动力学个体差异与其在肝中的代谢存在多态性有关．CYP3A参与了尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢，CYP3A的抑制剂可能会与尼莫地平发生代谢相互作用．
作者：柳晓泉；任亚丽；钱之玉；王广基 刊期： 2000年第08期
目的：观察大鼠吗啡与丁丙诺啡(或吗啡)的蛛网膜下腔与皮下联合给药的相互作用．方法：SD大鼠，置人蛛网膜下腔导管．辐射热诱发鼠腿撤退试验测痛阈．分别蛛网膜下腔给予吗啡、皮下注射丁丙诺啡(或吗啡)、蛛网膜下腔给予吗啡与皮下注射丁丙诺啡(或吗啡)的联合给药．结果：单独和联合给药均剂量依赖性地提高鼠痛阈．联合给药的量效曲线的斜率均显著大于吗啡单独给药的曲线斜率．等效线图显示联合给药的ED50均位于理论推测的叠加效应线的左侧．结论：吗啡与丁丙诺啡(或吗啡)的蛛网膜下腔与皮下联合给药呈协同效应．
作者：陈莲华；Alexander NEMIROVSKy；贡沁燕 刊期： 2000年第08期
目的：研究脑缺血再灌注后沙土鼠海马突触体蛋白质酪氨酸激酶(PTK)和蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP)活性的变化及其引起变化的机制．方法：双侧颈总动脉结扎(15 min)形成全脑缺血模型；放射性同位素γ-32p掺人法和比色法分别测定了总PTK和PTP的活性，免疫沉淀和γ-32p放射性同位素测定Src和PYK2活性，免疫印渍测定Src和PYK2蛋白表达量．结果：①脑缺血再灌注引起PTK活性升高，而PTP活性不变．②在假手术对照组中，Src比PYK2活性高，脑缺血再灌引起Src活性明显升高，而PYK2活性无显著变化．③脑缺血前腹腔分别给予氯胺酮和硝苯地平，都能拮抗脑缺血再灌注引起的PTK和Src活性的升高，但对PTP活性无影响．结论：脑缺血再灌注能诱导沙土鼠海马突触体总的PTK活性升高，而对PTP活性无影响，PTK活性的升高主要是Src活性的增加而与PYK2无关；脑缺血再灌注诱导PTK和Src活性升高是通过NR和L-型电压门控钙通道介导的，即与这两种钙通道的激活有关，而与其蛋白表达量无关．
作者：裴林；裴林；李勇；颜景芝；张光毅；崔肇春；朱正美 刊期： 2000年第08期
目的：建立同时定量5-羟奥美拉唑(5-OH-OP)和奥美拉唑砜(OPS)的分析方法，探讨奥美拉唑(OP)在中国人肝微粒体中能否作为细胞色素P450 2C19(CYP2C19)及3A4(CYP3A4)的活性表型探针药．方法：在中国人肝微粒体中进行OP的体外代谢，以高压液相色谱法(HPLC)检测主要代谢产物5-OH-OP及OPS；抗CYP2C8／9／19及抗CYP3A4的单克隆抗体被用于抑制实验；以Western斑点法和光密度扫描定量肝微粒体中CYP2C19及CYP3A4的含量．结果：在HPLC分析中5-OH-OP及OPS有很好的洗脱，二者检测限均为0．0l nmol，回收率为98％-102％并且变异系数小于9．5％；抗CYP2C8／9／19及抗CYP3A4均对5-OH-OP的生成有显著的抑制作用(P<0．05)，二者的抑制作用呈底物浓度依赖，并且抗CYP3A4几乎可单独去除OPS的生成(>87％)；在底物浓度为2 μmol／L OP时，中国人肝微粒体中OP的5-羟化与美芬妥英的4＇-羟化活性之间(r=0．72，P<0．01)、OP的5-羟化活性与CYP2C19含量之间(r=0．82，P<0．01)以及OP的硫代氧化活性与CYP3A4含量之间(r=0．78，P<0．01)均有很好的相关性．结论：中国人肝微粒体中OP的代谢主要由CYP2C19和CYP3A4介导；采用本研究建立的HPLC方法，在适当的底物浓度下，OP能用于体外探测中国人肝微粒体中CYP2C19及CYP3A4的活性．
作者：舒焱；王连生；肖卫民；王伟；黄松林；周宏灏 刊期： 2000年第08期
目的：模建人Kappa阿片受体(HKOR)三维结构，并研究它与强啡肽A(1-8)(Dyn8)的相互作用机制．方法：以牛视紫红质(OPSD)为模板，运用比较分子模拟模建HKOR七段跨膜区的三维结构．运用分子动力学优化HKOR模型并根据强啡肽A(1-14)核磁共振结果构建其三维结构，通过自建数据库搜寻建立HKOR的膜外环区．应用DOCK4．0将强啡肽A(1-8)与HKOR进行对接．结果：(1)得到HKOR三维模型，并用理论及实验参数进行了校正．(2)合理解释了Dyn8-HKOR相互作用机制：Aspl38通过与Dyn8的N端残基形成氢键及静电作用，在配体受体结合过程中起着重要的作用．(3)HKOR膜外第二环区(EL2)中带负电荷的氨基酸Asp223和Glu209与Dyn8的C端带正电荷的残基相互作用，而Glu209可能是决定肽类配体特异性的一个重要因素．结论：EL2，TM3，TM4，TM5上的一些关键氨基酸残基决定Kappa阿片受体与肽类配体的选择性结合．
作者：万旭虎；黄小琴；周德和；蒋华良；陈凯先；池志强 刊期： 2000年第08期
目的：研究人工半合成槲皮素一槲皮素-7，4＇-二硫酸酯二钠(disodium quercetin-7，4＇disulfate，DQD)对凝血酶(500 u·L-1)诱导猪血小板聚集的抑制作用及其机制．方法：用比浊法测定血小板聚集．Fura 2-AM荧光法检测胞浆游离钙浓度([Ca2+]i)．用组蛋白ⅢS，[γ-32 P]ATP与蛋白激酶C(PKC)酶液一起保温的方法测定Ca2+／PL依赖的PKC活性．用SDS-PAGE分离骨架蛋白．结果：DQD对凝血酶诱导的血小板聚集有抑制作用，当DQD的浓度为100，200和400 μmol／L时，抑制率分别为77％、86％和82％．DQD(10-80μmol／L)抑制凝血酶诱导的血小板胞外钙内流；DQD对凝血酶诱导的血小板胞内钙动员也有抑制作用．DQD(10-160 μmol／L)抑制血小板胞浆Ca2+／PL依赖的PKC，但DQD不影响胞膜PKC．DQD(20-200μmol／L)对凝血酶诱导的血小板肌动蛋白聚合有较强的抑制作用．结论：DQD对凝血酶诱导的猪血小板聚集有抑制作用，其分子作用机制是由于抑制血小板外钙内流、内钙动员、Ca2+／PL依赖的PKC和肌动蛋白聚合．
作者：刘文；梁念慈 刊期： 2000年第08期
目的：研究茜草双酯对正常小鼠免疫功能的影响．方法：采用免疫药理学常用方法即血清溶菌酶含量的测定，迟发型超敏反应的测定，血清溶血素的测定，[3H]TdR参入的小鼠全血白细胞吞噬能力的测定，鼠脾空斑形成细胞溶血能力的测定，T和B淋巴细胞转化能力的测定．结果：茜草双酯125，500，2000 mg·kg-1·d-1降低血清溶菌酶含量和全血白细胞吞噬功能；使PFC溶血能力和HC50产生减少；抑制DTH反应；体内给药体外测定，抑制[3H]TdR参人的PHA与LPS诱导的淋巴细胞转化．以上作用呈一定的剂量依赖性．结论：茜草双酯对正常小鼠特异和非特异性免疫功能均有不同程度的抑制作用．
作者：杨胜利；刘发；张华；窦清理 刊期： 2000年第08期
目的：研究沙土鼠脑缺血再灌注后海马突触体N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基2B(NR2B)酪氨酸磷酸化调节的机制．方法：沙土鼠双侧颈总动脉结扎形成前脑缺血模型；NR2B酪氨酸磷酸化通过免疫沉淀和免疫印渍分析．结果：脑缺血15分钟导致蛋白酪氨酸磷酸化水平明显下降；再灌注引起包括180 kDa蛋白在内的多种蛋白酪氨酸磷酸化水平快速(再灌注15分钟)、持续(至少48小时)升高．免疫沉淀和免疫印渍证实，180 kDa条带为NR2B．缺血15分钟，再灌注6小时，NR2B酪氨酸磷酸化明显高于对照组，为对照组的1．8倍，而NR2B蛋白表达量则无变化．缺血前腹腔注射非竞争性NR拮抗剂氯胺酮或L-型电压门控钙通道(L-type VGCC)阻滞药硝苯地平，对NR2B酪氨酸磷酸化水平升高有明显的拮抗作用，而对NR2B蛋白表达量均无影响．在此条件下，非NMDA受体拮抗剂6，7-二硝基喹恶啉土卫四(DNQX)对NR2B酪氨酸磷酸化水平无影响．酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP)抑制剂钒酸钠使脑缺血再灌注诱导的NR2B酪氨酸磷酸化进一步增加，而酪氨酸蛋白激酶(PTK)抑制剂金雀异黄素则使其减少．Src能与NR2B免疫共沉淀．结论：沙土鼠脑缺血再灌注NR2B的酪氨酸磷酸化的升高是通过NR和L-type VGCC介导的；PTK和PTP参与脑缺血再灌注NR2B酪氨酸磷酸化的调节，与NR2B以物理方式结合的Src可能在这种调节中起着重要作用．
作者：裴林；裴林；李勇；张光毅；崔肇春；朱正美 刊期： 2000年第08期
目的：研究端粒酶RNA组分反义寡脱氧核糖核苷酸类对人肝癌细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响．方法：用改良的端粒重复扩增法检测端粒酶活性．用流式细胞仪检测细胞周期．结果：端粒酶在四种人肝癌细胞株中都有表达，而在正常人肝细胞中却不表达．端粒酶RNA组分的反义寡脱氧核糖核苷酸类在体外明显抑制BEL-7404人肝癌细胞的端粒酶活性并使细胞周期阻滞在G2／M期．结论：端粒酶RNA组分的反义寡脱氧核糖核苷酸类在体外可抑制人肝癌细胞的端粒酶活性并使细胞周期阻滞在G2／M期．
作者：张如刚；王兴旺；袁金辉；谢弘 刊期： 2000年第08期
目的：研究在喜树碱诱导人白血病HL-60细胞凋亡过程中端粒酶的调节变化规律．方法：用MTT法测定药物对细胞存活率的影响；用琼脂糖电泳及流式细胞术检测和定量凋亡的发生；用以PCR为基础的TRAP法测定端粒酶活力；逆转录PCR检测凋亡过程中bcl-2及端粒酶亚基hTR、hEST2／hTERT和TLPl／TPl的基因表达水平的变化．结果：端粒酶活力伴随喜树碱诱导HL-60细胞凋亡的发生而逐渐降低，在此过程中端粒酶各亚基的mRNA水平无可见性变化，而bcl-2的基因表达水平则相应下调．结论：端粒酶活力的下调和喜树碱诱导的HL-60凋亡密切相关，端粒酶活力的阻断并非发生在其亚基基因转录水平，bcl-2对端粒酶活力的调节也不是通过影响端粒酶亚基的转录水平来实现的．
作者：蒋建飞；刘卫军；丁健 刊期： 2000年第08期
目的：研究GABA受体的激活对于鲫鱼视网膜ON-型双极细胞的胞体和轴突末梢内高钾引起的钙信号的影响．方法：急性分离的鲫鱼视网膜细胞经fluo-3AM孵育后，用激光共聚焦显微镜检测荧光变化．结果：GABA 100 μmol／L可以完全抑制双极细胞胞体和轴突末梢内高钾35 mmol／L引起的钙信号．仅激活GABA受体的一种亚型时，轴突末梢和胞体内出现了不同的结果．当GABAA受体或GABAc受体被单独激活时，尽管胞体内的钙信号仍旧被完全抑制，但轴突末梢的[Ca2+]i逐渐升高．GABA 10μmol／L仍旧可以完全抑制胞体内的钙信号且部分抑制轴突末梢内的钙信号．结论：激活GABAA和GABAc受体能够完全抑制鲫鱼视网膜ON-型双极细胞内高钾引起的钙信号．仅激活GABAA或GABAc受体时可以完全抑制胞体内的钙信号，而轴突末梢的[Ca2+]i逐渐升高，这可能与GABAA或GABAc受体的脱敏有关．
作者：吴迪；朱培闳 刊期： 2000年第08期
目的：建立快速测定糖尿病大鼠A1c型糖基化血红蛋白的FPLC方法．方法：大鼠血样经洗涤，离心，甲苯破膜，稀释后；用丙二酸钠溶液(A液)和丙二酸钠-氯化锂溶液(B液)为基本流动相，采用梯度洗脱程序在Mono S HR 5／5阳离子交换柱上进行分离测定，检测波长为415 nm．结果：在所给色谱条件下，大鼠A1c型糖基化血红蛋白能很好地从总血红蛋白中分离出来．糖尿病大鼠中HbA1c含量为3．6％±0．6％(n=7)显著高于正常大鼠的1．4％±0．4％(n=7)，P<0．01．测定一个样品所需的总时间约为27 min．结论：本方法简便，快速，准确，重现性好，可用于大鼠糖尿病模型中糖基化血红蛋白含量的研究和糖尿病治疗药物的筛选．
作者：葛晖；李晓明；苗振川；宋伟；刘树森 刊期： 2000年第08期
目的：鉴定中国成人肝微粒体中介导氯胍(PG)活化为氯胍三嗪(CG)的细胞色素P450(CYP450)．方法：分析中国成人(n=6)肝微粒体中PG活化为CG的酶促动力学，各种CYP450抑制剂对该代谢的作用及其与S-美芬妥英4＇-羟化的关系．结果：6个标本中，除一个外(两酶米氏模型)，PG活化为CG的酶促动力学符合米氏一酶模型；CYP3A4和CYP2E1的选择性抑制剂醋竹桃霉素(81．1％)和二乙二硫基苯甲酸(47．23％)可抑制CG生成，其它抑制剂没有明显作用；在低PG浓度时，PG的环化与S-美芬妥英4＇-羟化显著相关(r=0．805，P<0．05)，高浓度时相关性明显减小．结论：在中国成人肝微粒体中CYP2C19和CYP3A4参与了PG活化为CG．
作者：卢爱华；舒焱；黄松林；王伟；欧阳冬生；周宏灏 刊期： 2000年第08期
CYP450是一个超家族，参与了许多内源性和外源性物质的代谢．本文综述了CYP1A1、CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4参与代谢的药物和前致癌物，以及诱导和抑制它们的物质；阐述了它们的表型多态性和基因多态性；并简要地概括了近年来引起人们关注的基因多态性与癌症易感性的关系．
作者：韩兴梅；周宏灏 刊期： 2000年第08期
2000 November Shanghai, CHINAInfo: Prof MIAO Chao-Yu(缪朝玉)Department of Pharmacology School of Medicine Second Military Medical University Shanghai 200433CHINA Phn: 86-21-2507-0287E-mail: cymiao @ citiz. net
作者： 刊期： 2000年第08期
2000 Oct 9-11 Yangzhou,CHINA Info：Prof SUN Yun(孙云)Department of Anti-inflammation and Immunology Yangzhou University School of Medicine Yangzhou 225001CHINAFax: 86-514-7941-733Phn: 86-514-7978-877
作者： 刊期： 2000年第08期
2000 Oct 28- 30 Suzhou, CHINAInfo：Dr GUO Mei-Li(郭美丽)Department of Pharmacognostics School of Pharmacy Second Military Medical University Shanghai 200433CHINAPhn: 86-21-2507-0344E-mail: qlupingb @ online. sh. cn
作者： 刊期： 2000年第08期
