目的:研究雌二醇在cDNA表达的P450和人肝微粒体中的代谢机制,为在体内研究细胞色素P450活性与肿瘤发生的关系提供依据.方法:用HPLC-ECD法测定雌二醇的代谢产物.通过雌二醇在不同cDNA表达的P450中代谢,13例人肝微粒体中相关性研究,抑制剂对代谢的影响以及微粒体中17β-羟基脱氢化和2-羟基化代谢的催化动力学的研究来推断雌二醇的代谢机理.结果:在cDNA表达的P450中,催化2-羟基化代谢的P450按活性排列依次为CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9.CYP2C9、CYP2C19和CYP2C8均具有较高的催化17β-羟基脱氢化活性.抑制CYP1A2与抑制CYP3A4对2-羟基化代谢产物生成的影响相似,可认为CYP1A2和CYP3A4在人肝微粒体中催化2-羟基化代谢的作用相近.雌二醇代谢的途径与底物浓度有关,低浓度时(1,10 μmol/L)17β-羟基脱氢化为主要代谢途径;高浓度时(100μmol/L),2-羟基化成为主要代谢途径.结论:高底物浓度时,雌二醇主要由CYP1A2和CYP3A4催化代谢为2-羟基化产物.低底物浓度时,主要由CYP2C9、CYP2C19和CYP2C8催化生成17β-羟基去氢化产物.
作者：程泽能；舒焱；刘昭前；王连生；欧阳冬生；周宏灏 刊期： 2001年第02期
目的:研究PC12细胞上的钾离子通道门控动力学及神经生长因子(NGF)对其影响.方法:用膜片箝技术以细胞附贴式记录PC12细胞钾通道外向电流,用分形模型分析钾离子通道的门控动力学特征和NGF对其影响.结果:未经NGF处理的PC12细胞钾通道的关闭持续时间的分形维D与吸管位势的绝对值成正比,开放持续时间的分形维D＇与其成反比,在吸管位势0,-30,-50和-70mV下,D的值分别是1.75,1.88,1.95和2;D＇的值分别是1.5l,1.40,1.34,1.23,在相同的吸管位势下,用NGF处理后,钾通道开、关持续时间的分形维不大于经NGF处理前钾通道开、关持续时间的分形维.开放与关闭持续的动力学设定点不随吸管位势变化,它们的值为A(无NGF)=0.29±0.05,A(有NGF)=0.7l±0.06,A＇(无NGF)=0.110±0.020和A＇(有NGF)=0.38±0.08.结论:随着片膜被去极化,D(无NGF)的电压依赖性增加了通道保持长时间关闭的概率,D＇(无NGF)的单调性减少了通道保持长时间开放的概率.在细胞培养液中增加NGF后,加速了在较长时间尺度上发生的钾通道的动力学过程.
作者：刘向明；陶晻；韩晓东；樊青；林家瑞 刊期： 2001年第02期
目的:探索用氨乙酸丙酸(ALA)对髓性白血病细胞进行光敏化灭活.方法:用荧光光谱技术测量ALA在白血病细胞中内源生成光敏药物原卟啉IX;用共焦激光扫描荧光显微镜结合亚细胞器荧光探针探测其在JCS髓性白血病细胞中的分布;用MTT方法检测光敏化后的细胞存活.结果:ALA成功的在白血病细胞中内源生成光敏药物原卟啉IX;原卟啉Ⅸ分布在细胞核以外的细胞质中,线粒体是其的结合部位之一;经光照后此内源生成的原卟啉Ⅸ启动光敏化反应有效的灭活白血病细胞.结论:基于ALA的光动力反应有潜力用于对白血病细胞的光敏化灭活.
作者：陈暨耀；麦乃歧；张乃豪；梁荣能；彭迁 刊期： 2001年第02期
目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)和L-NAME性高血压大鼠(NHR)的血压波动性(BPV).方法:清醒自由活动大鼠连续血压监测技术测定BPV.尾套法观察L-NAME引起的升压过程,硝酸还原酶法测定NO浓度.结果:两种高血压大鼠的收缩压波动性(SBPV)和舒张压波动性(DBPV)均升高.在SHR,DBPV升高较多.而在NHR,SBPV升高较多.而且,NHR的SBPV升高(102%)明显高于SHR(28%).饮用水中加L-NAME 1 g/L使大鼠血压进行性升高,4周时100%造成高血压.NHR的血浆NO水平下降.结论:BPV升高是高血压的普遍现象.NO参与BPV的调控.
作者：缪朝玉；沈甫明；苏定冯 刊期： 2001年第02期
目的:研究小檗碱(Ber)对豚鼠心室肌细胞钾通道和动作电位作用,以及在蛙卵中表达的人的HERG通道的作用.方法:酶解方法分离单个心肌细胞,采用全细胞膜片箝方法记录钾离子电流及动作电位,基因箝技术研究HERG通道电流.结果:Ber可显著延长动作电位时程,并呈剂量依赖性.Ber 100μmol/L使APD90由对照的(450±48)ms延长至(888±90)ms(n=6,P＜0.01).Ber对IK1及IK呈剂量依赖性抑制作用.Ber100μmol/L对IK1的抑制率达65%±7%(n=6,P＜0.01).Ber50μmol/L对IK的抑制率达57%±6%;对IKtail的抑制率达53%±6%.Ber对IK作用呈现电压依赖性.Ber对在蛙卵中表达的HERG通道具有很强的阻断作用,IC50为75μmol/L,此阻断作用也呈电压依赖性.结论:Ber可使动作电位时程明显延长,对IK1及IK具有阻断作用.Ber可显著抑制HERG通道.Ber抗心律失常的机制与其抑制IK1、IK及HERG通道密切相关.
作者：李宝馨；杨宝峰；周晋；徐长庆；李玉荣 刊期： 2001年第02期
目的:建立一种统计学模型来评价临床不良事件与治疗间的关系.方法:将交叉试验的治疗期与间歇期分开,记录每一个阶段不良事件发生的次数和持续天数,累积各受试者每一阶段发生不良事件的总时间,用日/人表示.以泊松分布法计数发生事件反应的次数及其持续时间;以普通线性混合模型估计各不同处理间不良事件的发生率;以广义估计方程估计各交叉试验组间的相关性.结果:不良事件的发生率不仅受发生次数的影响,也受其持续时间和受试者耗于不良事件(日/人)总时间的影响.结论:本研究提供了一个实用的评价各种不良事件发生率的方法,此方法比单纯考虑不良事件的发生次数具有更少的偏性.
作者：王墉；李麟仙；王子灿；王跃和 刊期： 2001年第02期
目的:研究TGF-β1诱导细胞凋亡的机制.方法:采用DNA片段化和荧光染色方法对TGF-β1诱导的细胞凋亡进行定性观察,结晶紫染色方法定量检测TGF-β1的细胞存活率,免疫印迹方法检测Tak1、p53和Bax的蛋白水平,用荧光素酶报告基因的方法测定TGF-β1诱导的基因表达,采用薄层层析方法检测脂类信号分子神经酰胺的水平.结果:TGF-β1诱导AML12小鼠肝细胞出现典型的细胞凋亡变化,包括DNA片段化,细胞核的固缩、碎裂.放线菌酮下调了Tak1的水平以及TGF-β1诱导的PAI-1表达.TGF-β1能够诱导p53表达,但不诱导Bax表达.TGF-β1诱导的细胞凋亡过程中未见神经酰胺水平的升高.结论:TGF-β1诱导的细胞凋亡需要TGF-β1诱导的基因表达.
作者：廖劲晖；周兵红；柴敏强；宋建国 刊期： 2001年第02期
目的:研究大蒜素是否具有药物性预处理的作用,并探讨蛋白激酶C在大蒜素预处理中的重要作用.方法:34只离体家兔心脏挂上Langendorff装置,以95%O2%5% CO2混合的Krebs-Henseleit液灌流,均接受30min局部缺血和2 h复灌.结果:在30min局部缺血前10 min予5 min药物性预处理的大蒜素组较之对照组明显缩小心肌梗塞范围(7%±6%vs25%±7%,P＜0.05),大蒜素+多粘菌素B组的心肌梗塞范围与对照组相比无显著性差异(23%±5%vs25%±7%,P＞0.05).结论:大蒜素具有模拟缺血预处理样保护作用,其作用可被抑制剂多粘菌素B所阻断,表明大蒜素通过激活蛋白激酶C发挥药物性预处理作用.
作者：张卫军；史载祥；史载祥；王蓓蓓；崔义军；郭景珍；李波 刊期： 2001年第02期
目的:对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白-1(GLUT1)进行鉴定.研究转化生长因子(TGF-β1)对GLUTl表达和功能的影响及大黄酸的干预作用.方法:分别用RT-PCR、免疫荧光染色、流式细胞仪、Northern杂交和[3H]-2脱氧葡萄糖摄入率对系膜细胞GLUT1 mRNA表达、蛋白质分布和功能进行了研究.观察不同浓度TGF-β1在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄入以及GLUT1 mRNA表达的影响.结果:研究发现人类肾小球系膜细胞上存在功能性的GLUT1.TGF-β1能上调系膜细胞GLUTl mRNA的表达和增加系膜细胞葡萄糖摄入率.大黄酸对正常糖浓度培养条件下系膜细胞葡萄糖摄入无影响,但能明显抑制TGF-β1增加系膜细胞GLUTl mRNA表达和葡萄糖摄入的作用.结论:TGF-β1增加人肾小球系膜细胞GLUT1 mRNA的表达和细胞葡萄糖的摄入,该作用能够明显地被大黄酸所拮抗.
作者：刘志红；李颖健；陈朝红；刘栋；黎磊石 刊期： 2001年第02期
目的:观察阿司匹林铜对离体兔胸主动脉血管平滑肌的作用.方法:取兔胸主动脉条,观察阿司匹林铜对去甲肾上腺素(NE)、KCl、CaCl2诱导收缩作用的影响.结果:证实阿司匹林铜和对照物硫酸铜拮抗NE诱导的兔胸主动脉条收缩,IC50分别为3lnmol/L和0.29μmol/L,而阿司匹林本身没有拮抗作用.阿司匹林铜对KCl、CaC12诱导的收缩没有影响.在去内皮细胞兔胸主动脉条上,观察到相同的作用.结论:阿司匹林铜具有较强的拮抗NE诱导离体兔胸主动脉条收缩的作用,但不能拮抗KCl、CaCl2诱导的收缩,提示阿司匹林铜通过阻断受体调控钙通道,舒张血管平滑肌.
作者：杨为民；沈志强；陈植和；李玲；彭芳；刘伟平 刊期： 2001年第02期
目的:研究血脑屏障(BBB)上谷氨酸(Glu)外排是否受P-糖蛋白(P-gp)调节.方法:使用在体脑灌流技术,皮层内注射[3H]Glu 5 min,测定回收率,Glu单向转运常数(Kin)和牛脑微血管内皮细胞(BCEC)及腔面膜摄取[3H]Glu作用.结果:对照鼠,皮层内注射[3H]Glu 5 min回收率为25%±16%,先用环孢菌素A(CsA)10,100μmol@L-1,长春新碱(VCR)20μmol@L-1和维拉帕米(Ver)100μmol@L-1处理,回收率分别增至对照鼠的2.2,2.5,2.3和2.7倍.VCR和CsA增加[3H]Glu Kin CsA40μmol@L-1使[3H]Glu在皮层、海马和纹状体中Kin值分别增至对照组的9,3,7和4.6倍.CsA 100 μmol@L-1使BCEC摄取[3H]Glu增至对照组的2.5倍.MDR-逆转剂和P-gp单克隆抗体C219抑制腔面膜摄取[3H]Glu.结论:P-gp调节血脑屏障上的Glu外排.
作者：刘晓东；刘国卿 刊期： 2001年第02期
目的:研究氯胺酮在中枢交感心血管活动中的调节作用.方法:在25只氨基甲酸乙酯麻醉、三碘季铵酚制动并人工通气的雄性SD大鼠中,共细胞外记录到32个头端延髓腹外侧区前交感神经元的自发放电,这些神经元具有压力敏感性和向脊髓投射的特点.观察选择性NMDA受体拮抗剂氯胺酮对前交感神经元放电的影响.结果:静脉注射不同剂量的氯胺酮(3,6,12 mg/kg)能增加RVLM前交感神经元的放电频率,同时能阻断这些神经元的压力敏感性,且具有剂量依赖性的特点.结论:氯胺酮通过阻断RVLM前交感神经元压力感受反射的紧张性抑制,从而调节交感心血管活动.
作者：王伟忠；戎伟芳；王继江；袁文俊 刊期： 2001年第02期
目的:考察血管内皮生长因子/血管通透因子(VEGF)对体外培养牛主动脉内皮细胞脂蛋白通透性的影响及丹酚酸B的抑制作用.方法:将不同浓度的VEGF、丹酚酸B及培养基加入牛主动脉内皮细胞单层,与125I-LDL共孵育,在不同的时间段用SN695型液闪计数器测其通过细胞单层的百分率.结果:VEGF可显著增强牛主动脉内皮细胞单层对125ILDL的通透性(P＜0.01),这种增加具有时间和剂量依赖性.丹酚酸B能显著抑制VEGF诱导的这种高通透(P＜0.01).结论:上述结果提示VEGF在动脉粥样硬化的形成和发展过程中起一定作用.丹酚酸B对VEGF诱导血管内皮通透性升高有显著的抑制作用.
作者：邱彦；芮耀诚；张黎；李铁军；张卫东 刊期： 2001年第02期
目的:研究体外苦参碱对HSC-T6大鼠储脂细胞和NIH3T3成纤维细胞增殖和胶原合成的影响,以及体内对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响.方法:细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和[3H]脯氨酸掺入法.肝纤维化评价以血清透明质酸和肝中羟脯氨酸含量为指标.结果:苦参碱(1～2 nnol@L-1)显著减少血清刺激的HSC-T6细胞以及NIH3T3细胞增殖和胶原合成;苦参碱(0.25～2 mmol@L-1)浓度依赖地抑制血小板源生长因子(PDGF)促HSC-T6细胞增殖以及抑制转化生长因子β1(TGF-β1)促胶原合成的作用.体内苦参碱(50,100 mg@kG-1)均能显著降低血清透明质酸和肝脏羟脯氨酸水平.结论:苦参碱阻断PDGF和TGF-β1的作用,抑制储脂细胞增殖和胶原合成可能是其抗肝纤维化作用的机制之一.
作者：张俊平；张珉；周俭平；刘福堂；周斌；谢渭芬；郭澄；张纯；钱定华 刊期： 2001年第02期
目的:研究屈洛昔芬对假孕大鼠黄体细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响.方法:HE染色观察大鼠卵巢黄体组织学变化,TUNEL法检测黄体中凋亡细胞的存在,免疫组织化学方法观察假孕大鼠卵巢黄体中Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果:成年假孕大鼠卵巢黄体自然退化中黄体细胞凋亡出现在假孕第13天,15天时可观察到凋亡细胞的显著增加.Bax和Bcl-2蛋白在黄体细胞中的表达在整个黄体自然退化中无显著改变.20mg@kg-1假孕大鼠第2天口服给予20mg@kg-1屈洛昔芬后,第8天观察时黄体中出现凋亡细胞,且假孕期从(15.5±1.1)天缩短至(12.8±1.6)天.经屈洛昔芬作用后,假孕大鼠黄体中Bax蛋白的表达增加而Bcl-2蛋白表达下降.结论:成年假孕大鼠卵巢黄体自然退化中有细胞凋亡的发生,屈洛昔芬可加速假孕大鼠黄体细胞凋亡的出现并可缩短假孕期.Bax和Bcl-2蛋白的表达在假孕不同时间时无明显改变,而屈洛昔芬所诱导的Bax/Bcl-2的增加可能与该药物对黄体细胞凋亡的促进作用有关.
作者：冷颖；冯颖；曹霖；顾芝萍 刊期： 2001年第02期
目的:研究硝酸甘油增强心停搏液的保护作用与促进降钙素基因相关肽释放的关系.方法:在StThomas Hospital心停搏液条件下,离体心脏低温缺血4 h后再灌40min,记录心率、冠脉流量及心功能,并测定灌注液中降钙素基因相关肽(CGRP)的浓度及肌酸激酶(CK)的释放量.结果:硝酸甘油(0.1或1μmol/L)改善心功能,降低CK释放,同时促进CGRP的释放.CGRP(5或10 nmol/L)也改善心功能及降低CK释放.预先用辣椒素耗竭感觉神经递质后.硝酸甘油的心肌保护和升高灌注液中CGRP浓度作用消失.选择性CGRP受体拮抗剂CGRP8-37也能取消硝酸甘油的心肌保护作用.格列苯脲对硝酸甘油和CGRP的心保护作用均无影响.结论:硝酸甘油增强心停搏液的保护作用是通过内源性CGRP所介导,其保护作用与ATP敏感的钾通道无关.
作者：周智红；邓汉武；李元建 刊期： 2001年第02期
