目的：检测人源性细胞株DNA及人和黑猩猩外周血单核细胞(PBMC)DNA中是否存在与GBV-C基因组同源的核苷酸序列.方法：用PCR模板制备试剂盒提取MT2和HeLa细胞DNA及6例人和1例黑猩猩PBMC DNA，DNA经DNase的RNase消化后再用苯酚-氯仿提取.直接以上述DNA为模板，用GBV-C 5＇-NCR和NS3区引物进行套式PCR(dPCR)扩增.dPCR产物进行核苷酸序列分析，并用引物介导原位扩增(PRINS)DNA序列特异荧光标记技术确定扩增片段在染色体上的位置.结果：从MT2和HeLa细胞DNA及4例人PBMC DNA标本中获得GBV-C 5＇-NCR引物扩增片段.从MT2和HeLa细胞DNA及5例人和1例黑猩猩PBMC DNA标本中获得NS3区引物扩增片段.这些扩增产物的核苷酸序列与GBV-C基因组同源性为73.80％-79.15％.PRINS检测结果显示dPCR阳性的PBMC及其染色体上有荧光着色.结论：MT2和HeLa细胞DNA及人和黑猩猩PBMC DNA中存在与GBV-C 5＇-PCR和/或NS3区同源性较高的核苷酸序列，这些序列位于dPCR阳性的PBMC染色体上.
作者：严杰 刊期： 2001年第04期
目的：研究重组人碱性成纤维细胞生长因子的抗炎作用.方法：用巴豆油致小鼠耳肿，角叉菜胶致小鼠足肿，致小鼠、大鼠急性腹膜炎模型，观察rh-bFGF对小鼠耳肿胀、足肿胀、腹腔渗液中蛋白含量以及大鼠腹腔渗液中白细胞数、蛋白含量、超氧化酶歧化酶活性、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶释放、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性、丙二醛和前列腺素E2生成的影响.结果：rh-bFGF 2，4 kU/kg im明显抑制小鼠耳肿、足肿和腹腔中蛋白渗出；rh-bFGF4 kU/kg im明显抑制大鼠腹腔中白细胞游走、蛋白渗出，降低腹腔渗液中MDA含量，升高SOD活性，明显降低NOS活性、NO和PGE2含量.但rh-bFGF对腹腔渗液中NAG的升高无明显影响.结论：rh-bFGF肌注有抗炎作用，可能与降低毛细血管通透性，抑制白细胞游走，降低NO、MDA和PGE2含量，清除自由基有关.
作者：胡永芳；吴勇杰 刊期： 2001年第04期
目的：研究脑内P物质(substance P，SP)的心血管反应与去甲肾上腺素能系统的关系.方法：家兔脑室注射6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)10天后注射SP，记录平均动脉血压和心率的变化；放射受体测定法测定下丘脑及腹侧延髓中SP受体的密度和亲和力.结果：6-OHDA预处理后，下丘脑及腹侧延髓内NA的含量分别降低86.7％和77.0％，侧脑室注射SP的升压反应显著减弱.6-OHDA组下丘脑和腹侧延髓突触小体膜上SP受体总数Bmax分别为(42±18)和(20±5)pmol·g-1 protein，显著低于对照组(108±5)和(35.9±2.2)pmol·g-1 protein，而6-OHDA组[125I]SP对SP受体的平衡解离常数Kd[(0.029±0.001)，(0.015±0.003)nmol·L-1]显著高于对照组[(0.015±0.004)，(0.014±0.006)nmol·L-1].结论：中枢去甲肾上腺素神经通路参与侧脑室注射SP的心血管反应.
作者：钱红；杨俐萍；魏振宇；刘爱东；田虹；杨素芬 刊期： 2001年第04期
目的：研究γ-氨基丁酸转运蛋白亚型Ⅰ(GAT1)在认知中的生理功能.方法：原核显微注射法产生转基因小鼠.Southern-blot和PCR鉴定转基因的整合；半定量RT-PCR分析GAT1 mRNA水平；免疫荧光和免疫组化检测GAT1蛋白质表达.条件性回避行为分析联合型学习能力；新异物体识别行为分析记忆存储能力.电镜检查突触体形态.结果：获得4只含不同拷贝数转基因的建立者小鼠.GAT1在mRNA和蛋白质水平都呈过量表达.与野生型小鼠相比，转基因鼠联合型学习能力显著下降，视觉记忆显著减弱.另外，转基因鼠不对称突触数量减少约24％.结论：在小鼠中过量表达GAT1可导致认知衰退，表明γ-氨基丁酸转运蛋白表达的改变与某些类型认知缺陷的病理机制有关.
作者：马映华；周筱刚；段书惠；胡佳华；卢步峰；余莹；梅镇彤；费俭；郭礼和 刊期： 2001年第04期
目的：研究溶血磷脂酰胆碱(LFC)对内皮细胞(EC)中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法：在人脐静脉内皮细胞株ECV304培养基中加入不同浓度的LPC，培养不同时间，用基础酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组EC条件培养基中VEGF蛋白含量；用免疫组织化学法检测EC中VEGF蛋白及其受体的表达；用原位杂交检测VEGF信使核糖核酸(VEGF mRNA)的表达.结果：培养的ECV304能表达VEGF受体，在胞浆内呈棕色颗粒，当LPC刺激后，阳性增强.原位杂交结果显示，培养的ECV304中未见VEGF mRNA的表达，当LPC刺激后可见VEGF mRNA的高表达，在胞浆内呈棕色颗粒.ELISA结果显示LPC可使ECV304条件培养基中VEGF蛋白含量明显增加，且具有时间和剂量依赖性.结论：LPC能诱导ECV304表达高水平的VFGF.
作者：张黎；芮耀诚；邱彦；李铁军 刊期： 2001年第04期
目的：观察屈洛昔芬对妊娠大鼠黄体细胞凋亡的影响，并分析黄体中C-myc，Bax和Bcl-2蛋白表达与屈洛昔芬所诱导的黄体细胞凋亡间的可能联系.方法：大鼠于妊娠第2天口服给予屈洛昔芬20 mg·kg-1后，分别于第4天和第8天取卵巢，HE染色和TUNEL法检测黄体中凋亡细胞的存在，免疫组织化学方法观察黄体中C-myc，Bax和Bcl-2蛋白的表达，同时测定卵巢重量、蛋白质含量及血中孕酮水平.结果：大鼠经屈洛昔芬处理后，第4天卵巢黄体中出现明显的凋亡细胞，第8天时更加明显.卵巢重量、蛋白质含量及血清孕酮水平在第8天时显著下降.屈洛昔芬处理组大鼠卵巢黄体中C-myc蛋白表达在第4天即显著增加，Bax蛋白表达的显著增加在第8天可观察到，而Bcl-2蛋白在卵巢黄体中的表达无明显改变.结论：屈洛昔芬可诱导妊娠大鼠着床前黄体细胞凋亡，C-myc蛋白及Bax/Bcl-2蛋白表达的增加可能与该过程有关.
作者：冷颖；顾芝萍；曹霖 刊期： 2001年第04期
目的：探讨钙通道阻滞剂尼卡地平对大鼠杏仁核点燃的作用及机制.方法：恒定电流每日一次刺激大鼠右侧杏仁核，观察尼卡地平对杏仁核点燃发展和发作的影响，测定点燃大鼠脑内各种氨基酸神经递质的含量.结果：腹腔注射尼卡地平2 mg·kg-1显著延缓杏仁核点燃发展进程(P＜0.01)；尼卡地平2-20mg·kg-1剂量依赖性抑制大鼠杏仁核点燃发作，升高发作阈值(ADT)，降低Racine分级；20 mg·kg-1尼卡地平显著提高杏仁核点燃大鼠脑内抑制性氨基酸神经递质GABA的含量(P＜0.05).结论：尼卡地平对大鼠杏仁核点燃的发展和发作有抑制作用，其机制可能与阻断电压依赖性钙通道及增强GABA系统功能有关.
作者：岳旺；王蕾；张芳；仲伟珍；刘占涛 刊期： 2001年第04期
AIM: To investigate the protective effects of N-acetyl-cysteine (NAC) and Nω-Nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) on aluminium phosphide (AlP) poisoning induced hemodynamic changes, myocardial oxygen free radical injury and on survival time in rats. METH-ODS: AlP (12.5 mg/kg) was administered intragastrically under urethane anaesthesia. The effect of pre- and post-treatment with NAC and L-NAME alone and in combination was studied on haemodynamic parameters [blood pressure (BP), heart rate (HR), and electrocar-diogram (ECG) ] and biochemical parameters ( malonyl-dialdehyde, catalase, and glutathione peroxidase). RESULTS: AlP caused significant hypotension, tachycardia, ECG abnormalities, and finally marked bradycardia.The mean survival time was (90 ± 10) min. There was significant increase in myocardial malonyldialdehyde (MDA), and decrease in catalase and glutathione peroxidase (GSH Px) levels. NAC infusion (6.25 mg·kg-1·min-1, iv for 30 min) caused insignificant hemodynamic and biochemical changes. Pre- and post-treatment of NAC with AlP significantly increased the survival time,stabilized BP, HR, and ECG, decreased MDA and increased GSH Px levels compared to AlP group. L-NAME infusion ( 1 mg· kg- 1· min- 1, iv for 60 min) as such caused significant rise in BP but precipitated ECG abnormalities. Pre- and post-treatment of L-NAME with AlP neither improved the survival time nor the biochemical parameters despite significant rise in BP. Co-admin-istration of both the drugs with AlP worsened the hemodynamic and biochemical parameters with reduction in the survival time as compared to AlP. CONCLUSION:NAC increased the survival time by reducing myocardial oxidative injury whereas L-NAME showed no such protective effects in rats exposed to AlP.
作者：Archana AZAD；Shyam Bala LALL；Shivani MITTRA 刊期： 2001年第04期
目的：研究和阐明clobenpropit对大鼠海马局部脑血流(rCBF)的作用机制.方法：采用氢清除法测定海马的部脑血流，并利用大鼠尾部体积描记器测定大鼠的血压.结果：侧脑室内注射clobenpropit ( 20,50μg)后，15-30 min，可剂量依赖性、显著地改善8-16月龄大鼠海马中的rCBF,而clobenpropit的作用可被氯苯氨啶加强.(R)-α-甲基组胺(5μg)则明显抑制clobenpropit的rCBF改善作用.另外，美吡拉敏(5, 10 mg/kg)和zolantidine ( 10 mg/kg)均可剂量依赖性地抑制clobenpropit提高rCBF的作用.Clobenpropit (5 - 50 μg )对血压不产生影响.结论：Clobenpropit可以改善8-16月龄大鼠海马中rCBF,其作用主要与组胺H1，H2和H3受体相关.
作者：陈忠 刊期： 2001年第04期
目的：建立雌二醇在人肝微粒体中代谢产物的测定方法，研究低浓度雌二醇在人肝微粒体中的代谢机制.方法：有机溶剂提取、蒸发、重溶的方法处理样品，高效液相色谱法分离组分，电化学检测器测定含量.结果：流动相为醋酸缓冲液-乙腈(50：50，v/v，pH 4.5，电压为+0.7 vs Ag/AgCl时，在C18柱上分离较好.低检测量为100pg.结论：本法可用于测定底物浓度在1-100 μmol/L时，人肝微粒体中的代谢产物.
作者：程泽能；黄松林；谭志荣；王伟；周宏灏 刊期： 2001年第04期
AIM: To compare the effects of chronic supplementation with l-camitine (LCT) and dl-carnitine (DLC) on ammonia toxicity and hepatic metabolism. METHODS:Three groups of male adult rats were studied: 1) supplemented with LCT ( 1.2 mmol· kg- 1 · d- 1 ), 2 ) supplemented with DLC ( 1.2 mmol· kg- 1· d- 1 ), and 3) control group (COG) not supplemented. RESULTS: The treatment with LCT decreased the toxicity to ammonia.However, the supplementation with DLC did not show any significant effect. In contrast, the effects of the supplementation with LCT and DLC on hepatic metabolism were quite similar, ie, both groups showed:(a) intensified ammonia uptake and decreased urea production from ammonia; (b) increased glucose and urea production from L-glutamine (5 mmol/L). CONCLUSION: The results suggested that LCT supplementation might protect against ammonia toxicity by extra-hepatic mechanisms.
作者：Vilma A F G GAZOLA；Gisele LOPES；Rui CURI；Roberto B BAZOTTE 刊期： 2001年第04期
目的：观察丹酚酸B对淀粉样β蛋白的纤维形成及其细胞毒作用的影响.方法：将不同浓度丹酚酸B与淀粉样β蛋白(1-4)在25℃共同孵育，于不同时间取样品电镜观察纤维形成.用MTT法观察此不同时间点淀粉样β蛋白(1-40)对PC12细胞的毒性作用.另将淀粉样β蛋白(25-35)预先老化7 d，用MTT法观察此老化蛋白对PC12细胞的毒性及丹酚酸B的作用.结果：丹酚酸B 10-100 nmol/L可以完全抑制淀粉样β蛋白(1-40)25℃放置30 h的纤维形成，对淀粉样β蛋白(1-40)25℃放置48及100 h的纤维形成也有明显抑制作用.MTT法显示，经与丹酚酸B共同孵育的淀粉样β蛋白(1-40)明显较未与丹酚酸B孵育的淀粉样β蛋白对PC12细胞的毒性小.丹酚酸B 1 μmol/L可明显抑制预先老化的淀粉样β蛋白(25-35)对PC12细胞的毒性作用.结论：丹酚酸B可抑制淀粉样β蛋白的老化及纤维形成，同时可直接抑制老化淀粉样β蛋白对PC12细胞的毒性作用.
作者：唐民科；张均田 刊期： 2001年第04期
目的：建立Fas配体(FasL/CD95L)转基因小鼠并研究FasL广泛表达的生理效应.方法：原核显微注射法产生转基因小鼠，巢式PCR和Southem-blot鉴定转基因的整合及其完整性，半定量RT-PCR分析FasL mRNA水平，免疫荧光检测FasL蛋白质的表达，组织切片染色检查形态学变化，流式细胞仪检测脾脏αβT细胞百分比.结果：获得2只含置于CMV启动子控制下人FasL cDNA的建立者小鼠.Fl代杂合体小鼠的大部分组织可检测到人FasL中等程度的表达.转基因小鼠发育正常，但脾、睾丸、肺和肝局部区域形态异常，具有轻微类移植物抗宿主疾病特征.与野生型对照相比，来源于二个建立者的转基因小鼠αβT细胞在脾脏的百分比分别减少了约32％和24％.结论：广泛表达FasL可导致轻微类移植物抗宿主疾病.
作者：马映华；费俭；胡佳华；周筱刚；夏国宏；郭礼和 刊期： 2001年第04期
目的：观察四氢孕酮与苯巴比妥的抗惊厥相互作用.方法：采用小鼠大电休克惊厥(MES)试验，测定四氢孕酮和/或苯巴比妥的保护作用；并采用小鼠大脑皮质膜制备，用氚标氟硝安定检测四氢孕酮和/或苯巴比妥对GABAA受体复合物的调节.结果：苯巴比妥(0.5-50mg·kg-1)对小鼠大电休克惊厥具剂量依赖性的保护作用，其ED50为2.61 mg·kg-1，95％可信限为1.59-4.26 mg·kg-1.同样，四氢孕酮(0.01-1.0 mg·kg-1)也有剂量依赖性的保护作用，其ED50为0.11(0.06-0.18)mg·kg-1.四氢孕酮和苯巴比妥联合用药(1：20)的ED50为0.73(0.44-1.21)mg·kg-1，Q值小于1.测定四氢孕酮和/或苯巴比妥增加氚标氟硝安定的结合，其浓度效应曲线与功能性协同作用的理论曲线相符.结论：四氢孕酮和苯巴比妥对抗小鼠大电休克惊厥有协同作用；两者对增加氚标氟硝安定与GABAA受体复合物的结合也有功能性协同作用.
作者：鲁映青；于榕 刊期： 2001年第04期
脂布福吉宁是从传统中药蟾酥中分离的单一化合物.长期以来，蟾酥制品广泛应用于中国、日本及亚洲其他国家.但是，近来在美国出现一些有关蟾酥及其药物制剂引起中毒的报告.如洋地黄一样，脂布福吉宁也具有药理和毒理作用.根据我们的实验结果，高浓度脂布福吉宁，蟾酥的主要成分之一，可以引起离体心肌细胞和在体心脏的延时性后去极化及触发性心律失常.本文对引起毒性的可能机制及治疗心律失常的可能性也进行了讨论.
作者：解景田；Lucy DEY；吴吉安；Tasha K LOWELL；袁钧苏 刊期： 2001年第04期
