目的:观察褪黑激素对β-淀粉样多肽25-35片段(Aβ25-35)所致神经细胞毒性作用的影响.方法:用相衬倒置显微镜观察原代培养的神经细胞的形态;用噻唑兰(MTT)法、乳酸脱氢酶(LDH)测定及台盼兰染色观察神经细胞的存活情况.结果:Aβ25-35(20 μmol/L)可引起培养的神经细胞数量减少,部分突起消失;台盼兰着色细胞数增加;神经细胞增殖能力降低;培养上清液中LDH释放量增加;褪黑激素(1,10μmol/L)可抑制Aβ25-35诱导的上述毒性损伤.结论:Aβ25-35对原代培养的皮质-海马神经细胞有直接的细胞毒作用,褪黑激素对Aβ25-35所致神经细胞毒性损伤具有剂量依赖性的防护作用.
作者：沈玉先；魏伟；徐叔云 刊期： 2002年第01期
目的:研究罗哌卡因(Rop)对豚鼠心室肌细胞钠电流(INa)、L型钙电流(ICa-L)、内向整流钾电流(IKl)及延迟整流钾电流(IK)的影响.方法:全细胞膜片箝技术.结果:罗哌卡因10,50与100 μmol/L使INa的峰电流分别减小8.3%、33.3%和62.5%(P<0.01),使失活时间常数分别延长8.2%、24.7%和64.4%(P<0.05);罗哌卡因50与100μnol/L使Ica-I的峰电流分别减小7.6%和22.5%(P<0.05),使慢失活时间常数分别延长15.5%和33.0%(P<0.01);罗哌卡因50与100 umol/L对Kl和IK的峰电流无明显影响.结论:罗哌卡因抑制INa和ICa-L,可能与其心脏毒性作用有关.
作者：丁海雷；曾因明；李晓东；蒋文平；段世明 刊期： 2002年第01期
目的:研究大鼠肝中去甲肾上腺素、加压素、ATP的生理浓度.方法:肝细胞通过胶原水解酶灌流肝脏得到.分离的肝细胞加载钙离子荧光指示探针Fura-2,通过显微荧光术测量胞内钙浓度的变化,以荧光比例(F340/F3ao)表示,分别检测不同浓度范围的去甲肾上腺素、加压素、ATP对单个肝细胞胞浆钙离子浓度升高的作用.结果:去甲肾上腺素、加压素、ATP以剂量依赖的方式诱导胞内钙离子浓度的增加.较低浓度刺激,胞内钙浓度呈振荡性增加;随着刺激物浓度的增加,更多的细胞胞内钙离子浓度呈现缓慢或高台样增加.去甲肾上腺素、加压素、ATP诱发钙振荡的佳浓度分别是100-500nmol/L、50-100 pmol/L和 <1μmol/L.结论:在大鼠肝脏中,去甲肾上腺素、加压素、ATP的生理性浓度分别在100-500nmol/L、50-100pmoL/L和lμmol/L范围.
作者：崔宗杰；郭丽丽 刊期： 2002年第01期
目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)对肿瘤坏死因子(TNF-ot)和过氧化氢(H2O2)诱导牛主动脉内皮细胞(BAEC)凋亡的影响及信号机制.方法:BAEC培养并传代于DMEM.经TNF-a或H2O2处理24 h后,Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察形态学变化及凋亡细胞计数.MTT法测定细胞活性,琼脂糖凝胶电泳分析DNA降解,Western blot法检测磷酸化p38和p42/p44 CCDPK表达.结果:TNF-α5000 kU/L和H2O2 300 tμmol/L均可诱导BAEC产生DNA断片.VEGF 100μg/L显著增强TNF-a和H2O2诱导的磷酸化p42/p44 CCDPK表达,而明显抑制磷酸化p38 CCDPK的活化.对二者所致BAEC凋亡起明显的抑制作用.P42/p44 CCDPK抑制剂U0126可取消VEGF引起的磷酸化p42/p44 CCDPK表达上调和其抗凋亡作用.结论:VEGF通过其共调节作用激活p42/p44 CCDPK,抑制p38 CCDPK信号途径而对TNF-α和H2O2所致凋亡产生的抑制效应,是内皮细胞存活的重要机制.
作者：刘文兰；郭迅；陈清泉；郭兆贵 刊期： 2002年第01期
目的:研究血红素氧合酶-1(HO-1)是否参与单磷酰酯A诱导的心脏延迟保护作用.方法:在体大鼠心脏缺血-再灌损伤模型,缺血前24小时应用单磷酰酯A(500μμg/kg,ip)诱导心脏延迟保护,观察单磷酰酯A对心肌梗死面积、肌酸激酶(CK)活性以及血清一氧化氮(NO)浓度的影响,并检测心脏HO-1mRNA和蛋白的表达.结果:单磷酰酯A明显缩小心梗面积,减少CK释放以及显著升高血清NO浓度(P<0.01).这些作用可被预先给予一氧化氮合酶抑制剂L-亚硝基精氨酸甲酯(L-NAME,10 mg/kg,ip)和血红素氧合酶抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPP-9,45μmol/kg,ip)所取消(P<0.01);单磷酰酯A明显增加心脏HO-1 mRNA和蛋白的表达,这一作用不被L-NAME所影响(P＞0.05).结论:HO-l/NO途径介导单磷酰酯A诱导的延迟心脏保护.
作者：鲁蓉；彭军；叶峰；邓汉武；李元建 刊期： 2002年第01期
AIM: To study the anti-nociceptive effect of domperidone and cisapride in mice. METHODS: Initially, the effect of these drugs on motor activity was tested using rotarod. The anti-nociception was tested using chemical and mechanical assay. In the chemical assay, the number of abdominal constrictions either in the saline treated animals or in the domperidone/cisapride (1, 5, or 10 mg/kg either po or ip) treated mice, were recorded for a period of 30 main after acetic acid challenge (10mL/kg, of 0.6 % acetic acid ip). In the tail clip assay, the time taken by the mouse to make attempts to dislodge the bulldog clamp placed at the tail (reaction time) was recorded with a cut off time of 30 s. The role of opioid pathways was examined by pretreating the animals with naloxone (1 mg/kg, ip) 30 min prior to domperidone and cisapride. RESULTS: Domperidone and cisapride, both reduced the number of abdominal constrictions when given orally or intraperitoneally.Domperidone (5 mg/kg) inhibited it to the extent of 57.0 % after po and 54.6 % after ip. The inhibition after cisapride ( 5 mg/kg ) was 65.1% ( po ) and 71.6 % (ip). Naloxone pretreatnent reduced this inhibition (57.0 % vs 10.3 % for domperidone and induced hyperalgesia by antagonizing the inhibition and enhanced analgesia to the extent of 28.4 % for cisapride ). The reaction time was increased by domperiidone (10 mg/kg, ip) from 1.6 s±l.0 s to 14.8s ±0.5 s and cisapride (10 mg/kg, ip) from 3.3 s ± 1.0s to 14.8 s ± 0.5 s. CONCLUSION: Domperidone and cisapride exhibited a significant anti-nocicepfve activity after oral as well as intraperitoneal administration.A role for opioid pathways is indicated. Since domperidone is likely to exert less extrapyramidal effects,it can be substituted for metoclopramide, which is now widely used as an analgesic either alone or as an adjuvant.
作者： 刊期： 2002年第01期
目的:探讨三种生物黄酮类化合物在棉酚诱发低血钾中的作用.方法:从豚鼠肾脏制备11β-羟甾脱氢酶,NAD为辅酶,加入待测化合物,37℃反应一小时后提取甾体,反相高压液相测定酶活性,热辐射图像法分析药物相互作用.结果:所试生物黄酮类化合物均能抑制11β-羟甾脱氢酶,其IC5o(95%可信限)分别为:槲皮素164(79-341)μmoL/L,桑色素913(385-2173)μmol/L,柑桔素2193(1114-4315)gmoL/L.当11β-羟甾脱氢酶分别用槲皮素,红桔素,桑色素,柑桔素加上棉酚处理时,其CI值分别为:0.92、0.85、0.98和1.01.结论:三种生物黄酮类化合物与棉酚在抑制11β-羟甾脱氢酶中具有协同或相加作用.
作者：王茂山；史红；王恪申；Marcus M REIDENBERG 刊期： 2002年第01期
目的:分离和鉴定健康志愿者口服盐酸小檗碱后尿中的未知代谢产物.方法:用大孔树酯柱层析方法分离和纯化代谢产物,电喷雾-离子化质谱(ESI-MS)及1H核磁共振(1H NMR)进行结构分析.结果:三个未知代谢产物(M1,M2和M3)被分离纯化,它们均对芳基硫酸酯酶敏感.电喷雾质谱中分别可见准分子离子峰[M+H]+417.9,404.0和402.0,以及脱SO3片段的特征离子峰[M-80+H]+.测得各自的1H NMR谱,参考盐酸小檗碱的质子信号,确定了M1,M2和M3的质子信号归所及取代基的位置.结论:M1,M2和M3的结构可分别推定为药根碱-3-硫酸酯(M1)、脱亚甲基小檗碱-2-硫酸酯(M2)和Thalifendine-l0-硫酸酯(M3).其中M2为主要代谢产物.
作者：潘俊芳；余琛；朱大元；张慧；曾佳烽；蒋山好；任建英 刊期： 2002年第01期
目的:从受体和受体后水平探讨内毒素诱导的生长激素(GH)不敏感的发生机制.方法:采用SD大鼠,静脉和皮下分别或同时注射LPS和GH.用逆转录聚合酶链反应测定肝组织胰岛素样生长因子-I(IGF-I),生长激素受体(GHR)和细胞因子信号传导抑制子-3(SOCS-3)mRNA的表达;用放免法测定血清GH水平;用酶联免疫吸附测定法测定血清肿瘤坏死因子a(TNF-o)和白介素-6(IL-6)水平.结果:注射LPS后血清GH水平与对照组均无明显差异,但肝组织IGF-I和GHR mRNA的表达明显下调;正常鼠肝组织SOCS-3 mRNA微弱表达,注射LPS后显著上调.LPS刺激TNF-α和IL-6的释放,IL-6升高的水平与SOCS-3 mRNA表达的上调成高度正相关.对照组大鼠注射外源性GH后肝组织IGF-I mRNA的表达明显上调,但它不能阻止内毒素血症鼠IGF-I mRNA表达的下降.两种剂量的LPS(7.5 mg/kg和5.0 mg/kg)注射产生同样的IGF-I mRNA下调水平,但大剂量LPS注射诱导更多的GHR mRNA的表达下调和SOCS-3 mRNA的表达上调.结论:内毒素诱导的生长激素不敏感的机制在受体水平与GHR mRNA的表达下调有关,在受体后水平与SOCS-3 mRNA的表达上调有关.受体后水平的抑制与IL-6分泌的增加密切相关.
作者：王平；李宁；黎介寿 刊期： 2002年第01期
目的:研究和阐明中枢组胺对前脑基底核破坏所致大鼠记忆障碍的作用机制.方法:采用被动回避反应研究大鼠的学习记忆过程.结果:侧脑室内注射组胺(500 ng)、腹腔内注射组胺酸(1500 mg/kg)或他克林(3,5 mg/kg)均可对抗前脑基底核破坏所致的记忆障碍.选择性H1受体拮抗剂吡拉明(2,5mg/kg)可剂量依赖性地抑制组胺的作用,相反,H2受体拮抗剂卓兰替丁没有明显的作用.结论:中枢组胺可以明显改善前脑基底核破坏所致大鼠记忆障碍,其作用主要与H1受体与胆碱能神经相关.
作者：陈忠；沈颖婕 刊期： 2002年第01期
目的:比较浸透限制固定相高效液相色谱法(RAM-HPLC)与荧光偏振免疫法(FPIA)测定人血中的卡马西平(CBZ)浓度.方法:建立一种直接进样RAM-HPLC法测定病人静脉和指端血浆的CBZ浓度.结果:两种测定方法都不需样品前处理,有好的重现性和近100%的回收率.FPIA测定静脉血样CBZ的结果与RAM-HPLC分别测定静脉和指端血样CBZ的结果有良好的相关性(R=0.989,0.995),但相差显著(P<0.05);而RAM-HPIC法测定静脉和指端血样两组数据间相差不显著(P＞0.05).结论:RAM-HPLC和FPIA法均可测定CBZ浓度.在治疗药物监测中,FPIA更适合常规的监测;RAM-HPLC法更适用于相关研究和特殊病例监测,这里我们成功地应用于测定人外周微量血样中CBZ的浓度.
作者：马骏；朱彭龄；谢景文；贾正平；杨金升 刊期： 2002年第01期
目的:研究反式曲马朵及其活性代谢物反式氧去甲基曲马朵肾脏清除的立体选择性.方法:取雄性SD大鼠的右肾,分别以含反式曲马朵(300 μg/L)或反式氧去甲基曲马朵(50 μg/L)的灌流液(100 mL)进行灌流;利用高效毛细管电泳法测定灌流后灌流液、尿液中反式曲马朵及反式氧去甲基曲马朵对映体的浓度,并计算对映体浓度比值.结果:以反式曲马朵进行离体肾灌流后,在灌流液中,(+)-反式曲马朵的浓度高于(-)-反式曲马朵的浓度,(+)-反式氧去甲基曲马朵的浓度低于(-)-反式氧去甲基曲马朵的浓度;在尿液中,(+)-反式曲马朵较(-)-反式曲马朵多,(+)-反式氧去甲基曲马朵较(-)-反式氧去甲基曲马朵少.以反式氧去甲基曲马朵灌流后,在灌流液中(+)-反式氧去甲基曲马朵的浓度低于(-)-反式氧去甲基曲马朵的浓度;在尿液中(+)-反式氧去甲基曲马朵较(-)-反式氧去甲基曲马朵高.结论:反式曲马朵及反式氧去甲基曲马朵的肾脏清除具有立体选择性.在肾脏中反式曲马朵的氧去甲基代谢具有立体选择性,以(-)-反式曲马朵优先代谢成(-)-反式氧去甲基曲马朵.反式氧去甲基曲马朵的尿排泄具有立体选择性,以(+)-反式氧去甲基曲马朵占优.
作者：刘会臣；张熙洁；杨燕燕；王娜；侯艳宁 刊期： 2002年第01期
目的:研究腺相关病毒载体介导的人红细胞生成素在293细胞的体外表达.方法:将人红细胞生成素cDNA克隆至AAV表达载体,采用无辅助病毒共转染法生产重组AAV-EPO病毒,利用RT-PCR和ELISA法检测hEpo的体外表达.结果:成功构建和生产了表达hEpo的重组AAV-EPO病毒.重组AAV-EPO病毒感染293细胞后,RT-PCR结果显示有hEpo基因表达,细胞上清中hEpo的表达水平达500U/L.结论:所制备的重组AAV-EPO病毒可以有效表达hEpo,可以进一步用于动物体内实验.
作者：刁勇；许瑞安；王广基；赵小晨 刊期： 2002年第01期
目的:以血浆3,4-二羟苯乙醇(DHPG)和3,4-二羟苯乙酸(DOMA)的变化为判断指标,研究去甲肾上腺素(NE)在神经元内的代谢.方法:大鼠去脊髓并给予2.5 Hz电刺激合并静脉内输入NE(6 nmol@kg-1@min-1).同位素酶标法测定血浆DHPG和DOMA浓度.结果:当静脉内输入NE使血浆NE浓度增加了100倍时,血浆DHPG和DOMA分别增加了12倍和1.2倍.地昔帕明(2 mg/kg iv)使血浆DHPG浓度降低为对照组的25%,而DOMA无明显变化.MAO-A抑制剂氯吉林使血浆DHPG和DOMA浓度分别降低为对照组的15%和70%,MAO-B抑制剂司立吉林使二者的血浆浓度分别降低为对照组的26%和76%.氯吉林与司立吉林合用使血浆DHPG几乎完全消失,而DOMA无明显变化.结论:去甲肾上腺素被突触前膜摄取后,经线粒体外膜上的MAO氧化脱胺,还原产生DHPG为其主要代谢途径.
作者：董文心；倪湘莲 刊期： 2002年第01期
目的:研究吗啡、内吗啡肽-1和内吗啡肽-2对由苯肾上腺素(PE)和血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导离体大鼠胸主动脉环收缩的抑制作用.方法:离体血管环张力试验.结果:与对照组相比,吗啡、内吗啡肽-1和内吗啡肽-2的预处理(0.1-10μmol/L)能明显降低由PE(0.1μmol/L)和AngⅡ(1μμmol/L)(P<0.01)诱导离体大鼠胸主动脉环的张力,但是不能减少去内皮血管的张力.纳络酮(1μμmol/L)能部分阻断内吗啡肽-l和内吗啡肽-2的抑制作用(P<0.01),Nω_niu-o_L-arginine(10μmol/L)或血管环去内皮能完全阻断这种作用(P<0.01).结论:内吗啡肽-l和内吗啡肽-2通过纳络酮敏感方式抑制由PE和AngⅡ诱导的离体大鼠胸主动脉环收缩,这种抑制作用可能与血管内皮NO的释放有关.
作者：祁元明；杨顶建；段昕；杨帆；李世荣；沈剑敏；王锐 刊期： 2002年第01期
