目的 研究广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株对新型氟喹诺酮类药物的耐药特征以及氟喹诺酮类药物耐药相关基因突变的特点. 方法 选取2012年4月至2014年4月在北京胸科医院住院治疗的84例广泛耐药结核病患者的临床分离菌株,应用微孔板阿尔玛蓝显色法(micro-plate alamar blue assay,MABA) 检测菌株对左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星的小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),所有菌株都进行了gyrA基因和gyrB基因的耐药决定区(QRDR)的序列测定. 结果 84株广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株经MABA 检测,分别以1 μg/ml、2 μg/ml、1 μg/ml作为耐药判读标准,左氧氟沙星、莫西沙星、加替沙星3种氟喹诺酮类药物的耐药率分别是88.1%(74/84)、44.0%(37/84)、61.9%(52/84).89.3%(75/84)的临床分离株发生了gyrA 基因耐药决定区突变,其中以第94位点突变为常见,Asp94Gly突变菌株的MIC值较高,而所有菌株的gyrB基因均为野生型. 结论 广泛耐药结核分枝杆菌对新型氟喹诺酮类药物耐药形势严峻,耐药基因突变形式以gyrA基因突变为主,第94位点的Asp94Gly突变可能和高水平耐药有关.
作者：宗兆婧；荆玮；霍凤敏；董玲玲；马异峰；逄宇；黄海荣 刊期： 2017年第08期
目的 评估GeneXpert MTB/RIF检测方法对结核分枝杆菌(MTB)及其利福平耐药性检测的准确性和可行性.方法 于2012年11月至2015年11月,收集来自河南省南阳市第六人民医院和辖区11个县(区)结核病防治机构的1154例疑似肺结核患者的痰标本.患者痰标本均于河南省南阳市第六人民医院分别进行涂片镜检、固体培养、比例法药敏试验和GeneXpert MTB/RIF检测,分析比较GeneXpert MTB/RIF方法与传统方法检测MTB及利福平耐药性的检测效能.结果 以固体培养结果为金标准,GeneXpert MTB/RIF方法检测MTB的敏感度和特异度分别为90.0% (522/580)和89.5% (418/467);以传统比例法药敏试验结果为金标准,GeneXpert MTB/RIF方法检测MTB利福平耐药的敏感度和特异度分别为87.7% (64/73)和96.6% (460/476).结论 GeneXpert MTB/RIF检测MTB有较高的敏感度和特异度,在肺结核快速早期诊断及利福平耐药性检测方面有较好的应用前景.
作者：牛海军；王歌；李明虎 刊期： 2017年第08期
目的 讨肺结核患者血清25-羟基维生素D[25-(OH)D]与血清T淋巴细胞亚群水平的变化及临床意义.方法 2012年2 月至2014年5月收集上海市徐汇区中心医院结核病防治门诊诊治的386例肺结核患者作为肺结核组;选取同期在医院进行健康体检的647名健康人群作为健康对照组.肺结核组中所有患者均进行了规范的抗结核药物治疗,采用数字表法随机选取 44例患者在抗结核药物治疗基础上增加维生素D治疗,作为治疗组;选取45例患者不增加维生素D治疗,作为治疗对照组.采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定研究对象血清25-(OH)D2、25-(OH)D3和T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+绝对值水平,比较肺结核组与健康对照组,以及维生素D治疗组和治疗对照组上述指标的变化情况.结果 结核组患者25-(OH)D、25-(OH)D2、25-(OH)D3水平分别为31.3(22.5~41.5)、0.3(0.0~1.5)、31.9(22.3~41.1) nmol/L,明显低于健康对照组的42.0(34.3~51.5)、2.0(1.5~3.6)、40.1(31.9~49.5) nmol/L,差异有统计学意义(Z值分别为12.19、16.42、9.89,P值均<0.01);肺结核组CD3+、CD4+、CD8+绝对值水平分别为968.0(800.0~1164.0)、524.0(460.0~656.0)、394.0(288.0~512.0)个/μl,明显低于健康对照组的1324.0(1116.0~1568.0)、708.0(568.0~864.0)、524.0(412.0~652.0)个/μl,差异均有统计学意义(Z值分别为15.68、13.30、12.15,P值均<0.01).肺结核维生素D治疗组25-(OH)D3、25-(OH)D以及CD3+绝对值水平在治疗6个月分别为39.3(31.7~54.5) nmol/L、46.5(36.0~57.5) nmol/L、1268.0(1012.0~1448.0)个/μl,高于治疗对照组同期水平[39.3(34.3~45.8) nmol/L、38.0(33.8~44.8) nmol/L、1008.0(752.0~1212.0)个/μl],差异有统计学意义(Z值分别为2.57、1.45、2.41,P值分别为0.012、0.150、0.018).结论 结核患者血清25-(OH)D及外周血T淋巴细胞亚群水平低下,纠正维生素D的缺乏或不足可改善患者的细胞免疫功能.
作者：周颖；董伟毅；倪佩青；钟慧君；俞萍 刊期： 2017年第08期
目的 对结核分枝杆菌相对分子质量为38 000(以下采用38 kD表示)、线粒体通透性转换蛋白64 (mitochondrial permeability transition 64,MPT-64)和肝素结合血凝素(heparin-binding haemagglutinin,HBHA)蛋白在外周血中抗体的表达水平进行检测和比较,并对它们在结核病血清学方面的诊断价值进行评估.方法 选取2012年7月至2013年10月北京胸科医院收治的肺结核患者作为活动性肺结核(ATB)组,共78例;选取同期36例潜伏结核感染(LTBI)患者作为LTBI组;同期在北京胸科医院进行体检的31名健康人群(HC)作为HC组.将本实验室前期纯化的38 kD、MPT64和HBHA作为抗原应用于免疫学的检测,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中三种蛋白抗体的表达水平,经过统计学处理后,分别比较ATB、LTBI和HC三组之间的差异,并结合受试者工作特征曲线计算各蛋白抗原的敏感度和特异度,评价三种蛋白血清抗体的临床诊断价值.结果 ELISA检测ATB组38 kD蛋白抗体的吸光度(A)450 nm处的A值(0.343±0.120)高于LTBI组(0.221±0.102)和HC组(0.143±0.097),差异有统计学意义(t=3.07, P<0.05);MPT64抗体的A450值(0.234±0.102)高于LTBI组(0.198±0.087)和HC组(0.123±0.075),差异有统计学意义(t=3.79, P<0.05);HBHA抗体的A450值(0.263±0.113)高于LTBI组(0.188±0.091)和HC组(0.148±0.078),差异有统计学意义(t=2.70, P<0.05).以38 kD、MPT64和HBHA蛋白抗体表达水平从LTBI组鉴别ATB组时的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.78、0.61和0.62,敏感度分别为71.79%、62.82%和52.56%,特异度为72.22%、58.33%和69.44%;从HC组鉴别ATB组时的AUC分别为0.91、0.81和0.79,敏感度分别为87.17%、69.23%和73.08%,特异度为80.65%、74.19%和74.19%;从HC组鉴别LTBI组AUC分别为0.63、0.75和0.69,敏感度分别为58.33%、77.78%和63.89%,特异度为64.52%、51.61%和74.19%.结论 MTB 38 kD、MPT64和HBHA蛋白都有较好的免疫反应性,3种蛋白抗体在不同患者人群血清中的表达水平有差异,对肺结核诊断价值的评估结果表明采用ELISA对外周血中MTB蛋白抗体进行检测可作为结核病临床检测诊断的辅助方法.
作者：刘毅；张旭霞；张雨晴；李传友 刊期： 2017年第08期
目的 讨老年结核性脑膜炎(TBM)临床特征.方法 集2011年1月至2017年1月在首都医科大学附属北京胸科医院住院的44例老年TBM患者(年龄>65岁),对其临床资料进行回顾性分析.结果 4例患者中,男22例,女22例;中位年龄72.5岁.根据结核性脑膜炎临床诊断标准,确诊TBM 3例、可能TBM 41例.发病中位时间20 d,63.6% (28/44)患者就诊时为TBM Ⅱ、Ⅲ期.临床表现以发热(40/44,90.9%)、头痛(27/44,61.4%)、消瘦(23/44,52.3%)、意识障碍(16/44,36.4%)、呕吐(16/44,36.4%)、脑膜刺激征(15/44,34.1%)为主.仅7例(7/44,15.9%)患者颅内压>200 mm H2O(1 mm H2O=0.009 78 kPa).44例患者脑脊液白细胞均增高,以单核细胞为主;蛋白增高均较为明显,但糖及氯化物降低不明显.32.6%(14/43)患者腺苷脱氨酶>10 U/L.26例患者行头颅MRI增强检查,88.5%(23/26)有TBM征象,主要以结核结节与结核瘤常见,其次为基底池、侧裂池、软脑膜增厚.8例患者行头颅CT增强扫描,均无明确的TBM征象发现.67.6%(23/34)患者并发脑梗塞.所有患者均并发颅外结核,以血行播散性肺结核(23例)、继发性肺结核(15例)、结核性胸膜炎(8例)、胸椎结核(6例)常见.36例患者并发其他慢性疾病.26例初诊时被误诊为其他疾病,误诊率达59.1%(26/44).2例患者未接受抗结核治疗.42例患者接受抗结核药物治疗,其中30例(30/42,71.4%)患者好转;5例(5/42,11.9%)患者死亡,5例(5/42,11.9%)患者放弃继续治疗,2例(2/42,4.8%)患者治疗后无好转.结论 年TBM患者多表现为亚急性、慢性病程,并发颅外结核病及慢性病多见,临床表现多样化,脑脊液实验室检查不典型,头颅影像学检查无特异性,误诊率高,预后差.
作者：黄麦玲；马艳；陈红梅；刘荣梅；宋艳华；谢莉；吴晓光；马丽萍；高孟秋；李琦 刊期： 2017年第08期
目的 究氯法齐明在正常大鼠体内的药物代谢动力学及组织分布特征.方法 将平均体质量(200±20) g的Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠按随机数字表法分成8组,每组5只.分为单次给药实验组包括空白对照组(BL)、空腹实验组(KF)、普通饮食组(NM)、高脂饮食组(HM)、低剂量组(NL)、高剂量组(NH)、中剂量组(即普通饮食组NM);多次给药实验组包括空白对照组(D0)和多次给药组(D1).单次给药实验组中低、高剂量组给药剂量分别为2.1 mg/d、12.6 mg/d,其他组均为中剂量6.3 mg/d;多次给药组剂量为2.1 mg/d.空白对照组(BL组和D0组)均以油溶剂代替药物溶液.给药后不同时间点取血及组织样本,应用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定氯法齐明在大鼠血浆和组织液中的药物浓度,并计算药物代谢动力学参数血药浓度-时间曲线下面积(AUC) 、峰浓度(Cmax) 、达峰时间(Tmax) 和半衰期(T1/2).结果 氯法齐明单次给药后,Cmax值HM组为(1348.05±208.46) ng/ml,明显高于NM组[(719.33±123.70) ng/ml;t=5.77,P<0.01]和KF组[(557.73±85.11) ng/ml;t=2.41,P<0.01];Tmax值HM组为(3.84±0.66) h,明显少于NM组[(6.34±1.78) h;t=2.95,P=0.032],NM组明显少于KF组[(17.64±4.11) h;t=6.86,P=0.001].NL、NM、NH组的Cmax和AUC0~31 d分别为(321.51±91.86) ng/ml、(719.33±123.70) ng/ml、(1637.23±148.35) ng/ml和(1517.63±386.34) ng·d-1·ml-1、(3479.97±1013.54) ng·d-1·ml-1、(6485.15±1249.98) ng·d-1·ml-1,均与剂量的增加呈线性增加关系[Cmax (r2=0.9981)、AUC(r2=0.9998)].D1组连续给药约15 d后药物浓度开始维持稳定在1.1 μg/ml左右,28 d 后各组织(脂肪、脾、肺、肾)中的药物浓度分别为(5528.11±106.34) ng/g、(3514.24±45.96) ng/g、(3199.45±155.64) ng/g、(2384.14±55.16) ng/g,均明显高于血浆中药物浓度[(1141.81±50.75) ng/ml;t值分别为-83.24、-77.48、-37.06、-28.11,P值均<0.01].且各组脂肪组织中药物浓度明显高于其他组织.大鼠经解剖后可见体内脂肪组织均出现黄染,黄染强度依次为D1>NH>NL,肺和脾可见轻微增大.结论 单次给药氯法齐明的药物代谢动力学特征受食物中高脂肪成分及剂量影响较大,多次给药药物浓度在血浆和组织中的分布不均具有独特性,连续给药约15 d后血浆药物浓度维持稳定低值,但组织中药物浓度继续增加.
作者：付寒；杨春燕；王俊；张小平；杨应周 刊期： 2017年第08期
目的 分离体外培养的结核分枝杆菌分泌的膜囊泡,检测其形态和粒径分布,初步探索结核分枝杆菌膜囊泡对巨噬细胞中细胞因子释放的作用.方法 采用结核分枝杆菌实验室标准菌株H37Rv,通过7H9培养基复苏、扩大培养标准株H37Rv至对数生长期,菌体全部接种于苏通培养基中继续培养3周,离心取上清,超滤浓缩结合超速离心分离提取结核分枝杆菌H37Rv膜囊泡,通过透射电镜观察膜囊泡的大小、形态,采用纳米颗粒跟踪仪分析膜囊泡的粒径及分布.同时,设置不处理对照组、H37Rv感染组[按照感染复数(multiplicity of infection,MOI)=20∶1]和H37Rv膜囊泡处理组(按照膜囊泡∶细胞=100∶1)处理佛波酯(50 ng/ml)诱导贴壁的单核巨噬细胞(THP-1)4 h,更换新鲜培养基后0 h、4 h、8 h、24 h收集细胞培养上清,采用Milliplex多细胞因子检测试剂盒检测细胞因子的释放情况,通过曼-惠特尼U(Mann-Whitney U)检验对各时间点H37Rv膜囊泡处理组和不处理对照组之间肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)释放量进行比较,以P<0.05为差异有统计学意义. 结果 按照调整后的提取方法得到的提取物中可检测到H37Rv分泌的膜囊泡,平均粒径为137 nm,主要分布在30~510 nm之间,<250 nm的膜囊泡数量占总量的96.88%.4 h、8 h和24 h 的TNF-α、IL-6和IL-1β释放量与不处理对照组[分别为348.19(333.99,360.47) pg/ml、412.38(406.67,418.79) pg/ml、324.44(316.11,331.14) pg/ml;3.01(2.81,3.02) pg/ml、5.40(5.26,5.83) pg/ml、13.22(11.80,13.77) pg/ml;118.92(113.97,122.47) pg/ml、132.33(125.87,137.62) pg/ml、169.31(167.75,172.49) pg/ml]相比,H37Rv膜囊泡处理组[分别为507.33(501.80,513.84) pg/ml、4483.00(4130.75,4522.50) pg/ml、8170.00(8058.25,8206.75) pg/ml;12.88(12.04,13.84) pg/ml、68.51(66.88,69.77) pg/ml、335.44(331.02,340.64) pg/ml;800.57(791.18,809.60) pg/ml、1559.00(1546.00,1566.00) pg/ml、4316.50(4094.75,4389.75) pg/ml]均明显增加,差异均有统计学意义(U值均<0.001,P值均<0.01);但4 h、8 h和24 h的IL-10释放量[不处理对照组分别为1.23(1.21,1.31) pg/ml、1.56(1.31,1.82) pg/ml、5.41(4.99,5.89) pg/ml;H37Rv膜囊泡处理组分别为4.56(4.49,4.82) pg/ml、1.43(1.28,1.89) pg/ml、1.56(1.48,1.68) pg/ml]差异均无统计学意义(U值分别为6.00、17.00、7.00,P值分别为0.065、0.898和0.087). 结论 本研究建立了结核分枝杆菌膜囊泡分离提取的技术流程,可以得到纯度较好、形态完整、粒径正常的膜囊泡.同时,结核分枝杆菌膜囊泡可以诱发巨噬细胞中细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的释放.
作者：吕翎娜；贾红彦；廖莎；武剑楠；孙照刚；张宗德 刊期： 2017年第08期
目的 讨脊柱结核的非手术治疗临床管理路径的可行性及有效性.方法 将山东省胸科医院2010年1月至2015年6月符合入组条件的102例脊柱结核患者,全部纳入非手术治疗临床管理路径的研究.分时段观察记录患者的疼痛视觉模拟评分(VAS)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)的变化情况,影像学评估骨融合及骨桥形成情况,记录并发症的发生情况.分时段评估患者的心理状态并给予一对一的心理疏导,评估患者的营养状态并给予营养支持疗法.依据评估结果制定个体化治疗措施并进行严格随访.结果 4例非手术治疗失败转为手术治疗,98例(96.1%)至疗程结束评估结果符合临床停药标准,其中3例遗留小的脓肿.37例(36.3%)出现胃肠道不良反应,经保护胃黏膜等处理后症状逐渐消失;23例(22.5%)化疗过程中出现肝功能损伤,其中6例需停药,5例视物模糊,停用乙胺丁醇后逐渐恢复.完成治疗的98例患者入院时VAS、ESR、CRP分别为(6±2)分、(43±20) mm/1 h、(21±10) mg/L,抗结核药物治疗1个月时降为(4±2)分、(32±11) mm/1 h、(12±8) mg/L,3个月时降为(2±1)分、(15±7) mm/1 h、(6±2) mg/L,其中CRP下降的速率高于ESR.治疗后6、9、12个月对患者进行影像学复查,显示骨融合及骨桥形成者分别为37例(37.8%)、72例(73.5%)、89例(90.8%).入院时心理状态评估焦虑、抑郁、愤怒、孤独总分高达(104.1±10.8)分,1个月时降为(69.0±10.5)分,3个月时降为(52.6±8.1)分,至6个月时降为(32.8±6.9)分,接近正常人.入院时营养状态评估总分≥3分者53例,治疗后1、3、6、12、18个月分别为38例、19例、10例、3例、1例.这些数据提示患者心理状态与营养状态的改善需要较长的时间.结论 在全方面评估、个体化抗结核药物治疗联合辅助措施的临床管理路径指导下,对脊柱结核患者有选择地进行非手术治疗是有效可行的.
作者：郝蓉美；王传庆；侯代伦；魏传付；张强；李敬朝 刊期： 2017年第08期
目的 评估γ干扰素释放试验(IGRA)检测颈部淋巴结细胞悬液对颈部淋巴结核的辅助诊断价值.方法 将2015年1月至2016年5月在新疆维吾尔自治区人民医院收治的48例颈部淋巴结肿大患者采用复合诊断标准分为颈部淋巴结结核组(21例),非颈部淋巴结结核组(27例),对48例患者的外周血和颈部淋巴结细胞悬液进行γ干扰素释放试验检测,运用SPSS 19.0软件进行数据分析,两组间斑点形成细胞(SFCs)个数的比较采用Mann-Whitney U检验,样本间率的比较采用χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 IGRA检测颈部淋巴结细胞悬液和外周血的敏感度分别为90.48%(19/21)、95.24%(20/21),差异无统计学意义(χ2=0.00,P>0.05),颈部淋巴结细胞悬液和外周血的特异度分别为70.37%(19/27)、92.59%(25/27),差异有统计学意义(χ2=4.43,P<0.05).颈部淋巴结结核组中IGRA检测外周血和颈部淋巴结细胞悬液的SFCs中位数及上下四分位数[M(Q1,Q3)]分别为109(52,186)个、68(30,156)个,不同标本间检测的SFCs中位数差异无统计学意义(U=175.00, P>0.05).非颈部淋巴结结核组中IGRA检测外周血和颈部淋巴结细胞悬液的SFCs M(Q1, Q3)分别为0(0,18)个、0(0,3) 个,不同标本间检测的SFCs中位数差异无统计学意义(U=271.00,P>0.05).颈部淋巴结结核组的淋巴结细胞悬液SFCs明显高于非颈部淋巴结结核组的淋巴结细胞悬液SFCs,差异有统计学意义(U=45.00,P<0.05).结论 γ干扰素释放试验检测颈部淋巴结细胞悬液具有可行性,对颈部淋巴结结核的辅助诊断有一定的价值.
作者：许辉；闫广鹏；马晶；夏志刚；唐晖；李军 刊期： 2017年第08期
目的 讨改良胸膜纤维板剥脱手术对老年结核性脓胸患者的治疗效果. 方法 集2014年3月至2015年6月在陕西省结核病防治院外科接受治疗,年龄≥65岁的85例结核性脓胸患者的临床资料,根据治疗方法分为传统手术组(40例)和改良手术组(45例),其中传统手术组采用常规手术方式进行治疗,改良手术组在常规手术方式的基础上于术中游离肺叶裂,扩大肺裂间隙.观察两组患者的手术情况,比较两组患者的治疗效果、炎症细胞因子[白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)]变化情况、肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)和第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)]恢复情况和并发症发生情况. 结果 良手术组的手术时间[(109.76±9.14) min]长于传统手术组[(82.93±8.04) min],住院时间[(14.42±2.42) d]短于传统手术组[(18.37±3.12) d],术中出血量[(235.85±18.22) ml]多于传统手术组[(172.46±15.37) ml],差异均有统计学意义(t值分别为-14.29、6.46、-17.22,P值均<0.01);改良手术组治疗6个月有效率(97.78%,44/45)明显高于传统手术组(82.50%,33/40),差异有统计学意义(χ2=5.80,P=0.016);治疗后,改良手术组患者的IL-12[(8.68±0.43) pg/ml]、TNF-α[(8.22±2.06) pg/ml]和CRP[(22.26±8.45) mg/L]水平均明显低于传统手术组患者[分别为(11.92±0.54) pg/ml、(14.25±2.25) pg/ml和(28.17±11.63) mg/L],差异均有统计学意义(t值分别为30.75、12.90、2.70,P值均<0.01);改良手术组患者的FVC[(2.32±0.65) L]、FEV1[(2.13±0.52) L]和FEV1/FVC[(48.26±8.26)%]水平均明显高于传统手术组[分别为(1.83±0.48) L、(1.68±0.34) L和(43.45±6.85)%](t值分别为-3.91、-4.66、-2.90,P值均<0.01);两组患者并发症(包括术后感染、结核播散和复发)发生率[分别为17.50%(7/40)、6.67%(3/45)]差异无统计学意义(χ2=2.39,P=0.122).结论 良胸膜纤维板剥脱术对老年结核性脓胸患者有较好的治疗效果,可明显改善患者的肺功能,具有临床应用价值.
作者：陈其亮；李军孝；许军利；崔渊博；王直 刊期： 2017年第08期
目的 建立结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系,评估该体系以临床分离株DNA和痰菌DNA为模板扩增耐药相关基因的成功率.方法 常规提取结核分枝杆菌临床分离株(47株)及涂阳肺结核患者(21例)痰菌DNA.根据目前研究已发现的结核分枝杆菌耐药相关基因合成引物,建立2个多重PCR体系以扩增目的基因.扩增片段经测序证实后,计算该体系用于两种样本的扩增成功率.结果 针对临床常用8种抗结核药物,选取结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA、embB、gyrA、rpsL、rrs、eis共8个耐药相关基因设计合成引物.建立2个多重PCR体系扩增8个耐药基因,该体系扩增47株结核分枝杆菌临床分离株DNA和21例菌阳肺结核患者痰菌DNA的成功率分别为100.0%(47/47)和76.2%(16/21).结论 本研究建立了高效扩增8个结核分枝杆菌耐药基因的多重PCR体系,结果对进一步研发结核病耐药分子诊断产品具有重要意义.
作者：李自慧；潘丽萍；孙琦；吕翎娜；杜博平；张洪静；孙照刚；张宗德 刊期： 2017年第08期
目的 通过构建花生四烯酸12-脂氧合酶(ALOX-12)基因(ALOX-12基因)启动子区域rs3840880位点不同基因型的双荧光素酶表达质粒,分析此单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)对ALOX-12基因启动子活性的影响及其对基因表达的影响,阐明功能性SNP调控结核病易感的分子机制.方法 从全血样本中提取人全基因组,PCR扩增ALOX-12基因启动子区域包含rs3840880位点在内的约1700 bp的基因片段,构建pGL3-Basic-rs3840880G质粒,对此质粒进行定点突变得到pGL3-Basic-rs3840880 D放散型(DEL)质粒,分别转染人宫颈癌细胞株Hela细胞后使用双荧光报告酶检测系统(dual luciferase assay system)检测相对荧光值.结果 成功构建了ALOX-12基因启动子区rs3840880位点等位基因G的表达质粒pGL3-basic-G,采用定点突变技术成功将pGL3-basic-G质粒改造为pGL3-Basic-DEL质粒,测序验证后,两质粒其他序列完全相同.分别将此两个质粒转染Hela细胞并检测相对荧光比值[荧光值(F)/荧光?]后,发现pGL3-Basic质粒F/R=0.129,等位基因G的F/R=0.194,低于等位基因DEL质粒的F/R(0.274),采用单因素方差分析,二者之间的差异有统计学意义(F=25.09,P=0.001).结论 不同等位基因构建的质粒转染细胞后,荧光报告基因的表达差异具有统计学意义,故ALOX-12基因启动子区域的功能性SNPs确实能够影响启动子的活性,从而调控结核病的易感性.
作者：朱秀云；汪文斐；张培泽；张洁云；邱智辉；王召钦；张明霞；邓国防 刊期： 2017年第08期
采用DNA测序技术对吉林省287株耐多药结核分枝杆菌进行KatG基因序列检测,以H37Rv标准株KatG基因DNA序列为参比序列,分析检测菌株KatG基因突变特征.结果显示,239株耐多药结核分枝杆菌KatG基因发生突变,突变率为83.28%(239/287);共涉及13个突变位点,常见点突变位点为KatG315,突变率为58.18%(167/287).
作者：杨修军；张炜煜；张立夫；李可维 刊期： 2017年第08期
搜集天津市海河医院2009-2014年收治的381例脊柱结核手术患者进行回顾性研究,男209例,女172例.其中 5例颈椎结核采用一期前路病灶清除+取髂骨植骨接骨板内固定术;143例胸椎结核一期或分期经肋横突关节病灶清除+后路椎弓根钉内固定术及人工骨植骨;7例胸椎结核经胸前路病灶清除取髂骨植骨+后路内固定术治疗;226例腰椎结核采用前路病灶清除、取髂骨植骨,一期或分期行后路椎弓根钉内固定术.统计术中及术后发生的与手术相关的并发症共57例,发生率为14.96%.381例患者术后随访1~2年,停药前均能做到每个月门诊就诊1次,有并发症患者就诊次数相对较多;切口延迟愈合虽然换药时间较长,但3~6个月内经过定期换药均愈合.通过术中规范操作,术后及时对并发症进行相应处理,对患者治疗的总体疗效较为满意,未对患者生活质量造成明显影响.
作者：张文龙；苗瑞瑞；鲍玉成；韩臣富；孙晓晨；唐亮；邱南海 刊期： 2017年第08期
科学防治结核病的重中之重是了解其分布特征和影响因素,通过掌握其传播规律、耐药机制及有效实施科学决策下的结核病控制策略和措施,从而达到控制结核病的目的.然而由于结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染、耐药产生等因素,传统的流行病学方法不能很好地揭示其传播流行规律.结核分子流行病学以基因分型技术为基础,将传统流行病学与新兴的生物技术相结合,从分子水平来阐明结核病的发生、发展、流行、耐药产生及传播规律.分子流行病学在结核病暴发流行的调查、近期传播的追踪、菌株多样性的研究、内源性复燃和外源性再感染的区分、耐药机制及传播等研究中的优势显著[1],为制订有效的结核病控制策略提供了理论基础.
作者：贺文从；刘东鑫；赵雁林 刊期： 2017年第08期
通过对可能影响γ干扰素释放试验(IGRA)的酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测结果的受试者、检测方法、环境设施和仪器等因素的风险识别与分析,提示ELISPOT检测试剂在临床结核病诊断应用中可能产生的风险,并提出相应的风险控制措施,以降低该类试剂的检测风险.
作者：杨蕾；卢锦标；都伟欣；王国治；陈保文 刊期： 2017年第08期
背景 糖尿病是发生结核病的一种众所周知的危险因素.糖尿病在中、低收入国家越来越普遍,同时这些国家也是结核病的高负担地区.2015年世界卫生组织提出了遏制结核病战略,认为糖尿病是结核病控制中的一个重要危险因素和并发症.有研究表明,血糖的控制可能会改变结核病发生的风险.可是,目前对血糖控制和发生结核病风险之间关系的研究较少,且结果并不一致.
作者：Lee PH；Fu H；Lai TC；刘一典 刊期： 2017年第08期
对MTB线粒体翻译控制(mitochondrial translation control,MTC) 蛋白MTC28基因进行克隆, 构建真核表达质粒并在昆虫细胞中表达MTC28蛋白.采用PCR技术从MTB H37Rv 标准株基因组中扩增MTC28基因片断,MTC28基因片断和质粒pFastbac1经EcoRI和XhoI双酶切,T4 DNH连接酶连接,构建重组质粒pFastbac1-MTC28,转染DH5α感受态细菌,在含有氨苄青霉素溶菌肉汤(lysogeny broth,LB)固体培养基中筛选阳性克隆,挑选生长的菌落进而在含有氨苄青霉素的液体LB培养基中进行细菌克隆.PCR鉴定目的基因插入质粒后,阳性克隆细菌进行质粒(pFastbac1-MTC28)的提取.pFastbac1-MTC28质粒转染DH10 Bac感受态细菌构建重组杆状质粒(Bacmid-MTC28),用含有庆大霉素、卡那霉素和四环素的液体LB培养基进行细菌克隆,采取蓝白斑技术筛选阳性菌落.PCR鉴定为阳性的细菌进行杆状重组质粒(Bacmid-MTC28)的提取.利用脂质介导的转染技术,将杆状重组质粒(Bacmid-MTC28)转染sf9昆虫细胞中,包装重组杆状病毒,并表达蛋白质.结果成功构建了MTC28真核表达质粒,建立了杆状病毒表达MTC28蛋白的表达体系,并表达MTC28蛋白,通过纯化获得了高纯度且均一化的MTC28蛋白.
作者：卓文基；刘志辉；周琳；陈燕梅；陈涛；孙琦；郭卉欣 刊期： 2017年第08期
