目的 建立测定人血桨中咪达普利拉浓度的固相萃取高效液相串联质谱电喷雾检测法(SPE-LC-ESI-MS/MS).方法 以美国Agilent Eclipse plus C18(4.6 mm × 150 mm,3.5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(含0.005 mol·L-1 甲酸铵,含0.1%甲酸)(87:13);流速:0.5 mL·min-1;柱温:40℃.样品用Agilent C8固相小柱净化.经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对咪达普利拉(m/z 378.2→206.2)和内标依那普利拉(m/z 349.1→206.1)进行测定.结果 咪达普利拉的高(20μg ·L-1)、中(1Oμg·L-1)、低((1 μg·L-1.)3个质量浓度的方法回收率分别为102.44%,102.46%和105.69%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的低定量限为0.5μg·L-1.线性范围为0.5-25 μg ·L-1,回归方程为y=0.480 7×+0.008 7 × 10-4,r=0.997 6(n=6).结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.
作者：邱畅；温预关；张明；倪晓佳 刊期： 2011年第18期
目的 利用大肠杆菌表达抗表皮生长因子受体(EGFR)的单链抗体并对其抗肿瘤活性进行研究.方法 构建含有抗EGFR单链抗体基因片段的重组质粒,IPTG诱导大肠杆菌表达单链抗体ER(Fv),用Ni离子亲和柱纯化单链抗体.ELISA测定ER(Fv)与纯EGFR抗原的结合能力;流式细胞术分析ER(Fv)与肿瘤细胞的结合;MTT法检测ER(Fv)对肿瘤细胞体外增殖的影响;动物试验测定ER(Fv)的体内抑瘤效果.结果 应用基因工程菌表达带有组氨酸标签肽(His-tag)的单链抗体ER(Fv),相对分子质量约为27 × 103,主要以包涵体形式存在,收获量约为10 mg·L-1.ELISA测定ER(Fv)与纯EGFR抗原的亲和常数为4.0×107L·mol-1.单链抗体能与肿瘤细胞表面的EGFR发生特异性结合,其与3种EGFR高表达肿瘤细胞的解离常数皆为10-7mol·L-1.细胞增殖实验显示,单链抗体可抑制EGFR高表达肿瘤细胞的增殖.体内抑瘤实验表明,单链抗体对人鳞状上皮癌A431裸鼠移植瘤具有中度的生长抑制作用,5,10和20 mg· kg-1 3个剂量组35 d的抑瘤率分别为43.9%,46.7%和54.8%,与对照组相比存在显著差异.结论 成功地表达了抗EGFR单链抗体ER(Fv),其对肿瘤细胞具有良好的亲和力和一定的生长抑制作用,为研制靶向EGFR的抗体药物提供基础.
作者：盛唯瑾；尚伯杨；苗庆芳；甄永苏 刊期： 2011年第18期
目的 设计合成天然产物(25R)-胆甾-3β,5α,6β,26-四醇,并评价其抗胶质瘤活性.方法 以薯蓣皂素为原料,经过Zn-Hg齐还原开环,叔丁基二甲基氯硅烷(TBDMSCI)保护C-3 、C-26羟基,甲基磺酰氯(MSCl)磺酰酯化C-16羟基,LiAIH4还原C-16甲基磺酸酯,间氯过氧苯甲酸(mCPBA)氧化5,6位双键,酸性条件下开环、脱保护反应得到(25R)-胆甾-3β,5α,6β,26-四醇;并通过MTT法对该化合物的抗胶质瘤活性进行了初步研究.结果 各中间体和目标化合物通过1 H-NMR、13C-NMR、IR、EI-MS、EA等现代波谱技术进行了结构表征;化合物在浓度为10-150μg·mL-1 时,胶质瘤细胞的生存率存在显著性差异,其IC50为51.57 μg·mL-1.结论 利用廉价易得的薯蓣皂素合成了一种天然海洋甾体,该目标化合物具有显著的抗胶质瘤活性,且具有浓度依赖性,值得进一步研究.
作者：李心花；黄顺芳；罗美凤；朱文博；陈新颖；周树佳；张静夏 刊期： 2011年第18期
目的 研究龙葵多糖对S180及H22荷瘤小鼠红细胞补体受体1(CR1)数量及活性的影响,探讨龙葵多糖抗肿瘤作用的红细胞免疫机制.方法 采用体内移植S180和H22肿瘤细胞株造模的方法,评价龙葵多糖的体内抗肿瘤疗效;红细胞免疫花环实验检测红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;CR1单克隆抗体标记,流式细胞术检测荷瘤小鼠红细胞CR1数量;酵母多糖免疫黏附荷瘤小鼠红细胞的能力评价荷瘤小鼠红细胞CR1受体的活性;比色法测定荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量.结果 龙葵多糖能够抑制S180荷瘤小鼠实体瘤生长,延长H22荷瘤小鼠生存时间;提高荷瘤小鼠红细胞免疫花环率(DTER);增加荷瘤小鼠红细胞CR1受体的数量和活性;增加荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量.结论 龙葵多糖通过提高荷瘤小鼠红细胞膜上唾液酸含量,进而提高CR1的活性和数量,改善和提高荷瘤小鼠红细胞免疫黏附能力,发挥抗肿瘤的作用.
作者：高世勇；许龙波；季宇彬 刊期： 2011年第18期
目的 建立巴戟天寡糖的高效薄层色谱(HPTLC)指纹图谱,并对不同产地巴戟天药材、炮制饮片、混伪品及含巴戟天药材的复方制剂--口服液X中寨糖成分进行分析比较.方法 在湿度40%-55%,温度20-32℃条件下,以乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸为展开剂二次展开,展距13 cm,α-萘酚试液加热至显色,于可见光下检视.将巴戟天寡糖HPTLC指纹图谱导入指纹图谱系统解决方案软件(CHROMAP 1.5)生成共有模式.结果 巴戟天寡糖指纹图谱由11个特征条带(色谱峰)构成,并指认了其中的果糖、蔗糖,1-蔗果三糖、耐斯糖及1F-果呋喃糖基耐斯糖5个峰.结论 通过HPTLC指纹图谱考察,炮制后巴戟天寡糖成分出现质与量的改变;来源于4省的巴戟天药材无明显差异;混伪品中不含巴戟天寡糖不能作为巴戟天替代药材入药;含巴戟天药材的制剂仍可采用该HPTLC法进行制剂质量评价与控制.
作者：廖慧君；赖正权；仰铁锤；丁平 刊期： 2011年第18期
目的 探讨黄连单味药及其复方黄连解毒汤对小鼠的急性毒性,摸索半数致死量(LD50)或大耐受量,并确定其毒性靶器官.方法 采用灌胃给药的方法,给予不同剂量黄连水煎液或黄连解毒汤水煎液,连续观察7d,检测药物对小鼠的急性毒性作用,用加权回归几率法(Bliss)计算LD50,对死亡小鼠进行主要脏器的病理学观察.结果 黄连水煎液的小鼠LD50剂量(以含黄连生药量计)为18.826 g·kg-1,95%可信限为16.923-21.314 g· kg-1,LD5 为12.407 gkg-1,ID95为28.565 g·kg-1.病理结果提示,黄连对小鼠的主要毒性靶器官为脑、肝、脾、肺、肾.黄连解毒汤未引起小鼠死亡,其大耐受量(以含黄连生药量计,黄连-黄芩-黄柏-桅子=20:6:6:9)为80g·kg-1.结论 单味黄连水煎液具有毒性,其小鼠LD50剂量(以含黄连生药量计)为18.826 g·kg-1,毒性靶器官为脑、肝、脾、肺、肾;经配伍后的黄连解毒汤则较为安全.
作者：贾鹰珏；李国辉；张平 刊期： 2011年第18期
目的 用肠管外翻模型研究荷叶碱在大鼠不同肠段的体外肠吸收特征.方法 在不同肠段(十二指肠、空肠、回肠和结肠)的肠管外翻模型中分别加入10、20和40μg ·mL-1的荷叶碱,在不同时间点取样,采用Agilent 1100型高效液相色谱仪测定肠囊内药物浓度,计算荷叶碱的吸收参数来分析其在肠道的吸收特征,比较不同肠段对荷叶碱通透能力的差异.结果 37℃下,不同浓度的荷叶碱在台氏液中2.5 h内稳定,方法学考察均符合生物样品的测定要求.荷叶碱在大鼠不同肠段中的吸收在一定浓度内无饱和现象,十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收速率常数依次为(0.0144±0.005 4)、(0.019 6±0.0033)、(0.0215±0.0044)、(0.0178±0.0032)min-1.结论 荷叶碱在大鼠不同肠段的转运为一被动扩散过程,不同肠段的吸收具有线性吸收的特征,吸收速度依次如下:回肠、空肠、结肠和十二指肠.
作者：李晓宇；周尔君；顾圣莹；徐媛；刘皋林 刊期： 2011年第18期
目的 建立HPLC/DAD/MS法同时测定盐酸昂丹司琼合成中可能存在的主要7种微量杂质.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:Allsphere Cyano(CN)柱,4.6mm×250mm,5μm;流动相:乙腈-0.02 mol·L-1醋酸铵水溶液梯度洗脱,梯度洗脱条件如下:0 min,18:82;10 min,19:81;12 min,60:40;32 min,60:40;32.1 min,18:82;40 min,18:82;柱温:30℃;流速:0.8mL·min-1;进样量:10μL;检测波长:266 nm.HPLC/DAD/MS条件离子源:APCI;扫描模式:正离子.结果 盐酸昂丹司琼及其7种杂质9-甲基-3-(二甲胺基)甲基-1,2,3,9-四氢-4H-咔唑-4-酮(4H-carbazol-4-one,3-[(dimethylamino)methyl]-1,2,3,9-tetrahydro-9-methyl-,A1)、9-甲基-3-(二甲胺基)甲基-1,2,3,9-四氢-4H-咔唑-4-酮(4H-carbazol-4-one,3-[(dimethylamino)methyl)-1,2,3,9-tetrahydro-,A2)、1,2,3,9-四氢-9-甲基-4H-咔唑酮(4H-carbazol-4-one,1,2,3,9-tetrahydro-9-methyl-,A3),1,2,3,9-四氢-4H-咔唑酮(4H-carbazol-4-one,1,2,3,9-tetrahydro-,A4)、1,2,3,9-四氢-9-甲基-3-亚甲咔唑酮(4H-carbazol-4-one,1,2,3,9-tetrahydro-9-methyl-3-methylene-,A5),1,2,3,9-四氢-3-(1H-咪唑基-1-甲基)-9-甲基-4H-咔唑酮(4H-carbazol-4-one,1,2,3,9-tetrahydro-3-[(1H-imidazol-l-yl)methyl]-9-methyl-,Z1),1,2,3,9-四氢-3-[(2-甲基-1H一咪唑-1-)-4H-咔唑酮(4H-carbazol-4-one,1,2,3,9-tetrahydro-3-[(2-methyl-1H-imidazol-l-yl)methyl]-,Z2)的线性范围分别为:0.009 7-1.94μg(r=0.9997),0.0104-2.08μg(r=0.9997),0.0098-1.96μg(r=0.9999),0.0095-1.90μg(r=0.9998),0.0105-2.10 μg(r=0.9998),0.0096-1.92μg(r=0.9998),0.0104-2.08μg(r=0.9998),0.0105-2.10μg(r=0.9997);低检测限分别为0.29,0.31,0.49,0.10,0.10,0.29,0.31,0.16 ng;定量限分别为0.97,1.04,1.47,0.29,0.32,0.96,1.04,0.52 ng.结论 盐酸昂丹司琼及其7种微量杂质分离良好;对其两批制剂及一批原料药进行检测,其中原料药中检出杂质A1,A3,A5含量超过0.11%.该方法简单、准确、可靠、具有较广泛的适用性,可以作为盐酸昂丹司琼及其7种可能的微量杂质的质量控制方法.
作者：冯茹；孙宇鹏；王琳；童元峰；吴松；王琰；蒋晔 刊期： 2011年第18期
目的 综述非病毒载体介导基因转染存在的屏障及跨越细胞障碍的方法和原理.方法 通过阅读近几年国内外具有代表性的文献,对非病毒载体介导的基因转染存在的主要屏障进行归纳总结,并对克服这些屏障所运用的一些方法进行分析和评述.结果 与结论 非病毒载体介导的基因转染效率低,主要是非病毒载体携带外源基因进入细胞核,表达目的蛋白前需要跨越3道屏障:细胞膜、内涵体-溶酶体系统、核膜.笔者总结了近年来为提高非病毒载体基因转染效率的一些方法和途径,分析了目前研究的一些问题并提出自己的见解.
作者：黄景彬；钟延强 刊期： 2011年第18期
目的 总结近年来手性药物药动学立体选择性的研究概况与进展.方法 查阅近5年来国内外相关文献,进行分析评述.结果 与结论 手性药物对映体在体内的手性环境中易表现出显著的立体选择性,对映体间药动学参数存在差异;与血浆蛋白或组织蛋白结合率不同引起对映体立体选择性分布;与药物代谢酶细胞色素P450酶或葡糖醛酸转移酶亲和性不同,导致对映体代谢呈现立体选择性;手性药物的相互作用包括对映体间的相互作用和其他药物与对映体的相互作用;中药手性成分研究也逐步受到重视.
作者：张寅瑛；洪战英；范国荣 刊期： 2011年第18期
目的 评价控释地诺前列酮阴道栓用于延期妊娠引产的妊娠结果.方法 选择60例因延期妊娠引产的孕妇,随机分为试验组(控释地诺前列酮组)和对照组(催产素组),主要结果的衡量标准是24 h内阴道分娩率及新生儿出生结果.两组计数资料比较分析采用Ridit检验,计量资料采用x2检验.同时测定孕妇使用后的阴道栓内残余地诺前列酮的含量,进一步分析引产结果与使用地诺前列酮之间的量效关系.结果 试验组24 h内阴道分娩率显著高于对照组(P <0.05),两组新生儿的出生结果没有显著性差异(P>0.05).地诺前列酮的释放量与放置时间呈指数关系.结论 延期妊娠引产使用控释地诺前列酮阴道栓能取得更好的引产结果,但延长阴道栓的放置时间并不能明显改善引产结果.
作者：彭保安；赵轶；虞和永 刊期： 2011年第18期
