目的探讨激发型CD40单抗5C11对白血病细胞来源的树突细胞(DC)的诱导作用及其生物学特性的影响.方法激发型CD40单抗5C11联合不同的细胞因子组合诱导白血病细胞分化为DC,通过显微镜形态分析,流式细胞仪表型分析,活细胞计数,IL-6 、IL-12 ELISA定量检测及混合淋巴细胞反应和细胞毒性实验等细胞生物学、免疫学方法对其进行研究.结果白血病患者外周血或骨髓的白血病细胞,在经激发型CD40单抗5C11联合不同的细胞因子组合培养后,能诱导成为大量成熟的DC;形态学观察呈现典型的DC特征;流式细胞仪检测证实细胞表面上调性表达CD40、CD80、CD83、CD86等分子;白血病细胞分化为DC后,IL-6分泌量减少,IL-12分泌量增加(P<0.05);同种异体混合淋巴细胞反应也显示,诱导的DC具有很强的刺激同种异体T细胞增殖的能力,这种增殖的T细胞对白血病细胞具有一定的杀伤作用.结论激发型CD40单抗5C11联合细胞因子能诱导白血病细胞分化为功能性DC.这可能在白血病的过继免疫疗法中具有潜在的应用价值.
作者：王正飞；于葛华；朱子玲；朱一蓓；王凤鸣；潘建忠；顾宗江；张学光 刊期： 2003年第11期
目的探讨粒细胞肉瘤( granulocytic sarcoma, GS)的诊断与鉴别诊断.方法对12例GS的组织形态学及免疫表型特征进行研究,并结合外周血、骨髓涂片检查及骨髓活检对全部病例进行FAB分型诊断.结果 12例患者均以淋巴结肿大、结外骨及软组织肿块为首发症状.组织学上瘤细胞核呈圆形、卵圆形或不规则形,胞浆少,核分裂易见,呈弥漫分布 .骨髓活检示11例有幼稚细胞弥漫单一性增生,形态与髓外浸润的瘤组织相似.1例没有白血病的形态学改变.免疫组化显示瘤细胞表达CD45 100%阳性、溶菌酶 100%阳性、MPO 92%阳性、CD68 83%阳性、CD34 42%阳性、TdT 17%阳性.CD15和Mac387仅表达在分化较成熟的粒细胞.CD3、CD45RO、CD20、CD45RA、CD79a及CD30阴性.结合外周血及骨髓涂片检查结果确诊1例为孤立性粒细胞肉瘤(非白血病性粒细胞肉瘤),11例为急性髓系白血病髓外浸润(白血病性粒细胞肉瘤),11例中1例为AML-M0,2例为AML-M1,8例为AML-M2.结论 GS在石蜡切片上因其形态学与非霍奇金淋巴瘤极其相似而容易造成误诊,免疫表型及全面的临床检查,特别是外周血、骨髓涂片检查及骨髓活检对明确诊断有很大帮助.
作者：刘艳辉；庄恒国；廖新波；骆新兰；蔡秀玲；罗东兰 刊期： 2003年第11期
目的探索体外诱导脐血单个核细胞(MNC)扩增分化为T/NK细胞的佳培养体系.方法脐血MNC在6种培养体系中培养4周,于各时间点用流式细胞仪测定细胞表面T/NK标志抗原的表达;测定有核细胞(NC)数;并行细胞形态学鉴定及细胞毒功能实验.结果脐血MNC在SCF+FLT-3L+IL-7+IL-15+TNF-α+IL-2体系中培养,第22天NC数达(20～26)×106/ml;淋巴细胞占NC的比例和CD3+T细胞占淋巴细胞的比例均达到90%以上,以CD8+T细胞亚群为主,CD4+T细胞亚群比例下降;CD56+CD3+NKT细胞和TCRγδ+细胞的比例分别由不足2%升高到30%～40%和10%～15%.CD3-CD56+NK细胞无扩增.培养后细胞在效靶比为50∶1时对K562细胞和Raji细胞的杀伤率分别达75%以上和32%～65%.结论本实验中体外诱导脐血MNC扩增分化为T/NK细胞的佳培养体系为SCF+FLT-3L+IL-7+IL-15+TNF-α+IL-2,佳扩增时间是培养后第22天.
作者：陈戈煜；黄绍良；周敦华；吴燕峰；魏菁；陈琴 刊期： 2003年第11期
目的探索As2S2和STI 571联合使用对K562细胞的诱导凋亡作用及其机制.方法用细胞计数法研究As2S2对K562细胞的生长抑制作用;细胞凋亡的检测用流式细胞术、基因组DNA电泳、细胞形态学观察等方法;蛋白表达的检测采用Western-blot法;基因表达的变化用半定量RT-PCR法.结果 As2S2 1～5 μmol/L作用24～72 h,即可明显抑制K562细胞增殖, 3～5 μmol/L作用48～72 h即可诱导K562细胞凋亡.3 μmol/L As2S2作用72h,细胞凋亡率达34.4%;5μmol/L As2S2作用48,72h,细胞凋亡率分别达21.8%和46.0%.1 μmol/L STI 571作用48 h,细胞凋亡率为(18.4±1.4)%;5 μmol/L As2S2作用48h,细胞凋亡率为(15.8±1.2)%;而两者合用细胞凋亡率上升为(40.6±2.0)%.对于U937细胞,单用1 μmol/L STI 571作用48 h,细胞凋亡率为(4.5±1.1)%;单用5 μmol/L As2S2作用48 h,细胞凋亡率为(6.0±1.2)%;而两者合用,细胞凋亡率为(7.3±1.0)%,无明显协同作用.As2S2能降低K562细胞中Bcr-Abl蛋白水平,并抑制c-Abl和Bcr-Abl PTK活性,但As2S2并不调变bcr-abl基因表达水平.结论 As2S2联合STI 571可增强诱导K562细胞凋亡的作用,其机制可能在于As2S2和STI571均可降低Bcr-Abl的PTK活性.
作者：李俊娥；孙关林；吴英理；邬维礼 刊期： 2003年第11期
目的了解真性红细胞增多症(PV)患者内源性红系集落(EEC)生长情况及其临床意义.方法应用半固体甲基纤维素培养体系培养26例PV患者及19名正常对照者骨髓单个核细胞中的EEC,应用流式细胞术检测8例PV患者及10名正常对照者骨髓单个核细胞Annexin Ⅴ并分析其与EEC之关系.结果①26例PV患者中25例(96.2%)检测到EEC,继发性红细胞增多症患者及正常对照组EEC检出率为0.②PV患者的EEC数、EEC/Epo依赖CFU-E(EEC率)与患者血红蛋白水平呈正相关(r=0.608,P＝0.01),EEC率与患者外周血白细胞和血小板计数及中性粒细胞碱性磷酸酶(ALP)指数无明显相关性.③EEC与血清Epo水平无相关性(r=0.518,P=0.125).④15例PV患者应用羟基脲(HU)和(或)干扰素(IFN)治疗,治疗前EEC率与达完全缓解(CR)所需治疗时间呈正相关(r=0.651,P=0.009),与缓解持续时间呈负相关(r=-0.592,P<0.02).⑤7例应用HU和(或)IFN治疗的PV患者,血常规恢复正常后EEC及EEC率均减低.⑥EEC率与血栓栓塞发生率呈正相关(r＝0.524,P=0.01).⑦PV患者骨髓单个核细胞的凋亡率较正常对照组明显减低,PV患者中EEC与骨髓细胞凋亡率呈负相关(r=-0.192,P<0.045).结论 EEC特异性见于PV,EEC率与血红蛋白浓度、达CR所需治疗时间及血栓栓塞发生率呈正相关,与缓解持续时间呈负相关;骨髓抑制治疗可降低EEC检出率,PV患者EEC与骨髓细胞凋亡率呈负相关.EEC是直接反映PV异常造血克隆负荷的一项敏感、特异的指标,可作为PV诊断及评价疗效的辅助指标.
作者：白洁；邵宗鸿；刘鸿；施均；何广胜；曹燕然；崔振珠；孙娟；田征；贾海蓉；钱林生；杨天楹；杨崇礼 刊期： 2003年第11期
例1,女,30岁.以头昏、乏力2周伴发热、皮肤瘀点3 d,于2001年5月23日入院.2周前因将霉变红薯粉蒸成粉皮食用后,出现腹胀、恶心、呕吐,吐出物为胃内容物及清水,一日5～6次,伴头昏、乏力,无腹痛、腹泻,曾在当地输液治疗1 d,上述症状消失.3 d前头昏、乏力加重,出现发热、全身皮肤瘀点、牙龈出血、咳嗽,体温波动于39～40 ℃,在当地按感冒治疗3 d无效,转来我院门诊,血常规提示三系血细胞减少.既往体健,否认肝炎、结核病史,无慢性肝、肾病史,无农药及有害物品接触史,家族中否认传染病史及遗传病史.入院查体:体温39.5 ℃,脉搏106次/min,呼吸23次/min,血压110/75 mm Hg.神志清楚,重度贫血貌,呼吸急促,自动体位,查体合作.全身皮肤可见较密集瘀点及散在片状瘀斑,以躯干和双下肢为著.未见皮肤黄染,浅表淋巴结不肿大.双眼睑肿胀,结膜苍白,巩膜无黄染.口唇苍白,牙龈渗血,口腔黏膜可见散在出血点及血泡,咽部充血,双侧扁桃腺不肿大.颈软,胸骨无压痛,双肺呼吸音粗,未闻及干湿口罗音,心率106次/min,律齐,心音有力,无杂音.腹平软,全腹无压痛,未触及包块,肝脾肋缘下未触及,双肾区无叩击痛,肠鸣音正常.双下肢不水肿.血常规:WBC 0.8×109/L,中性粒细胞0.25,淋巴细胞0.75,RBC 1.76×1012/L,Hb 45 g/L,BPC 2.0×109/L,网织红细胞为0.尿常规:黄色浑浊,脓细胞3～4/HP,红细胞1～2/HP.粪常规:正常.血沉40 mm/1 h,肝功能、肾功能、电解质均正常.肝炎系列抗体阴性,B超(肝、胆、脾、胰、双肾)声像图正常.心电图示窦性心动过速.胸片提示支气管感染.骨髓象:有核细胞增生减低;粒系占0.130;红系占0.290,晚幼红细胞比例增高,成熟红细胞大小略不等;淋巴细胞占0.370,形态正常;浆细胞占0.170,为成熟浆细胞;单核细胞、网状细胞及组织嗜碱细胞可见;骨髓小粒空虚,以非造血细胞(淋巴细胞、组织嗜碱细胞、脂肪细胞)为主;巨核细胞全片1个,为颗粒巨,血小板偶见;外铁染色(++).拟诊急性造血功能停滞,急性支气管炎,急性泌尿系感染.给予抗感染、输血、止血、惠尔血(150 μg皮下注射,每日1次,连用7 d)积极治疗10余天,头昏、乏力明显好转,发热消退,皮肤瘀点消退,外周血三系细胞明显回升.门诊随诊2个月,血常规和骨髓象恢复正常.随访1年,病情无复发.
作者：杨冬英 刊期： 2003年第11期
患者,男,49岁,因贫血来院就诊.查体:贫血貌,胸骨压痛(-),脾肋缘下2 cm.血常规:WBC 5.8×104/L ,Hb 64g/L, BPC 61×109/L.血细胞分类:原始细胞0.08,有核红细胞8/100个白细胞.NAP积分118.骨髓穿刺髂前、胸骨均干抽.骨髓活检结果:骨髓造血组织三系细胞均可见,巨核细胞数明显增多,各系细胞形态未见明显异常,网状纤维明显增生.诊断为原发性骨髓纤维化(MF). 采用外周血48 h培养法,按常规制备染色体.
作者：潘金兰；薛永权；李建勇；陈苏宁；吴亚芳 刊期： 2003年第11期
黑色素瘤特异性抗原(Prame)是由Ikeda等于1997年首次在黑色素瘤患者中证实为能被细胞毒性T细胞(CTL)识别的肿瘤抗原,该基因位于22q11,编码509个氨基酸的蛋白质.我们采用RT-PCR方法测定白血病患者Prame mRNA的表达,探讨其在白血病发病中的作用及临床意义.
作者：徐凯红；黄宗干；杨刚毅；唐宗山；刘小姗；潘建 刊期： 2003年第11期
再生障碍性贫血(AA)是一种由多种病因引起的较为常见的造血衰竭综合征,十余年前国内曾做过AA危险因素大规模病例对照研究[1],发现氯霉素等是AA重要的危险因素.近年来由于国内工农业的飞速发展以及合理用药的普及,AA的一些危险因素可能发生了变化,如氯霉素等的应用比以前明显减少,各种与职业有关的有害物质接触及环境污染较前明显增多,国内AA危险因素是否发生变化,值得作进一步的调查.我们采用配对病例对照研究方法对AA的危险因素进行调查,现将结果报道如下.
作者：全国再生障碍性贫血协作组 刊期： 2003年第11期
CD28是表达于T细胞表面重要的共刺激分子之一,在T细胞的活化与信号传导中起着重要作用.我们探讨了再生障碍性贫血(AA)患者T淋巴细胞表面CD28表达及体内、体外应用环孢菌素A(CsA)后CD28表达.
作者：黄海雯；傅晋翔；张学光；於葛华；李军；陈萍 刊期： 2003年第11期
我们检测了242例血栓性疾病患者及50名正常对照的抗凝蛋白的变化,并对上述所有患者及395名正常对照的凝血酶原基因G20210A(FⅡG20210A)的变异情况作了分析,以了解其在血栓性疾病发生发展中的作用.
作者：顾健；张育；赵广圣；汪中强；孙爱红；朱新华；马莉；鹿群先 刊期： 2003年第11期
急性淋巴细胞白血病(ALL)患者白细胞糖皮质激素受体(GR)及其mRNA水平与近期疗效的关系已有较多的临床报道,一般认为GR水平与近期疗效呈正相关.但GR水平与长期存活的关系一直未见明确的临床报道.我们采用放射配体结合分析法和以人GR cDNA为探针的分子杂交技术,对29例ALL患者白细胞GR及其mRNA含量与近期疗效以及长期存活的关系进行了对比观察,并对这29例患者的预后进行了跟踪随访,现将观察及随访结果报告如下.
作者：董群生；童书鹏；王健民；陈学宜；闵碧荷 刊期： 2003年第11期
我们通过酶联免疫双抗体夹心法检测再生障碍性贫血(再障)患儿血浆、正常足月新生儿脐血血浆可溶性c-kit受体(SCD117)及干细胞因子(SCF)水平,并与正常儿童进行比较,现将结果报道如下.
作者：王军；孟晓晖；冯剑飞；王宏 刊期： 2003年第11期
近年的研究证实,早幼粒细胞白血病(promyelocytic leukemia,PML)基因不仅在早幼粒细胞白血病的发病中起重要作用,而且与人体其它恶性肿瘤(如肝癌)的发病密切相关[1,2],是多种细胞凋亡途径的核心基因[3].再生障碍性贫血(再障)的重要发病机制之一是造血细胞凋亡增加,但有关再障患者细胞凋亡增加的机制尚不完全清楚.在过去的研究中,我们证实了再障患者血清可诱导CD34+细胞凋亡[4,5].本研究中我们进一步测定再障患者血清对正常人CD34+细胞凋亡及PML蛋白表达的影响,并同时观察半胱天冬酶(caspase)3,8抑制剂对这种影响的阻断作用.
作者：刘红；陆德炎；杨锦媛；徐瑞容 刊期： 2003年第11期
越来越多的证据表明再生障碍性贫血(AA)尤其是重型再生障碍性贫血(SAA)的发生、发展与T细胞介导的细胞免疫异常关系密切[1].T淋巴细胞的激活需要两个不同的信号,第一信号为抗原结合T细胞受体(TCR),第二信号为T细胞上的另一受体与其配体结合,即共刺激信号,CD28/B7共刺激信号系统是其中重要的一对共刺激信号.我们应用流式细胞术检测34例SAA患者外周血淋巴细胞共刺激信号CD28及其配体CD80和CD86的表达,探讨其在AA发病中的作用,观察其与临床治疗效果的关系.
作者：张春青；徐从高；张锑；申蓉；孙婉玲；张茂宏 刊期： 2003年第11期
树突细胞(DC)是目前所知的体内功能强的专职性抗原呈递细胞,其大的特点是能够显著刺激初始型T淋巴细胞增殖,因此DC是机体免疫反应的始动者,在免疫应答的诱导中具有独特的地位.国内外有关DC的基础性研究及临床应用已成为免疫学关注的热点.朗格汉斯细胞(LC)来源于骨髓多能造血干细胞,是DC分化发育过程中的一个亚群[1],属于未成熟DC.体外诱导LC的生成为研究DC的分化发育和成熟奠定了基础.
作者：江小霞；张毅；刘元林；吴英；张双喜；毛宁 刊期： 2003年第11期
