目的 探讨脐带来源间充质干细胞(MSC)对脐血来源CD34+细胞在NOD/SCID小鼠体内归巢的影响及其可能的机制.方法 将CD34+细胞与MSC细胞共移植入经放射线照射后的NOD/SCID小鼠,采用流式细胞术和RT-PCR检测移植后20 h NOD/SCID小鼠骨髓及脾脏中人CD34+细胞,计算其相应的骨髓和脾脏的归巢效率.将脐血CD34+细胞与脐带MSC体外共培养,检测MSC细胞对CD34+细胞趋化功能的影响;并于培养4、7 d检测培养后CD34+细胞表面CD49e、CD31、CD62L、CD11a等归巢相关黏附分子表达情况.结果 ①移植后20 h采用流式细胞术成功在小鼠骨髓和脾脏中检测到人CD45+细胞.共移植组CD34+细胞骨髓归巢率[(7.2±1.1)%]高于单移植组[(5.4±0.9)%](P<0.05).②RT-PCR结果 显示共移植组小鼠骨髓细胞和脾脏细胞,单移植组小鼠脾脏细胞扩增得到人GAPDH基因片段,而单移植组小鼠骨髓细胞未见明显扩增条带.③MSC存在时,CD34+细胞的体外迁移能力为(35.7±5.8)%,显著高于CD34+细胞自发迁移率[(3.5±0.6)%,P<0.05].④CD34+细胞与MSC体外共培养后细胞表面CD49e、CD31和CD62L黏附分子的表达水平高于CD34+细胞单独培养组.结论 MSC细胞与CD34+细胞共移植有利于CD34+细胞向骨髓、脾脏等造血器官归巢,这可能与MSC促进CD34+细胞迁移以及维持CD34+细胞表面归巢相关黏附分子的表达相关.
作者：郝牧；孟恒星；李刚；漆佩静；徐燕；李长虹；王亚非；邱录贵 刊期： 2009年第02期
目的 探讨以人工抗原呈递细胞模拟树突细胞(DC)体外诱导特异性T淋巴细胞活化、增殖,观察特异性T淋巴细胞杀伤白血病细胞的效应.方法 用慢性粒细胞白血病细胞特异性抗原肽(CML28)作为目标肽,并以磁珠同时负载人工合成的HLA-A2-Ig二聚体-抗原肽(CML28)复合物以及B7-1分子,作为诱导T淋巴细胞的活化、增殖的双信号分子,模拟抗原呈递细胞的生物功能,建立一种人工抗原呈递细胞;从HIA-A2健康骨髓捐献者骨髓或外周血中分离出单个核细胞作为效应细胞,并与人工抗原呈递细胞共孵育,以流式细胞术检测特异性T淋巴细胞活化、增殖程度.以初治急性白血病细胞作为靶细胞,将特异性T淋巴细胞与白血病细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1比例共孵育4 h,用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测杀伤急性白血病细胞的效果.结果 以该人工抗原呈递细胞刺激T淋巴细胞后,其CML28特异性T淋巴细胞比例明显增高,实验组中抗原肽ALFCGVACA、FLQGDTSVL、DLMSSTKGL、VLTFALDSV所诱导的特异性T淋巴细胞比例分别为(13.5±1.6)%、(15.2±1.5)%、(14.7±1.8)%、(34.3±3.5)%,与对照组[(2.2±0.4)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).当效应细胞与靶细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1混合后,随着效应细胞的增加,诱导杀伤急性白血病细胞效率也明显增强,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 以磁珠为平台的人工抗原呈递细胞能有效模拟人抗原呈递细胞,诱导T淋巴细胞特异性杀伤白血病细胞,为白血病的免疫治疗提供了一种新的途径.
作者：毛汉文；刘文励；周剑锋；耿哲；黄伟 刊期： 2009年第02期
目的 提高对普通变异型免疫缺陷病的认识.方法 报告2例普通变异型免疫缺陷病病例并进行相关文献复习.结果 2例患者均于青少年期发病,表现为反复呼吸道、消化道感染,脾肿大,免疫球蛋白明显减低,可明确诊断为普通变异型免疫缺陷病,例1经脾切除诊断合并脾脏外周T细胞淋巴瘤,例2反复消化道感染、腹泻,并发营养性巨幼细胞性贫血,经静脉注射丙种球蛋白及抗感染对症治疗后,患者临床症状减轻.结论 普通变异型免疫缺陷病起病相对较晚,临床表现多样,以低丙种球蛋白血症和反复呼吸道、消化道感染为特征,早期诊断及正规治疗可改善预后.
作者：李建平；王慧君；张磊；杨仁池；张凤奎 刊期： 2009年第02期
目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)α在调节造血干/祖细胞(HS/PC)归巢中的增效作用及其机制.方法 将荧光染料CFSE标记的脐血CD34+细胞移植入接受照射(对照组)或联合TNFα预处理(实验组)的BALB/c受鼠.移植后20 h,采用流式细胞术(FACS)检测脐血CD34+细胞在BALB/c受鼠中的分布(外周血、肝脏、肺脏)与归巢(骨髓、脾脏)特征,计算其相应的归巢效率;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测BALB/c受鼠血清基质衍生因子(SDF)-1α水平;FACS检测TNFα预处理前、后脐血CD34+细胞表面CXCR4表达水平的变化;免疫组化法检测BALB/c受鼠骨髓及脾脏组织切片中SDF-1α的表达水平.结果 脐血CD34+细胞主要归巢于BALB/c受鼠骨髓和脾脏;经TNFα预处理的实验组BALB/c受鼠骨髓归巢率[(0.65±0.13)%]显著高于对照组[(0.30±0.09)%,P<0.01];但TNFα预处理同时显著抑制脐血CD34+细胞归巢于BALB/c受鼠脾脏(P<0.01);不同剂量的TNFα预处理不影响受鼠血清SDF-1α水平;新鲜分离的脐血CD34+细胞与不同浓度TNFα共孵育18 h后,其表面CXCR4表达水平并无明显变化;但TNFα预处理受鼠骨髓龛组成细胞SDF-1α表达增高,且脾脏红髓区小梁动脉和小梁静脉内皮细胞SDF-1α表达增高.结论 TNFα通过提升骨髓龛SDF-1α浓度梯度促进HS/PC归巢于骨髓,这一发现将有助于为临床提供可行性HS/PC归巢增效剂.
作者：代红胜；高静韬；张彤雯；杨舟；车永哲；郑以州 刊期： 2009年第02期
目的 研究甲泼尼龙对移植物细胞构成的影响及其对H-2半相合小鼠造血干细胞移植的作用.方法 以C57BL/6J(H-2b)雄性小鼠为供鼠,C57BL/6J(H-2b)×BALB/c(H-2d)F1代雌性小鼠为受鼠,以常规动员方案(单用G-CSF)为对照,在此基础上加用3 d剂量分别为2 mg/kg(小剂量组)、10 mg/kg(中剂量组)及50 mg/kg(大剂量组)的甲泼尼龙动员造血干细胞,流式细胞术检测移植物中T细胞亚群、DCI(HLA-DR+CD11c+细胞)及CD34+细胞,干细胞回输后观察移植后的排斥、急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生及生存情况.结果 与对照组比较,动员方案中加用不同剂量甲泼尼龙的各实验组移植物中CD3+T细胞比例均有显著下降(P<0.05),其中CD4+T细胞比CD8+T细胞下降更为明显,CD4/CD8+比值显著下降,而CD+CD25+T细胞比例则显著上升,DC1比例下降,CD34+细胞比例上升.CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD34+细胞百分比在小剂量、中剂量和大剂量组间差异有统计学意义(P值均<0.05).对照组、小剂量组、中剂量组和大剂量组植活率分别为90%、100%、100%、80%.与对照组比较,各实验组HLA半相合移植受鼠aGVHD严重程度均明显下降(P<0.05),不同剂量的实验组间差异有统计学意义(P<0.05);移植后小鼠生存期均较对照组明显延长(P<0.05),中剂量组较小剂量组延长(P<0.05),但大剂量组反而较中剂量组缩短(P<0.05).结论 动员方案中加用甲泼尼龙可选择性去除供鼠移植物中的T细胞,同时下调其中DC1比例,提升CD34+细胞比例,使H-2半相合小鼠移植后GVHD明显减轻,生存期延长.一定剂量的甲泼尼龙不会增加移植排斥风险.
作者：刘军民；李玉峰；丁邦和；宣恒报；张连生 刊期： 2009年第02期
目的 探讨亲属间HLA单倍体相合外周血干细胞移植(PBSCT)治疗恶性血液病的疗效.方法 恶性血液病患者36例,中位年龄25(11～48)岁,供受者人类白细胞抗原(HLA)配型1个位点不合者7例,2～3个位点不合者29例.移植方案采用清髓性预处理及联合免疫抑制剂预防移植物抗宿主病(GVHD)进行非体外去T细胞的PBSCT,移植的CD34+细胞中位数为11(4.16～21.00)×106/kg.结果 36例患者均获得完全、持久供者造血干细胞植入,发生急性GVHD(aGVHD)15例(41.7%),均为Ⅰ～Ⅱ度;在随访时间超过18个月的29例患者中发生慢性GVHD(cGVHD)17例(58.6%).移植后T、B、NK细胞亚群下降及恢复与HLA位点全相合移植患者差异无统计学意义.36例患者中位随访时间为15(4～69)个月,复发5例,累计复发率为13.9%.现无白血病存活30例,2年预期总无白血病生存率(LFS)为82.2%.结论 应用清髓性预处理联合多种免疫抑制剂进行非体外去T细胞亲属间HLA单倍体相合PBSCT是治疗恶性血液病安全有效的方案.
作者：袁海龙；李玲；曲建华；温丙昭；江明；郝建萍；陈瑢；郭新红；哈力达·亚森；王善征；丁凌录 刊期： 2009年第02期
目的 探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后应用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)技术检测血浆巨细胞病毒(CMV)DNA载量,诊断CMV感染及指导临床抗CMV治疗的意义.方法 统以318例接受allo-HSCT患者为研究对象,其中同胞HLA相合HSCT患者160例,血缘关系配型不合127例,非血缘关系移植31例.移植前供受者采用ELISA方法 进行CMV血清学抗体检测.移植后采用RQ-PCR方法 检测血浆CMV DNA,6×102拷贝数/ml为CMV PCR阳性.全部患者在预处理阶段-9 d到-2 d应用更昔洛韦预防CMV感染.抢先治疗主要应用更昔洛韦或膦甲酸钠,或两药联合治疗.结果 移植后100天(+100 d)内CMV感染累计发生率40.6%,同胞相合、血缘关系配型不合及非血缘关系移植三种移植方式,+100 d内CMV感染累计发生率分别为17.5%、66.1%、45.2%.无论是单因素还是多因素分析均表明,血缘关系配型不合移植和非血缘关系移植,预处理方案中使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)以及中重度急性移植物抗宿主病是导致CMV感染发生的危险因素.在早期应用抢先治疗后,总体+100 d内CMV病累计发生率为8.8%.三种移植方式+100 d内CMV病累计发生率分别为5.6%、9.4%、22.6%.且三种移植方式CMV感染患者2年生存率差异无统计学意义.结论 allo-HSCT后RQ-PCR检测血浆CMV DNA可有效用于CMV感染诊断和监测,并有利于指导临床抗CMV治疗,减少移植后CMV感染高危患者CMV疾病的发生.
作者：陈欢；刘开彦；许兰平；刘代红；陈育红；赵晓甦；余莉；韩伟；张晓辉；王昱；陈瑶；黄晓军 刊期： 2009年第02期
自1988年首例HLA相合的相关脐血移植(LICBT)获得成功以来,脐血移植发展迅速.由于受单份脐血细胞数量的限制,UCBT在成人造血干细胞移植中的地位尚存争议.进行双份脐血移植(double-unit UCBT)可增加细胞数量[1].我们总结了2001年5月至2006年12月接受非血缘关系双份脐血移植的19例血液病患者的长期随访情况.
作者：姜夕锋；葛林阜；王光忠；郭康合；管冰；曲伟红；沈柏均 刊期： 2009年第02期
近年来组织因子(TF)和生理性抑制剂组织因子途径(TFPI)在炎症反应、肿瘤迁移等非凝血功能方面表现出的重要作用得到许多学者的重视.现已发现,内皮损伤可能在器官移植后移植物抗宿主病(GVHD)的发生和发展中起重要作用.我们应用ELISA法检测异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者在移植前、后及发生GVHD的不同时段血清中TF、TFPI的水平变化,探讨TF、TFPI是否参与并影响了GVHD的病理过程,从而寻求预测GVHD发生、发展的有效检测指标.
作者：都琏琏；李泉；邹萍；游泳；夏凌辉；黎纬明 刊期： 2009年第02期
骨原发性淋巴瘤(PBL)早期无淋巴结肿大,骨髓检查未见异常,多为单骨发病,预后较好.PBL国内外报道不多,常引起误诊而延误病情或诊断后早期过度治疗,我们报道我院1例PBL患者并进行相关文献复习.
作者：陈慧；李晓；徐黎；宋陆茜；陶英；刘薏芝；应韶旭 刊期： 2009年第02期
蛋白C(PC)是由肝脏合成的一种维生素K依赖性糖蛋白.PC被凝血酶调节蛋白(TM)与凝血酶的复合物水解为活化蛋白C(APC),通过灭活FVa、FⅧa下调促凝活性,同时通过凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)抑制纤溶酶原激活物抑制物(PAI)-1活性而增强纤溶活性,参与机体的抗凝,维持抗凝与凝血过程的动态平衡[1].
作者：郑昌成；丁秋兰；吴竞生；丁凯阳；徐修才 刊期： 2009年第02期
造血干细胞移植(HSCT)是许多血液系统疾病治疗的有效手段,但移植相关并发症影响了移植的疗效.其中出血常成为移植患者死亡率增加的重要原因之一.移植患者出血原因主要有血小板减少及移植后其他并发症[1].
作者：高海丽；孙爱宁；韩悦；张威；仇惠英；金正明；苗瞄；唐晓文；傅琤琤；何广胜；吴德沛 刊期： 2009年第02期
内皮祖细胞(EPC)可促进血管生成及组织修复.很多学者用外周血单个核细胞(PBMNC)来源的EPC作为标准,揭示具有典型免疫标志的细胞的病理生理学特性,但对EPC的定义却并不明确.我们对此进行了研究.
作者：崔维韻；张建宁；张安玲；刘丽；陈芳莲 刊期： 2009年第02期
