目的 研究Th22细胞在急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血中的表达水平,并探讨其意义.方法 用流式细胞术分别检测B系ALL(B-ALL)及T系ALL(T-ALL)初诊患者、完全缓解期患者及正常对照组外周血中Th22细胞所占比例.用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测各组外周血血清中IL-22、转化生长因子(TGF)-β、TNF-α、IL-6水平.用半定量RT-PCR方法分别检测各组外周血单个核细胞中Th22细胞的相关转录因子IL-22 mRNA的表达水平.并逐层分析比较.结果 初诊B-ALL、T-ALL患者Th22细胞比例,血清IL-22、TNF-α、IL-6水平及单个核细胞IL-22 mRNA的表达水平分别为(0.44±0.10)%、(10.9±3.4)ng/L、(110.7±26.5)ng/L、(60.2±13.8)ng/L、0.17±0.04和(0.46±0.11)%、(11.2±3.5)ng/L、(114.6±27.0)ng/L、(58.7±12.4) ng/L、0.19±0.04;缓解期B-ALL、T-ALL患者分别为(0.59±0.15)%、(14.3±4.1)ng/L、(142.5±32.7)ng/L、(83.7±18.9)ng/L、0.25±0.06和(0.60±0.15)%、(14.6±4.3)ng/L、(140.4±31.4)ng/L、(81.4±18.2) ng/L、0.26±0.06,均明显低于正常对照组的(1.24±0.31)%、(19.7±6.6)ng/L、(238.3±50.4)ng/L、(138.0±27.1)ng/L、0.49±0.09,差异有统计学意义(P<0.01).缓解期B-ALL、T-ALL患者Th22细胞比例,血清IL-22、TNF-α、IL-6水平及单个核细胞IL-22 mRNA的表达水平均高于初诊B-ALL、T-ALL患者,差异有统计学意义(P<0.05).B-ALL与T-ALL比较差异无统计学意义(P>0.05).初诊B-ALL、T-ALL和缓解期B-ALL、T-ALL患者TGF-β水平分别为(30.6±8.2)ng/L、(31.4±8.8)ng/L和(24.2±5.8)ng/L、(25.1±6.1)ng/L,明显高于正常对照组的(9.6±2.8)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01),且初诊患者TGF-β水平高于缓解期患者(P<0.05);B-ALL与T-ALL比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 ALL患者体内Th22细胞数量减少,可能与ALL的发生发展呈负相关,提示ALL患者体内TNF-α、IL-6的表达减低及TGF-β的过度表达可能抑制Th22细胞的分化发育.
作者：刘立民；张兴霞；赵广圣；司叶俊；林国强；张彦明；何广胜；吴德沛 刊期： 2012年第12期
目的 分析2005-2011年我科血液病住院患者院内感染的流行病学及其耐药性变迁.方法 收集2005年1月至2011年12月住院血液病患者临床分离菌株1453株,采用微量稀释法进行药敏实验.结果 ①临床分离菌株中呼吸道标本多为836株(57.5%);血液标本比例占13.60%,高于全院(6.26%);细菌培养送检阳性率52.37%,低于全院(60.24%);化疗导致的粒细胞缺乏是院内感染的主要原因;革兰阳性菌578株(39.8%),革兰阴性菌875株(60.2%),革兰阳性菌中表皮葡萄球菌有上升趋势,革兰阴性菌特别是非发酵菌有上升趋势.②血液科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为72.8%、产ESBL大肠埃希菌为18.9%、产ESBL肺炎克雷伯菌为10.4%.③2005-2011年革兰阳性菌中葡萄球菌属和肠球菌属对抗生素的耐药性无明显变化;革兰阴性菌中肠杆菌科对碳青霉烯类保持高度敏感,其次为头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦,而大肠埃希菌对头孢吡肟和头孢他啶的耐药率逐年升高;不发酵糖革兰阴性菌中铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦保持敏感,其中铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药率稍有上升趋势.结论 血液病住院患者院内感染革兰阴性菌的比例有上升趋势,其中大肠杆菌比例高;非发酵菌比例有上升趋势;大肠埃希菌对头孢吡肟和头孢他啶的耐药逐年升高,铜绿假单孢菌对碳青霉烯耐药率稍有上升趋势.
作者：邓琦；李青；林雪梅；李玉明 刊期： 2012年第12期
目的 观察阻断Th17细胞分化对小鼠小肠急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响.方法 将小鼠分为5组:正常对照组、单纯照射组、异基因骨髓移植(allo-BMT)组、allo-BMT+二甲基亚砜(DMSO)组、allo-BMT+常山酮(HF)组.移植后观察小鼠GVHD发生情况并进行临床和病理评分;移植后第14天(+14 d),用流式细胞术检测外周血Th1、Th17比例及IFN-γ和IL-17A浓度变化;+14 d,用RT-PCR方法检测小肠T-bet、RORγT、CXCL9、CXCL10、CXCL11和CCL20转录因子表达水平.结果 +14 d,allo-BMT+HF组小鼠小肠损伤较重;allo-BMT+HF组Th1细胞比例高于allo-BMT组[分别为(9.34±0.67)%和(6.69±1.37)%],Th17细胞明显下降[分别为(0.46±0.04)%和(1.01±0.04)%](P<0.05),allo-BMT组IL-17A和IFN-γ浓度分别为(3.54±0.06)和(41.67±0.11)ng/L,而allo-BMT+HF组IFN-γ浓度为(38.77±0.17)ng/L(P<0.05),未检测到IL-17A.RT-PCR分析结果显示allo-BMT+HF组小鼠小肠组织中RORγT表达均较allo-BMT+BMT和正常对照组低(P<0.01);allo-BMT和allo-BMT+HF组T-bet表达量均较正常对照组表达升高(P值均<0.05),但二者相比差异无统计学意义(P>0.05);移植后allo-BMT-HF组CXCL9、CXCL10表达明显高于allo-BMT组(P<0.01),但未检测到CCL20.结论 阻断Th17细胞分化加重allo-BMT小鼠小肠损伤.
作者：李护君；程海；潘彬；曾令宇；徐开林 刊期： 2012年第12期
目的 探讨利妥昔单克隆抗体(单抗)联合自体外周血干细胞移植治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的疗效及影响预后的因素.方法 回顾性分析25例接受利妥昔单抗体内净化联合自体外周血干细胞移植治疗的DLBCL患者临床资料.患者中位年龄39(17~61)岁,Ann ArborⅠ~Ⅱ期2例、Ⅲ期3例、Ⅳ期20例,60%患者有B组症状,国际预后指数(IPI)评分低危组、低中危组、高中危组及高危组患者分别为2、11、10及2例.预处理方案采用BEAM方案(21例)及全身照射为主的方案(4例).造血干细胞动员化疗前1 d及化疗后第7天、自体造血干细胞回输前1 d及回输后第8天各输注利妥昔单抗1次,每次剂量为375 mg/m2.结果 自体造血干细胞移植前疾病获得完全缓解(CR)者20例、部分缓解者5例.92%患者于移植后达到CR.中位随访时间45 (2~121)个月,19例无病存活,4例死亡.全组患者3年总生存率及无进展生存(PFS)率分别为78.9%及75.9%,累积复发及进展率为19.1%.20例移植前CR的患者3年总生存率及PFS率分别为87.4%及82.4%,复发率为11.8%.多因素分析显示,移植前是否CR是影响总生存的独立危险因素,而IPI是影响PFS的独立危险因素.结论 利妥昔单抗体内净化联合自体外周血干细胞移植治疗DLBCL的疗效良好.
作者：梁赜隐；岑溪南；邱志祥；欧晋平；王文生；许蔚林；李渊；王茫桔；董玉君；王莉红；尹玥；孙玉华；刘微；王倩；任汉云 刊期： 2012年第12期
目的 探讨hsa-miR-146b-5p(miR-146b-5p)的表达在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者风险评估中的意义.方法 选择62例原发于淋巴结的DLBCL患者石蜡样本,应用免疫组织化学EnVision法对所有样本进行CD20、CD3、CD10、Bcl-6、Mum-1免疫标记,根据Han's分类方法将DLBCL分为生发中心B细胞型(GCB型)和非生发中心B细胞型(non-GCB型);应用安捷伦16.0高密度芯片对24例DLBCL患者的石蜡样本进行miRNA表达谱筛选;采用实时定量RT-PCR方法对62例DLBCL患者的石蜡样本进行miR-146b-5p表达水平的验证.以11例淋巴结反应性增生患者标本作为对照.结果 62例DLBCL患者中,GCB型22例(35.5%),non-GCB型40例(64.5%),GCB型患者中miR-146b-5p表达水平是non-GCB型患者的3.2倍,差异有统计学意义(P=0.006).DLBCL患者中miR-146b-5p表达水平是淋巴结反性增生患者的5.4倍,差异有统计学意义(P=0.001).62例DLBCL患者中,复发者35例(56.5%).无复发组患者的miR-146b-5p表达水平明显高于复发组,差异有统计学意义(P=0.004).DLBCL患者中miR-146b-5p高表达组(>中位值)无复发生存(RFS)率明显高于低表达组(<中位值),差异有统计学意义(P=0.005),miR-146b-5p的表达与患者总体生存(OS)率没有明显相关性.多因素COX模型分析显示 miR-146b-5p低表达(P=0.004)、国际预后指数(IPI)≥3分(P=0.011)为各自独立的预后不良因素.结论 DLBCL患者无复发组miR-146b-5p的表达水平明显高于复发组,并且miR-146b-5p高表达组RFS率明显高于低表达组.提示miR-146b-5p可能是DLBCL患者风险评估中的一个新型分子标志物.
作者：曹其伟；李红燕；姚晓香；王晋芬 刊期： 2012年第12期
目的 探讨儿童难治性血细胞减少(refractory cytopenia of children,RCC)的诊断及鉴别诊断,并评价骨髓穿刺和活检在RCC诊断中的作用.方法 回顾性分析2007至2010年间50例临床诊断为非重型再生障碍性贫血(AA)患儿的临床资料,复查骨髓穿刺涂片、骨髓活检、血常规及免疫组化等实验室检查,根据骨髓增生异常综合征WHO分类标准(2008版)重新评估儿童全血细胞减少中RCC的诊断及相关的鉴别诊断.结果 50例患儿中男23例、女27例(男∶女=1∶1.17),诊断时中位年龄9(3~14)岁.骨髓穿刺涂片与骨髓活检诊断不一致的共有5例,其中3例涂片诊断为AA,活检诊断为RCC,2例反之.结合骨髓穿刺涂片和活检结果,终诊断AA 16例、RCC 34例[其中8例为难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)].全部16例AA患者骨髓增生极度低下,RCC中有4例(15.38%)、RCMD有5例(62.50%)骨髓增生极度低下,RCC中有19例(73.08%)、RCMD中有2例(25.00%)骨髓增生较低下,RCC中有3例(11.54%)、RCMD有1例(12.50%)骨髓增生正常.结论 RCC骨髓原始细胞数并不增多,病态造血是主要特征.RCC与AA鉴别诊断要点:有否病态造血及程度、造血细胞的异常分布及定位、巨核细胞的形态特点等.AA与RCC患者鉴别诊断须骨髓穿刺涂片和活检两种检查手段互为补充.
作者：李占琦；竺晓凡；杨文钰；刘恩彬；孙琦；方立环；孙福军；杨晴英；张培红 刊期： 2012年第12期
目的 研究供受者IFN-γ基因+874位点单核苷酸多态性(SNP)对恶性血液病患者HLA全相合同胞供者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)疗效的影响.方法 收集80例接受HLA全相合同胞供者allo-HSCT的恶性血液病患者移植前外周血单个核细胞标本,采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)方法检测供受者IFN-γ +874位点SNP,分析供受者不同基因型与移植疗效的相关性.结果 供者为IFN-γ +874 A/A与非A/A基因型的两组患者恢复中性粒细胞绝对计数(ANC)>0.5×109/L的中位时间分别为15(11~27)d和18(12~30)d,差异有统计学意义(P=0.029).供受者均为IFN-γ +874 A/A与+874A/A基因型的两组患者恢复ANC>0.5×109/L的中位时间分别为13(11~25) d和19(12~31)d,差异有统计学意义(P=0.019).受者为IFN-γ +874 A/A与非A/A基因型的两组患者各有11例(20.0%)和1例(4%)发生Ⅱ~Ⅳ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)(P=0.041),24例(43.6%)和4例(16.0%)发生巨细胞病毒(CMV)血症(P=0.032),预期5年无事件生存(EFS)率分别为(58.2±6.7)%和(84.0±7.3)%(P=0.032),5年移植相关死亡(TRM)率分别为(33.7±6.8)%和(12.0±6.5)%(P=0.050),差异均有统计学意义.供受者均为IFN-γ +874 A/A与均为非A/A纯合子型的两组患者各有10例(21.7%)和2例(5.9%)发生Ⅱ~Ⅳ度aGVHD(P=0.050);21例(45.7%)和7例(20.6%)发生CMV血症(P=0.020),两组患者5年TRM率分别为(31.6±7.5)%和(13.6±6.5)%(P=0.048);5年EFS率分别为(56.8±7.3)%和(79.4±6.9)%(P=0.037),差异均有统计学意义.结论 在HLA全相合同胞供者allo-HSCT中,供者或供受者均为IFN-γ +874 A/A基因型的患者较非A/A基因型患者粒系植入时间显著提前,而受者或供受者均为A/A基因型较非A/A基因型患者移植后发生Ⅱ~Ⅳ度GVHD、CMV血症及TRM的风险显著增加,EFS率显著降低.
作者：蔡小矜；宋阿霞；王华；张平；张桂新；杨帆；魏嘉璘；马巧玲；阎嶂松；姜尔烈；黄勇；杨栋林；王玫；何祎；冯四洲；韩明哲 刊期： 2012年第12期
目的 研究树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)为效应细胞的过继免疫联合化疗治疗多发性骨髓瘤(MM)患者的免疫机制和临床疗效.方法 将60例MM患者随机分为2组:化疗组30例,给予适合的化疗方案;联合组30例,除接受适合的化疗外,还给予DC-CIK免疫治疗.记录所有患者在化疗前后的免疫学指标,并比较治疗后两组患者的临床疗效.结果 化疗后,所有患者的免疫指标[热休克蛋白70表达水平为(20.87±4.79) μg/L;Th1/Th2比值为1.39±0.31;转移生长因子-β表达水平为(0.97±0.32 )μg/L;CD4+CD25+细胞百分比为(8.26±2.18)%]与化疗前[(18.24±4.16)μg/L、1.22±0.25、(1.19±0.46)μg/L、(10.31±2.54)%]比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05);治疗后,联合组患者的生活质量和临床疗效[PS评分为2.26±0.41;瘤细胞百分比为(24.73±6.38)%;β2微球蛋白表达水平为(7.14±2.03)mg/L;24 h尿液轻链为(11.26±3.67)mg;肌酐水平为(162.40±33.84)μmol/L]与化疗组患者[2.57±0.58;(29.12±8.67)%;(9.35±3.42)mg/L;(14.78±4.23)mg;(187.50±46.53)μmol/L]比较,均有所提高(P值均<0.05).结论 化疗能减轻MM患者肿瘤细胞的免疫抑制,促进DC-CIK的抗瘤活性;DC-CIK免疫治疗与化疗联合应用于MM患者具有良好的协同疗效.
作者：钟国成；颜斌；孙薏；张小玉；陈健；苏毅；孙浩平；龙海霞；朱波 刊期： 2012年第12期
目的 探讨多重连接探针扩增技术(MLPA)在血友病B(HB)基因诊断中的应用.方法 采用MLPA和短串联重复序列(STR)基因连锁分析对由于凝血因子Ⅸ(F9)基因大片段缺失导致测序失败的2个HB家系进行基因诊断.结果 MLPA检测结果显示,2例HB患者F9基因存在1或2个外显子的缺失,缺失位置Ratio值<0.10;患者母亲相应位置Ratio值为0.50±0.05,可判断为携带者;其他女性受检者Ratio值为0.71～1.30,可排除携带者.基因连锁分析与MLPA判断结论一致.结论 MLPA为HB的直接基因诊断提供了一种新的方法,可用于测序无法检出的F9基因大片段缺失的携带者诊断.
作者：陈星；梁燕；闫梅；刘敬忠 刊期： 2012年第12期
目的 探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血CD5+ B细胞数量及其分泌IL-10的能力及意义.方法 采用流式细胞术检测57例治疗前、40例治疗后ITP患者及25名正常对照外周血CD5+ B细胞比例及其在体外培养后胞内IL-10的平均荧光强度(MFI),ELISA方法检测培养上清液IL-10浓度;分析CD5+ B细胞特征与疾病状态的关系.结果 治疗前ITP患者外周血CD5+ B细胞占总淋巴细胞比例和绝对值计数[(3.75±2.37)%、(6.29±5.77)×107/L]均高于正常对照[(2.10±1.08)%、(3.06±1.90)×107/L](P值均＜0.05);ITP患者和正常对照外周血CD5+ B细胞的胞内IL-10的MFI水平均高于其他淋巴细胞亚群;治疗前ITP患者CD5+ B细胞中产生IL-10的细胞比例、胞内IL-10 MFI[(29.51±20.73)%、27.95±13.99]均高于正常对照[(15.90±9.58)%、14.31±11.29](P值均＜0.05),其细胞培养上清液中IL-10浓度[(173.05±102.50)ng/L]低于正常对照组[(230.61±76.96)ng/L];治疗后ITP患者CD5+ B细胞比例下降至正常水平,其胞内IL-10 MFI与治疗前无显著差异,仍高于正常对照组,但细胞培养上清液中IL-10水平恢复正常.结论 治疗前ITP患者外周血CD5+ B细胞比例升高、细胞内IL-10积聚,但分泌IL-10的能力下降;疾病缓解后,CD5+ B细胞的数量及分泌IL-10的能力得到恢复.
作者：李锋；化范例；季丽莉；詹延霞；邹善华；王小云；高松；邬扬炯；程韵枫 刊期： 2012年第12期
阿糖胞苷(Ara-C)是血液肿瘤治疗中重要的药物之一,临床证实其与多种药物联合可产生协同作用[1-2].近年大剂量阿糖胞苷(HD-Ara-C)联合大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)取得良好疗效,但对作用机制、药物相互作用研究较少,临床应用以经验为主[3].我们应用前期建立的反相高效液相色谱分析法(RP-HPLC)[4]测定HD-Ara-C联合HD-MTX静脉滴注后外周血单个核细胞内三磷酸阿糖胞苷(Ara-CTP)水平及荧光偏振免疫法测定MTX血药浓度,与单独应用HD-Ara-C或HD-MTX后药物浓度进行比较,分析不同方案所致不良反应与药物浓度之间的关系,探讨联合用药的疗效和不良反应发生机制、药物相互作用,为进一步优化治疗方案与策略提供实验依据.
作者：曲艳凝；江滨；王宇航；冯婉玉；江倩；江浩；刘晰 刊期： 2012年第12期
移植后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)是一组实体器官移植或造血干细胞移植(HSCT)后发生的异质性淋巴细胞增殖性疾病,总体发病率为1%~2%,当存在高危因素时,发病率可升至25%[1].随着异基因HSCT(allo-HSCT)在国内的广泛应用,PTLD越来越受到重视[2-3].然而,由于大多数PTLD患者呈急性播散性起病,病情短期内迅速进展,早期死亡率高达80%.常规治疗手段包括减停免疫抑制剂、放化疗、抗病毒治疗,疗效均较差.提高疗效的关键是在出现多脏器功能不全之前及时采取有效的措施治疗,包括抗CD20单克隆抗体(单抗)、供者淋巴细胞输注(DLI)和EBV特异性T淋巴细胞(EBV-CTL)输注[4-6].我们回顾性分析我院2006年1月至2011年12月间实施allo-HSCT后发生PTLD患者的诊治情况,现报告如下.
作者：顾斌；陈广华；王荧；胡晓慧；薛胜利；陈峰；何雪峰；傅琤琤；仇慧英；孙爱宁；吴德沛 刊期： 2012年第12期
移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患者死亡的主要原因之一.供、受者人类白细胞抗原(HLA)-A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB1 5个位点高分辨结果完全匹配时,Ⅲ~Ⅳ度急性GVHD(aGVHD)的发病率仍为30%;而当供、受者HLA位点及MHCⅠ类分子相关蛋白A(MHC class Ⅰ-related chain A, MICA)位点均匹配时,患者的生存率明显提高,证实MICA位点匹配对allo-HSCT有重要意义[1-2].MICA基因位于6号染色体HLA-B位点近着丝粒端46.4 kb,具有基因多态性.MICA基因主要表达于胃肠道上皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞表面,在大多上皮源性肿瘤细胞表面也有表达(如黑色素瘤),但在T、B淋巴细胞表面不能表达.MICA是NK细胞活化性受体(Natural killer group 2, member D,NKG2D)的配体,能通过NKG2D途径激活NK细胞、γδT细胞和αβCD8+T细胞等免疫细胞,在免疫应答及免疫调节中发挥重要作用.大量研究发现MICA基因多态性与allo-HSCT后GVHD、复发、感染等密切相关.我们就MICA基因多态性与allo-HSCT的新研究进展进行综述.
作者：郝玉娜；张庆波；孙玉英；奚永志 刊期： 2012年第12期
