目的 通过骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外生长分化因子-5(GDF-5)基因转染修饰,然后移植入退变的椎间盘中,观察修复椎间盘退变的效果.方法 脂质体介导的pcDNA3.1(+)/GDF-5重组质粒转染兔BMSCs,G418筛选稳定表达株;实验分为转染细胞组、BMSCs组、退变组,2个月后RT-PCR观察椎间盘髓核细胞GDF-5基因表达稳定性,间苯三酚法检测髓核蛋白多糖含量,流式细胞仪检测细胞凋亡率来观察修复效果.结果 RT-PCR结果 显示BMSCs转染GDF-5基因48h后以及移植手术后2个月时GDF-5基因表达稳定.转染细胞组和BMSCs组髓核蛋白多糖含量明显高于退变组(P＜0.01),转染细胞组高于BMSCs组(P＝0.05).退变组髓核细胞凋亡率比其他两组显著增高(P＜0.01),转染细胞组与BMSCs组之间没有差异(P＝0.09).结论 移植BMSCs或者GDF-5基因转染的BMSCs对退变椎间盘有修复作用,后者的修复效果更好.
作者：梁峰；贾长青；谭树森；刘振宁；柏树令 刊期： 2011年第04期
目的 观察链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的实验性糖尿病对APP/PSl转基因小鼠脑组织中糖原合成酶-3 α(GSK-3 α)蛋白活性的影响.方法 3月龄APP/PS1转基因小鼠腹腔内注射STZ建立实验性糖尿病模型.使用电子天平和便携式血糖仪定期检测小鼠体重和血糖的变化.应用免疫组织化学方法 和western blotting方法 检测AD转基因小鼠脑组织中p-GSK-3α和GSK-3α的蛋白表达.结果 动物饲养20W后,与APP/PS1转基因小鼠比较,STZ组APP/PS1转基因小鼠体重下降(P＜0.05),血糖则明显升高(P＜0.01),提示糖尿病模型诱导成功.Western blottintg结果 显示,STZ组转基因小鼠脑内p-GSK-3α蛋白表达水平较APP/PS1转基因小鼠明显降低(P＜0.01),而总GSK-3α蛋白没有变化(P＞0.05),两者的比值p-GSK-3d/GSK-3α下降49%(P＜0.01).免疫组化染色显示,STZ组APP/PS1转基因小鼠大脑皮层神经元内p-GSK-3α阳性表达明显低于转基因小鼠.结论 STZ上调APP/PS1转基因小鼠脑组织内GSK-3 α蛋白活性.
作者：王旭；于嵩；王明；杨鹤丹；蔡玉文 刊期： 2011年第04期
目的 研究不同浓度的萘普生钠对乳腺癌细胞凋亡的影响,探讨该药物对乳腺癌细胞促凋亡作用途径和方式.方法 分别用0mmol/L、1mmol/L、5mmol/L和10mmol/I浓度的萘普生钠处理乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231后,应用Annexin V/PI双染色法,流式细胞仪(BD FACScalibur)检测凋亡细胞,应用WesternBlot方法 检测各处理组乳腺癌细胞中ERK及p-ERK的表达情况.结果 流式细胞仪结果 显示MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率随萘普生钠浓度的增大而增加(P＜0.05),而在这两种乳腺癌细胞间无明显差异(P＞0.05).Western Blot结果 显示随萘普生钠浓度的增大,ERK的表达无明显变化,而p-ERK的表达下降(P＜0.05),同时药物浓度与p-ERK表达具有明显负相关.结论 萘普生钠可能通过抑制ERK磷酸化途径,减少p-ERK的表达,促进乳腺癌细胞的凋亡.
作者：李春杨；甄娟；陈晓玲；徐曼；安淑香；孟媛；宋敏 刊期： 2011年第04期
目的 探讨CYP1A1基因1462V多态性与非小细胞肺癌的相关性.方法 采用病例对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性对72例非小细胞肺癌患者(病例组)和90例正常对照(对照组)CYP1A1基因I462V多态进行检测,分析基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组的分布,比较不同基因型与非小细胞肺癌患病风险的关系.应用SPSS 13.0进行统计学分析.结果 在非小细胞肺癌组和正常对照组I462V多态基因型频率(2=14.971,P＝0.001)和等位基因频率(2=9.506,P=0.002)的分布存在显著性差异,且G等位基因携带者患非小细胞肺癌的风险高于A等位基因携带者(OR=2.080,95%CI 1.301～3.324).结论 CYP1A1基因1462V多态与非小细胞肺癌具有明显的相关性,具有G等位基因的个体非小细胞肺癌患病风险增高,CYP1A1基因可能是非小细胞肺癌的遗传易感基因.
作者：王佐周；王春渤；马业罡 刊期： 2011年第04期
目的 研究缓激肽(bradykinin,BK)对脑胶质瘤大鼠肿瘤微血管内皮细胞中转录因子核因子-κ B(nuclearfactor-kappaB,NF-κ B)的活性和表达的影响.方法 雌性Wistar大鼠96只,随机分为6组,即对照组、BK 5min组、BK 10min组、BK 15min组、BK 30min组和BK 60min组.每组16只.建立大鼠C6胶质瘤模型,颈动脉给药,应用TransAMTMNF-κ B p65试剂盒检测NF-κ B(p65)的活性;应用免疫组织化学法检测大鼠脑肿瘤微血管上NF-κ B(p65)的分布和表达水平变化;应用western blot法检测肿瘤微血管内皮细胞中NF-κB(p65)蛋白表达水平的变化.结果 与对照组相比,BK显著增强了NF-κ B的活性;在脑肿瘤组织,NF-κB(p65)主要表达在肿瘤微血管和肿瘤细胞上,BK能够增加NF-κ B(p65)在肿瘤微血管上的表达,并且上调肿瘤微血管内皮细胞细胞核中NF-κ B(p65)的蛋白表达,在BK作用15 min时效果显著(P＜0.01).结论 缓激肽能够增强脑胶质瘤大鼠肿瘤微血管中NF-κ B的活性和表达水平,NF-κ B可能是BK开放血肿瘤屏障机制之一.
作者：刘丽波；马腾；陈方圆；解辉；薛一雪 刊期： 2011年第04期
目的 探讨组织蛋白酶D(Cathepsin D,CD)和第10号染色体磷酸酶和张力蛋白同源丢失性基因(phosphatase andtension homolog deleted on chromosome 10,PTEN)表达与人胶质瘤恶性程度和侵袭性之间的关系.方法 采用免疫组织化学法和Western blot法检测46例胶质瘤标本和10例正常脑组织标本中CD及PTEN的表达情况.结果 CD阳性染色主要定位于细胞质内,呈棕黄色细颗粒状,在高分化组(Ⅰ-Ⅱ级)中呈散在的弱阳性表达,表达率为50%(14/28);而在低分化组(Ⅲ-Ⅳ级),表达明显增强,表达率为83.3%(15/18),与高分化组有显著差异(P＜0.05).PTEN阳性染色主要定位于细胞质内,46例胶质瘤中PTEN阳性表达18例(39.1%),高分化组(Ⅰ-Ⅱ级)中15/28例(53.6%)明显高于低分化组(Ⅲ-Ⅳ级)3/18例(16.7%,P＜0.05).结论 CD和PTEN的表达对分析、判断胶质瘤分级及恶性转化具有一定意义.
作者：曹英海；姚长义；雷鸣；卞威；夏春义 刊期： 2011年第04期
目的 探讨(-)表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响.方法 3-4月龄Wistar大鼠70只,用线栓法建立血管性痴呆(VD)动物模型,随机分为5组:假手术组,模型组、对照组、EGCG高剂量治疗组(6mg/kg/d)、EGCG低剂量治疗组(2mg/kg/d).水迷宫实验检测动物的学习记忆能力,免疫组化、Wstern Blot方法 检测Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 水迷宫结果 显示:模型组动物水迷宫潜伏期较假手术组明显延长(P＜0.05),EGCG高低剂量治疗组VD动物的水迷宫潜伏期较模型组明显缩短(P＜0.05).免疫组化和Western Blot结果 显示:与假手术组相比模型组动物Bax蛋白表达上升(P＜0.05),Bcl-2(P＜0.05)蛋白表达下降,EGCG治疗组Bax蛋白表达下降(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.01).结论 EGCG明显改善VD动物模型的学习记忆能力,可能与诱导脑组织Bcl-2蛋白表达及降低Bax蛋白表达量有关.
作者：孟令慧；陈福军；商秀丽 刊期： 2011年第04期
目的 研究出生前后不同浓度慢性铝暴露对年轻大鼠学习记忆行为学及海马细胞内CaMKⅡ表达影响,以探讨铝损害学习与记忆的突触机制.方法 45只大鼠随机分为对照组、0.2%-Al和0.4%-Al组大鼠,从孕期始分别自由饮用蒸馏水、Al3+浓度为15mmol·L-1和30mmol·L-1的AlCl3水溶液;采用跳台法测定海马长时程增强,采用Western-blot法检测海马细胞内CaMKⅡ的表达.结果 大鼠记忆保持测试结果 显示,与对照组相比,各铝暴露组跳下平台的潜伏期明显缩短(P＜0.01),5 min内错误次数显著增加(P＜0.01),且两铝暴露组间差异明显(P＜0.05);与对照组相比,两铝暴露组海马CaMKⅡ的表达明显降低(P＜0.01).结论 出生前后慢性铝暴露引起大鼠学习记忆能力的降低可能与海马CaMKⅡ的表达下调相关.
作者：刘鹏 刊期： 2011年第04期
目的 研究电刺激大脑岛叶对大鼠心率变异(Heart Rate Variability,HRV)的影响.方法 检测麻醉状态下大鼠的心电图(ECG),将动物分成未处理组、假手术组、500以及1000μA点刺激组,对各组大鼠进行ECG数据的采集,对各组大鼠心率变异的频域指标进行分析.结果 HRV各参数值发生变化,表现为心动周期的标准差(standard deviation ofR-Rintervals,SDNN)和相邻正常心动周期差值的均方根(the root mean square successive differencesin milliseconds,RMSSD)下降,而LF/HF(Lowfrequency/high frequency,低频/高频)升高,与假手术对照组之间比较,差异有显著意义,且1000 μA电刺激比500μA时HRV参数下降幅度更大.结论 LF/HF的明显升高提示电刺激大脑岛叶使交感和迷走神经功能失调而发生HRV改变.
作者：李亘松；孙娇；李森；邓欣；王洋 刊期： 2011年第04期
目的 探讨血清白细胞介素-6在神经胶质瘤患者预后中的潜在意义.方法 收集手术前182位神经胶质瘤病人和49位正常供血者的血清样本.使用酶联免疫吸附试验测定白细胞介素-6水平.与血清癌胚抗原(CEA)、甲胎球蛋白(AFP)和C-反应蛋白(CBP)水平比较,评估白介素-6的临床意义.结果 神经胶质瘤患者血清白介素-6水平明显高于健康对照组.血清白介素-6水平与癌胚抗原密切相关,但是与AFP和CRP关系不大.患者血清IL-6水平与患者TNM分期显著相关.此外,高血清的IL-6水平与神经胶质瘤的不良预后相关联.结论 血清IL-6是神经胶质瘤的预后因子.
作者：朱萧；王芳；卢敏莹；潘东晓；胡树珍；申鸿卓；罗凯；贺智敏；王金龙 刊期： 2011年第04期
目的 研究miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响.方法 将miR-19a模拟物转染至人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3,应用real-time PCR法检测miR-19a的表达.用过表达miR-19a的hCMEC/D3细胞和人U251胶质瘤细胞建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统检测血肿瘤屏障跨内皮阻抗值的变化;Western blot和免疫荧光法检测体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达.结果 经miR-19a模拟物转染后,hCMEC/D3细胞中miR-19a的表达水平显著升高;血肿瘤屏障跨内皮阻抗值显著下降;体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平显著降低,在细胞膜上呈不连续分布.结论 miR-19a过表达能显著增加血肿瘤屏障的通透性,其机制之一可能与降低紧密连接相关蛋白相关.
作者：王萍；刘云会；薛一雪 刊期： 2011年第04期
目的 探讨黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对缺血再灌注大鼠海马神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法 实验动物随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、BMSCs+黄芪组.采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,BMSCs组、BMSCs+黄芪组分别于建模成功后3 h经尾静脉注射已制备好的PKH26标记BMSCs悬液.另外BMSCs+黄芪组于缺血前5min、缺血后12h,24h腹腔注射黄芪皂甙Ⅳ.缺血再灌注72 h后,各组进行神经功能评分,应用荧光显微镜观察海马PKH-26标记的移植BMSCs分布,采用免疫组化法和实时荧光定量PCR方法 检测大鼠海马Bcl-2、Bax、caspase-3的表达,运用TUNEL方法 检测神经元细胞凋亡指数.结果 PKH-26标记的BMSCs在海马有表达.与模型组比较,BMSCs组与BMSCs+黄芪组均能够使大鼠神经功能损害评分降低(P＜0.01),BMSCs+黄芪组神经功能恢复为明显(P＜0.05).模型组Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白表达及细胞凋亡与假手术组差异显著(P＜0.01).与模型组比较,BMSCs+黄芪组和BMSCs组均可下调Caspase-3、Bax蛋白表达和细胞凋亡指数(P＜0.05),上调Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值(P＜0.05),其中以BMSCs+黄芪组作用更为显著(P＜0.05).实时荧光定量PCR显示:与模型组和BMSCs组比较,BMSCs+黄芪组能显著下调Caspase-3、Bax mRNA相对表达(P＜0.05),上调Bcl-2 mRNA相对表达(P＜0.05).结论 黄芪皂甙Ⅳ联合BMSCs移植对脑缺血再灌注神经元细胞凋亡有协同抑制作用,其作用机制可能与黄芪皂甙Ⅳ促进BMSCs抑制Bax、caspsse-3表达,增强Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值有关.
作者：王莹；李文媛；贾桦；佟晓杰 刊期： 2011年第04期
目的 研究脯氨酸丰富的肌醇多磷酸5-磷酸酶(proline-richinositol polyphosphate 5-phosphatase,PIPP)组氨酸557位点突变为丙氨酸时PIPPH557A在小鼠1-细胞期受精卵中对有丝分裂促进因子(MPF)的调节作用.方法 将HA-PIPPH557A、HA-PIPP和/或HA vecto转染到小鼠1-细胞期受精卵中,用激酶活性分析法和WesternBlotting方法 检测小鼠受精卵中MPF活性以及pCdc2Tyr15表达的变化.结果 HA-PIPpH557AA对小鼠受精卵MPF活性影响较小,但可以降低pCdc2 Tyr15的表达,与HA-PIPP的作用不同.结论 HA-PIppH557A在小鼠受精卵中通过失活PIPP降低pCdc2 Tyr15的表达调节小鼠受精卵的有丝分裂.
作者：邓欣；李亘松；胡庆哲；于秉治 刊期： 2011年第04期
目的 探讨肿瘤抗原负载的DC与DC-CIK细胞对B16恶性黑色素瘤荷瘤鼠的治疗作用.方法 在无菌条件下提取小鼠骨髓干细胞,应用相应的细胞因子诱导出DC与CIK细胞;然后通过肿瘤全细胞冻融法将DC进行肿瘤抗原负载;将抗原负载的DC与CIK细胞按1:10的比例进行共培养,即是肿瘤抗原负载的DC-CIK细胞.建立B16恶性黑色素瘤模型鼠.将30只B16恶性黑色素瘤模型鼠随机分为三组,分别注射肿瘤抗原负载的DC、DC-CIK细胞、生理盐水(对照组).测量治疗前后肿瘤体积的变化,计算抑瘤率.通过HE染色切片观察比较在对照组和不同治疗组中肿瘤细胞数量及形态学变化;通过免疫组化染色法,检测MMP-3分别在不同组中的表达.结果 治疗组均有明显的抗肿瘤作用,抗原负载的DC-CIK明显优于抗原负载DC的治疗作用;MMP-3的表达在抗原负载的DC-CIK治疗组明显低于抗原负载的DC治疗组,而对照组MMP-3则高表达.结论 抗原负载的DC-CIK和DC有明显的抗肿瘤作用,DC-CIK优于DC,这一作用与其对MMP-3表达的调节有关.
作者：王忠成；王钰 刊期： 2011年第04期
目的 构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO3在HEK293细胞内的定位.结果 hLMO3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为440 bp;Western blot检测到融合蛋白在HEK293细胞表达,分子量约为42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293细胞中主要定位于细胞核内.结论 成功构建了hLMO3基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO3蛋白在HEK293细胞中主要定位于细胞核内.
作者：顾卉；佟宇鑫；刘彤；李妍；李丹妮；袁正伟 刊期： 2011年第04期
目的 构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 利用Kpn1和Xho1位点酶切pcDNA3.1-RUNX3质粒,将获得的1300bp RUNX3编码序列插入到pGEX-4T-2中,构建pGEX-4T-2-RUNX3质粒,并转化Ecoli DH5α,筛选阳性重组子,酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coliBL21中,经IPTG诱导表达后SDS-PAGE电泳鉴定.结果 酶切pGEX-4T-2-RUNX3质粒获得1300bp RUNX3片段,经测序后获得的DNA序列与GenBank进行同源性比对,证实pGEX-4T-2-RUNX3构建成功.在E.coliBL21用IPTG进行诱导表达后,SDS-PAGE电泳方法 证实了GST-RUNX3融合蛋白表达.结论 成功构建了RUNX3原核表达载体,其融合蛋白在大肠埃希菌表达,为进一步纯化RUNX3蛋白和研究RUNX3的生物学功能奠定了基础.
作者：王桂玲；王孝会；都田赵；陈薇；姜佩家 刊期： 2011年第04期
作为基质金属蛋白酶家族成员之一,牙釉质基质金属蛋白酶-20(matrix metalloproteinases,MMP-20)是近几年来被发现并证实的MMP家族的新成员,又称为釉质溶解蛋白(enamelysin),主要在成釉细胞的分泌期降解牙釉质蛋白,是一种牙齿特异表达的基质金属蛋白酶,与牙釉质发育和疾病有密切关系.在牙体组织的生理与病理过程中发挥作用.
作者：付廷刚；张静；韩婷婷 刊期： 2011年第04期
膀胱出口梗阻(bladderoutlet obstruction,BOO),是指膀胱出口至尿道外口之间任何部位出现梗阻,它对膀胱逼尿肌功能的影响包括逼尿肌不稳定(DI)、逼尿肌收缩功能受损和逼尿肌顺应性改变.BOO致膀胱逼尿肌损害的患者在临床上极为常见,但由于这种损害的具体机理还不明确,故疗效欠佳.多年来研究发现其损害机理涉及膀胱的神经支配、基因表达和转录、超微机构等的变化,机理十分复杂.
作者：王晓鹏；张春阳；姜华茂 刊期： 2011年第04期
骨髓基质细胞具有高度的增殖能力和神经分化潜能,可用于治疗缺血性脑损伤,其作用机制可能是通过增殖、分化替代受损神经细胞并整合到原有的神经网络当中,分泌生长因子和神经营养因子促进内源性神经干细胞的增殖与分化、促进血管发生、增强轴突可塑性、减少神经细胞凋亡等,以促进神经功能恢复.
作者：李文慧；席焕久 刊期： 2011年第04期
纳米技术是指在0.1-100nm量度范围内对物质结构和制造技术进行研究.纳米粒子能够进入细胞并与细胞及其组织发生作用,从而在分子水平上产生生物效应.由于纳米粒子可以和有机高分子多肽、无机盐等结合通过血脑屏障,已经在中枢神经系统药物转运、中枢神经系统疾病的诊断和治疗中发挥重要作用.本文从纳米粒子与血脑屏障的关系、纳米粒子在神经系统的保护、神经系统的再生中的作用等几方面阐述纳米技术在中枢神经系统应用中的现状与前景.
作者：刘啸白；李冬阳；刘丽波 刊期： 2011年第04期
人体解剖学是医学生先接触的医学基础课程,是认知人体结构的基本课程,人体解剖学的实验教学是学习人体结构的重要途径和手段.通过让学生在真实的人体标本上观察和触摸,形成真实、清晰的感性认识,增强对人体结构中名词、结构的认知和记忆.传统的人体解剖学实验教学是教师引导学生逐一辨认结构和器官,学生缺乏独立思考和感知的机会,在这种模式下形成的对结构和器官的认识往往是肤浅、片面的,缺乏深切的体会.
作者：王家增 刊期： 2011年第04期
人体解剖学是一门研究人体正常形态结构的科学.只有正确认识人体的形态结构,才能对异常的病理过程做出判断,才能进一步对疾病实施正确的诊断和治疗.因此,人体解剖学既是基础医学课程的必修课,也是学习临床医学课程的先修课.人体解剖学属于生物学中的形态学范畴.对于刚刚进入校门的医学生来说,内容繁琐而抽象.所以,为了使学生牢固、灵活地掌握人体解剖学基础知识,培养学生自主学习和临床应用能力,正确而有效的教学方法 非常重要.目前,本学系针对临床专业的医学生多采用讨论式教学方法 ,以下是在教学实践中的几点体会.
作者：关晓伟；李敏；肖明；丁炯 刊期： 2011年第04期
