目的 体外构建含有人4-IBBL基因的重组腺病毒载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法 设计一对含有Sfil酶切位点的4-1BBL因上下游引物,以质粒pCR4-TOP0-4-1BBL为模板,通过PCR扩增获得4-1BBL基因全序列.片段回收后经酶切处理,连接到穿梭质粒pShuttle-CMV-EGFP上,获得重组穿梭质粒pShuttle-ECFP-4-1BBL.经Sfil酶切、PCR及插入片段测序鉴定正确后,将其用I-Ceul和I-Scel双酶切处理,转移到pAdxsi载体上,得到pAdxsi-GFP-4-1BBL病毒质粒,PCR鉴定正确后,经HEK293细胞包装成复制缺陷型腺病毒Ad-4-1BBL,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,Western blot检测目的 基因人4-1BBL的表达.结果 酶切鉴定和序列分析证实,重组腺病毒质粒含有人4-1BBL全长cDNA编码序列,病毒滴度为1.2×10<'10>pfu/mL.转染HEK293细胞后荧光显微镜下观察到CFP的表达,Western blot检测可见4-1BBL蛋白的正确表达.结论 人41BBL基因重组腺病毒载体的成功构建和在HEK293细胞中的表达,为下一步将其应用于前列腺癌的免疫治疗奠定了基础.
作者:杨明花;王帅;田昕;王扬;隋承光 刊期: 2011年第05期
目的 探讨同时携带CRT基因及MAGE-A3基因的重组腺病毒载体转染人胃癌细胞SGC-7901的表达及对其体外侵袭、凋亡及血管形成能力的影响.方法 Ad-CRT/MAGE-A3转染SGC-7901,转染48h后以Western blotting法检测CRT及MAGE-A3蛋白的表达,Transwell方法检测Ad-CRT/MAGE-A3对SGC-7901细胞侵袭的影响,Annexin V -FITC/PI双染法检测Ad-CRT/MAGE-A3对SGC-7901细胞凋亡的影响,小管形成实验检测AdCRT/MAGE-A3对血管形成的影响.结果 转染48h,Westem blotting结果显示转染Ad-CRT/MAGE-A3的SGC7901细胞能够表达CRT及MAGE-A3蛋白,Transwell检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制SCC-7901的侵袭能力,Annexin V -FITC/PI双染法检测结果证实Ad-CRT/MAGE-A3在实验的转染条件下对SGC-7901并无诱导凋亡的作用,小管形成实验结果显示Ad-CRT/MACE-A3能够明显抑制血管形成.结论 Ad-CRT/MAGE-A3明显抑制SGC-7901的侵袭能力和血管生成,提示Ad-CRT/MAGE-A3可以作为潜在的胃癌基因治疗的新方法.
作者:刘新莉;赵丹;李岩;马萍 刊期: 2011年第05期
目的 构建人hRNF6基因的原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达.方法 提取前列腺癌细胞CWR22Rvl的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hRNF6全长编码基因,并将其克隆至GST融合表达载体pGEX5X-1,在E.coli BL21中诱导GST-hRNF6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果.结果 hRNF6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量为104KD,免疫印迹检测到了融合蛋白表达.结论 成功构建hRNF6基因原核表达载体,诱导表达出GSTRNF6融合蛋白.
作者:刘彤;李洋;李丹妮;李丰 刊期: 2011年第05期
目的 观察水通道蛋白1(AQPl)在小鼠口腔粘膜的表达与分布,为研究AQP1在口腔水代谢和感觉传递中的作用提供形态学依据.方法 制备成年小鼠口腔各部粘膜石蜡切片,进行AQP1免疫组织化学染色.结果 AQP1免疫阳性产物在唇、颊、硬腭、软腭和舌粘膜下层的毛细血管和神经纤维上广泛表达.另外在上述部位的腺泡和腺管周围的肌上皮细胞以及舌的味蕾和丝状乳头上也有AQP1免疫阳性信号.结论 AQP1在口腔广泛分布,可能参与了唾液分泌和口腔感觉传递等生理过程.
作者:谭美芸;高俊英;丁炯;肖明 刊期: 2011年第05期
目的 建立一种稳定的大鼠胎鼠海马神经元培养方法并能够有效的鉴定其纯度,探讨用化学转染试剂体外转染大鼠胎鼠海马神经元的佳转染条件.方法 分离Wista大鼠E18d胚胎并取海马组织,无血清培养基培养并做MAP2荧光染色鉴定其纯度.应用lipofectamine <'TM>2000转染试剂盒,大鼠神经元电转试剂盒,lipofectamine<'TM> LTX转染试剂盒,三种不同方法包被质粒转染体外培养海马神经元.转染后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率.结果 用无血清培养方法培养的海马神经元成活率好,MAP2荧光染色鉴定其纯度高于80%.三种转染方法的转染率lipofectamine<'TM> 2000转染试剂为(14.05±2.32)%,大鼠神经元电转试剂为(52.39±1.68)%,lipofectamine<'TM> LTX转染试剂为(22.87±5.32)%,其中电转试剂转染这种方法转染率高.结论 电转试剂能有效地转染体外培养的大鼠胎鼠海马神经元,同时保持很好的神经元存活率,是一种比较合适的神经元转染方法.
作者:张勇;张国宁;丛敬;倪月秋 刊期: 2011年第05期
目的 观察β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法 取C57小鼠6只及APP/PS-1转基因小鼠12只,C57小鼠为对照组(Control)、APP/PS-1小鼠12只随机分为模型组(APP/PS-1)和实验组(APP/PS-1+20HE),实验组APP/PS-1转基因小鼠按14.4mg/kg的剂量灌胃β-蜕皮甾酮,每日一次,对照组及模型组小鼠灌胃等量蒸馏水,连续灌胃8周,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,尼氏染色观察各组小鼠海马组织病理学变化,免疫组化法观察海马Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果 模型组小鼠与对照组小鼠相比,认知能力明显下降(P<0.01),海马Bcl-2和Bax蛋白表达均增加.实验组与模型组相比,学习记忆能力明显改善(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达增加,Bax蛋白的表达减少.结论 β-蜕皮甾酮能够改善APP/PS-1转基因小鼠的学习记忆能力,可能与促进海马Bcl-2蛋白表达和抑制Bax蛋白表达有关.
作者:陈月;孟令慧;冯婉玉 刊期: 2011年第05期
目的 研究HDPR1(human homologue of Dapper)在肺癌表达与p120ctn和β-catenin异常表达相关性的可能调节机制.方法 运用siRNA技术沉默肺癌细胞系的HDPR1表达后,应用RT-PCR和Westem blot技术观察p120ctn和β-caterun的表达情况,并应用基质胶侵袭实验观察肺癌细胞的侵袭能力.结果 沉默肺癌细胞系中HDPRI表达后,p120ctn的表达明显下调,而β-catenin的表达明显上调,肺癌细胞的侵袭能力明显增强.结论 肺癌细胞HDPR1的表达下调可通过下调p120ctn蛋白分子的稳定性和/或间接上调β-catenin的表达,从而促进肺癌细胞的侵袭能力.
作者:宋清斌;杨志强;王恩华 刊期: 2011年第05期
目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)-C和趋化因子受体CCR7在膀胱移行细胞癌组织内的表达情况,分析VEGF-C和CCR7表达与癌淋巴结转移之间的关系.方法 取膀胱癌病例60例,其中,淋巴结转移组36例,无淋巴结转移组24例.应用免疫组化法和Western blot技术观察VEGF-C和CCR7在膀胱癌组织内的表达.结果 VEGF-C和CCR7主要表达于膀胱癌细胞胞浆或,和胞膜内,二者在淋巴结转移组的表达率明显高于无淋巴结转移组.VEGF-C和CCR7蛋白同时表达在淋巴结转移组和非淋巴结转移组中的表达率分别为61.1%和33.3%,VEGF-C和CCR7的表达具有显著的相关性,联合检测VEGF-C和CCR7诊断膀胱癌淋巴结转移具有较高的准确度,ROC曲线下面积达0.708.结论 VEGF-C和CCR7在促进膀胱癌淋巴结转移中可能具有一定的协同作用,二者联合检测有助于膀胱癌淋巴结转移的早期诊断
作者:黄启成;李鑫磊;杨树才;孔建;马晶 刊期: 2011年第05期
目的 研究p120-catenin( p120ctn)对肺癌细胞是否有调节作用,探讨其对细胞周期是否具有调节功能.方法 应用siRNA方法建立p120ctn基因沉默的多种癌细胞系BEI,SPC和LTE的细胞克隆后,采用流式细胞术和裸鼠移植实验在活体内外观察p120ctn对肺癌细胞的生长是否具有调节作用.结果 我们发现在p120ctn基因沉默的肺癌细胞系中,细胞的S期峰值明显增高,而Gl期峰值明显减低.活体内的实验结果也显示注射p120ctn-siRNA肺癌细胞系的裸鼠形成的移植瘤的平均重量明显大于对照组和未转染组.结论 p120ctn参与细胞周期调节,缺失可促进肺癌细胞的生长.
作者:刘楠;刘洋;王恩华 刊期: 2011年第05期
目的 通过不同的测量方法的对比分析,探讨科学准确的辽宁汉族学生指长比的测量方法.方法 随机抽取辽宁地区汉族的学生245人(男124人,女121人),分别应用直接测量(Z)、放射X线(X1)、放射X线(X2)三种方法测量其手指2D、3D、4D、5D的长度,比较其均值及不同测量方法的差异.结果 直接测量和放射线X1、X2三种方法均发现男女右手2D:4D指长比存在性别差异(P<0.01),直接测量方法显示左手2D:5D指长比也存在明显的性别差异,放射线XI测量方法显示左、右手的2D:3D、2D:4D、2D:5D以及右手的3D:4D、3D:5D指长比存在明显的性别差异,放射线X2方法还发现右手的2D:3D、2D:5D、左手的2D:4D以及左右手的3D:5D、4D:5D存在显著的性别差异.结论 右手2D:4D、左手2D:5D指长比存在显著的性别差异,三种方法都可应用于2D:4D、2D:5D指长比的研究.
作者:裴林国;孟凡丽;胡庆甫;张园园;席焕久 刊期: 2011年第05期
损毁、药物失活和电生理记录等领域研究的结果提示,小脑皮层是参与经典眨眼条件反射建立、保留和任务执行过程的关键脑区.在此,本文综述了近年来关于小脑皮层在经典眨眼条件反射过程中作用和机制的研究进展.
作者:陈浩;杨丽;隋建峰;胡波 刊期: 2011年第05期
C-型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)是在软骨内成骨过程中具有重要作用的多肽类物质,在软骨内成骨过程中发挥重要作用,主要通过CNP内源性配体系统发挥其成骨作用.由于CNP在软骨内成骨中的特殊作用,渴望通过检测CNP来r解成骨状况及建立骨龄评估的新方法,将为临床骨龄评估提供一种更科学简便的检测手段,即通过血液检测,就可以判定和评价儿童骨骼的发育状况,可为临床及运动医学提供更科学准确的评估指标.
作者:古月;李文飞;段相林;于鹏 刊期: 2011年第05期
蛋白酶活化受体4(PAR4)是G蛋白偶联受体家族成员之一,可被凝血酶、胰蛋白酶活化.PAR4是血小板活化和炎症的强力调节受体,活化的PAR4可作为潜在的内源性镇痛因子,在正常和炎症条件下参与调节外周疼痛反应.PAR4通过致敏TRPV1、细胞内Ca<'2+>的释放和刺激周围感觉神经末梢释放P物质和CCRP参与了炎症和疼痛的周围机制.PAR4直接与电压门控Ca<'2+>通道的相互作用可能是PAR4对细胞除极诱发的Ca<'2+>信号产生抑制作用和PAR4参与镇痛的作用机制.
作者:王昭金;陈丹;张在峰 刊期: 2011年第05期
功能磁共振成像提供了一种无创的、在活体中间接检测神经活动的神经成像方式.功能磁共振成像技术在视觉、听觉以及记忆等认知神经科学领域取得了明显进展,其中包括通过任务或刺激模式下特定的实验设计,定位与这些认知过程相关的活动皮层区、发现某些疾病与功能丧失的联系,以及应用静息态功能磁共振成像对脑功能连接的探讨.本文还讨论了目前研究的局限性,并对未来的应用领域进行了展望.
作者:吴佳;张进禄;叶德荣 刊期: 2011年第05期
骨髓间充质干细胞(BMSCs)应用的安全性已经越来越受到关注,BMSCs可通过以下机制促进肿瘤生长并形成肿瘤.首先作为一种免疫缺陷细胞,BMSCs可逃避T细胞的识别,并通过IDO,PEGE2等多种途径抑制T、B淋巴细胞增殖及功能.其次,BMSCs还可能分化为内皮细胞及血管周细胞,参与构建肿瘤基质而促肿瘤生长.再次,有研究显示,长期体外扩增BMSCs,可致其出现永生化并显现肿瘤细胞特点,如形态变小而致密,表面标志物表达异常,接触抑制减弱及端粒酶活性增强等,移植入动物体内,可形成肉瘤.BMSCs恶性转变及成瘤的遗传学原因与染色体不稳定或基因序列错误累积有关,包括染色体增加、缺失及转位等.本文就近期有关骨髓间充质干细胞应用安全性的研究进行综述.
作者:胡宜;程鹏;刘云会 刊期: 2011年第05期
人的差异问题是人类学的中心问题,是国内外研究的热点和重点.人的差异不仅表现在生物学上(包括形态学、生理学、生物化学、药物代谢、免疫学与疾病易感性、体成分、体能等),还表现在地域、时间、种族与民族、性格、性别等多方面.这些差异产生的原因主要来自生态学因素(或环境因素)和遗传因素等.人的差异及其影响因素的研究对人类学、医学、法医学、考古学和人类生态学等都具有重要意义.
作者:席焕久;李文慧;张美芝;温有锋;杜雪;李超 刊期: 2011年第05期
纳米导管可以效仿细胞外基质的纤维结构,为细胞的存活、分化等提供合适的微环境.电纺技术是较为成熟的制备纳米导管的方法.多项细胞生长与增殖的实验表明纳米导管的生物相容性良好,对免疫系统也未见明显影响.在神经修复领域,实验证实纳米导管对于神经细胞与神经突的再生,神经胶质细胞的吸附与生长都具有促进作用;此外纳米导管还可以用来作为神经营养因子的载体,为神经修复过程创造适宜的生物微环境.
作者:程辰;丁文龙 刊期: 2011年第05期
中枢神经系统(CNS)损伤后因胶质瘢痕形成而导致神经元的轴突不能再生,功能恢复不良.胶质瘢痕的重要组分是硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs),其单独或与其它细胞外基质结合,导致向损伤部位延伸的轴突在胶质瘢痕处停止,而且CSPGs在神经再生时间窗关键期末可降低轴突生长的可塑性.近年研究发现硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)能通过降解CSPGs,使轴突的再生能力加强,活化轴突生长的可塑性,促进CNS损伤后的运动功能恢复.本文综述了近年来ChABC对中枢神经系统神经再生和可塑性作用的研究进展.
作者:王莹;贾桦;李文媛;佟晓杰 刊期: 2011年第05期
组织学与胚胎学是一门重要的医学基础课程,开设在大学一年级,然而大一的学生刚从中学毕业,没有相关学科的专业知识,没有完善的空间思维和立体概念,加之本课程内容多,知识面广,专业性强,授课学时少,对于刚踏入医学院校的这些初学者接受起来有一定难度,易导致学生缺乏学习兴趣.
作者:霍小蕾;贾书花;李凯平 刊期: 2011年第05期
随着社会经济的发展,人们健康的水平不断改善,对健康服务也提出了更高的要求.为更好地适应社会需要,高职院校培养的护理专业学生,不但要有扎实的医学理论知识,熟练的技术本领,还要具备良好的科学的思维能力和高尚的医德修养,所以,加强学生的德育教育是非常重要的.
作者:李玉彬 刊期: 2011年第05期
科学的医学教学方式是培养医学生学习方法的有效途径,科学的医学教学过程应具备以下三个特点:减少冗余课程内容;尽可能多的安排实习实践课;培养学生创造创新思维能力.
作者:易新;李波;马嘉;谭学新 刊期: 2011年第05期
家畜解剖学是研究畜禽有机体形态、结构、位置、相互关系和发生发展规律的学科,是一门形态学<'[1-2]>.这门课教给学生许多畜牧兽医学知识和名词,是畜牧、兽医专业的专业基础课程.
作者:李奎;肖传斌;张书松;刘忠虎;靳向阳 刊期: 2011年第05期
局部解剖学是医学生,尤其是临床医学、口腔医学等专业学生必修的一门基础课程,它侧重于人体局部的层次结构,器官位置及毗邻关系的学习,是基础与临床一门桥梁课程<'[1,2]>.
作者:戴景兴;沈志勇;刘晓静;焦培峰;原林 刊期: 2011年第05期
在解剖一具成年男性尸体标本时,见其双侧胸大肌肌束异,查阅文献资料未见此类报道.为积累人类学资料并供临床外科手术参考,现报道如下:成年男尸,约60岁,身高174 cm,坐高97 cm,发育良好.
作者:刘雪亚;马建军;胡威利;王刚阳;杨传维;杨路焕;杨秀林;付海真 刊期: 2011年第05期
在临床和科研工作中切片大部分都是以HE染色树胶封片,这样可样将切片长期保存.但是往往因为原有组织块丢失而或其他原因需要在原有石蜡HE染色切片原位基础上行免疫组织化学检测.本文就上述问题做了尝试并得到了较好的效果.
作者:宁斌;马云胜;翟效月;赵永江;戚万强 刊期: 2011年第05期
国内已有胎儿整体血管铸型标本制作的相关报道<'[1-2]>,但铸型标本均没有保留骨骼,这样不能较直观地定位血管位置,缺乏整体立体感.目前,20W以下较小胎儿保留骨骼的动脉铸型标本制作尚未见有相关报道.
作者:黄海龙;陈丽娟;杜尧平;钟卫娟 刊期: 2011年第05期
人体解剖学是医学院校教学的基础课程之一,是所有医学专业的必修课程.人体解剖学教学标本多少年来一直是使用福尔马林溶液进行固定,而多聚甲醛分解后的甲醛是一种易挥发、具有刺激性气味且对人体多个脏器有严重危害的化学物质,在人体解剖学课程的学习和教学过程中,甲醛的刺激性气味使广大的解剖学教师和学生深受其害.
作者:靳建亮;李林;贺建文;於平;肖明;韩群颖;丁炯 刊期: 2011年第05期