目的:研究酶酚酸酯(MMF)对大鼠肾病综合征的治疗作用,为临床应用提供依据.方法:经尾静脉一次性注射阿霉素,构建大鼠肾病综合征动物模型,观察MMF对大鼠肾病综合征血、尿生化指标、淋巴细胞电压依赖性钾通道及肾脏组织学改变的影响,并与强的松进行对照研究.结果:注射阿霉素14 d,大鼠肾病综合征模型建立,模型鼠表现外周T淋巴细胞电压依赖性钾通道电流增强. MMF治疗可使大鼠尿蛋白和血尿素氮明显下降, 血白蛋白上升, 肾脏病理显示足突无明显融合,疗效明显优于强的松治疗组.结论:在阿霉素诱导的大鼠肾病综合征模型的形成中,细胞免疫参与了其发病.MMF能明显改善模型鼠的肾功能并减轻肾脏组织形态学损害,且疗效优于强的松.
作者：毕黎琦；刘晓敏；何成彦；李颖 刊期： 2000年第12期
目的:采用分子杂交及PCR方法,分析鸭α-干扰素基因的表达及多态性.方法:从鸭外周血分离出的单核细胞在体外经PHA(5 μg/ml)刺激不同时间后,提取总RNA.以RT-PCR方法检测鸭α-干扰素(DuIFN-α)mRNA表达状况.引物根据近公布的DuIFN-α基因序列设计.从鸭外周血单核细胞中提取的基因组DNA经限制性内切酶BamHI, HindIII, PstI, XbaI消化后,以公布的DuIFN-α序列为探针,采用Southern杂交分析DuIFN-α基因的多样性.结果:在未经PHA刺激的鸭外周血单核细胞(PBMCs)中,未检测到DuIFN-α表达;PHA刺激4 h后,即可检测到DuIFN-α表达,一直持续到24 h.基因组DNA限制性内切酶多态性分析表明,PstI酶切后,出现片段大小各异的杂交信号,提示DuIFN-α存在多样性.结论:鸟类α-干扰素基因与哺乳动物类似,也具有多样性.
作者：黄爱龙；Allison Jilbert；Ieva Kotlarski 刊期： 2000年第12期
目的:研究可溶性syndecan-1(CD138)分子对人多发性骨髓瘤(MM)细胞生长行为的影响及其机制.方法:用亲和层析法分离可溶性syndecan-1;借助3H-TdR 掺入、间接免疫荧光、ANNEXIN-V及PI标记分析MM 细胞增殖、凋亡及周期变化.结果:①从XG-2细胞培养上清中分离纯化得到分子量为60 kD左右的可溶性 syndecan-1 分子;②可溶性 syndecan-1分子在体外能抑制XG-1增殖,阻滞细胞增殖停留在G2/M期,并介导其凋亡; FGF、5%小牛血清、肝素酶III可逆转一定浓度可溶性 syndecan-1的作用,HGF、VEGF和IGF-1可部分逆转可溶性syndecan-1分子对细胞的生长抑制作用;③IL-6及激发型抗IL-6R130(gp130)单抗对可溶性syndecan-1作用无影响. 结论:可溶性syndecan-1分子通过不同于IL-6及其受体的信号传导途径,参与了人多发性骨髓瘤细胞的生长调控.
作者：李新燕；陆肇阳；Klein B；张学光 刊期： 2000年第12期
机体抗肿瘤免疫主要是细胞免疫介导的,体内的抗肿瘤细胞毒效应细胞有:①CTL细胞;②NK细胞;③巨噬细胞.巨噬细胞通常以常在性巨噬细胞存在于机体各组织中,受到刺激后成为活化巨噬细胞,从而获得多种生物学功能,包括对肿瘤细胞的细胞毒功能.与CTL及NK细胞相比,巨噬细胞抗肿瘤作用机理的研究还远不够深入.主要组织相容性复合体是一组高度多态性的基因群,其编码的I及II类分子在抗肿瘤细胞毒作用中起着限制性识别和介导杀伤的重要作用,细胞毒效应细胞的MHC限制性成为肿瘤细胞过继治疗的不利因素.活化巨噬细胞与肿瘤细胞的直接接触是其发挥细胞毒作用的前提条件,细胞粘附分子在此过程中介导效靶细胞间识别、粘附和信号传递,从而参与细胞毒细胞的杀伤机理.因此研究巨噬细胞细胞毒功能的MHC限制性和相关粘附分子在巨噬细胞杀伤时所起的作用,对明确巨噬细胞的杀伤机理是极其重要的.
作者：牛春波；谭岩；贾飞勇 刊期： 2000年第12期
单克隆抗体亲和层析技术可用来从体液、组织抽提液、细胞培养液中,特别是从基因工程菌体破碎液等复杂组成物中分离出微量蛋白质和多肽.由于其特异性高,操作简便而迅速,在高价值蛋白质和治疗用多肽的下游处理过程中,作为一种良好的分离纯化工具,有较广泛的适用性.本文运用该技术从人生长激素(hGH)基因工程菌发酵破碎液中一步分离制备高纯度并具有生物活性的重组hGH.
作者：陈登鸿；严鼎 刊期： 2000年第12期
目的:探讨IL-12基因转染的树突状细胞(DCs)能否体外加强细胞免疫反应.方法:脂质体转染(经过Flt-3L、SCF、GM-CSF刺激)增殖周期中的DCs前体细胞.加入GM-CSF、IL-4和TNF-α扩增转染细胞.在流式细胞仪上分析细胞表型及IL-12的表达.成熟DCs装载上分别能与HLA-I 类和HLA-II类分子结合的多肽,观察IL-12基因转染DCs对特异性Th细胞发育及特异性CTL诱导和功能的影响.结果:IL-12基因转染细胞在上述细胞因子作用下发育成为能有效表达IL-12并具有典型形态学与表型特征的DCs.在装载上CD4+T细胞表位HBcAg50-69后,能诱导这些细胞发育成为IFN-γ产生型的Th1细胞.HLA-A201亚型DCs在其同时装载CD4+T和CD8+T细胞相应的表位后,IL-12 基因转染DCs所诱导产生的自身淋巴细胞的CTL效应增强.结论:IL-12基因转染的DCs能增强对Th1细胞的刺激和CTL效应的诱导能力,提示它在肿瘤疫苗发展中的潜力.
作者：曲春枫；顾培娣；鞠吉雨；孙宗棠 刊期： 2000年第12期
转移因子(transfer factor,TF)是介导细胞免疫的重要因子之一,其TF口服液具有协同诱导人T淋巴细胞IFN-γ和HLA-DR/DQ分子的表达[1],促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能,促进人T淋巴细胞增殖发挥良好的免疫调节作用[2].为进一步了解TF口服液协同诱导细胞因子的分泌和CD分子的表达,我们以TF口服液加入外周血淋巴细胞培养,观察其协同PHA诱导T细胞、IL-2、IL-6的分泌及CD3、CD4、CD8T细胞的变化.
作者：孙万邦；张忆雄；王燕妮；李官成；宋明英；罗军敏；黄俊琼 刊期： 2000年第12期
目的:研究登革病毒E基因免疫的可行性.方法:用脂质体转染法将构建的E基因重组真核表达质粒pcDNA3-E导入小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞,SDS-PAGE和蛋白质印迹试验检测E基因的体外表达.然后将该重组真核表达质粒经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,检测其诱发特异性免疫应答水平.结果:重组真核表达质粒pcDNA3-E在小鼠体内诱发一定水平的体液和细胞免疫应答,且持续时间较长.结论:登革病毒E基因免疫可诱发特异性免疫应答,为登革病毒疫苗的研制提供了实验依据.
作者：洪帮兴；江丽芳；张欣；郭辉玉 刊期： 2000年第12期
目的:探讨肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor α, TNF-α) 对晶状体上皮细胞在细胞外基质上的粘附移行作用,以及在此过程中整合素分子的表达情况.方法:借助细胞粘附实验和移行实验研究TNF-α对体外培养的牛晶状体上皮细胞在细胞外基质上的粘附和移行,以及整合素抗体封闭后对细胞的影响.TNF-α对细胞表面整合素的表达调节经免疫荧光染色后由流式细胞仪检测.结果:TNF-α可以明显促进晶状体上皮细胞在Ⅳ型胶原、层粘蛋白、纤维连接蛋白上的粘附移行.抗体封闭实验表明整合素β1、α2、α3、α5亚基参与细胞的粘附,在细胞移行中发挥主要作用的是α亚基而非β亚基.流式细胞仪检测表明TNF-α可上调晶状体上皮细胞中整合素的表达.结论:胶原、层粘蛋白、纤维连接蛋白是晶状体囊的主要成分,肿瘤坏死因子α促进晶状体上皮细胞与晶状体囊膜成分的粘附移行,该作用的发挥至少部分通过TNF-α上调整合素分子在细胞上的表达而实现.
作者：张晓红；孙慧敏；陈桂彬；苑晓勇；袁佳琴 刊期： 2000年第12期
目的:通过体外分离、增殖培养获取γδT细胞、NK细胞和LAK细胞,并比较了3种细胞的抗肿瘤的生物学特性.方法:收集用不同单抗分别包装被粘附的细胞,然后通过MACS细胞分选仪的分选,获取的细胞进行细胞增殖动力学、细胞表型、细胞杀伤活性的测定以单抗阻断效应的分析.结果:经MACS分离得到的γδT细胞,培养2 w后细胞数扩散600～800倍,CD3、CD8和γδ细胞表达阳性率分别是72.29%、58.02%和65.98%.γδT细胞对NK敏感细胞K562以及NK不敏感细胞Raji和XG-7这3种不同靶细胞均有较高的杀伤率,分别为35.98%、42.27%和69.08%;NK细胞对此3种细胞的杀伤率分别是45.12%、12.34%和29.27%;LAK细胞的杀伤率分别为44.01%、29.27%和25.68%.γδT细胞对经MHC-Ⅰ类单抗阻断前后的K562、Raji和XG-7 3种靶细胞的杀伤率无明显改变.结论:γδT细胞、NK细胞和LAK细胞都具有一定的非特异性杀伤肿瘤细胞的作用;γδT细胞对MHC-Ⅰ类单抗阻断后的肿瘤细胞的杀伤无明显变化,提示γδT细胞较NK细胞和LAK细胞有更广泛的抗瘤谱.
作者：马安伦；葛海良；张冬青；王树军；周光炎 刊期： 2000年第12期
目的:探讨孕酮(Progesterone, Prog)及地塞米松( Dexamethasone, Dex )对人外周血T淋巴细胞体外活化CD69表达的作用.方法:以女性健康志愿者(10名)为研究对象,以蛋白激酶C的刺激剂佛波醇酯(Phorbol ester,PDB)为T 淋巴细胞的活化剂,采用双荧光染色流式细胞技术,检测CD3+的T淋巴细胞表达早期活化表面分子CD69的百分率,以观察Prog、Dex及Prog加上Dex对外周血T淋巴细胞体外活化的作用.结果:在体外培养条件下,无论单独使用Prog还是Dex均增强低剂量PDB刺激CD69的表达. 然而,与单独使用Prog或Dex 的作用相比,Prog加上Dex明显减弱低剂量PDB的活化CD69的表达.结论:同时使用Prog与Dex可明显抑制T淋巴细胞的体外活化,提示在临床上联合使用Prog和Dex对自身免疫性疾病病人可能产生抑制免疫炎症作用.
作者：孙荭；曾耀英；黄柏炎；何贤辉；曾洁铭；徐丽慧 刊期： 2000年第12期
目的:研究人β胰岛细胞Fas的表达及细胞因子诱导Fas表达量的增加在β胰岛细胞杀伤中的作用.方法:用FACS检测IFN-γ和TNF-α作用于人β胰岛细胞株(NIT)前后Fas表达水平及sFasL和抗Fas介导细胞凋亡的变化.结果:NIT表面无Fas表达,IFN-γ和TNF-α可促进其Fas表达增加,以及对sFasL和anti-Fas介导细胞毒敏感性增加.结论:细胞因子诱导β胰岛细胞表面Fas的表达可能在I型糖尿病(IDDM)的病理损伤中起重要作用.
作者：周华蓉；李鸣；张悦；沈关心；周新荣 刊期： 2000年第12期
目的:探讨IL-6、IL-1β、TNFα在人胎大脑神经细胞体外发育过程中对原癌基因c-fos、c-jun的表达调控规律.方法:应用人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型,通过DNA-RNA斑点杂交,采用计算机图像分析系统测定杂交点的平均灰度值.结果:c-fos、c-jun的表达均在IL-6、IL-1β、TNFα作用后15～30 min开始上调,1 h达高峰,而后下降.结论:这些细胞因子均在转录水平上促进神经细胞c-fos、c-jun的表达,为分析其生物学效应的分子机制奠定基础.
作者：庞智玲；李兰英；魏佼；尹雪茜 刊期： 2000年第12期
目的:研究神经酰胺对结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb)诱导的γδT细胞活化及凋亡作用.方法:用结核杆菌低分子多肽抗原刺激正常人PBMC,并用磁珠阳性分选法获得高纯度的γδT细胞.通过MTT试验观察神经酰胺、鞘磷脂酶以及神经酰胺合成酶抑制剂Fumonisin B1对γδT细胞的活化作用;FACS检测其对γδT细胞的凋亡作用.结果:Mtb刺激获得的γδT细胞可达73%,磁珠分选后可高达98%;高浓度神经酰胺及鞘磷脂酶能抑制γδT细胞的增殖,而出现凋亡,Fumonisin B1则对γδT细胞的增殖及凋亡无明显影响.结论:鞘磷脂水解产生的神经酰胺对γδT细胞有致凋亡作用.
作者：宋秀宇；李柏青；杨贵贞 刊期： 2000年第12期
目的:研究α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对LPS诱导星形胶质细胞产生NO和前炎性细胞因子的影响,探讨α-MSH的抗炎作用机制.方法:分别用LPS或α-MSH+LPS处理体外培养的大鼠脑星形胶质细胞,用Griess试剂测定NO, 以MTT显色法检测IL-1、IL-6和TNF-α, 采用半定量RT-PCR检测MIF mRNA表达.结果:体外培养的星形胶质细胞在LPS刺激下产生NO、IL-1、IL-6、TNF-α和表达MIF mRNA显著增高; 若同时给予LPS和α-MSH, 可明显降低NO、IL-1、IL-6和TNF-α的产生以及MIF mRNA表达.结论:提示α-MSH抑制星形胶质细胞产生NO和前炎性细胞因子与其抑制中枢神经系统炎症反应密切相关.
作者：吴秀菊；田野苹；周正芳；郑玲莉；马施华 刊期： 2000年第12期
抗原处理相关转运蛋白体 (transporter associated with antigen processing, TAP)基因位于HLAⅡ类区域的DQB1和DPB1位点之间, 包括TAP1和TAP2,相距约70 kb.TAP基因产物是内质网膜上的跨膜二聚体,功能是将与胞浆内的蛋白酶体(proteosome)结合后并降解的内源性抗原转运至内质网腔,与HLAⅠ类分子结合,形成稳定的HLA-Ag复合物,然后才能表达于细胞表面并提呈给T细胞. Colonna M等[1]通过基因测序获得TAP全基因序列,证实该基因具有高度多态性和变异性.TAP的多态性可使不同的肽转运至内质网,因此,不同个体的MHCⅠ类分子对同一大分子提呈的抗原片段不同,从而使不同机体对同一抗原的免疫应答表现出个体差异[2].本研究对皖籍汉族正常人群进行TAP等位基因分型,并与不同种族、不同地区的资料进行比较,为进一步研究TAP关联疾病的发病机制奠定基础.
作者：苏虹；王保龙；高萍；李向培；叶冬青 刊期： 2000年第12期
70年代Simons等相继报道HLA-A2抗原与新加坡华人鼻咽癌相关[1],但对中国大陆不同地域的多次血清学分型调查均未发现HLA-A2与鼻咽癌之间存在关联[2-4].由于HLA-A2等位基因存在种族和地域差异,应用基因分型技术可以更准确地揭示HLA-A2与鼻咽癌遗传易感性之间的关系.本文在国内首次调查一组南方汉族鼻咽癌患者的HLA-A2等位基因构成,并与该地区正常人群资料相比较[5],报道如下.
作者：田伟；李立新；郭实士；程文 刊期： 2000年第12期
