戈谢病(Gaucher's disease)是一种罕见的脂类代谢异常性疾病,临床资料报道较多,实验室研究资料尚少.我们通过对3例戈谢病骨髓中戈谢细胞的免疫表型及吞噬功能研究,发现戈谢细胞主要表达淋巴细胞抗原,高度表达B淋巴细胞抗原,同时证实戈谢细胞具有吞噬功能.
作者：李玉秀；刘永春；王香林；田兰芝；王彩云；李彦会；郝冀洪；李连蛟 刊期： 2000年第03期
目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在多发性硬化(MS)发生、发展中的作用.方法:采用酶联免疫吸附ELISA方法,对45例MS患者血清TGF-β1的含量进行了测定.结果:与对照组和NIND组相比,MS患者血清TGF-β1含量明显下降(P＜0.01);与Stable MS组相比,RRMS组和CPMS组TGF-β1含量亦明显下降(P＜0.05);动态观察显示,随着病情的好转,TGF-β1含量亦逐渐升高.结论:血清中TGF-β1的检测对判断MS患者的病情变化具有重要的临床实用价值.
作者：何志义；吕昌龙；刘凤芝；付国；王刚 刊期： 2000年第03期
目的:研究CD5+B细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用.方法:采用免疫荧光双标记技术和流式细胞仪对39例MG患者和18例健康对照者周围血中CD5+细胞(CD5+CD19+)的百分率进行测定,同时用ELISA间接法检测MG患者血清中AchRab.结果:在MG患者周围血CD5+B细胞百分率显著高于对照组,而且在血清AchRab阳性和阴性MG中CD5+B细胞均明显高于对照组;但在血清AchRab阳性和阴性MG患者之间CD5+B细胞百分率无显著性差异.结论:CD5+B细胞与MG发病有关,但与AchRab的产生之间无显著相关;可能在血清AchRab阴性MG的发病中起作用.
作者：韩钊；徐文桢；刘鸣；魏于全；雷松 刊期： 2000年第03期
近来研究表明,血清sFas水平增高可使Fas介导的淋巴细胞凋亡减少,从而导致自身免疫[1],但在HCV感染诱导的自身免疫机制中是否存在sFas水平增高,目前国内外尚未见报道.为探讨血清sFas水平在丙型肝炎自身免疫机制中的作用,作者测定了57例慢性丙型肝炎患者血清sFas浓度,现报道如下.
作者：刘文恩；谭德明；张铮；范学工；欧阳颗 刊期： 2000年第03期
本文从多年对过敏性哮喘患者的脱敏治疗经验进行分析、总结,揭示过敏性哮喘患者发病机制,寻找治疗该病的佳方法.1 材料与方法18例患者均为粉尘螨过敏,并经10年以上脱敏治疗的过敏性哮喘病人,男4例,女14例;年龄48～81岁,平均年龄65岁;病程均在30年以上.其中18例过敏性哮喘患者中15例伴过敏性鼻炎.粉尘螨特异性IgE强阳性,血清总IgE＞300 U/ml;血清间接阻断抗体试验皮试阳性.
作者：毛荣清；覃惠清；谭颂华；郭灵 刊期： 2000年第03期
目的:优化热聚IgG的制备条件,提高对RF的检测灵敏度.方法:利用高效液相凝胶色谱和酶联免疫吸附技术研究加热条件对热聚IgG分子量分布及其对类风湿因子结合能力的影响.结果:将IgG溶液(10 mg/ml)在62℃热聚30 min,其优势聚合度为11左右,此时它对类风湿因子的结合能力强.结论:应用高效液相凝胶色谱与ELISA技术,对热聚IgG体系进行分离测定和活性分析,缩短了测定时间,提高了结果的灵敏度和准确性.
作者：付春晓；陈长治；俞耀庭；吕宪禹 刊期： 2000年第03期
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握佳采集时机,准确判断采集的干 /祖细胞数量具有重要指导意义.为准确检测外周血及 APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种 FACS检测CD34+细胞方法的异同.
作者：韩晓红；石远凯；刘鹏；王军；冯奉仪 刊期： 2000年第03期
目的:建立顺序特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法检测HLA-B27基因并与血清学方法比较.方法:设计合成B27特异引物3个和内源性阳性对照2个,建立PCR-SSP方法,用于B27基因分型.血清学分型为一步法单克隆抗体方法.临床样本100份,来源于可疑强直性脊柱炎患者.快速酚氯仿法提取模板DNA.结果:100例临床样本PCR-SSP行B27基因分型均获成功.总耗时4 h.其中B27阴性58例,阳性42例,5例临床诊断为强直性脊柱炎,占11.9%.30份样本同时行血清学分型,20份B27阴性,5份阳性,5份可疑阳性.其中20份阴性中3例为阳性,5份可疑阳性中2例为阴性.结论:PCR-SSP行B27基因分型,分辨度高、特异性强,快捷、准确,适合于临床应用.
作者：王庆华；谭建明 刊期： 2000年第03期
目的:构建表达人自身抗原SSA/Ro60的重组体,为研究自身免疫病中的抗原抗体作用提供物质基础.方法:采用逆转录-PCR技术克隆自身抗原SSA/Ro60 cDNA,定向插入表达载体PGEX-2T,并经酶切电泳,DNA测序鉴定分析.结果:经鉴定,证明成功构建了表达人自身抗原SSA/Ro60的重组体.结论:SSA/Ro60表达型重组体可用于自身抗原SSA/Ro60的大量生产并用于诊断.
作者：邓安梅；仲人前；孔宪涛 刊期： 2000年第03期
目的:用抗HIV-1 p24单克隆抗体和多克隆抗体构建的间接ELISA试剂,检测HIV-1抗体阳性及其它样品,探讨应用的可行性.方法:采用单克隆抗体固相、兔抗HIV-1 p24抗体夹心,羊抗兔HRP结合物的间接ELISA法.结果:显示试剂盒HIV-1 p24抗原检出灵敏度为50 pg/ml(基因工程抗原);特异性99.46%;HIV抗体阳性血样阳性率3.2%;抗体阴性的特殊人群血样阳性率3.9%;抗体不确定血样阳性率为15.4%,明显高于抗体阳性和阴性组血样.病毒培养1 d,抗原效价1∶80,第3天可达1∶5 120.结论:该间接夹心HIV-1 p24抗原检测试剂灵敏度高、特异性好,可应用于HIV感染的辅助检测及病毒的基础研究.
作者：尹红章；李秀华；孟淑芳；宋爱京；李德富 刊期： 2000年第03期
结核病诊断主要沿用50余年来常规方法,灵敏度低,报告缓慢,误、漏诊率高.本文参照Hunter S W的提纯方法[1],从结核杆菌菌壁中提纯脂阿拉伯甘露糖-B(LAM-B)抗原,并与免疫滴金法(DIGFA)相结合,研制成一种方便快捷、灵敏度及准确性均可靠的结核病特殊血清学诊断方法.
作者：胡雷光；戴湘茹；叶宇冰；刘翳雯；任关仁 刊期： 2000年第03期
目的:应用t-PA单克隆抗体建立ELISA法检测t-PA含量以及研究t-PA功能和结构的关系.方法:运用杂交瘤技术研制5株t-PA单克隆抗体,进行较系统的免疫特性的鉴定.结果:5株单抗特异性高,与u-PA、PLG、Fg、Fb、BSA均无交叉反应;亲和力强,1H4＞3C10＞5H10＞4E6＞4C6;腹水效价5×10-6～1×10-7;免疫球蛋白亚类为IgG1和IgG2a;5株抗体中,3C10和1H4可明显抑制t-PA活性,而5H10、4E6、4C6则对t-PA活性无明显影响.结论:为进一步应用这些单抗作为研究手段提供了基础.
作者：王钦红；王鸿利；邵慧珍；朱立红；王学峰 刊期： 2000年第03期
目的:以二硝基氟苯(DNFB)所致迟发型超敏反应(DTH)小鼠模型观察小檗碱对小鼠DTH及其体内几种重要细胞因子的影响.方法:采用1%DNFB腹部致敏、耳廓发敏的方法建立DTH小鼠模型,以巨噬细胞NO2-释放法测定血清IFN-γ水平,胸腺细胞法检测IL-1水平,丝裂原激活的淋巴母细胞法检测IL-2水平,L929细胞结晶紫染色法测定TNF-α水平.结果:发现小檗碱可抑制DNFB诱导的小鼠DTH,降低其血清IFN-γ水平,抑制其腹腔MΦ产生IL-1及TNF-α,抑制其脾细胞产生IL-2.结论:表明小檗碱有抑制小鼠DTH的作用,其机制可能是抑制了IFN-γ、IL-1、TNF-α、IL-2等细胞因子的产生和分泌,从而抑制免疫反应,减轻炎症损伤.
作者：吕燕宁；邱全瑛 刊期： 2000年第03期
医学免疫学学科本身具备的特点即它的横跨性、网络性、实践性、进展更新快,使本科生这批初学者,不可避免地感到概念多,头绪不清,压力较大,如何抓住学科特点,上好本科生医学免疫学课程.经历多年的教学实践,积累了以下体会:
作者：尚红生 刊期： 2000年第03期
目的:观察不孕患者血清AsAb及其外周血细胞培养上清液中IFN-γ的水平变化,了解AsAb与IFN-γ的相关性,揭示AsAb,IFN-γ与不孕的关系及致病机理.方法: 酶联免疫吸附法(Enzymelinked Immunosorbent Assay,ELISA)测定了62例不孕患者及50例正常生育者血清AsAb, 同时测定50例不孕患者与50例正常生育者外周血细胞培养上清液中γ-干扰素 (interferon-γ,IFN-γ) 水平.结果:(1)不孕患者血清AsAb阳性率(29.03%)显著高于正常生育组(6.00%,P<0.05);(2)外周血细胞培养上清液中IFN-γ水平,不孕组为(1.100±0.459) μg/L,显著高于正常生育组(0.607±0.052) μg/L(P<0.001);(3)不孕患者外周血细胞培养上清液中IFN-γ水平,AsAb阳性组(1.308±0.345) μg/L,显著高于AsAb阴性组(0.836±0.265) μg/L(P<0.001);(4)不孕患者血清AsAb水平与培养上清液中IFN-γ水平呈显著正相关(r=0.812 6,P<0.001).结论:(1)AsAb是与不孕有密切关系的重要免疫因素;(2)不孕患者体内IFN-γ水平明显高于正常生育组,提示患者体内细胞免疫功能状态异常增强,异常升高的IFN-γ可能通过影响机体生殖免疫功能而导致不孕;(3)不孕患者体内异常高水平的IFN-γ与AsAb的产生有着密切的关系.
作者：耿琳琳；任芬若；韩书心；张唏；刘东峰；贾丽婷 刊期： 2000年第03期
胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)与HLA关联,非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)则否.然而在成人迟发型糖尿病中有一部分是胰岛素依赖的,研究其发病机理,对该病的治疗和预后有重要意义.为此,对沈阳地区成人迟发型胰岛素依赖型糖尿病人按年龄分组进行了与HLA第二类基因和新近发现的TAP基因的关联研究[1,2].
作者：冯世良；白淑英；于桂兰；孙桂芝；李桂芹；韩家康；孙逸平 刊期： 2000年第03期
目的:对人群进行HLA-DRB的分型及多态性研究,发现未曾报道过的HLA-DRB等位基因.方法:用HLA-DRB通用引物扩增该个体所有DRB等位基因的第二外显子,并对扩增产物进行克隆,通过双脱氧法进行DNA测序.结果:发现一个新的HLA-DRB核苷酸序列.结论:通过与已发表的序列及Genbank已收载的序列比较,显示该序列属于HLA-DRB4家族的新等位基因,我们暂时称它为DRB4.NC.该序列已被Genbank收载(登录号为AF207548).
作者：朱乃硕；杨毅；李勇；陈诗书；于善谦 刊期： 2000年第03期
目的:观察人T细胞Trail(TNF-related apoptosis-inducing ligand)受体表达及Trail诱导T细胞凋亡的作用.方法:通过荧光双标记,使用流式细胞仪检测Trail受体阳性细胞和凋亡细胞.结果:静息Jurkat细胞表达高水平Trail受体[(49.19±12.25)%],激活Jurkat细胞对Trail受体表达无影响.Trail诱导显著的Jurkat细胞凋亡[(90.01±26.71)%].正常人外周血淋巴细胞(PBL)仅激活后表达Trail受体[(25.27±6.42)%],但无细胞凋亡发生.结论:人T细胞表达Trail受体,Trail受体和Trail的相互作用对细胞凋亡有调控作用.
作者：范学工 刊期： 2000年第03期
目的:从噬菌体随机6肽文库中筛选IL-6抗体的识别表位.方法:利用具有IL-6中和活性的单抗C220筛选呈现于丝状噬菌体表面P3蛋白的随机6肽文库.结果:从噬菌体随机6肽文库中筛选出36株可与单抗特异结合的噬菌体克隆, 其中多数克隆呈现核心序列 SWLR,该序列与 IL-6 的序列具有一定同源性.竞争结合实验和Western印迹分析,带有 SWFNLR 和 HSWLRY小肽的2株噬菌体克隆可与IL-6竞争结合单抗C220.结论:SWFNLR 和 HSWLRY 是IL-6单抗C220特异识别的表位.
作者：陈兴；王鑫；杨子义；董家新；王建安；姚志建；沈倍奋 刊期： 2000年第03期
目的:为了探讨肿瘤细胞的靶向性杀伤途径.方法:采用PCR-Cloning技术和DNA重组技术,构建了2类IL-2-PE40'嵌合基因的表达载体,分别由IPTG和温度(42℃)诱导表达,并对表达产物进行了酶切片段大小、电泳迁移率、分子量、IL-2和PE40'组分抗原性及细胞学效应的检测.结果:发现重组毒素对表面表达IL-2受体的活化T淋巴细胞具有明显杀伤效应,并有抑制混合淋巴细胞反应的作用.结论:该IL-2-PE40'融合蛋白确实具有明显的特异性免疫抑制效应.
作者：毕美霞；杨渝珍；舒平；韩玲 刊期： 2000年第03期
目的:探讨热休克蛋白90α的生物学功能,获得高质量及充足的HSP90α蛋白.方法:采用PCR的方法扩增HSP90αcDNA5'端424 bp片段,在起始密码子位置制造一个NcoI酶切位点,将PCR产物克隆到中间载体,再通过合适的酶切位点将其余片段连接到此载体,形成一个带有NcoI突变位点的HSP90αcDNA全长克隆.终将HSP90α全部编码cDNA插入到pET-16b表达载体中.结果:经诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约83 kD处有一诱导蛋白带.Western Blot证明表达产物与抗HSP90α抗血清有特异的免疫反应.结论:构建成了T7启动子控制下的HSP90α表达质粒.
作者：乔绘红；赵玫；施一江；袁兴华；范云霞；周纯；徐枫；黄常志 刊期： 2000年第03期
弓状核是下丘脑重要的神经核团,内含多种神经元胞体和几十种化学物质,其神经纤维联系也十分广泛,并参与垂体前叶内分泌、痛觉调制、免疫、情感活动、摄食等多种重要生理活动的调节过程,是神经-内分泌学研究的重要神经核团.我们已往的实验研究表明,弓状核对T、B淋巴细胞、RBC免疫功能均有调节作用[1],但对NK细胞活性的影响未见报道.为了探讨下丘脑弓状核对NK细胞活性和IL-2的影响,实验利用化学损毁的方法[2],建立了下丘脑弓状核损毁的大鼠模型.然后在成年期,观察了NK细胞和白细胞介素-2的活性[3],结果显示:在弓状核损毁组其NK活性细胞为26.39±1.49(U/ml),对照组为42.50±2.91(U/ml,P＜0.01),IL-2在弓状核损毁组为13.30±1.49 (U/ml),而对照组为23.40±2.91 (U/ml,P＜0.01),表明弓状核对机体的NK细胞活性和IL-2水平有明显的影响.
作者：苗维纳；任桂华；白华；骆永珍 刊期： 2000年第03期
