目的:为了观察葡萄球菌肠毒素A(SEA)对人膀胱癌BIU-87细胞株诱导凋亡机制.方法:应用MTT比色法和流式细胞术检测SEA对BIU-87细胞增殖抑制率和对细胞周期的影响.结果:SEA对BIU-87细胞株有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性.流式细胞术分析,SEA能阻止G1期细胞向S期的进程,G1期细胞堆积.结论:SEA能诱导BIU-87细胞凋亡,具有细胞毒性效应,可用于膀胱内灌注,从而抑制膀胱癌的浸润转移.
作者:李艳辉;罗萍;孙立群;孙冬 刊期: 2003年第07期
目的:研究Wee1转基因细胞抗CTL介导的细胞毒效应及抗穿孔素抗体对抗细胞毒效应的影响.方法:体外混合NIT及淋巴细胞培养获得CTL,并测定淋巴细胞增殖指数(MTT法);采用脂质体将重组体Wee1Hu/GFP导入哺乳动物细胞NIT;以转染重组体前后的NIT为靶细胞,检测CTL介导的胞毒效应(LDH法),同时测定抗穿孔素抗体对此效应的影响.结果:混合细胞培养可诱导CTL的增殖;转染Wee1基因及加入抗穿孔素抗体NIT组发生的细胞溶解的数量少.结论:转Wee1基因靶细胞在一定程度上可抵抗CTL介导的细胞毒作用,穿孔素抗体可协同增强此抗胞毒作用.
作者:胡萍;朱慧芬;朱丽娟;杨敬;张悦;邵静芳;沈关心 刊期: 2003年第07期
分子生物学技术的发展使从基因文库中筛选新分子的方法日臻完善,许多新的白细胞介素(Interleukin,IL)被相继发现.目前,IL系列细胞因子已至少有28个成员,其中IL-19~IL-26是用差减杂交等方法从不同细胞或组织的cDNA文库或基因文库中筛选出,再经组织分布、结构分析和功能实验等后确定的.尽管对这些白细胞介素的细胞介素的功能了解不多,且它们已知的功能与IL-10或IFN-γ的活性不同,但由于这些新白细胞介素的细胞介素在氨基酸序列和蛋白质空间构型方面与IL-10和IFN-γ有同源性,它们的受体也十分相似,人们仍将它们归类于Ⅱ型细胞因子家族或IL-10家族.
作者:王惠琴;厉永建;孙卫民 刊期: 2003年第07期
目的:筛选并鉴定HIV-1 gp41核心表位.方法:用识别HIV-1 gp41的构象特异性单克隆抗体NC-1筛选噬菌体12肽库,通过夹心ELISA、NC-1特异性阻断实验、竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆,DNA序列分析阳性克隆.结果:经3轮筛选,随机挑取24个噬菌体克隆,ELISA鉴定表明有10个克隆可与NC-1结合,DNA序列分析并推导氨基酸序列,共5种序列:HDVHHRWVYLLS、ITVNEWLYTSEQ、HGRSHGMFKPKR、MGPIARPHWHLN、DMYRSPRPKPDT.其中gp41N肽和C肽所形成的复合物可特异性阻断表达HDVHHRWVYLLS,VNEWLYTSEQ和MGPIARPHWHLN的克隆与NC-1的结合.结论:所得序列HDVHHRWVYLLS,VNEWLYTSEQ及MGPIARPHWHLN模拟HIV-1 gp41六螺旋束核心表位.
作者:刘北一;罗海波;朱平;姜世勃;富宁 刊期: 2003年第07期
目的:为了研究叉头框c2(Foxc2)在骨骼和主动脉发育上的作用.方法:利用基因重组融合蛋白制作大鼠抗小鼠Foxc2单克隆抗体(抗-Foxc2 mAb),并利用蛋白质印迹和免疫荧光分析了Foxc2蛋白在小鼠肌胚细胞C2C12的表达和在小鼠胚胎的表达部位.结果:用小鼠GST-Foxc2融合蛋白免疫大鼠制得的抗-Foxc2 mAb效价为1∶5 000,并特异地与转染了CX-Foxc2质粒的小鼠L细胞和人膀胱癌HTB9细胞产生的Foxc2蛋白结合.在骨成形蛋白-2(BMP-2)的诱导下,Foxc2蛋白在C2C12细胞中显著地增加,用反义Foxc2序列转染C2C12细胞可以明显地抑制Foxc2蛋白在这个细胞系中的表达.Foxc2蛋白表达主要定位于11.5-dpc小鼠胚胎的生骨节和主动脉周围的间充质组织.结论:应用大鼠抗小鼠基因重组Foxc2单克隆抗体研究Foxc2的作用,结果表明Foxc2蛋白在BMP-2的诱导下,在调节C2C12细胞向成骨细胞分化以及在胚胎中轴骨骼和心血管的形成过程中起重要作用.
作者:付艳;邓伟国;邹积艳;李玉林;Naoyuki MIURA 刊期: 2003年第07期
目的:探讨脂质体介导IL-2cDNA、TNF-αcDNA联合基因转导体内抗肿瘤效果.方法:建立裸鼠肝癌动物模型,在荷瘤部位将脂质体包裹的IL-2cDNA和TNF-αcDNA直接注入瘤体中,观察肿瘤大小变化,并检测此2种基因在肿瘤组织中的表达情况.结果:IL-2基因和TNF-α基因联合治疗组肿瘤生长明显受到抑制,抗肿瘤效果显著优于单纯治疗组和对照组.结论:IL-2和TNF-α基因联合治疗组对肿瘤生长抑制效果明显优于单纯治疗组与对照组,荷瘤鼠生存期明显延长(P<0.05).
作者:李东复;申吉子;闫峻;邵国光;周晓琦;杨春荣 刊期: 2003年第07期
目的:探讨自制的一种白血病瘤苗对C57BL/6小鼠Mφ杀伤功能的影响.方法:建立白血病荷瘤小鼠模型,用自制的3种不同的白血病瘤苗进行预防或主动免疫治疗,用MTT比色法检测预防或治疗2周、4周后小鼠Mφ杀伤活性,并与对照组比较.结果:(1)随着白血病细胞在小鼠体内的生长,小鼠的Mφ免疫功能受到严重抑制.(2)灭活肿瘤细胞+IFA+细胞因子(rGM-CSF+rIL-2+rIL-6)的肿瘤疫苗在提高小鼠的Mφ免疫功能方面,优于灭活肿瘤细胞+IFA肿瘤疫苗,而仅含灭活肿瘤细胞的疫苗作用不明显.结论:灭活肿瘤细胞+IFA+细胞因子(rGM-CSF+rIL-2+rIL-6)的肿瘤疫苗可以激活以Mφ为代表的非特异性细胞免疫功能,如非特异性细胞毒、免疫监视、抗原递呈等功能,为进一步活化T淋巴细胞打下基础,此种疫苗在血液恶性肿瘤的特异性主动免疫治疗中很有潜力.
作者:赵万红;何爱丽;张王刚;王一理;耿宜萍;田玮;宋长琐 刊期: 2003年第07期
目的:构建抗人HAb18G分子单链抗体基因,并在大肠杆菌中进行分泌表达.方法:通过连接肽(Gly4Ser)3基因序列将已成功克隆的抗人肝癌单抗HAb18轻、重链可变区基因拼接成单链抗体(ScFv)基因,并在5′和3′端引入相应的酶切位点,克隆至改造的分泌性表达载体pCANTAB 5His之中,转化到E.coli HB2151中进行诱导表达.亲和层析纯化表达蛋白后,以SDS-PAGE电泳、Western blot及ELISA等方法分析检测表达产物.结果:经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实基因构建正确.SDS-PAGE电泳和Western blot分析表明ScFv基因在大肠杆菌中成功表达.表达产物的相对分子质量(Mr)为31 kD,与理论预期值相符,并且可与相应的抗原特异结合.结论:成功实现了抗人HAb18G分子单链抗体的原核分泌表达,为其在人肝癌诊治中的进一步应用奠定了基础.
作者:邢金良;杨向民;王永庆;姚西英;陈志南 刊期: 2003年第07期
目的:研究五加皮抗肿瘤成分Age对单核细胞功能的影响,揭示Age抗肿瘤机制.方法:使用对TNF敏感的L929细胞采用生物法测定了TNF含量,用ELISA法测定了IL-12的含量.用RT-PCR法分析了单核细胞的细胞因子mRNA表达.用同位素法分析了Age对单核细胞吞噬功能的作用.结果:Age与单核细胞共同培养后,单核细胞TNF-α、IL-12等细胞因子的产生明显增加(P<0.01),而且有较好的量效关系.在单核细胞与LPS的培养液中加入不同浓度的Age,经培养后与单独加入LPS相比TNF-α分泌的量显著增加,显示了Age对LPS的单核细胞刺激有相加作用.经Age处理后,单核细胞的TNF-α、IL-12等细胞因子的mRNA表达也明显增强.体内实验结果也显示,Age对单核细胞的细胞因子产生有一定的影响.荷瘤小鼠经口连续投入Age后,血清中和脾脏分离的单核细胞体外培养上清中TNF-α和IL-12含量明显提高,单核细胞TNF-α、IL-12 mRNA表达也明显增强(P<0.01),从蛋白水平和分子水平证明了Age对单核细胞的细胞因子产生有促进作用.结论:中药五加皮抗肿瘤有效成分Age对单核细胞有较强的刺激作用.通过促进其细胞因子的分泌和吞噬功能的增强杀伤肿瘤或抵抗肿瘤发生,所分泌的细胞因子还可通过调节免疫功能达到治疗肿瘤作用.该结果对五加皮抗肿瘤作用机制和临床应用提供了科学依据.
作者:单保恩;段建萍;张丽华;梁文杰;李巧霞;刘冀琴;张华;刘刚叁 刊期: 2003年第07期
细胞因子是一组非均一体的多肽介质,具有多种生物学活性,在免疫和炎症反应中起重要作用.细胞因子家族包括白介素、化学因子、干扰素、集落刺激因子、生长因子等.为了解转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-beta 1, TGF-β1)及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF)在皮肌炎中的作用,我们就皮肌炎患者血清TGF-β1及GM-CSF水平的变化做了测定.
作者:李澄;刘升云;冯树芳;侯惠丽 刊期: 2003年第07期
目的:探讨口服耐受对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的预防作用.方法:给予健康Lewis大鼠口服MBP抗原诱导免疫耐受,随后以MBP+CFA于足底免疫,检测口服耐受对实验大鼠EAE发病的预防作用及对MBP特异性淋转率、细胞因子和抗MBP抗体等免疫功能的变化情况.结果:致病组EAE发病率为91.7%,MBP特异性淋转率、IFN-γ与TNF-α含量升高,IL-10降低;口服耐受组EAE发病率为21.4%, MBP特异性淋转率、IFN-γ、TNF-α回复至正常,IL-10含量低于正常.MBP抗体水平两组均比正常对照组高.结论:口服耐受可降低宿主自身免疫反应性,减低EAE的发病率.
作者:余奇文;张冬青;柏峻;马安伦;李宁丽;张继英;聂红 刊期: 2003年第07期
目的:探讨B7反义肽竞争抑制CD28-B7共刺激通路、抑制移植排斥反应的作用,为该反义肽在器官移植方面的应用提供实验依据.方法:固相合成法合成含有MYPPPY motif的B7反义肽N'-EFMYPPPYLD-C',纯度95%,分子量(MW)为1 271.6;用灭活的C57(H-2d)脾细胞和体外培养新生C57心肌细胞作为刺激细胞,以适当浓度的B7反义肽处理刺激细胞后,再与BALB/C(H-2d)脾细胞作为应答细胞进行混合培养,观察此反义肽在体外抑制淋巴细胞增殖的效果;用此反义肽预封闭新生C57小鼠心肌后,移植到BALB/C小鼠耳后,观察此反义肽在体内抑制移植排斥反应、延长心肌移植存活的情况.结果:B7反义肽能抑制前述两种淋巴细胞增殖反应,抑制率分别为38.4%和36.6%;并呈现出明显的剂量依赖关系,此反义肽预处理过的新生C57小鼠心肌,移植到BALB/C小鼠,可较对照组平均延长5.4天(n=6,P<0.001).结论:人工合成的B7反义肽在体外可以通过抑制CD28-B7共刺激通路,抑制淋巴细胞的增殖,并可用于延长心肌移植物存活,为进一步研究其在移植免疫方面的应用提供了有益的启示.
作者:陈晋;熊思东;张瑞华;储以微;郑秀娟 刊期: 2003年第07期
目的:克隆藏猪白细胞介素4基因cDNA.方法:从体外ConA刺激70小时的藏猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增,pMD-T载体连接,常规转化后,进行酶切及序列测定进行鉴定.结果:研究表明克隆得到的IL-4基因cDNA与成华猪的IL-4同源性达到99%,与长白杂交猪的同源率为98%.结论:从藏猪外周血淋巴细胞中成功地分离到IL-4基因.
作者:李惠;高荣;武梅;王丽焕;丁晓涛;李平;李波;余庆;郑勇;刘崑;刘世贵 刊期: 2003年第07期
目的:探讨45例SARS的诊断和治疗方法.方法:对45例SARS病人的临床特点、治疗效果进行了分析.结果:45例均以高热起病,近距离接触过传染源,潜伏期2~15天,45例患者中曾伴有呼吸困难、干咳、乏力、肌肉酸痛.患者随病情进展在进展高峰期肺部X线表现,其中累及两侧肺野为38人,占84.4%,呈实质性病变为31人,占68.9%,死亡为6例,占13.3%.常规抗感染治疗无效,中毒症状明显和肺部阴影扩散时,及时应用持续气道正压通气(CPAP)和皮质激素可有效控制病情发展.结论:该病传染性强,主要经呼吸道传播,常规抗感染治疗无明显效果.肺部阴影增多和呼吸困难加重时,及时应用CPAP和皮质激素是有效的治疗方法.
作者:王冠军;华树成;张捷;马忠森;李立;孙晓莉;牛俊奇 刊期: 2003年第07期
目的:探讨严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS)冠状病毒抗体IgG的变化规律.方法:采用间接酶联免疫(ELISA)法,对534例发病后1~153天的SARS患者的血清特异性抗体IgG进行检测,并设置对照组进行比较.结果:SARS患者血清IgG抗体阳性率为58.1%,对照组为0.5%,两者具有显著性差异(P=0.000).SARS患者中,临床症状出现后1~10天、11~30天、31~60天、61~90天、91~120天、≥121天组冠状病毒抗体IgG的阳性率分别为18.8%(3/16例)、63.8%(37/58例)、55.6%(30/54例)、51.4%(71/138例)、62.1%(159/256例)、83.3%(10/12例).结论:SARS患者发病初期IgG抗体阳性率低,第11天后迅速上升,第4、5个月时持续存在,但持续多长时间尚需进一步观察.
作者:鲁恩洁;高阳;狄飚;张伟;王鸣;杨卫路;吴新伟;刘小宁;陈芳;朱惠扬;何丽娟;陈小霜 刊期: 2003年第07期
根据世界卫生组织报告,截至6月27日全球非典型肺炎(Atypical Pneumonia)患者累计为8445人,累计810名非典型肺炎患者死亡.波及32个国家和地区.其中中国大陆5327名,死亡348名.世界卫生组织(WHO)干事长布兰特(Dr.Brundtland)称该病可能是21世纪以来除艾滋病外,严重威胁人类健康的传染病.
作者:牛俊奇;王冠军 刊期: 2003年第07期
心理免疫学是精神神经科学与免疫学的交叉学科,应激(Stress)状态对免疫系统的影响是其研究的主要内容之一.
作者:杨贵贞 刊期: 2003年第07期
目的:观察SARS患者在疾病早期CD4+细胞的改变及其在疾病的发展及治疗选择中的临床意义.方法:流式细胞仪方法对52例发病10天内确诊为SARS患者的外周血标本进行T细胞亚群的绝对计数检测并动态观察胸部X光病变的变化及疾病转归.结果:在52例患者中,有34例CD4+细胞绝对数在正常范围内的患者,病变范围小、病情呈稳定状态,病变吸收快,不需要肾上腺糖皮质激素治疗;另有18例患者出现CD4+细胞的绝对值低于正常,其中有13例患者病情呈进展状态,加用肾上腺糖皮质激素治疗,有5例CD4+细胞绝对数轻度减低患者,病情处于稳定状态,未加用肾上腺糖皮质激素治疗.两组CD4+细胞数经统计学分析P=0.000;CD4+细胞数与肺内病变程度的Pearson相关性检验结果为r=-0.737;P=0.000;与糖皮质激素应用的Pearson相关性检验结果为r=-0.573;P=0.000.结论:1SARS患者发病早期外周血CD4+细胞绝对计数与肺内病变的程度呈良好的负相关;②CD4+细胞绝对数下降明显者需糖皮质激素治疗.
作者:徐娟俞;乃昌惠;吴函;刘聪艳;孙雪静;贺景娟;刘建;万岁桂;周玉涛;郭轶先;戴维葭;姚征;赵弘;吴航;李亚林;李艳军;徐敏;李昆成;方向华;吉训明 刊期: 2003年第07期