目的:探讨多梗塞性痴呆患者外周血CD54、CD106和CD62p的变化及意义.方法:采用酶联免疫法测定了82例多梗塞性痴呆患者血清CD54、CD106、CD62p水平,并与23例健康人对照比较.结果:多梗塞性痴呆患者血清CD54、CD106及CD62p水平(CD54:469±76.33 ng/ml,CD106:1 103.3±98.96 ng/ml,CD62p:18.22±8.90 ng/ml)较对照组(CD54:196±45.91 ng/ml,CD106:601.0±76.30 ng/ml,CD62p:6.70±3.30 ng/ml)高,差异具有显著性意义.CD54、CD106及CD62p水平与痴呆程度呈正相关.结论:CD54、CD106、CD62p参与了MID的病理变化过程,并与痴呆程度密切相关,在一定程度上反映了MID神经功能缺损的程度,可作为MID后监测病情变化的重要指标.
作者:吴杰;尹金植;刘佰纯;丁萍;姜立刚 刊期: 2005年第07期
目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中树突状细胞亚型绝对数,分析其与疾病活动程度的相关性.方法:荧光染色标记DC,流式细胞仪检测分析 DC亚型绝对数,并分析与SLEDAI、ds-DNA、C3、C4的相关性.结果:SLE患者外周血MDC(13 630.50±2 548.55)和PDC(9 196.29±1 837.75)较正常对照组(15 859.18±2550.55和11 362.5±2 100.14)明显降低(P<0.05).静止期MDC和PDC(14 503.06±2 165.74和9 564.75±1 748.62)较对照组无明显下降,活动期组两DC亚型(12 466.33±2 600.32和8 514.67±1 918.73) 较对照组下降明显(P<0.01).SLE患者外周血MDC和PDC与SLEDAI、ds-DNA明显负相关(P<0.01),与C3、C4呈正相关(P<0.05).结论:DC参与疾病的发生,其绝对数可反映SLE疾病活动程度.
作者:齐晖;李富荣;刘冬舟;肖学吕;任莉莉;王新根;文锦丽;黄瑞芳;戴勇 刊期: 2005年第07期
生精障碍是男性不育的主要原因.研究发现,位于Y染色体长臂上存在着被称为无精子因子(azoos-permia factor,AZF)的基因,它的DNA微缺失可以导致男性生精障碍所致的男性不育症[1].本文报道采用PCR方法对65例特发性无精症或严重少精症患者进行Y染色体的AZF基因微缺失的检测结果.
作者:林经安;包洪初;郑伟清;罗义麒 刊期: 2005年第07期
目的:通过研究强直性脊柱炎(AS)病人的外周血单个核细胞(PBMC)/关节液单个核细胞(SFMC)的基因谱,了解有无支持UPR假说的转录物以及那些细胞参与未折叠蛋白应答(UPR),UPR在AS病人的变化及其在关节炎发病机制中的作用和意义.方法:AS病人的PBMC/SFMC基因表达谱通过含1176基因的cDNA微阵列扫描得到,结果中比较AS与健康自愿者和RA病人有差异表达的基因C2、C3、C8、LMP-2、LMP-7和BiP(UPR的标志物)再以RT-PCR验证.结果:AS患者的SFMC中的BiP表达显著高于RA患者SFMC组(RT-PCR的均数和标准差为86.4±111.3和18.5±13.0,两者比较,P=0.044),AS和RA患者SFMC组的C2分别为91.6±36.7和18.5±3.6(两者比较,P<0.037),而且AS患者的SFMC中BiP和UPR相关的蛋白酶体C2的增高水平密切相关(相关系数r=0.9).另外,研究还发现,AS患者SFMC过度表达BiP的细胞是单核/巨噬细胞.结论:内质网UPR确实发生在AS患者SFMC中的巨噬细胞.结果显示UPR应答在AS病人关节炎症的初期和延续中起重要的作用.
作者:古洁若;黄烽;李天旺;朱剑;李超;张江林;赵丽珂;余得恩 刊期: 2005年第07期
目的:通过检测ACTH-R、5-HT1A-R蛋白及其mRNA在人淋巴组织中的表达情况,寻求神经免疫内分泌网络之间功能双向调节的形态学依据.方法:应用免疫组织化学及核酸分子原位杂交方法检测ACTH-R、5-HT1A-R蛋白及其mRNA 在人100例淋巴结、脾脏及肠道淋巴组织中的表达.结果:免疫组织化学显示ACTH-R、5-HT1A-R在各种淋巴组织中表达的阳性率为82.5%和86.3%,与原位杂交(阳性率为70%和75%)之间无统计学差异(χ2=1.907、0.570,均P>0.05).结论:人的免疫活性细胞不但可以表达ACTH-R、5-HT1A-R蛋白,还可以合成其mRNA,ACTH、5-HT都可以通过免疫细胞膜上的ACTH-R、5-HT1A-R发挥对免疫系统的调节作用.
作者:孟云霄;纪祥瑞;谢琰臣;魏志敏 刊期: 2005年第07期
目的:探讨性激素调控抗体分泌细胞游走到生殖道的分子机制和对局部抗体分泌的影响.方法:以鼠源杂交瘤细胞SG2和PA4为对象,检测其性激素受体、CXCR4的mRNA和CD31的表达;用流式细胞术和ELISA检测不同浓度性激素作用下,抗体分泌细胞表面与细胞游走相关分子的表达和抗体分泌的变化.结果:SG2和PA4细胞表达雄激素受体和雌激素受体β,表达CXCR4,但不表达CD31.性激素对抗体分泌细胞表面分子的表达和抗体分泌量并没有明显的影响.结论:性激素对抗体分泌细胞游走的调控作用与细胞自身相关黏附分子的变化关系不大,推测可能主要是通过对内皮细胞地址素表达的影响来实现的.
作者:俞明灿;王晓蕾;许金菊;曹筱梅;贲昆龙 刊期: 2005年第07期
目的:为了解各种属动物Ⅱ型胶原分子结构的保守性和自身抗体形成的关系.方法:(1)从不同种属动物(包括人、猪、牛、鸡)中制备Ⅱ型胶原,用溴化氰把胶原分解成多个片段,以聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法(Western blot)鉴定和测定抗体的各项特性.(2)用鸡Ⅱ型胶原自皮下多点注射至大鼠尾部,建立了类风湿关节炎(RA)的动物模型,并通过口服Ⅱ型胶原以观察其对疾病的干扰情况.(3)用ELISA法分析RA病人血清中自身抗体.结果:112例RA病人血清对牛Ⅱ型胶原IgG和IgA抗体反应的阳性率分别为19.6%和12.5%,对人Ⅱ型胶原IgG和IgA反应的阳性率则各自为17.5%和13.8%.对不同种属动物Ⅱ型胶原抗体IgG和IgA反应的阳性率无明显差异.IgA型阳性率高于一般正常比率.溴化氰能把各种属Ⅱ型胶原消化成8~12个片段,每个片段有类似的分子量,有类似的位点特异抗体,CB10、CB11、D和C是主要的位点抗体.动物模型结果表明预先口服胶原大鼠组发生RA的阳性率明显低于模型组,二组的发病率分别是44.4%和83.3%,口服胶原组的病情严重程度明显低于模型组,口服胶原组和模型组的肢体累及率分别为13.8%和49.9%.结论:不同种属Ⅱ型胶原分子结构有很高的保守性,自身抗体的产生可能是饮食胶原刺激人体免疫器官或直接刺激肠道黏膜的免疫系统所致,病人的主要位点特异抗体是CB10、CB11.此外该研究还发现D和C也是主要特异位点抗体,特异位点抗体与RA疾病程度有关.
作者:陈仁涉;鲍利民;高芳堃;高欣;吴伟;周惠琼;李东民;吴东海 刊期: 2005年第07期
目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体.方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固相多肽合成法合成了FRG4抗原多肽,并免疫家兔;用免疫组化检测蛋白在人肝癌细胞HepG2细胞中的表达.结果:通过生物信息学分析选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,制备兔抗人FRG4多克隆抗体.高效液相色谱检测显示抗体纯度达82.79%,抗体滴度为1∶16 000,Western blot证实该抗体具有较好的反应性和特异性,免疫组化证实其主要在HepG2细胞胞浆中表达.结论:成功制备了新的人突触相关蛋白(FRG4)多克隆抗体.
作者:王仁;杨向东;屈顺林;刘俊文;闾宏伟;姬志娟;盛树力 刊期: 2005年第07期
目的:构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)糖蛋白B DNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答.方法:PCR扩增编码HSV-Ⅰ gB去除N端部分信号肽序列(39 bp)的基因片段(2 673 bp),定向插入pcDNA3载体中,构建pcDNA3-gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定.于BALB/c小鼠注射免疫3次,观察小鼠CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,CFSE/PI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性.结果:双酶切分析结果为目的基因(2.7 kb)和线性质粒pcDNA3(5.4 kb);PCR扩增结果为特异产物(2.7 kb);测序结果与GenBank gB基因序列同源性达99.5%;CTL活性增强;BALB/c小鼠脾CD4+T细胞增加.结论:经鉴定证实了HSV-Ⅰ gB基因疫苗的构建;HSV-Ⅰ gB基因疫苗可以诱导较强的细胞免疫应答,应用于预防HSV-Ⅰ的感染具有良好的前景.
作者:李光源;贺冰;冯非;孟祥俊;宋忆淑;王晓祺 刊期: 2005年第07期
目的:探讨补肾中药对人早孕蜕膜巨噬细胞吲哚胺2,3-二氧化酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的影响.方法:半定量RT-PCR测蜕膜IDO mRNA表达;Western blot检测蜕膜巨噬细胞IDO蛋白质表达;ELISA测蜕膜巨噬细胞和淋巴细胞共培养上清液中IL-10、IFN-γ含量,高效液相色谱法测上清色氨酸、犬尿氨酸含量,以二者比值表示IDO活性.结果:正常组蜕膜IDOmRNA表达高于难免流产组;IDO抑制剂使Th细胞因子平衡偏离Th2型;中药血清可提高IDO蛋白质表达及活性,恢复Th细胞因子平衡.结论:蜕膜巨噬细胞IDO正常表达和活性是维持妊娠所必需,补肾中药可提高IDO活性至正常水平.
作者:李雪莲;归绥琪;王海燕 刊期: 2005年第07期
目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在再障-阵发性血红蛋白尿综合征(AA-PNH)的早期诊断中的价值,寻找AA-PNH早期诊断敏感指标,进而达到早期发现、早期诊断、早期治疗的目的.方法:应用流式细胞仪测定AA-PNH综合征患者的CD55、CD59、CD34抗原变化关系,并与PNH、AA等疾病组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原相互变化关系,经过统计学处理,找出相关性.结果:结果表明AA-PNH、PNH CD55、CD59、CD34抗原较AA及其他疾病组及正常对照组明显减低,并与溶血试验中溶血程度呈正相关,且早于其他溶血指标.结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH、AA-PNH综合征早期诊断敏感指标,并与预后转归密切相关.
作者:王永才;朱杰;王敏;李晓雯 刊期: 2005年第07期
目的:通过观察体外循环(CPB)中使用腺苷心肌停博液对CPB围术期心肌酶学及相应促炎性细胞因子释放的影响,探讨它减轻CPB术中心肌损害的作用.方法:选择47例主动脉阻断时间在30分钟以上的心脏直视手术患者,随机分为实验组23例,对照组24例.实验组在常规CPB术中,心脏灌注液中加入腺苷2 mmol/L,对照组不用腺苷注射液.分别在手术开始前、主动脉阻断后30分钟,主动脉开放后30分钟、12小时、24小时抽取桡动脉血,检测CK-MB、采用ELISA法测定血浆细胞因子(TNF-α、IL-6)的浓度.结果:两组患者术前血浆TNF-α、IL-6、CK-MB浓度无差异,在主动脉阻断30分钟后已开始升高(P<0.05),实验组患者TNF-α、IL-6、CK-MB在主动脉开放后各时间点血浆浓度均明显低于对照组(P<0.05).结论:在CPB心脏冷停博液中加入腺苷注射液可明显减少CPB术中对心肌的损害,对术中肺保护起一定作用.
作者:吕民;李惠君;张秀和;符邵鹏 刊期: 2005年第07期
目的:研究基础疾病对严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS)患者免疫学指标的影响,为探讨SARS患者的发病机制、预测病情变化及为治疗提供依据.方法:收集1 291例SARS患者的临床资料,建立病历数据库,记录普通/合并基础疾病SARS患者发病1~5周各周的白细胞计数,淋巴细胞记数,CD3+、CD4+及CD8+T淋巴细胞绝对值,C3、C4、血沉及C反应蛋白等数据,研究各免疫学及炎性指标在普通/合并基础疾病SARS患者中的不同及意义.结果:合并基础疾病SARS患者的白细胞、淋巴细胞、CD3+、CD4+及CD8+T细胞绝对值明显低于普通患者(P<0.01或P<0.05),而CRP水平明显高于普通患者(P<0.01).结论:合并基础疾病SARS患者的T细胞免疫功能明显弱于普通SARS患者,对此类患者进行免疫支持治疗可能对改善预后具有一定意义.
作者:程永静;黄慈波;谢高强;王钱;刘爱华;赖蓓;陈颖娟;韩德民 刊期: 2005年第07期
目的:研究妊娠期妇女子宫NK细胞(uNK细胞)与外周血NK细胞(pNK细胞)表面NKG2A和NKG2D及其相应配体的表达,探讨uNK细胞表面NKG2A和NKG2D的不平衡表达与母胎界面所形成的免疫耐受关系.方法:采用流式细胞术检测30例孕6~9周的正常妊娠妇女uNK细胞和pNK细胞NKG2A、NKG2D的表达状况;RT-PCR技术检测绒毛膜组织HLA-E、MICA的表达.结果:子宫NK细胞NKG2A的表达显著高于外周血NK细胞,二者分别为(97.86±1.75)%与(33.35±10.92)%;子宫NK细胞NKG2D的表达水平与外周血NK细胞相近,分别为(93.21±4.52)%与(97.80±1.72)%,滋养层组织仅检测到HLA-E mRNA的表达.结论:妊娠期子宫NK细胞表面高表达抑制性受体NKG2A,同时滋养层组织表达相应的配体HLA-E,这可能是维持母胎界面免疫耐受的重要因素.
作者:赵丽丽;曲迅;孔北华;董白桦;杨美香;吕晓梅;张友忠 刊期: 2005年第07期
目的:提高hCGβ在真核细胞中的表达效率,观察分子佐剂C3d3增强hCGβ基因疫苗的体液免疫应答.方法:构建带有增强目的基因表达效率的狗胰岛素前原信号肽(DPPISS)的高效真核表达质粒pCMV4-hCGβ-C3d3、pCMV4-hCGβ和pCMV4-C3d3.分别用pCMV4-DPPISS-hCGβ-C3d3、pCMV4-DPPISS-hCGβ和pCMV4-DPPISS-hCGβ联合pCMV4-DPPISS-C3d3免疫BALB/c小鼠,各组免疫剂量分别为5、10、50、100、500 pmol,间隔3周相同剂量加强免疫1次.间接ELISA法分析免疫小鼠外周血抗hCGβ抗体动态变化以及IgG亚型.结果:含有DPPISS的pCMV4-hCGβ-C3d3较无DPPISS的pCMV4-hCGβ-C3d3在COS-7细胞中的表达效率明显提高.50 pmol是BALB/c小鼠hCGβ基因免疫的佳免疫剂量.C3d3使得BALB/c小鼠hCGβ的免疫原性增强了400倍.hCGβ-C3d3免疫组IgG1/IgG2a比值明显高于hCGβ免疫组和hCGβ与C3d3联合免疫组.结论:分子佐剂C3d3与hCGβ基因融合能够显著增强hCGβ基因避孕疫苗的体液免疫应答及抗体类型转换.
作者:余敏;赵欣荣;李大金;王秀丽;袁敏敏;姚晓英 刊期: 2005年第07期
目的:研究抗氧化微量营养素(antioxidant micronutrients, AM)对1型糖尿病大鼠Th2型细胞因子IL-4、IL-10基因表达的影响,以探索改善胰岛功能,防止糖尿病发生与发展的营养学因素.方法:应用链脲佐菌素(STZ)小剂量、多次注射法诱导大鼠1型糖尿病模型.AM-Se、VE、V、Cr通过饮食方法补充.外周血、脾脏淋巴细胞IL-4、IL-10基因表达检测应用流式细胞术.血糖及自由基代谢通过生化分析法完成.结果:补充AM组大鼠外周血及脾组织IL-4、IL-10阳性淋巴细胞百分比明显高于模型对照组(P<0.05,P<0.01),其中Se+VE+V+Cr组升高更明显;糖尿病模型组IL-4、IL-10表达处于低水平.补充AM各组较模型组明显增加了胰岛素分泌储备(P<0.05).与模型组相比,AM补充各组血糖水平显著降低,GSH-Px活力水平升高,MDA含量明显下降(P<0.05).结论:AM适剂量与组合不仅可以调节糖尿病大鼠胰岛素代谢、减轻氧化侵袭,而且通过上调IL-4、IL-10等Th2型细胞因子表达减轻胰岛损害.
作者:张桂珍;刘霆;宋旸;盛春华;高申;郑德明;朴松兰;常颖;孙英 刊期: 2005年第07期
目的:研究SAM-P1鼠中枢神经系统被流感病毒感染后,机体对感染神经元的清除及病毒感染所诱导的免疫应答.方法:采用立体定位微量注射法,用神经毒型流感病毒R404BP株经嗅球感染SAM-P1鼠,造成实验性流感病毒脑炎动物模型.检测感染鼠生存率,感染神经元清除时间以及Th1型细胞免疫.结果:SAM-P1鼠对流感病毒R404BP株易感性高,感染后生存率降低,清除感染神经元所需时间延长,脾淋巴细胞NK活性及CTL杀伤活性低下.结论:老化鼠因机体Th1型免疫应答下降导致对神经毒型流感病毒免疫防御机制的降低.
作者:刘北星;木村吉延 刊期: 2005年第07期
目的:探讨心脏移植慢性排斥反应的发病机制.方法:通过DSBT(Donor Specific Blood Transfusion)诱导耐受,建立同种异体大鼠心脏移植慢性排斥的模型.采用免疫组化和Northern blot方法检测大鼠心脏移植慢性排斥反应时浸润细胞的表型及分布,胞间黏附分子和生长因子的表达.结果:慢性排斥组的心肌CD45+、CD4+、CD8+、TCR+、CD45RB+细胞、巨噬细胞和NK细胞显著升高.这些细胞主要分布在心肌间质、血管周围和心内膜下区域,并以T淋巴细胞和巨噬细胞为主.在损伤区域可见Ⅰ型细胞间黏附分子(ICAM-1)、Ⅰ型淋巴细胞功能性抗原(LFA-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达增强.TGF-β1 mRNA Northern blot分析,慢性排斥组比正常对照组升高5~6倍.结论:T细胞和巨噬细胞在心脏移植慢性排斥的损伤中起主要作用,ICAM-1、LFA-1、bFGF和TGF-β1也参与了心脏移植物血管病(Cardiac allograft vasculopaphy,CAV)的形成.
作者:张建军;罗兆榴 刊期: 2005年第07期
目的:研制犬多价高免血清用于犬病毒性传染病的紧急预防和治疗.方法:选择1岁以上临床检查健康的昆明狼种犬及部分土犬20条,用犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬传染性肝炎病毒(ICHV)、犬冠状病毒(CCV)、犬副流感病毒(CPIV)弱毒和强毒多次交叉免疫,颈动脉无菌采血,分离血清,实验室采用微量中和试验、血凝抑制试验来检测抗体效价.结果:应用本制品高免血清在临床上取得了较好的效果.结论:研制成稳定、高效的犬多价高免血清,并获得了较好的经济效益和社会效益.
作者:李志敏;肖啸;严达伟;舒宏祥;李建生 刊期: 2005年第07期