目的:探讨L-选择素、VLA-4α、LFA-1、ICAM-1、VCAM-1在IgA肾病 (IgA nephropathy,IgAN)患者与非肾炎慢性扁桃体炎患者扁桃体的表达及意义.方法:收集10例伴有慢性扁桃体炎的IgAN患者扁桃体(IgAN组),这些患者经肾活检诊断为IgAN,10例不伴IgAN慢性扁桃体炎(Chronic tonsillitis,CT组)作为对照.应用Western blot技术定量分析两组扁桃体组织L-选择素,VLA-4α、LFA-1、ICAM-1、VCAM-1的表达,同时采用免疫组织化学技术检测扁桃体L-选择素、VLA-4α、LFA-1表达,观察ICAM-1,VCAM-1在生发中心和滤泡间区高内皮小静脉(High endothelial venules HEV)分布.结果:Western blot技术显示IgAN组及CT组扁桃体L-选择素、VLA-4α、LFA-1、ICAM-1、VCAM-1的表达分别为[(1.10±0.09;0.80±0.14)、(0.39±0.05;0.24±0.04)、(0.41±0.06;0.29±0.06)、(1.36±0.04;1.18±0.09)、(2.56±0.63;1.60±0.32)].免疫组织化学检测两组各归巢受体表达差别有显著统计学意义,IgAN扁桃体生发中心和滤泡外区HEV内血管地址素表达增强.结论:扁桃体淋巴细胞归巢异常是伴有慢性扁桃体炎的IgAN患者的重要特征,IgAN的发病机制与之有密切关联.
作者：孙海英；王志斌；刘胜洪；刘阳；刘妍 刊期： 2011年第09期
目的:探讨狼疮肾炎(Lupus nephritis,LN)血浆中Th17细胞相关的细胞因子(Interleukin,IL)-17、IL-6、IL-23、IL-27和转化生长因子β(Transforming growth factor-beta,TGF-β)水平的变化.方法:实验组分为系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)有活动性肾脏病变组的患者23例,无肾脏病变组的SLE患者 20例;健康对照组20例.采用酶联免疫吸附法测定血浆中IL-17、IL-6、IL-23、IL-27和TGF-β水平,分析它们的相关性.结果:SLE患者与健康对照组比较血浆中IL-17、IL-6、IL-23和IL-27的浓度都明显升高,TGF-β的血浆浓度则明显降低,而且实验组与健康对照组之间的差异具有统计学意义(P＜0.05).SLE有活动性肾脏病变和SLE无肾脏病变组之间比较,有活动性肾脏病变组IL-6升高更明显,TGF-β的血浆浓度降低更明显,且有统计学差异(P＜0.05).而IL-17、IL-23和IL-27在实验组之间则无明显的差异.IL-17与IL-6、IL-23和IL-27之间呈正相关,与TGF-β之间则呈负相关.结论:IL-17及其相关的细胞因子在SLE表达异常,但IL-17的表达与SLE肾脏病变无相关性.
作者：高丽霞；张明峰；郭惠芳；靳洪涛；孙毅锋 刊期： 2011年第09期
树突状细胞(Dendritic cells,DC)是由美国学者Steinman于1973年发现的,是目前所知的功能强的抗原提呈细胞,因其成熟时伸出许多树突样突起而得名.部分亚型DC分布在粘膜上皮,胞吞能力较强,是性传播过程中HIV-1初被感染的靶细胞之一[1],且DC活化后具有很强的迁移和抗原提呈能力,在淋巴组织内可以将抗原提呈给幼稚型或活化的T细胞[2],从而引发适应性免疫应答或免疫耐受[3],使DC在抗HIV-1感染中起重要的作用;同时HIV-1对不同亚型DC的功能、分布也有不同影响.因此研究不同亚型DC与HIV-1之间的相互作用,对于进一步理解HIV-1发病机制和设计有效的预防策略具有重要的作用.HIV-1与DC的相互作用包括:DC降解HIV-1;HIV-1直接有效感染DC;DC携带HIV-1传递给T细胞;HIV-1对被感染DC生理功能进行破坏等.本文就以上几方面介绍不同亚型DC与HIV-1的相互作用.
作者：刘爱平；杨瑜；张晓燕 刊期： 2011年第09期
多种免疫细胞能够分泌细胞因子IL-9,例如Th2、Th9、Th17、Treg细胞、NKT细胞、肥大细胞等.近有关IL-9的研究又有新进展,本文就IL-9的细胞来源、效应细胞及其免疫生物学功能做简要综述.
作者：李青；路丽明；周光炎 刊期： 2011年第09期
机体的免疫反应包括固有免疫和获得性免疫,各自具有不同的特点和机制,但两者间存在着非常紧密的联系.其中,自然杀伤细胞(NK细胞)和树突状细胞(DC)是固有免疫系统中两类非常重要的细胞,其在固有免疫和获得性免疫的建立和调节过程中起着关键作用.大量证据表明NK细胞的功能和DC密切相关.1985年Shah等[1]首次提出了NK细胞可能通过消除与抗原相互作用的DC来调节T细胞应答;1999年Fernandez等[2]发现DC能够触发NK细胞介导的抗肿瘤应答.自2001年以来,越来越多的研究表明,在对病原体和肿瘤的免疫监视中,DC与NK细胞间存在着重要的信号传递.
作者：马茜；袁青 刊期： 2011年第09期
类风湿性关节炎(RA)是一种以滑膜持续炎症和关节软骨及骨破坏为特征的自身免疫性疾病.RA的发展伴随着滑膜细胞增生、新生血管形成,以及局部大量T细胞浸润[1].IL-17是主要由Th17细胞分泌,并在RA滑膜中表现出与疾病严重程度相关的炎性因子[2].体外实验表明IL-17通过活化滑膜细胞而侵蚀关节,是RA病理过程中的重要调节因子[3].小鼠关节炎模型证实缺乏或拮抗IL-17A可以产生明显的抗炎作用[4,5].近,两种针对IL-17的单克隆抗体在RA早期临床试验中表现出安全性和有效性[6,7].本研究就近年来IL-17的亚型及其受体、信号通路以及IL-17在RA发病机制中的作用研究进展作一综述.
作者：卢月；曹雅晶；钱瑞琴 刊期： 2011年第09期
目的:构建β-半乳糖苷结合凝集素-9(Gal-9)的真核表达载体,在CHO细胞中表达,并检测其表达.方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Gal-9基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGal-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法检测Gal-9的表达,MTT法检测Gal-9对同种异体淋巴细胞增殖的影响.结果:DNA测序和酶切鉴定证明Gal-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGal-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法,在分子和蛋白水平证实Gal-9的表达,MTT法检测显示,Gal-9明显抑制同种异体淋巴细胞增殖反应,平均抑制率达85.43%.结论:成功构建pGal-9的真核表达载体,证实其在CHO细胞中可以成功表达,并抑制同种异体淋巴细胞增殖反应.
作者：郭凯文；邱文洪；许楚娟；易路阳 刊期： 2011年第09期
目的:近期台湾地区食品及饮料中添加邻苯二甲酸酯类(塑化剂)的安全问题受到广泛关注,已有研究证实邻苯二甲酸酯类物质能影响人类生殖系统发育,但其对人体免疫系统影响尚不清楚.本文研究邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响,以期揭示其对人类健康的危害.方法:使用不同浓度邻苯二甲酸二丁酯体外处理小鼠腹腔巨噬细胞24小时,然后进行巨噬细胞对细菌E.coli以及诱导凋亡的小鼠胸腺细胞的吞噬实验,并检测其吞噬率和吞噬指数,从而评价其对巨噬细胞吞噬能力的影响.用流式细胞仪检测邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞表面吞噬相关分子CD11b、CD54、CD36、TLR4和CD64的影响;利用siRNA技术对吞噬相关受体CD36进行表达干扰,验证其在邻苯二甲酸二丁酯抑制巨噬细胞吞噬能力中的作用.结果:经过24小时体外处理,不同浓度邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力均有抑制作用,并且具有剂量依赖性.此外,邻苯二甲酸二丁酯能显著降低巨噬细胞清道夫受体CD36的表达.结论:研究结果证实邻苯二甲酸二丁酯通过降低细胞膜表面CD36表达从而抑制巨噬细胞吞噬能力.
作者：李蕾；李海山；宋乃宁；陈会明 刊期： 2011年第09期
目的:构建人脂联素球状结构域(gAd)基因的原核表达载体PET-28a(+)-gAd,诱导表达并纯化重组gAd蛋白,制备多克隆抗体.方法:以人基因组为模板,用PCR方法扩增人脂联素球状结构域(gAd)基因,构建原核表达载体PET-28a(+)-gAd,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,经SDS-PAGE,免疫印迹法检测并鉴定表达产物,表达的目的蛋白用镍亲和层析柱纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.结果:原核表达载体PET-28a(+)-gAd转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,获得gAd重组蛋白,免疫印迹证实能与抗his标签检测抗体结合,制备的多克隆抗体经间接ELISA法测得效价为1∶32 000.免疫印迹证实,抗血清不仅能特异性地识别gAd蛋白,还能识别脂联素蛋白,而不与非特异性蛋白结合.结论:成功构建原核表达载体PET-28a(+)-gAd,并表达、纯化重组蛋白gAd,制备的多克隆抗体特异性好,效价较高,为进一步的研究奠定了基础.
作者：安薇；徐霞 刊期： 2011年第09期
目的:获得高纯度、高活性的人TLR4 胞外段蛋白.方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4 胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达.用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白.SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,ELISA和FCM鉴定其功能活性.结果:获得1 911 bp 的人TLR4 胞外段基因片段,构建成重组表达载体pET32a-TLR4并在大肠杆菌中表达.TLR4-Trx融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的12%,其纯度较高.ELISA和FCM检测显示,TLR4-TrX融合蛋白不仅与配体LPS结合,还能竞争性抑制LPS与THP1细胞结合.结论:所获TLR4-Trx融合蛋白纯度高,功能活性好,为进一步研究TLR相关的免疫调节机制提供物质基础.
作者：王凡平；王明永；孙瑞利；郭庆合；张婧婧；杨景瑞；张新富；段巨洪 刊期： 2011年第09期
目的:建立肺间质树突状细胞(DCs)的分离与纯化方法,为肺间质DCs的相关研究提供实验基础.方法:雄性BALB/c小鼠肺组织经Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心、CD11c+免疫磁珠分选纯化DCs,流式细胞术鉴定分选DCs纯度,倒置相差显微镜观察孵育细胞生长状态,扫描电镜和透射电镜观察DCs超微形态,流式细胞术检测肺间质DCs的CD11c、CD11b、CD86和I-Ab表型.结果:分选获得的肺间质DCs经鉴定,纯度为92.59%±5.62%,在RPMI1640培养基中生长状态良好,少数细胞形成小细胞集落.DCs超微形态观察显示细胞表面多见长1～2 μm密集的树枝状突起,细胞器不发达,细胞核形不规则.90%以上肺间质DCs为未成熟状态或前体DCs,低表达成熟标志物I-Ab和CD86,并具有异质性,近40%起源于髓系细胞分化.结论:密度梯度离心和免疫磁珠分选是分离、纯化肺间质DCs的理想方法,获得的DCs纯度高、活性好、免疫表型稳定,但操作步骤比较复杂,技术要求高.
作者：王宏伟；陆江阳；田光；刘茜；赵敏；杨毅；康佳蕊 刊期： 2011年第09期
目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应.方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果.结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21.于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应.结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应.
作者：何向锋；王净；余方流；赵枫姝；蔡凯；张洪义；陈峻崧；陈登宇；窦骏 刊期： 2011年第09期
目的:观察艾叶挥发油对变应性鼻炎(AR)大鼠血清中IgE、IL-4和IL-5含量的影响.方法:60只SD大鼠按体重随机分为正常对照组、模型组、治疗组和阳性药对照组,每组10只.实验组用卵蛋白(OVA)、氢氧化铝和灭活百日咳杆菌皮下注射致敏,用10%的卵蛋白生理盐水溶液滴鼻激发,建立AR模型.正常对照组以等量生理盐水代替.治疗组和阳性药对照组分别灌胃给予艾叶挥发油和氯雷他定治疗10天,正常对照组用橄榄油代替药物;另外20只大鼠用于被动皮肤过敏原试验(PCA),检验大鼠模型制备及治疗情况;用ELISA法测定各组大鼠外周血清IL-4、IL-5和IgE含量.结果:模型组大鼠鼻喷嚏平均次数明显多于正常对照组、治疗组和阳性对照组(P<0.05);模型组大鼠PCA试验阳性率为92%,其余三组全部表现为阴性;模型组IgE均显著高于正常对照组(P<0.05);治疗组IgE、IL-4、IL-5均显著低于模型组(P<0.05);治疗组各项指标与阳性对照组比较差异无统计学意义.结论:艾叶挥发油可降低AR大鼠血清中IL-4、IL-5和IgE含量,减轻鼻粘膜变应性炎症.
作者：张枢；王宇；张宇 刊期： 2011年第09期
玉米(Zea mays L.)为一年生禾本科草本植物.玉米营养丰富,除蛋白质、脂肪和粗纤维外,还含有多种活性多糖,已有研究表明,玉米多糖具有抗便秘、减肥降脂、调节免疫、抑肿瘤及降血糖等作用[1,2].目前对于玉米多糖的研究仅限于玉米皮、玉米须和玉米花粉中多糖的生物学活性的研究[3].其中玉米子粒中多糖的免疫调节作用少见报道.本试验研究了玉米子粒中多糖对小鼠免疫功能的影响, 为玉米多糖的研究与开发提供理论依据.
作者：洪铁；杨振；吕传峰；张宇；董满；赵晶；谢宇；于玮炜 刊期： 2011年第09期
目的:探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠心肌Caspase-3、Cyt C蛋白的表达及其与心肌细胞凋亡的关系.方法:7日龄新生大鼠制备HIE经典模型.分为HIE组和假手术对照(NC)组,两组分别于HIE后1小时、4小时、12小时、24小时、48小时、72小时、7天取心脏组织,应用免疫组织化学法检测心肌组织Caspase-3、Cyt C蛋白的表达;应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡.结果:HIE组24小时Caspase-3出现阳性细胞表达增多,48小时达高峰,24小时～7天Caspase-3的表达均明显高于NC组(P＜0.05).HIE组24小时Cyt C出现较多的阳性细胞表达,72小时达高峰,至7天时仍高于NC组(P＜0.05).HIE组12小时心肌阳性凋亡细胞开始增多,72小时达高峰,12～72小时各时间点阳性凋亡细胞明显高于NC组(P＜0.05).Caspase-3、Cyt C蛋白表达与凋亡细胞数二者之间均呈直线正相关.结论:HIE新生大鼠心肌细胞Caspase-3、Cyt C蛋白表达增加,提示Caspase-3、Cyt C蛋白表达对心肌细胞凋亡起促进作用.
作者：刘英；郭世杰；韩军；周文莉 刊期： 2011年第09期
目的:探讨Th及NKT细胞内细胞因子(Intracellular cytokine,ICK)在再生障碍性贫血(Aplastic anemia,AA)发病中所起的作用.方法:流式细胞术(FCM)检测Th细胞表面CD3+CD4+分子、NKT细胞表面CD3+CD16+56+分子,细胞内染色技术检测Th、NKT细胞内IFN-γ和IL-4水平.结果:AA患者外周血Th细胞减少(P＜0.01),细胞内CD3+CD4+IFN-γ+、CD3+CD4+IL-4+均增高,Th1/Th2增高(P＜0.01);NKT细胞增多(P＜0.05),NKT细胞内IL-4+水平升高(P＜0.05),IFN-γ+水平无统计学差异.结论:AA的发病与T淋巴细胞异常密切相关,是一种Th1型反应.NKT细胞可代偿调节AA患者IFN-γ和IL-4比例.
作者：童勇；马莉；曾小菁 刊期： 2011年第09期
目的:研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对再生障碍性贫血患者 Treg 细胞的影响,探讨其对再生障碍性贫血(AA)可能的治疗作用.方法:取传代培养第 7 代的 hUC-MSC,密度梯度离心法分离 AA-PBMC,分为 3 组:空白组(hUC-MSC),对照组(AA-PBMC),实验组(分别以1∶10、1∶1及10∶1的比例将hUC-MSC与AA-PBMC 共培养7天),RT-PCR法测定Foxp3mRNA的相对表达量(Foxp3/β-actin),3色流式细胞仪测定Treg细胞(CD4+CD25+Foxp3+)占外周血 CD4+ T细胞的比例.结果:hUC-MSC不表达Foxp3mRNA,无Treg细胞存在.实验组 Foxp3mRNA 相对表达量、Treg 细胞占外周血CD4+T细胞比例高于对照组(P＜0.05),hUC-MSC 与 AA-PBMC 比例为 10∶1 时,差异更显著(P＜0.01).结论:人脐带间充质干细胞体外可增加再生障碍性贫血患者 Treg 细胞占CD4+T细胞比例,为临床治疗提供新的理论依据;其来源广泛,目前已产业化,具有广阔的临床应用前景.
作者：柴晔；刘瑛；孙媛媛；张连生；曾鹏云；吴重阳；岳玲玲；李莉娟；熊彬 刊期： 2011年第09期
目的:检测不同组织中TSP50启动子区域的甲基化状态,研究其表达的机制.方法:分离、纯化鼠睾丸中的精原细胞、精母细胞和精子,分别提取人的睾丸组织、Ntera-2细胞、鼠精原细胞、精母细胞和精子的基因组DNA,用重亚硫酸盐处理基因组DNA,PCR扩增人和鼠的TSP50的启动子CpG岛区域,电泳,提纯,连接于质粒中,转导入细胞中,扩增,提取,纯化质粒,测序.结果:人睾丸组织甲基化水平较低,Ntera-2细胞处于较高水平.鼠的精原细胞和精子细胞甲基化水平较高,精母细胞甲基化水平较低.结论:TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化水平调控TSP50蛋白的表达.
作者：茅淑砚；杨明；蒲春雪；吕静静；王悦增 刊期： 2011年第09期
目的:通过检测TLR4和IFN-β在单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)小鼠脑组织中的表达,为探讨TLR4在HSE发病中可能的免疫学作用奠定基础.方法:采用颅内接种法建立HSE小鼠模型并设置盐水组、正常组对照,分别应用RT-qPCR、RT-PCR方法检测小鼠脑组织中TLR4、IFN-β的相对表达并采用Pearson相关分析两者相关性.结果:HSE小鼠脑组织中TLR4、IFN-β的相对表达较对照组明显上调(P＜0.01),TLR4和IFN-β表达呈正相关(r=0.851,P＜0.01).结论:TLR4可能会通过启动下游细胞因子IFN-β等介导宿主在HSE中的免疫应答作用.
作者：刘强；赵春梅；惠晶；王振海 刊期： 2011年第09期
目的:探讨Notch1信号传递水平对小鼠造血干细胞(HSC)体外分化为T/B淋巴细胞的影响.方法:应用表达Notch1配体Delta1的基质细胞OP9-DL与来源于小鼠胎肝和骨髓的Lin- HSC在体外共培养,检测Notch1基因突变对HSC在体外分化后B淋巴细胞或者CD4+CD8+细胞的比例.结果:Notch1基因点突变后Notch1受体结构发生改变,和特异性抗体以及配体的结合能力降低,导致信号传递能力下降.Notch1突变后,胎肝和骨髓HSC向B淋巴细胞分化过程未受影响,但是向T淋巴细胞的分化过程受到明显抑制,其中Notch1突变对胎肝HSC分化能力的影响高于骨髓HSC,分别被抑制44%和34%.结论:Notch1突变导致Notch1信号水平降低,对HSC向B淋巴细胞分化没有影响,但是能抑制向T淋巴细胞的分化.
作者：王磊；洪剑；王玉华；苗丽丽；许望翔；杨晓明；葛常辉 刊期： 2011年第09期
目的:探讨阻断CD40-CD40配体共刺激信号诱导移植免疫耐受对树突状细胞功能的影响.方法:将抗CD40配体抗体(MR-1)应用于小鼠心脏移植受体以诱导移植免疫耐受,使用磁珠细胞提取装置从排斥及免疫耐受受体中提取树突状细胞.使用流式细胞仪测定树突状细胞表面分子CD40、CD80及CD86的表达.于体外以LPS再刺激树突状细胞,并使用ELISA法测定上清中的细胞因子IL-10和IL-12的水平.同时采用混合淋巴细胞反应(MLR)测定了树突状细胞的刺激性及免疫调节能力.结果:免疫耐受受体的树突状细胞表达低水平的共刺激分子CD40、CD80及CD86,同时分泌高水平的IL-10和低水平的IL-12.而且这些树突状细胞具有较弱的刺激性,并能抑制脾细胞的增殖.结论:阻断CD40-CD40配体共刺激信号可以产生免疫耐受状态,在这样的免疫耐受受体中诱导出未成熟表型的IL-10highIL-12low树突状细胞,这些细胞具有免疫调节活性.
作者：姜晓峰；郭大伟；崔哲铭；朱磊；孙文郁；林琳；唐裕福；王学范；梁健 刊期： 2011年第09期
目的:探讨重组GnRH六聚体-麦芽糖结合蛋白(MBP-GnRH-6)主动免疫对公猪体重、生长激素和胰岛素样生长因子-I的影响.方法:7头公猪在9周龄时用重组GnRH主动免疫,17周龄时加强免疫,免疫和屠宰前1天称猪体重,酶联免疫分析法检测血清猪生长激素,放射免疫分析法检测血清IGF-I和睾酮水平,Pearson相关分析血清睾酮与IGF-I的相关性.结果:MBP-GnRH-6主动免疫猪血清睾酮浓度显著地低于阳性对照组(P＜0.05),体重显著重于阴性对照组(P＜0.05),但不影响公猪血清生长激素水平(P＞0.05).在17～21周龄时,免疫组公猪血清IGF-I浓度显著低于阳性对照组(P＜0.05),21～25周龄时免疫组公猪血清IGF-I显著高于阴性对照组(P＜0.05).相关分析表明血清睾酮与IGF-I呈正相关.结论:MBP-GnRH-6主动免疫改变了公猪生长性能,增加体重,其作用途径可能是睾酮通过调控血清IGF-I水平来调控的.
作者：方富贵；张运海；刘亚；苏时萍；蒲勇；李运生；陶勇；章孝荣 刊期： 2011年第09期
