细胞焦亡(pyroptosis)是新发现的一种依赖半胱天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate spe-cific proteinase-1,caspase-1)的促炎形式的细胞程序性死亡.细胞焦亡本质上是一种炎性反应,它由各种病理性刺激引发,是控制病原体感染的关键.细胞焦亡与凋亡、坏死虽有相似之处,但也存在着较大差异,因此有必要对细胞焦亡发生、病原体诱发焦亡及病毒抑制焦亡方面进行综述,为进一步研究细胞焦亡提供新思路.
作者：顾生风；郎秀娟；聂欢欢；王燕 刊期： 2018年第05期
肿瘤发生的根本原因是细胞周期调控紊乱,细胞S期激酶相关蛋白2(S-phase associated kinase protein 2,Skp2)是新近认识的细胞周期调控的蛋白之一.在多种肿瘤中高表达,例如:直肠癌,肺癌,胶质瘤,前列腺癌等;并影响患者预后.Skp2作为肿瘤基因治疗的新的靶点,抑制其表达能有效的控制肿瘤的发展,提高患者的预后,现就Skp2的结构、功能和与肿瘤的相关性进行综述.
作者：孙雅静 刊期： 2018年第05期
多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)为世界卫生组织分型IV级,是常见的成人恶性脑肿瘤.近年来发现,患者多存在局部或全身的免疫抑制微环境,这可能是GBM对治疗抵抗的原因之一.受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)可介导细胞增殖、迁移、分化等生物学功能.某些RTKs在GBM中异常活化,是促进疾病恶性进展的重要分子和靶向治疗的重要靶点,并参与GBM的免疫抑制.现就RTK介导的GBM免疫抑制微环境及其作用与机制等研究进展进行综述.
作者：甄梓期；宫宇娇；程化坤；任欢 刊期： 2018年第05期
调节性树突状细胞(regulatory dendritic cells,DCreg)是树突状细胞(dendritic cells,DCs)亚群之一,具有抑制T细胞增殖、诱导调节性T细胞分化和支持肿瘤免疫耐受的功能.DCs的调节能力取决于它们的未成熟状态和不同的亚群,以及它所处的环境,可由免疫抑制因子、遗传操纵、某些致病刺激、免疫细胞或凋亡细胞的信号、组织或肿瘤微环境引起,因此DCs的致耐受性是一个复杂的环境信号与细胞内在机制的网络控制.对肿瘤环境中刺激DCs分化成DCreg的抑制/极化因子鉴定,有助于设计有效的肿瘤治疗疫苗和恢复DCreg功能,维持肿瘤患者的临床相关抗肿瘤免疫具有重要意义.
作者：张雪伟；张燕丽；文泽馨；张敏 刊期： 2018年第05期
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因未明的常见自身免疫性疾病.间质性肺病(interstitial lung disease,ILD)作为RA患者常见的关节外表现,病情进展快,病死率高,且RA-ILD病因尚未完全明确.LL-37是人类天然免疫系统中唯一的抗菌肽cathelicidin家族成员,由于其具有调节免疫系统、促进损伤修复以及抗肿瘤等功能而越来越受到关注.辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)是一种重要T细胞亚群,在感染免疫、自身免疫性疾病和肿瘤免疫中均有重要作用,且与LL-37在RA-ILD的人群中关系密切.因此,有必要就LL-37在RA-ILD的发生发展中的作用作一简要综述.
作者：李铮；李洋 刊期： 2018年第05期
随着近年来寨卡病毒(zika virus,ZIKA)疫情多地区频繁爆发,ZIKA病毒感染危害逐渐引起全球高度关注.虽然ZIKA病毒的主要危害是孕妇感染所伴随的新生儿头小畸形,但越来越多的证据表明,ZIKA还能引起患者其他系统器官的损伤和危害.现就ZIKA病毒感染患者神经系统、生殖系统、胎儿以及胎盘等器官损伤研究及其机制的新进展进行综述.
作者：唐秋菊；庞伟；郑昌博 刊期： 2018年第05期
目的 研究miRNA-126表达阻断后,成釉细胞瘤内血管的变化情况.方法 将实验对象分为Control组(未转染组),NC组(转染无意义单链反义核苷酸药物的细胞组),AMO组(转染单链反义核苷酸药物的细胞组).通过制备miRNA-126的单链反义核苷酸药物,加入到体外培养的成釉细胞瘤细胞中,荧光定量PCR检测体外培养的成釉细胞瘤细胞中miRNA-126表达是否被阻断.利用荧光定量PCR和Western blot分别在RNA和蛋白水平检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGFA)、细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)(CD54)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)(CD106)等相关细胞因子的表达情况.结果 与Control组相比,AMO组miRNA-126表达水平显著降低,差异极显著,而VEGFA、ICAM-1和VCAM-1的RNA表达水平及蛋白表达水平显著升高.miRNA-126的单链反义核苷酸药物可以有效的阻断miRNA-126的表达,miRNA-126表达阻断后,成釉细胞瘤细胞中VEGFA和成纤维细胞生长因子7(fibroblast growth factor 7,FGF7)表达显著升高.结论 miRNA-126的单链反义核苷酸可能会通过阻断miRNA-126的表达,进而增加VEGFA、ICAM-1和VCAM-1的表达,从而达到调节成釉细胞瘤生长的目的.
作者：王伟；董臣；孙翔宇；焦晓辉 刊期： 2018年第05期
目的 原核表达肠道病毒68型(enterovirus D68,EV-D68)表面结构蛋白VP2、VP3,分析其亲和力和结合力,得到具备高结合力的、可结合特异性记忆性B细胞的EV-D68病毒表面结构蛋白.方法 采用PCR法扩增EV-D68病毒的VP2、VP3蛋白基因,插入原核表达载体pGEX-5X-1,构建重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,转化到工程菌Rosetta(DE3)pLy中,异丙基硫代半乳糖苷(i-sopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,表达的重组蛋白形成包涵体,经超声洗涤、透析复性;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)电泳、Western-blot鉴定重组蛋白;竞争性酶联免疫吸附检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测蛋白VP2、VP3的蛋白活性和亲和力;藻红蛋白荧光素(phycoerythrin,PE)标记VP2和VP3重组蛋白,结合CD19-APC、CD27-FITC抗体,流式细胞术检测VP2、VP3蛋白结合特异性记忆性B细胞的情况.结果 成功构建出重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,通过双酶切鉴定及测序分析,确认表达载体构建正确,通过表达纯化,成功获得EV-D68的VP2、VP3蛋白,SDS-PAGE电泳灰度扫描显示,VP2蛋白的纯度可达80％,VP3蛋白的纯度可达75％;经Western-blot和ELISA鉴定,均有抗原特异性;通过竞争ELISA检测,VP2亲和力常数为2.7×107 M-1,为中等亲和力;VP3亲和力常数为3.25×106 M-1,为低亲和力;通过流式细胞术可以检测到病毒攻击小鼠后脾脏细胞中的特异性记忆性B细胞.结论 成功原核表达,复性纯化得到EV-D68 VP2、EV-D68 VP3蛋白,两个蛋白均具有较强的抗原特异性,利用流式细胞仪能检测到特异性记忆性B细胞.终获得了具有较强结合能力,可用于分选抗原特异性记忆性B细胞的EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3,为研究VP2、VP3蛋白的中和抗原表位及其广谱中和抗体的分选检测打下了基础.
作者：龙海亭；孔璟；郑惠文；李冰香；张寒；李恒；刘玉斌；范海涛；于丽；廖国阳；孙明；刘龙丁 刊期： 2018年第05期
目的 探讨重组人白介素2(recombinant human interleukin-2,rh IL-2)治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)合并干燥综合征(sjogren syndrome,SS)的疗效,以及对血清B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,Blys)水平的影响.方法 选取湖北民族学院附属民大医院2014年2月至2017年6月RA合并SS患者60例,随机分为两组,治疗组(30例),给予rh IL-2每天5万IU皮下注射,连续治疗5 d,对照组(30例)给与常规抗免疫治疗.应用Schirmer试验、唾液流率评价患者SS症状改善情况,应用类风湿关节炎疾病活动评分(28 joint disease activity score,DAS28),关节肿胀的压痛指数评价患者RA症状改善情况.采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测患者血清Blys和免疫指标,并对比治疗前后的差异.结果 治疗后左眼泪流量改善差值1.51(95％CI:0.938-2.082)mm/min、右眼泪流量改善差值1.67(95％CI:1.095-2.245)mm/min、唾液流率改善差值0.21(95％CI:0.049-0.371)mL/min.治疗组患者治疗后Schirmer试验、唾液流率指标均优于对照组(P<0.05).治疗组关节肿胀的压痛指数(2.05±0.03)得分较治疗前明显降低(P<0.05)且低于对照组(P<0.05).治疗组RA缓解比例较治疗前增高40％(P<0.05)且显著高于对照组(P<0.05).治疗后红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation tate,ESR)、C反应蛋白(C reaction protein,CRP)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)显著下降(P<0.05).两组治疗后ESR改善差值3.72(95％CI:1.03,5.06)mm/h,CRP改善差值1.95(95％CI:0.68,3.47)g/L,IgG改善差值2.01(95％CI:0.69,4.93)g/L,治疗组患者治疗后血清免疫指标均优于对照组(P<0.05).治疗组患者血清Blys由治疗前(8.34±3.19)ng/mL下降到(4.72±2.16)ng/mL,差异明显(P<0.05),对照组血清Blys治疗后与治疗前对比无统计学差异(P>0.05).结论 rh IL-2通过降低血清Blys水平减轻自身免疫反应,改善RA合并SS临床症状,对RA合并SS的治疗效果明显.
作者：余莹莹；石天；刘俊龙；袁杰 刊期： 2018年第05期
目的 探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)敲除基因小鼠类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型中ICOS信号对于滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells,Tfh)和Th9细胞的影响.方法 流式细胞仪分析测定ICOS敲除基因(ICOS-knockout,ICOS-ko)小鼠及对照组小鼠Tfh及Th9细胞群的表达;酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞培养悬液中细胞因子中白细胞介素(interleukin,IL)-21、IL-9的水平.结果 野生型RA小鼠脾细胞Tfh亚群表达水平从8 W到16 W呈上升趋势[(8 W:(2.55±0.95)％;16 W:(15.30±3.48)％];ICOS-ko RA小鼠脾细胞Tfh亚群的表达同样呈上升趋势[8 W:(0.91±0.49)％;16 W:(2.56±1.03)％],但与野生型RA小鼠相比各期均表达下调(均P<0.05);野生型RA小鼠脾细胞Th9亚群表达水平从8周到16周呈上升趋势[8 W:(2.57±1.20)％;16 W:(8.93±2.56)％];ICOS-ko RA小鼠脾细胞Th9亚群的表达同样呈上升趋势[8 W:(0.94±0.49)％;16 W:(2.58±1.32)％],但与野生型RA小鼠相比各期均表达下调(均P<0.05);野生型RA小鼠的IL-21、IL-9的表达从8周到16周呈上升趋势,ICOS-ko RA小鼠同野生型RA小鼠相比,表达趋势相同但呈下调趋势(P<0.05).结论 Tfh细胞及Th9细胞参与了RA的免疫应答过程;下调ICOS能够下调Tfh及Th9的致炎作用.
作者：王波；梁松；李媛；韩晓芳 刊期： 2018年第05期
目的 检测双阴性T(double negative T,DNT)细胞对自然杀伤(natural killer,NK)细胞功能的影响,初步探讨其在3型鼠肝炎病毒(murine hepatitis virus strain 3,MHV-3)诱导的小鼠暴发型肝炎(fulminant viral hepatitis,FVH)模型中发挥的作用.方法 通过腹腔注射MHV-3感染BALB/cJ小鼠诱导FVH,尾静脉转移过继FVH小鼠脾脏DNT细胞,观察小鼠生存时间和肝脏组织病理学改变,流式细胞术检测小鼠肝脏NK细胞CD69表达情况.磁珠分选肝脏DNT细胞和NK细胞,共培养24 h后,检测NK细胞CD69、胞内干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的表达水平,利用乳酸脱氢酶释放实验检测NK细胞对原代肝细胞的杀伤作用.结果 转移过继DNT细胞,FVH小鼠生存时间缩短,在三天内全部死亡.转移过继组小鼠肝脏NK细胞CD69表达比例较对照组显著升高[(80.60±5.56)％比(4.53±4.82)％,P<0.05].肝脏DNT细胞和NK细胞以10:1比例共培养,NK细胞CD69表达比例较NK单独培养显著增加[(23.1±3.7)％比(4.53±4.82)％,P<0.05],TNF-α表达水平升高[(8.9±2.3)％比(3.0±0.2)％,P<0.05],NK细胞对原代肝细胞的杀伤活性明显增强[(7.6±0.5)％比(3.7±0.4)％,P<0.05].结论 DNT细胞可促进NK细胞活化和TNF-α表达,增强NK细胞对肝细胞的杀伤作用,可能为DNT细胞参与FVH发生发展的机制之一.
作者：吴迪；王洪武；黄达；宁琴 刊期： 2018年第05期
目的 观察含氢培养基对巨噬细胞RAW264.7极化的影响,并初步探讨巨噬细胞的功能.方法 分别采用常规培养和含氢培养基培养巨噬细胞RAW264.7(M0),予以脂多糖(lipopolysac-charide,LPS)20 ng/mL和干扰素-γ(interferon gamma,IFN-γ)50 ng/mL诱导M1型极化,白细胞介素-4(interleukin,IL-4)20 ng/mL诱导M2型极化,采用相差显微镜观察细胞形态学变化,CCK-8法检测细胞活力,实时荧光定量PCR(quantitative real-time,qPCR)检测相关炎症基因表达情况,流式细胞仪检测M1型巨噬细胞膜蛋白CD16/32和M2型巨噬细胞膜蛋白CD206比例变化,Western blot检测核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达变化,划痕实验检测细胞迁移能力.结果 巨噬细胞予以LPS和IFN-γ诱导后显示M1型极化,表现为轴突细而长;予以IL-4诱导后显示M2型极化,表现为轴突短而小.炎症因子(iNOS、TNF-α、和IL-1β)在M1型巨噬细胞中以及IL-10和YM-1在M2型巨噬细胞中表达显著增加(P<0.05).氢气对RAW264.7的活力无显著影响.含氢培养基可降低M1型巨噬细胞促炎症因子表达和膜蛋白CD16/32表达下降,核转录因子NF-κB(P65)入核减少,并降低M1型巨噬细胞的迁移能力.但对M2型巨噬细胞的极化及功能无显著影响(P>0.05).结论 含氢培养基减少M1型巨噬细胞炎症因子表达和膜蛋白CD16/32比例,并降低M1型巨噬细胞迁移能力,可能与核转录因子NF-κB(P65)入核减少有关.
作者：余胜华；史婧奕；高志梅；郑露露；吕志宝 刊期： 2018年第05期
目的 研究果蝇C病毒(Drosophila C virus,DCV)刺激下果蝇的固有免疫信号通路基因的表达.方法 将羽化5至7天的果蝇分为两组:感染DCV组作为实验组,注射磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)作为空白对照组.24 h后,提取果蝇的总RNA,进行反转录,利用实时荧光定量PCR分析果蝇固有免疫基因的表达.结果 DCV感染后,在Toll信号通路中,dmDrosomycin基因表达量显著高于对照组(P=0.0286);在免疫缺陷信号通路(immune deficiency,IMD)中,DmDpt和DmATT基因表达量显著高于对照组(P分别为0.0079,0.002);在酪氨酸激酶-转录因子信号通路(janus kinase-signal transducer and activator of transcription,JAK-STAT)中,DmVago基因表达量显著高于对照组(P=0.007);在类补体信号通路(complement-like)中,DmTEP5基因表达量显著高于对照(P=0.0079).结论 DCV感染果蝇可以激活果蝇固有免疫系统的Toll、IMD、JAK-STAT和类补体信号通路.
作者：黄鑫亮；温必露；肖小平 刊期： 2018年第05期
目的 探索乙酰半胱氨酸对骨髓成纤维细胞转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和Ⅰ型胶原的抑制作用.方法 选择健康成年远交群(sprague dawley,SD)大鼠雌雄不限,将36只大鼠随机分成正常血清组和乙酰半胱氨酸血清组,每组18只,经灌胃和DMEM培养基稀释分别制备正常血清和乙酰半胱氨酸血清;以大鼠骨髓组织体外培养成纤维细胞为材料,经免疫荧光鉴定后采用MTT法检测成纤维细胞增殖率,酶联免疫吸附法试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光定量PCR法检测TGF-β和Ⅰ型胶原表达水平.结果 乙酰半胱氨酸血清组成纤维细胞增殖率显著低于正常血清组[(42.51±2.62)％比(71.62±4.51)％,t=21.635,P<0.05],TGF-β和Ⅰ型胶原表达水平显著低于正常血清组[(27.91±5.73)μmol/L比(35.61±6.42)μmol/L,t=10.235,P<0.05;(21.21±4.62)μmol/L比(28.72±5.91)μmol/L,t=9.658,P<0.05],mRNA表达水平显著低于正常血清组[(0.25±0.10)比(0.46±0.11),t=12.525,P<0.05;(0.13±0.06)比(0.40±0.10),t=8.652,P<0.05].结论 乙酰半胱氨酸对骨髓成纤维细胞TGF-β和Ⅰ型胶原有一定抑制作用.
作者：王胜；刘林 刊期： 2018年第05期
目的 建立人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型E7蛋白的原核表达系统,表达HPV16 E7蛋白,制备小鼠抗HPV16 E7血清.方法 采用PCR方法扩增HPV16 E7基因,构建入pET21b质粒,重组表达载体经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3).诱导表达后经十二烷基硫酸钠(so-dium dodecyl sulphate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)和Western blot鉴定表达产物.提取包涵体进行变性复性处理后纯化,纯化后的可溶性蛋白免疫Balb/C小鼠,检测小鼠体内 γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化.结果 PCR扩增片段为0.3 Kb,酶切和序列测定证实重组质粒构建正确.SDS-PAGE在11 KD处出现蛋白条带.蛋白表达以包涵体为主.免疫后小鼠抗体效价升高,CD4/CD8比值无升高,IFN-γ无反应.结论 成功制备可溶性HPV16E7蛋白和小鼠抗HPV16E7高效价抗血清.
作者：颜学勤；王莹莹；嵩钰佳；王鑫；陈思佳；魏兰兰；钟照华；商庆龙 刊期： 2018年第05期
目的 探究FoxP3+Treg细胞和炎症因子在宫颈病变中的表达情况及与宫颈病变的相关性.方法 选取23例就诊于同济大学附属第十人民医院的宫颈病变患者作为病例组,另选取同期来我院体检的23例健康女性作为对照组,并根据HPV感染的分型分为高危组和低危组.对受试人员进行妇科检查并取宫颈上皮细胞,分析人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况.抽取患者静脉血并检测FoxP3+Treg细胞的表达情况,检查受试人员宫颈灌洗液中炎症因子的表达情况并分析其与宫颈病变的相关性,同时应用免疫组化分析对患者切除的宫颈组织进行Foxp3蛋白的检测.结果 病例组人群的白细胞介素(interleukin,IL)-12、干扰素(interferon,IFN)γ水平明显更低(P<0.05),而IL-10、IL-4和转化生因子(transforming growth factor,TGF)-β1的水平较正常受试人员显著更高(P<0.05);高危组患者中Foxp3+Treg阳性的比例高于低危组(χ2=31.360,P<0.05).不同HPV感染分型的比较表明,低危组患者的IL-10、IL-4、TGF-β1和外周血Foxp3+Treg细胞百分比均显著低于高危组患者(P<0.05),而IL-12、IFN-γ的水平则显著高于高危组(P<0.05).结论 FoxP3+Treg和炎症因子的水平与宫颈病变的严重程度有明显关系,宫颈病变时二者表达增多,提示其可针对性地指导宫颈病变的诊断与治疗.
作者：吴帆；宋力雯；成佳景；丘瑾；周健红 刊期： 2018年第05期
