目的探索4℃低温保存肝细胞的方法.方法两步法分离新生乳猪肝细胞,将肝细胞分别以3种不同低温保存液(RPMl-1640培养液;加有聚乙二醇(PEG)的RPMl-1640培养液;UW液)4℃保存24h、48h及72h.复苏后接种培养,作存活率、贴壁率及细胞活性等检测,并观察其形态结构变化.结果不同低温保存液保存不同时间的猪肝细胞的活力、生物学功能及形态学表现均有所不同,其中单用RPM1-1640培养液组效果差,PEG组和UW组结果相似,均保持70%以上存活率达48h,活力与药物代谢功能无明显差别,镜下见复苏肝细胞浆内含丰富颗粒,可见较多双核细胞,线粒体无减少,粗面内质网数下降,滑面内质网增多.结论猪肝细胞在4℃可保存48h,加入PEG的RPM1-1640培养液可更好地保持肝细胞活性.
作者：刘鸿凌；王英杰；郭海涛；刘国栋；刘俊；于乐成 刊期： 2002年第03期
目的观察层粘连蛋白(LN)对细胞角蛋白(CK)19异常表达的诱导作用,进一步探讨肝实质细胞额外表达CK19的分子机制.方法对选择的3株肝细胞癌(HCC)细胞系的CK19和LN的表达进行免疫酶细胞化学、免疫印迹和激光共聚焦显微镜观察;用含有LN的培养液进行CK19表达诱导,应用LN的多克隆抗体阻断这一效应.结果3株细胞系中有1株产生内源性LN,并且表达CK19,其余2株这两种分子的表达均为阴性.当接种于含有外源性LN的培养液中生长时,原来CK阴性的2株HCC细胞系均出现CK19的表达,其水平与LN剂量相关.LN的多克隆抗体可完全阻断外源性及内源性LN对CK19表达的诱导作用.结论LN确实能够诱导体外生长的HCC细胞表达CK19,这种效应可被LN抗体所阻断.
作者：傅勇；苏勤；刘彦仿；张伟；刘节；王春梅 刊期： 2002年第03期
目的探索上海地区血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的检测标准化,并进行测定条件下人群ALT参考范围调查.方法将cfas中含IFCC推荐要求的ALT值传递给一份新鲜混合人血清样品,以此作为临时校准品,校准后测定不同浓度的血清样品.19所医院检验科共进行7次实验,并在测定条件下检测20岁以下到71岁以上7 598人的ALT.结果ALT在300U/L以下时,各参加医院检验科之间的平均测定值具有良好的可比性,CV＜5 0%(1.80%～4.60%).两次实验之间测定值的CV＜3.4%(3.34%～3.39%).7 598例ALT测定值男性或女性的第97.5百分位点分别为66 U/L和55 U/L,约相当于35或29赖氏法测定单位;第99百分位点分别为74U/L和64U/L,约相当于39或34赖氏单位.结论采用统一校准血清,可使不同单位(不同方法)间ALT测定值差异明显减小,可比性显著增加.
作者：潘柏申；张万忠；周华文；倪星忠 刊期： 2002年第03期
目的观察氧化苦参碱预防大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制.方法建立半乳糖胺和二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型,观察氧化苦参碱(30mg/kg、90mg/kg)预防前后肝指数、血及肝组织生化、羟脯氨酸含量、TGFβ1mRNA表达、电镜及病理组织学改变.结果氧化苦参碱预防组较模型组肝功能改善、肝组织羟脯氨酸含量及TGFβ1表达水平降低(P＜0.01);预防组肝组织内SOD、GST-PX较模型组升高,而MDA低于模型组;电镜显示肝细胞损伤减轻,病理组织学明显改善.结论氧化苦参碱对半乳糖胺及二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化均有预防作用,其主要机制为抗脂质过氧化、保护肝细胞和抑制肝星状细胞活化,从而抑制纤维生成等.
作者：杨文卓；曾民德；陆伦根；茅益民；范竹萍；曹爱萍；宋育林；贾一韬 刊期： 2002年第03期
目的评估基因芯片法检测乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异的临床应用.方法用基因芯片法检测60份乙型肝炎病人的血清,其中20份同时用基因测序法和快速PCR法检测,用Ridit方法分析检测结果.结果拉米夫定治疗52周的20个标本中,用基因芯片法检测出14份有YMDD变异株,与快速PCR法检出结果一致,测序法仅检出9例有变异株.结论基因芯片法检测YMDD变异是临床有用的方法.
作者：计焱焱；徐蓓；姚光弼；倪晓龙；吴亦栋；马宁 刊期： 2002年第03期
目的体内外观察多种细胞因子和(或)肿瘤相关抗原(tumor allogenic antigen,TAA)刺激的正常人树突状细胞(DC)诱导免疫效应细胞对BEL-7402的生长抑制.方法体外分别用人GM-CSF、IL-4、TNFα、BEL-7402TAA和人IL-2刺激正常人DC和去DC的单个核细胞(免疫效应细胞),5～6d后混合培养DC和免疫效应细胞1～2d.体外实验时效应细胞分无DC刺激组(A0组)、细胞因子培养和DC刺激组(A1组)、细胞因子和TAA培养的DC刺激组(A2组).体内实验时,裸鼠分为3组:预防组(Ⅱ),于接种BEL-7402前1～2d天给DC激活的免疫效应细胞;治疗组(Ⅲ),待全部裸鼠移植瘤长出时给DC激活的免疫效应细胞;组Ⅱ、Ⅲ于给予DC激活免疫效应细胞后再间断给予DC培养上清液3～6d.对照组(Ⅰ)给等量的1640培养液.结果多细胞因子体外可刺激DC发生扩增并高表达B7分子.体外实验中大杀伤效率:A2组为81%,A1组为68.1%,A0组为3.5%.体内实验中:组Ⅰ和组Ⅲ第12d时12例全部发生移植瘤;组Ⅱ观察30d时,6例有1例发生移植瘤,观察45d时,仍只有1例发生移植瘤,组Ⅰ、Ⅱ相差有非常显著意义(P=0.00466);在给予DC激活的免疫效应细胞后的第45d处死所有裸鼠并称瘤体的重量,组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ比较相差有非常显著意义(P＜0.01),组Ⅱ的6只裸鼠仅1只产生移植瘤,瘤重为0.27g.结论激活的DC在抗恶性肿瘤中有重要作用.
作者：孙早喜；王福生；孙诚谊；邢利和；雷周云；施明；刘明旭；刘敬超；张冰 刊期： 2002年第03期
目的对自1958年至2001年确诊的40例原发性胆汁性肝硬化(PBC)病人作较详细的前瞻性观察,以唤起国内同道的注意.方法从1958年诊断第1例起,至今已收集了40例,对其临床过程作了长期的随访.诊断标准:(1)临床表现和肝生化检查符合淤胆;(2)除外其他原因的肝内或肝外淤胆;(3)血清抗线粒体抗体阳性;(4)肝活检符合PBC的组织学改变;(5)经1年以上随访,符合PBC的自然病程.结果自1958年至2001年共确诊PBC 40例,1958～1990年间仅9例,余者在1991～2001年间诊断.29例系上海市常住户口,8例系来自外地,另3例系外籍华人.本组发病时平均年龄为(47.9±9.1)岁,确诊时年龄为(51.5±9.8)岁.女性39例,男性仅1例.本病起病隐匿和缓慢,不易觉察.有14例发病时无明显症状,系在体检时发现肝功能(LFL)异常或高血脂就诊.初起时主诉为乏力、皮肤搔痒、尿深和轻度黄疸.PBC的临床表现随着病程的进展而变化,一般病程大于5年或以上,往往有黄疸、眼睑黄疣、肝脾肿大、肝掌和蜘蛛痣.长期黄疸病人脸色呈黄色、黄褐色或黑色.起病时LFL的异常率如下:ALP 97.5%,GGT 95%,ALT80%,AST 70%,高胆红素血症52%.免疫荧光法测线粒体抗体20例,其中17例阳性;酶免疫法M2抗体试验测定31例,30例阳性,1例阴性;IgM增高者为88.6%.28例有肝组织学资料.病理学分期:Ⅱ期8例,Ⅲ期12例,Ⅳ期8例.并发病:自身免疫性肝炎2例,口眼干燥征7例,Ⅱ型糖尿病4例,类风湿性关节炎4例,自身免疫性溶血性贫血、甲状腺功能亢进、多肌炎和自身免疫性胃炎各1例.治疗:单用皮质激素、氨甲蝶呤或秋水仙碱无效,16例应用熊去氧胆酸12个月以上,12例有明显缓解.随访和转归:8例死亡,死亡原因为肝衰竭和(或)上消化道大出血,29例仍存活,3例失访,平均存活期为9.17年.结论PBC在中国人中并非罕见,提高本病的早期诊断,给予有效治疗,可改进预后和生存质量.
作者：姚光弼 刊期： 2002年第03期
目的研究抗线粒体抗体(AMA)M2亚型检测对原发性胆汁性肝硬化(PBC)的诊断价值.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测人血清中M2抗体含量.共检测正常人20名,PBC患者37例,其他肝病患者50例.结果ELISA法检测M2抗体重复性好,灵敏度高,特异性强.37例PBC患者中有36例阳性(＞5U/ml),只有1例阴性.而其它肝胆系患者50例,3例为假阳性.灵敏度为97.3%,特异性为94.0%.正常人均为阴性.PBC患者M2抗体滴度为(73.66±55.93)U/ml,较正常人(1.60±1.13)U/ml显著升高(P＜0.01),其他肝胆系患者M2抗体滴度(2.90±3.16)U/ml与正常人相比无显著差别(P＞0.05).结论 M2抗体检查可作为临床诊断PBC的重要血清免疫学指标.
作者：姚展蔚；姚光弼 刊期： 2002年第03期
目的探讨拉米夫定停药后肝炎的发生率、临床特点、机制及防治.方法对长期应用拉米夫定治疗后停药的患者进行1年以上的随访.结果拉米夫定停药后肝炎的总发生率为13.5%.其发病原因是HBV复制失抑制后的再活动.已发生HBeAg/抗-HBe血清转换的患者停药后仍有可能发生拉米夫定停药后肝炎.结论对长期应用拉米夫定治疗的患者无论是否因发生血清转换而停药,都应继续监测肝功能.对发生停药后的肝炎患者,可再次使用拉米夫定或用甘草酸类制剂治疗.
作者：蔡皓东；马秀云；崔振宇 刊期： 2002年第03期
目的原发性胆汁性肝硬化(PBC)的重要特征为血清抗线粒体抗体(AMA)阳性,但少数PBC病例AMA阴性.本文分析AMA阴性PBC患者的临床、生化和免疫学特性.方法对1991年1月～2002年7月期间临床/病理诊断PBC的70例患者进行回顾性研究,分析比较AMA阴性和AMA阳性患者的一般资料、病程、临床表现、生物化学、免疫学及病理学等特征.结果确诊PBC时,11例患者血清AMA/AMA-M2阴性,AMA阴性患者的血清免疫球蛋白M显著低于AMA阳性患者,分别为(2 851±1 418)mg/L和(6 361±4 928)mg/L,P=0.033,血清抗核抗体和(或)抗平滑肌抗体阳性率高于AMA阳性患者(分别为81.8%和40.7%,P=0.031),在年龄、性别比例、临床表现、肝功能试验、组织学表现和病理分期等各方面和AMA阳性患者无显著性差异.结论AMA阴性PBC患者除血清免疫球蛋白M较低及抗核抗体和(或)抗平滑肌抗体阳性率较高外,其他临床特征和AMA阳性者相似.
作者：张福奎；贾继东；钱林学；王宇；崔焱；欧晓娟；尹珊珊；马红；王宝恩 刊期： 2002年第03期
本文通过对慢性重型肝炎(CSH)患者T细胞亚群的测定,了解其细胞免疫功能的变化,试图为CSH患者的免疫学诊断和免疫功能调节治疗提供实验依据.现将结果报道如下.
作者：顾锡炳；李小雯 刊期： 2002年第03期
为了解慢性乙型肝炎患儿及正常儿童肝纤维化血清标志物的水平,采用了放射免疫技术(RIA)检测了79名正常儿童及82例慢性乙型肝炎患儿血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)含量并作对比,以提供诊断价值.
作者：徐赛芳 刊期： 2002年第03期
一氧化氮(NO)是一种重要的生物活性分子,普遍存在于脊椎动物各种细胞内,参与各种生理与病理过程.甲胎蛋白(AFP)是目前公认的特异的原发性肝癌(PHC)标志物,但亦存在一定的局限性.本文测定了PHC患者血清NO与AFP含量,并进行相关分析.
作者：施根林；何海明；刘金波；王新元 刊期： 2002年第03期
α干扰素与拉米夫定是目前治疗慢性乙型肝炎(CHB)的有效药物,但两者各有优缺点,联合应用能否提高疗效是临床上关注的热点.现对70例CHB患者采用联合与单独应用治疗予以探讨,并报道于下.
作者：周玉森；高涛 刊期： 2002年第03期
拉米夫定对成年慢性乙型肝炎患者的HBV DNA阴转、HBeAg血清转换,以及肝功能恢复均显示了一定的效果.但是,其对少年儿童的临床治疗效果、不良反应仅国外有少量报道[1],本文选择16例8～15岁慢性乙型肝炎患者服用拉米夫定,同时设对照组进行疗效和安全性的对比观察,现报道如下.
作者：赵利斌 刊期： 2002年第03期
腹水是临床上常见的疾病,原因众多,对于腹水性质鉴别方法也有多种.近年来血清腹水蛋白梯度被认为是腹水诊断重要的试验[1].现将100例腹水患者的血清腹水蛋白作一回顾性统计分析,观察血清腹水蛋白梯度对鉴别腹水来源的价值.
作者：陈晓敏 刊期： 2002年第03期
我们对192例重型肝炎进行了血清电解质变化的检测,重点对血清钠、钾、氯进行观察与分析,现将其结果报道如下.
作者：邹华忠 刊期： 2002年第03期
我院自1998年起应用胸腺肽α1治疗慢性病毒性乙型肝炎13例,取得良好效果,现将结果报道如下.
作者：李秋健 刊期： 2002年第03期
一氧化氮(NO)是一种新型的生物活性分子,其广泛的生物学作用正日益受到人们的重视.近年研究证实,NO在信息传递、心脑血管调节、抗肿瘤免疫和抗感染免疫中起重要作用.为进一步阐明肝癌患者NO水平及在肿瘤发生中的作用,我们对肝癌患者血清中的一氧化氮合成酶(NOS)和NO水平进行了检测,现报道如下.
作者：张吉才；李文斌；李德奎 刊期： 2002年第03期
乙型肝炎病毒(HBV)的前S2抗原与病毒的感染性和活动性复制有密切关系,可作为判断HBV感染者是否有病毒活动性和传染性的标志.我们对前S2抗原与HBV DNA及其他HBV标志物(HBVM)之间关系作了检测,现报道如下.
作者：李旭红；王崇国；缪松毅 刊期： 2002年第03期
乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个全球性的公共健康问题.多数感染是没有症状的,而且病毒标志很快转阴.幼儿期间感染HBV容易演变为慢性病毒携带状态(危险性＞50%),而成人型感染慢性化的危险性较低(3%～8%).
作者：苏勤 刊期： 2002年第03期
对造血系统重建的深入研究,确定了造血干/祖细胞在血液系统短期重建及永久再生中的重要地位.那么,肝脏中有干细胞吗?如果有,它定居何处,有何特征,它是如何分化成熟的?这些问题在争论了数十年之后,尽管仍未达到统一认识,但至少目前多数学者认为,与其他多数器官系统一样,肝细胞系统也存在干细胞、祖细胞和成熟细胞,而且肝干细胞可能不仅仅存在于肝内.
作者：王韫芳；裴雪涛 刊期： 2002年第03期
肝纤维化的形成是多种因素参与并长期相互作用的过程,因此肝纤维化的基因治疗也应采取综合措施[1].肝纤维化基因治疗的具体策略包括慢性病毒性肝炎的防治、抑制或减少肝脏贮脂细胞的激活、转化和增生以及细胞外基质的降解等.
作者：成军；李莉 刊期： 2002年第03期
树突状细胞(DC)是目前发现的功能强的专职抗原递呈细胞(APC),在免疫反应中起着举足轻重的作用,因此备受重视.
作者：王全楚；冯志华；聂青和；周永兴 刊期： 2002年第03期
本实验应用腹腔注射无菌40%CCL4溶液的方法[1]造成大鼠肝纤维化自发逆转模型及不能逆转模型,观察平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的动态变化,探讨了调解逆转的生物学机制.
作者：李东；李兵顺；刘金星；甄真 刊期： 2002年第03期
随着人们生活方式和饮食结构的改变以及老龄化人口的增加,脂肪肝及其相关性疾病患病率明显上升.流行病学调查发现脂肪肝的发病与年龄、性别、血脂、血糖、血压及肥胖等密切相关.
作者：顾国妹；杨栓平；邱夏地；李靖环 刊期： 2002年第03期
干扰素和拉米夫定是目前公认有一定疗效的抗病毒药物,但通过对干扰素的长期使用我们发现其疗效仍不够理想,尤其对ALT正常的亚洲患者效果较差[1],转阴率迄今仍保持在40%左右[2].
作者：张大军；吴秀娟；马建平；王毅；葛霞 刊期： 2002年第03期
大动物的原位肝移植实验是开展临床肝移植的重要的动物模型.我科于2001年11月至2002年4月间采用贵州小香猪行原位肝移植19次,全部行离心泵体外静脉转流,取得了较好的手术效果.
作者：叶晟；董家鸿；郑树国；杨占宇；卿德科；韩本立 刊期： 2002年第03期
原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种原因不明,以肝内胆管进行性破坏为特征的自身免疫性疾病.欧美等国对此病研究较多,但有关临床早期诊断报道较少.现将我院收治的43例经自身抗体检测及(或)肝脏病理确诊的PBC资料总结如下.
作者：贺江平 刊期： 2002年第03期
随着拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(CHB)研究的深入开展,耐药变异越来越成为广大学者关注的焦点,尤其是YMDD变异发生后出现的伴随着HBV DNA反跳的肝炎活动--拉米夫定耐药性乙型肝炎(1amivudine-resistant hepatitis B,LRHB)已成为CHB治疗的一个重要课题.为此我们在拉米夫定联合苦参素成功治疗CHB的基础上,开展了苦参素治疗LRHB的临床研究.
作者：胡国启；张学武；周敏 刊期： 2002年第03期
重型病毒性肝炎由于病情凶险,并发症复杂,虽经积极常规综合治疗,仍难以达到满意疗效.为提高重型肝炎的治疗效果,我院于1999年9月～2002年2月对120例重型肝炎患者在综合治疗基础上,采用人工肝支持系统(ALSS)治疗,取得较好疗效.现报道如下.
作者：林明华；潘晨；林榕生；叶寒辉；姚履枫；林太杰 刊期： 2002年第03期
肝性脑病(HE)的治疗近十年来仍无重大突破.为了更好地研究HE,需要规范其研究方法,明确轻微型HE(minimalHE)及其对治疗的反应.
作者：肖扬；陈成伟 刊期： 2002年第03期
病毒感染是导致人体疾病的一类重要原因,机体对病毒的免疫抵御主要是由细胞介导的免疫反应.一般认为,抗体中和体液中的病毒,而一旦病毒进入细胞内,则只有通过细胞介导的免疫反应,其中主要是依赖于Ⅰ类主要组织相容性复合物(MHC-Ⅰ)所限制的属CD8+的杀伤性T淋巴细胞(CTL)对感染细胞的破坏.
作者：陈慧；朱启殚；王建设 刊期： 2002年第03期
原发性胆汁性肝硬化(primary bjliary cirrhosis,PBC)是一种原因不明的,由免疫损害介导的慢性进展性肝脏疾病,主要表现为肝内小胆管进行性破坏伴门脉炎症性改变,终导致肝纤维化及肝硬化;临床表现为慢性梗阻性黄疸与肝脾肿大,晚期可出现肝功能衰竭与门脉高压等征象.本文就该疾病的现状作一介绍.
作者：李松华；万谟彬；吕立权 刊期： 2002年第03期
肝硬化门脉高压引起食管胃底曲张静脉破裂出血是肝硬化患者的重要死亡原因之一.肝硬化患者中静脉曲张的年发病率约为2%～5%.其中大约1/3有出血.
作者：曾欣；谢渭芬 刊期： 2002年第03期
患者男,19岁,因乏力、尿黄10d,加重3d伴食欲减退、恶心、疲劳后肝区疼痛于2002年1月14日入院,否认既往有肝炎史、家族性肝病史和毒物药物接触史.
作者：李鸿明 刊期： 2002年第03期
原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种慢性肝内胆汁淤积性疾病.西方国家患病率较高.据统计,约占人口的20/百万人～240/百万人,而且近年来有日益增多的趋势,如英国北方某地1976年为16/百万人,至1994年上升至251/百万人.我国发病率较西方为低.
作者：王宝恩 刊期： 2002年第03期
原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝移植预后良好,在西方国家PBC是成人肝移植多的原发疾病之一,本文就PBC肝移植的适应证作一讨论.
作者：陈成伟 刊期： 2002年第03期
慢性肝炎(CH)时肝脏由于反复炎症坏死后发生纤维增生,虽然临床可根据血液生化指标的检测,例如Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢP)来判断肝脏胶原合成情况,但肝穿刺活检对于诊断肝炎肝纤维化有着不可取代的作用.
作者：胡锡琪 刊期： 2002年第03期
患者女性,47岁.因皮肤搔痒26年,皮肤黄染5年,伴腹胀、纳差1周而入院.患者26年前出现皮肤搔痒时未加注意,5年前因皮肤搔痒就诊,发现丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)100U以上、总胆红素正常(18μmol/L)2倍以上.
作者：王虹；孙一骏；周磊；高建萍；李泽民 刊期： 2002年第03期
