目的研究细胞因子IFN-γ和IL-4的抗卡氏肺孢子虫感染作用.方法分别用IFN-γ或IL-4基因敲除的C57BL/6小鼠(各15只作为动物模型)与未经基因敲除的C57BL/6小鼠(15只作感染对照组),以密切接触的方式,使小鼠自然感染卡氏肺孢子虫;同时设非感染组15只小鼠作阴性对照.分别于3、5和7 wk后观察各组小鼠肺内虫体数量、肺部CD4+、CD8+T细胞反应以及血清中卡氏肺孢子虫特异性IgG抗体滴度.分析基因敲除鼠对卡氏肺孢子虫的易感性.结果IFN-γ基因敲除小鼠肺内虫体数量明显高于IL-4基因敲除小鼠(P＜0.05)和对照组小鼠,而IL-4基因敲除小鼠肺内虫体数量与对照组无显著性差异(P＞0.05).T细胞亚群分析表明,两种基因敲除小鼠的CD4+和CD8+T细胞反应曲线与感染度呈正相关.而IgG抗体滴度,3组接触感染鼠均逐渐呈不同程度上升.结论IFN-γ在小鼠抗卡氏肺孢子虫中起重要作用,但缺少IL-4基因的小鼠对肺孢子虫感染的影响不明显.
作者：安春丽；王继春；王雪莲 刊期： 2002年第05期
目的构建恶性疟原虫红前期融合蛋白4(PfCP-4).方法通过甘氨酸-脯氨酸-甘氨酸(GPG)接点将恶性疟原虫3D7株血凝素相关匿名蛋白(TRAP)膜外区序列(氨基酸26～330)和环子孢子蛋白(CSP)19个4肽重复区及其羧基末端序列(氨基酸199～383)连接,采用不对称PCR法人工合成1 577 bp PfCP-4基因.将PfCP-4基因克隆在pQE表达质粒上,转化大肠杆菌SG13009后进行诱导表达,用抗CSP的免疫血清进行免疫印迹检测.结果免疫印迹检测显示在57kDa处出现特异的表达条带,其大小与推算的PfCP-4分子量一致,表明PfCP-4合成基因能在大肠杆菌中表达分子量为57kDa的PfCP4重组蛋白.结论成功构建了PfCP-4.
作者：杜景伶；潘卫庆；钱锋；谢超 刊期： 2002年第05期
目的克隆和表达旋毛虫河南地理株成囊前期幼虫编码31 kDa抗原的结构基因(TspE1).方法大鼠感染旋毛虫后第17天收集成囊前期幼虫,提取虫体的总RNA.通过RT-PCR特异性扩增目的基因,构建重组质粒pUC18/Ts-HN3,将重组质粒pUC18/Ts-HN3中的目的基因亚克隆入原核表达载体pGEMEX-1,构建重组子pGEMEX-1/Ts-HN3,经IPTG诱导,在E..coli JM109(DE3)中表达.对表达产物进行SDS-PAGE分析和Westem blotting鉴定.结果SDS-PAGE显示目的基因在大肠杆菌中获得高效表达,重组蛋白的分子量为31 kDa,以诱导4 h时表达量多.薄层凝胶光密度扫描分析结果显示,表达的融合蛋白量约占细菌总蛋白的26%.Westem blotting证实,融合蛋白条带能被感染旋毛虫的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别.结论旋毛虫河南地理株成囊前期幼虫抗原结构基因TspE1克隆和原核表达成功.
作者：崔晶；王中全；王会智；赵国强；张红卫 刊期： 2002年第05期
目的克隆和表达日本血吸虫新的分泌蛋白Sjsp16的编码基因.方法根据EST测序的结果设计引物,从含有Sjsp16基因的cDNA克隆中扩增得到该编码基因,亚克隆入原核表达载体pET28中表达,然后用生物信息学的方法对蛋白结构功能进行预测.结果成功克隆和表达了日本血吸虫分泌蛋白基因Sjsp16,生物信息学分析提示该基因编码蛋白的N端带有一个信号肽序列,是一个分泌蛋白,含有一个ML功能结构域,具有4种潜在的功能作用位点,即1个N-糖基化位点、3个蛋白激酶C磷酸化位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和3个肉豆蔻酰化位点.结论Sjsp16基因编码蛋白为具有脂质识别和结合功能的分泌蛋白,可能为潜在的血吸虫病药物靶点或疫苗候选分子.
作者：胡薇；刘锋；王聚君；许学年；韩泽广；冯正 刊期： 2002年第05期
目的探讨用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4的诊断价值.方法用华支睾吸虫成虫可溶性抗原进行ELISA分别检测华支睾吸虫病患者(76例)血清中的特异性IgG和IgG4抗体及日本血吸虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病患者(分别为63、35、41例)和健康者(65人)血清中的交叉抗体.结果检测76例华支睾吸虫病患者血清中IgG4的检出率为93.42%,检测65例健康者血清中的IgG4均为阴性,分别与检测IgG结果比较差异均无显著性意义(P均＞0.05);与其它寄生虫病的交叉反应率,IgG4显著低于IgG;诊断效率及阳性、阴性预告值分别为96.45%、100%和92.85%.结论用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4具有较高的诊断应用价值.
作者：张顺科；曾宪芳；易新元；李忠杰；蔡春；田明礼；张祖萍；沈杰 刊期： 2002年第05期
目的克隆、表达苏云金杆菌以色列亚种晶体蛋白CryIVD基因并测定其杀蚊毒效.方法采用PCR技术,扩增得到CryIVD基因片段;通过双酶切及连接反应,将该基因克隆入大肠杆菌质粒pUC18构建重组克隆及表达载体;转化E.coli DH55a,提取重组质粒进行酶切鉴定及DNA序列测定;以IPTG诱导表达CyIVD蛋白,SDS-PAGE分析表达产物并进行杀蚊毒效测定.结果CryIVD基因成功克隆并在宿主菌中正确表达,表达产物对蚊幼的杀灭毒效测定显示其对淡色库蚊Ⅱ～Ⅲ龄健康幼虫的LC50为2.38×106 cells/ml,对白纹伊蚊健康幼虫的LCs0为1.6×107cells/ml.结论CryIVD基因被成功克隆和表达,且其表达产物有明显杀蚊幼活性.
作者：张昕；刘相萍；闫歌；甄天民；王新国；孙传红；王怀位 刊期： 2002年第05期
目的微小隐孢子虫地方株cDNA文库构建及P23、CP15/60基因的克隆.方法提取微小隐孢子虫总RNA、mRNA,逆转录合成cDNA.将cDNA与pUC18 DNA连接,导入DH5α宿主细胞中生成cDNA文库.根据文献分别设计并合成两对PCR引物,从上述文库中筛选保护性基因,对PCR产物克隆、测序.结果文库容量为1.9×106个重组子,文库中cDNA插入片段大小介于0.4×103～6.5×103 bp.从该文库中克隆出编码23 kDa、15/60 kDa子孢子表面蛋白的核苷酸序列.结论成功地用pUC18质粒载体构建了C.parvum cDNA文库.
作者：徐卫东；张西臣；孔庆昌；刘明远；尹继刚；李建华；杨举；何宏轩；吕亚坚 刊期： 2002年第05期
目的对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗(Sjc97 DNA)与紫外线致弱尾蚴(UVC)疫苗免疫C57BL/6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征.方法以Sjc97 DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C57BL/6小鼠共2次,每次间隔3wk,末次免疫后3wk攻击感染日本血吸虫尾蚴;UVC疫苗接种同种小鼠后5 wk攻击感染上述等量尾蚴.均于攻击感染后7 wk计数虫负荷及肝卵负荷.并设空质粒对照及感染对照组.用ELISA分析免疫鼠攻击感染前后血清特异性IgG、IgA及亚型抗体水平,以及脾淋巴细胞体外诱生的细胞因子水平.结果Sjc97 DNA疫苗及UVC疫苗免疫小鼠均诱生出以Th1型免疫应答为主的IL-2、IFN-γ及特异性抗AWA、SEA IgG2a、IgG2b亚型及IgA抗体,UVC疫苗组小鼠各细胞因子及抗体水平均显著高于Sjc97 DNA疫苗组,但两疫苗组均未测及IL-4.攻击感染后,Sjc97 DNA疫苗组的减虫率36.3%、减卵率42.4%,明显低于UVC疫苗组的66.9%和75.6%.攻击感染后7 wk,两疫苗组小鼠Th2型免疫应答虽有所增强,但仍以Th1型免疫应答占优势;而空质粒对照组和感染对照组小鼠则以Th2型免疫应答为主.结论核酸疫苗与紫外线致弱尾蚴疫苗均能诱导产生抗感染免疫保护力,致弱尾蚴疫苗的免疫保护力高于Sjc97 DNA.两疫苗诱导的抗感染免疫保护力与其诱导机体Th1/Th2型免疫应答优势向Th1型偏移的程度及水平成正相关.
作者：陈家旭；刘述先；曹建平；宋光承；徐裕信 刊期： 2002年第05期
目的探讨旋毛虫成虫可溶性抗原(AWSAg)接种小鼠后诱发的免疫应答.方法制备旋毛虫AWSAg免疫小鼠,分别于攻击感染后7、14、21、28和35 d,动态观察免疫小鼠特异性IgG抗体水平、IL-2水平和T淋巴细胞亚群的变化.结果与非免疫鼠相比,免疫鼠血清特异性IgG抗体OD值在攻击感染后7 d明显升高,在观察期内一直高于非免疫鼠.感染后7d IL-2水平明显增高,达观察期内高值,21 d后才逐渐减少,在感染后28～35 d仍高于正常组.免疫鼠CD4+T细胞在攻击感染7d明显增加并保持不变,非免疫鼠CD4+T细胞及CD4/CD8比值明显较正常鼠减低.结论旋毛虫AWSAg免疫小鼠攻击感染后,出现细胞、体液免疫应答.
作者：申丽洁；罗志勇；朱声华 刊期： 2002年第05期
目的为获得旋毛虫成虫抗原基因.方法应用免疫血清和人工感染血清对旋毛虫成虫cDNA文库进行免疫筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库(GenBank)查寻比较,采用DNAstar软件进行基因序列分析.结果免疫筛选成虫cDNA文库,获得9个阳性克隆.对其中的Ts87进行测序,又采用5'-RACE,获取全长为1 172 bp的cDNA片段,该基因编码347个氨基酸.序列分析表明,克隆Ts87是个尚未见报道的旋毛虫基因序列,存在预测的抗原表位.结论获得具有抗原性的旋毛虫抗原新基因.
作者：杨雅平；诸欣平；杨静；周蕾；黄松 刊期： 2002年第05期
自1835年Owen发现旋毛虫以后,一直认为旋毛虫属只有一个种,即Trichinella spiralis(T.spira-lis),并认为只有猪和少数生态上与人关联的动物(synanthropic animal,如鼠等)是其保虫宿主,野生动物感染旋毛虫被认为是罕见的.
作者：王中全；崔晶 刊期： 2002年第05期
国内外关于检测血吸虫病患者血清中循环抗原的研究不少,而近年来有关检测血吸虫病患者尿液循环抗原的报道日益增多.早在1958年,Okabe首次发现日本血吸虫病患者尿中存在循环抗原等.
作者：刘晓明；肖祥 刊期： 2002年第05期
患儿女,8个月,广州市人.因近日常哭闹,烦躁不安,于2001年10月20日来本院门诊就诊.经检查,左外耳道红肿,有少量脓性分泌物渗出,并从外耳道内检出8条蠕动较快的乳白色虫体,即送本教研室鉴定:见虫体前端较尖,后端钝圆,大小为0.5cm×0.15cm,经鉴定为绿蝇Ⅱ龄期幼虫.
作者：沈树满 刊期： 2002年第05期
患者男,46岁.2001年7～11月多次从思茅到西双版纳高疟区工作,回思茅后于2002年3月5日出现畏寒、发热(体温38℃)、出汗、全身酸痛等症状,曾服感冒清、甲硝唑、鱼腥草等药,症状无明显缓解.
作者：李春富；李兴亮 刊期： 2002年第05期
患者男,30岁,民工.5 d前由缅甸返回腾冲,出现不明原因头痛、发热,发热前出现寒战,发热后盗汗.在卫生院就诊,给予青霉素、甲硝唑治疗,病情未见好转.
作者：李树梅 刊期： 2002年第05期
患者男,31岁,工人,于1997年10月16日因左侧胸痛、乏力、盗汗,疑似左侧胸膜炎入本院.查体:T36.4℃,神志清楚,呼吸平稳,右腋中线第6肋间有一质地较软肿物,大小约1crm×1cm,无触痛,活动度佳,外观局部肤色正常,左前第5肋以下叩诊呈浊音,呼吸音减弱.
作者：孙丽；李双宁；曹卫萍 刊期： 2002年第05期
1一般资料18例脑囊尾蚴病患者,其中男性12例,女性6例;年龄小2岁,大12岁,平均6.7岁;汉族15例,傣族2例,景颇族1例.
作者：何长品 刊期： 2002年第05期
2002年4月,根据卫生部部署在山东省莒南县开展全国人体重要肠道寄生虫病现状调查,采用改良加藤氏(Kato-Katz)厚涂片法从2例患者粪便中检出猪巨吻棘头虫虫卵(图1、2见P297).现将结果报告如下.
作者：万功群；杨国华；刘新；赵长磊；杨萍；朱孔序；李静；袁芳 刊期： 2002年第05期
曼氏裂头蚴病系曼氏迭宫绦虫(Spirometra mansoni)的幼虫感染所致,是人兽共患寄生虫病.国内已报道的人体感染曼氏裂头蚴(Sparganum mansoni)病例分布于22个省、市、自治区[1].
作者：张同富 刊期： 2002年第05期
人体蠕形螨呈世界性分布,报道的感染率颇不一致,国外为27%～100%,国内则为0.8%～81%[1].为摸清本市大中专学生人群中蠕形螨感染情况,于2001年11月至2002年5月对本院在校学生进行了调查,现将调查结果报告如下.
作者：许正敏；陶永平；唐玉成；胡生梅；武小樱；王洪波；王鹏；高翔 刊期： 2002年第05期
自1982年以来,本院用吡喹酮治疗囊尾蚴病6 480例,总有效率为98.7%.在治疗过程中,患者出现不同程度的治疗反应及毒副反应,其中治疗反应为多见.总结分析如下.
作者：苏日娜；斯琴 刊期： 2002年第05期
II-2、sIL-2R和TNF-α是重要的炎症和免疫反应介质,参与多种感染性疾病的免疫反应.在华支睾吸虫病患者中这些细胞因子的水平及作用如何,国内外尚未见报道.为此,作者等测定30例华支睾吸虫病患者血清中IL-2、sIL-2R和TNF-α的含量,并初步探讨其临床意义.
作者：辛华；蔡连顺；肖景莹；齐宗春；朱立贤；车世伟 刊期： 2002年第05期
目的鉴定日本血吸虫成虫肠道内容物中的金属蛋白酶.方法以明胶作底物,利用明胶-SDS-PAGE分离日本血吸虫成虫肠道内容物,将电泳后的凝胶于不同pH缓冲液和酶抑制剂中进行孵育,对其中的金属蛋白酶进行分析和鉴定.结果日本血吸虫成虫肠道内容物中存在降解明胶的金属蛋白酶,其适pH值为7～9.金属蛋白酶抑制剂EDTA抑制其活性.电泳分离获得有活性的酶蛋白,该酶是血吸虫感染血清识别的弱抗原.结论日本血吸虫成虫肠道内容物存在金属蛋白酶.
作者：袁仕善；易新元；曾宪芳；张顺科；黄跃龙；Larry MeReynolds 刊期： 2002年第05期
目的观察猪带绦虫囊尾蚴的发育过程及其形态变化,以确定虫体的出现时间和成熟时间.方法仔猪感染猪带绦虫卵后不同时间剖杀,取各部位组织检查囊尾蚴的分布.剥离囊尾蚴作压片及组织切片,显微镜下观察其形态.结果猪囊尾蚴主要分布在肌肉组织,其次是脑、肝、肺、肾等器官.同一宿主不同部位甚至同一宿主同一部位囊尾蚴处于不同的发育阶段.感染后19 d仅在骨骼肌中发现幼期囊尾蚴,头节区未见吸盘和小钩.组织学检查显示了早期发育的头节.感染后30 d的囊尾蚴出现小钩及吸盘的雏形,随感染时间的延长,吸盘直径及小钩长度增加.感染后60 d,囊尾蚴头节区出现较大的吸盘和许多折叠.60 d以后的囊尾蚴在形态学上与60 d的相似.在每一发育阶段均有退化变性的囊尾蚴出现.结论猪体感染猪带绦虫卵后,囊尾蚴19 d出现,60 d成熟.
作者：刘永杰；李庆章；郝艳红 刊期： 2002年第05期
目的观察大鼠心脏移植受体经不同途径感染弓形虫及术后使用环孢素A(Cyclosporin A,GsA)对免疫功能和弓形虫感染的影响.方法用ELISA法检测大鼠心脏移植术后受体弓形虫特异性抗体IgM、IgG及循环抗原,流式细胞术测定移植术后受体的T淋巴细胞亚群的变化.结果移植术后使用CsA可使弓形虫感染危险度提高,供体携带弓形虫病原体引起的感染大于受体隐性感染的复发的发生率,CD8+T淋巴细胞升高更快.感染发作时CD8+T淋巴细胞明显升高,C1M+/CD8+比值降低或倒置.结论移植术后使用CsA导致免疫抑制是弓形虫感染的重要原因,感染发作时CD8+是主要的细胞毒T淋巴细胞.
作者：韩辉；钟红兴；章咏裳 刊期： 2002年第05期
目的比较伯氏疟原虫敏感株(N株)和抗性株(RC株)基因组DNA差异.方法应用基因组DNA随机多态性扩增(RAPD)和锚定引物扩增DNA(APAD),分别对抽提的伯氏疟原虫N株和RC株基因组DNA进行PCR扩增,并对扩增的产物进行电泳,对结果进行统计分析.结果37条随机引物RAPD方法扩增出440条DNA条带,其中RC株和N株的共有条带是196条,差异带43条.84条锚定多聚A引物APAD方法扩增出952条DNA条带,其中RC株和N株的共有条带是436条,差异带53条.两种方法得到N株和RC株基因组DNA的同源性分别为0.89和0.9l;距离系数分别为0.197和0.155.结论伯氏疟原虫N株和RC株基因组DNA具有高度同源性.
作者：陈克强；宋关鸿；朱淮民；苏新专 刊期： 2002年第05期
目的观察马来丝虫经长爪沙鼠传代的衰退情况.方法用马来丝虫微丝蚴感染中华按蚊,收集感染期幼虫(L3),通过腹腔接种感染长爪沙鼠,连续观察33代长爪沙鼠体内马来丝虫微丝蚴的发育情况.结果从1974年建立的马来丝虫长爪沙鼠动物模型至今,通过33代传代,发现随着转种代数增加,从第28代起长瓜沙鼠的阳性率逐年下降,由28代的80%下降至32代的16%,到33代时阳性率降为0.结论经过较长期的传代,马来丝虫幼虫难以在长爪沙鼠体内发育繁殖.
作者：陈韶红；孙德建；施恒华；袁以真 刊期： 2002年第05期
