目的采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测疟疾媒介按蚊环子孢子蛋白(CSP),评价ELISA用于云南疟疾媒介按蚊传疟效能调查的可行性.方法现场捕获疟疾媒介按蚊经产蚊,每只蚊镜检3叶唾腺子孢子感染率,ELISA检测另3叶唾腺CSP;用含间日疟原虫配子体的患者血人工喂饲微小按蚊,11d后同法镜检唾腺子孢子感染率及ELISA检测唾腺CSP.在种植场捕获8种按蚊(微小按蚊、中华按蚊、多斑按蚊、迷糊按蚊、可赫按蚊、带足按蚊、菲律宾按蚊和须喙按蚊)各龄成蚊,ELISA检测唾腺CSP.结果①现场捕获经产蚊1 010只,镜检唾腺子孢子阳性7只,阳性率为0.69%;ELISA检测唾腺CSP阳性8只,阳性率为0.79%;其中6只蚊两项检测均为阳性,阳性率为0.59%.两法比较,差异无显著性意义(P＞0.05).②人工感染36只微小按蚊,镜检唾腺子孢子阳性27只,阳性率为75.0%;ELISA检测唾腺CSP阳性29只,阳性率为80.6%;其中有26只蚊两项检测(Pv210 CSP)均阳性,阳性率为72.2%.两法比较,差异无显著性意义(P＞0.05).③种植场捕获8种按蚊各龄成蚊4 675只,ELISA检测唾腺CSP阳性11只,阳性率为0.24%;其中Pv210阳性9只,Pf2A10阳性2只;微小按蚊、中华按蚊和多斑按蚊ELISA检测阳性率分别为0.20%、0.24%、0.39%.结论 ELISA是检测按蚊传疟效能的有用方法.
作者：周红宁；张再兴；Chris Curtis；Nigel Hill；李春富；吴超；王丕玉 刊期： 2004年第04期
目的克隆从我国四川省分离的多房棘球绦虫Em18抗原基因片段,表达重组抗原,用于多房棘球蚴病(AE)的诊断,并用患者血清对其诊断价值进行评价.方法 PCR扩增目的基因片段与质粒载体pET28a(+)连接构建表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株表达重组蛋白,用镍-次氮基三乙酸琼脂糖树脂(NI-NTAagarose)亲和层析纯化重组抗原,酶联免疫吸附测定(ELISA)评价重组抗原的血清学诊断效果.结果获得两个高效表达克隆ReEm18-1和ReEm18-2.其中ReEm18-1与预期序列一致,ReEm18-2为同一序列,但有27 bp的核苷酸缺失.两个克隆表达的融合蛋白相对分子质量(Mr)分别为28 000和26 000.对101例AE、47例细粒棘球蚴病、30例囊尾蚴病、10例肝癌、9例血吸虫病和40名健康人共237份血清进行ELISA检测,结果显示,ReEm18-1和ReEm18-2重组抗原对AE血清诊断的敏感性为86.1%和90.1%、特异性为93.4%和94.1%、阳性预期值为90.6%和91.9%、阴性预期值为90.1%和92.8%、诊断效率分别为90.3%和92.4%;对58例AE患者肝脏病灶大小与重组抗原检测血清平均吸光度(A)的相关性比较分析结果表明,抗体反应水平在病程早期有较好的相关性.结论Em18重组抗原对AE具有特异性诊断价值,检测的抗体水平在早期与病程有较好的相关性,对筛查早期患者有一定应用价值.ReEm18-2与ReEm18-1两者的效果相似.
作者：江莉；冯正；薛海筹；许学年；裘丽姝 刊期： 2004年第04期
目的探讨江西省卫氏并殖吸虫病流行状况及其变化的原因.方法选择江西省靖安县、万载县2个林场和玉山县1个镇进行流行病学调查和回顾性分析,调查卫氏并殖吸虫病中间宿主放逸短沟蜷(Semisulcospira libertina)与华溪蟹(Sinopotamon spp.)、保虫宿主(猫、犬、果子狸、野猫等)感染率,以及流行区生态环境变化和人群个体行为变化.结果卫氏并殖吸虫病流行区中间宿主放逸短沟蜷与华溪蟹平均感染率分别为0.21%和54.3%,保虫宿主平均感染率为5.6%.与20年前比较,华溪蟹感染率明显下降.结论江西省原流行区仍有卫氏并殖吸虫病流行,生态环境改变可能导致华溪蟹的感染率下降.
作者：晏渠如；严涛；周宪民；李友松；朱春潮；石林波；马细妹；胡宁燕 刊期： 2004年第04期
目的研究7种硬蜱的基因组随机扩增多态性DNA(RAPD)以及种间的遗传距离.方法用5条不同的多聚核苷酸单链引物对草原革蜱、森林革蜱、青海血蜱、台湾血蜱、刻点血蜱、龟形花蜱、卵形硬蜱7种硬蜱基因组DNA进行随机扩增,分析DNA图谱并计算7种硬蜱间的遗传距离.结果 7种硬蜱基因组随机扩增产物均有各自独特的DNA条带,种间的平均遗传距离为0.71.结论RAPD技术可以区分这7种硬蜱.
作者：杨银书；赵红斌；第五进学；张继军；史智勇 刊期： 2004年第04期
目的探讨肾移植后并发卡氏肺孢子虫(Pc)肺炎(PCP)的诊断、治疗和预防方法.方法总结12例肾移植后确诊为PCP患者的临床表现、实验室检查、X线胸片及肺部CT、支气管镜检和活检等诊断方法和预防措施.结果肺泡灌洗液涂片Pc检出率为16.7%,纤维支气管镜肺组织活检Pc包囊检出率为66.7%.2例痰标本PCR法检出Pc病原体.X线胸片呈间质性肺炎表现占58.3%,CT肺部呈多发毛玻璃样改变占50%,肺泡实变影改变占25%.预防和治疗药物为复方磺胺甲基(口恶)唑(即磺胺甲基(口恶)唑SMZ/甲氧苄氨嘧啶TMP).除1例呼吸衰竭死亡,其余均治愈,肾功能维持正常水平.结论肾移植后并发PCP患者早期表现为发热、干咳等非特异症状,实验室检查无明显特异性,X线胸片可提示PCP的存在,CT可帮助对PCP病理改变的进一步理解.支气管镜肺组织活检,查见卡氏肺孢子虫包囊可确诊.SMZ/TMP为首选的综合预防、治疗药物.
作者：孙明；杨宇如；卢一平；王莉；唐科仕；魏强；李虹 刊期： 2004年第04期
目的检测细粒棘球绦虫Eg95抗原基因疫苗(pcDNA3-Eg95)体外瞬时表达,探讨其诱导小鼠的体液和细胞免疫效果.方法 pcDNA3-Eg95经脂质体转染HeLa细胞瞬时表达.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Eg95抗原信使RNA(mRNA)在HeLa细胞中的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测Eg95蛋白的瞬时表达情况.pcDNA3-Eg95基因疫苗肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA检测IgG和IgG2a水平,四甲基偶氮唑盐试验(MTT法)检测免疫小鼠T淋巴细胞增殖反应.结果 RT-PCR检测结果显示,pcDNA3-Eg95瞬时表达组有Eg95抗原基因mRNA表达,ELISA和Western blotting检测结果表明,可在HeLa细胞中特异性表达Eg95蛋白.用pcDNA3-Eg95基因疫苗免疫BALB/c小鼠,第3周出现特异性IgG免疫应答,持续升高至第10周,显著高于对照组.从第2周开始,小鼠血清IgG2a应答即为阳性,且长时间(至第10周)维持较高水平,与pcDNA3空质粒组比较,其差异具有非常显著性意义(P＜0.01).用原核表达的Eg95重组蛋白刺激免疫小鼠脾细胞,有明显的T细胞增殖反应.pcDNA3-Eg95基因疫苗免疫组刺激指数明显高于pcDNA3空质粒组(P＜0.01).结论pcDNA3-Eg95基因疫苗可诱发小鼠产生特异的体液免疫和细胞免疫应答.
作者：林仁勇；丁剑冰；卢晓梅；王笑峰；阿孜古丽；魏晓丽；王俨；温浩 刊期： 2004年第04期
目的建立日本血吸虫表达序列标签(SjEST)序列自动分析系统,筛选新基因、分析其表达谱.方法建立本地化日本血吸虫专业数据库,整合序列同源性比较软件(BLAST)及片段整合分析软件(PHRAP),运用生物信息学策略编写程序控制EST自动延伸.建立本地化蛋白库,对延伸结果进行蛋白库同源性分析.实现对成批数据大规模自动分析,筛选出可能的新基因全长cDNA序列,并进行基因表达谱分析.结果延伸系统规则有效,延伸结果序列与原始序列高度同源.对552条EST进行自动分析,487条得到不同程度的延长,其中有104条EST原始序列检索无同源性,但经过延伸后获得高度同源性的联配序列信息.根据延伸结果尝试分析基因表达谱,筛选出27个可能新基因.结论建立了本地化的有效的SjEST序列自动分析系统.该系统为新基因的筛选及基因表达谱的分析提供了重要的参考信息.
作者：刘翰腾；吴忠道；邹赛德；邵筱 刊期： 2004年第04期
目的探讨阿苯达唑减量法及外科降颅压措施治疗重度脑囊尾蚴病的方法.方法 74例重度脑囊尾蚴病患者经脑CT和/或磁共振成像(MRI)证实囊尾蚴数为100～1 160个.先用阿苯达唑减量法找到初始耐受剂量,之后逐渐递增到治疗剂量(口服阿苯达唑每天20 mg/kg,分3次服用,10 d为1疗程,共3～4疗程).服药治疗期间同时用降颅压药物和抗癫痫药.使用药物降颅压无效者行外科降颅压治疗.结果 74例患者服用阿苯达唑后,经药物降颅压有效者7例,无效者67例.无效者,经脑室外引流术治疗48例,脑室外引流加颞肌减压术治疗19例.67例经手术降颅压治疗的患者,除1例外皆可耐受阿苯达唑治疗.74例患者中随访70例,随访期为19～52个月(平均37.2月).随访中经复查CT或MRI,除1例(囊尾蚴数达1 160个)治疗失败外,其余69例均临床治愈.结论阿苯达唑减量法并行降颅压药物或外科降颅压治疗重度脑实质囊尾蚴病,是安全、有效的治疗方法.
作者：袁治；任海军；丁永忠；张建生；吴小璐；王维平；裘明德 刊期： 2004年第04期
目的获取具有抗原性的旋毛虫新生幼虫基因.方法以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序及分析.结果从4.5×105旋毛虫新生幼虫cDNA文库重组子中共获得158个阳性克隆.序列分析结果表明,其中有36个新的cDNA序列,已报道的序列有5个,有12个序列无开放阅读框架(ORF),与旋毛虫线粒体基因组DNA同源.结论获得具有抗原性的旋毛虫抗原编码cDNA分子.
作者：吴秀萍；付宝权；刘明远；张亚兰；原丽红；李莲瑞；卢强；Pascal Boireau 刊期： 2004年第04期
目的探讨用组织化学方法鉴别血吸虫体外培养细胞来源或种类的可能性.方法取日本血吸虫肝期童虫,经酶消化处理后取混合细胞涂片,用成虫制作组织切片.将细胞涂片和组织切片分别平行作高碘酸-希夫氏(PAS)、硫堇(Thionin)、嗜银反应(根据Grimeliu's)、苦味酸-酸性品红(根据Van Gieson,VG)、甲苯胺蓝(Toluidine blue,TB)和苏木素-伊红(HE)6种组织化学方法染色.光镜下比较观察,判定结果.结果PAS染色的大细胞呈亮红色与组织切片中卵黄腺着色接近,表明着色的大细胞来源于卵黄腺;含特有尼氏体的神经细胞胞浆被硫堇染色呈深蓝色;Grimeliu's染色的细胞和消化道上皮细胞均呈黑色;VG染色,部分细胞和虫体肌纤维组织均呈黄色;TB染色,细胞涂片仅见1个紫红色细胞,组织切片未见相同颜色的组织和细胞.结论PAS、硫堇、Grimeliu's、VG、TB和HE 6种组织化学染色,对体外培养的血吸虫细胞的显色特征与虫体相应器官或组织细胞的化学染色定位相一致.本法可用于鉴别血吸虫体外培养细胞的来源或种类,且操作简便、快速.
作者：林雪迟；曾庆仁；龚燕飞；言敢威；沈杰 刊期： 2004年第04期
目的探讨人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导体外培养的人肺上皮细胞A549凋亡,以及提取物浓度和作用时间与细胞凋亡的相互关系.方法根据四氮唑盐酶还原法(MTT)结果,选用5种不同浓度的提取物诱导人肺上皮细胞凋亡.分别在诱导后的5个时间段,采用苏木素-伊红(HE)染色盲法计数和二苯胺法检测DNA断裂率,观察肺上皮细胞凋亡情况.同时对某个时间和浓度组的样本,用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果不同浓度人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导A549细胞凋亡,在5 h之内细胞凋亡率随提取物浓度增加而增加,两者呈正相关关系,且细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05),5 h细胞凋亡率达高峰(65.2%).结论人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物可诱导人肺上皮细胞凋亡,细胞凋亡与其提取物浓度呈明显的相关关系.在时间上表现为双向变化关系,其变化程度同时受提取物浓度的影响.
作者：彭国华；袁铿；周宪民；彭卫东 刊期： 2004年第04期
目的观察抗蚴灵邻苯二甲酸二丁酯乳化液治疗蠕形螨病的疗效.方法应用该药治疗面部蠕形螨感染者447例,其中随机观察有粉刺、皮疹和脓疱疹患者30例,治疗20 d后复查阴转例数并观察其治疗效果,并与市售肤螨灵、2%灭滴灵溶液和8%灭滴灵霜的疗效做比较试验.进行体外杀灭蠕形螨试验、动物毒性试验和局部用药安全试验.结果治疗后20 d复查,面部蠕形螨阴转率为92.8%(415/447),对有明显面部损害的患者治疗有效率为90.0%(27/30),明显高于其他3种药物(P＜0.01).体外杀灭蠕形螨试验结果显示,1 h内能杀死全部蠕形螨.动物毒性试验显示LD50在安全范围,局部用药无明显刺激和过敏反应.结论邻苯二甲酸二丁酯乳化液有望成为安全、高效的治疗蠕形螨病药物.
作者：夏惠；胡守锋；马维聚；葛继华 刊期： 2004年第04期
目的构建原核重组表达质粒pET23a-SAG2,并在大肠埃希菌中实现高效表达,以及检测表达产物的抗原性.方法 PCR扩增SAG2编码基因目的片段,琼脂糖凝胶电泳回收纯化,克隆至pMD18-T载体,转化大肠埃希菌DH5α.测序后亚克隆至表达质粒载体pET23a,构建重组表达质粒pET23a-SAG2,转化大肠埃希菌DH5α.筛选阳性克隆,经限制性酶切分析鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹分析表达产物.结果 PCR扩增出约500 bp的SAG2编码基因目的片段,与预期片段大小相符,经测序鉴定无基因突变;所构建的pET23a-SAG2重组表达质粒阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致;含有pET23a-SAG2重组质粒的大肠埃希菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物约Mr 19000;免疫印迹结果表明表达产物具有良好的抗原性.结论成功构建了pET23a-SAG2表达质粒,实现了全长成熟SAG2蛋白在大肠埃希菌中的高效表达;表达产物具有良好的抗原性.
作者：雷明军；吴少庭；戴五星；潘晖榕；林绮萍；温见翔；黄达娜；高世同；张仁利 刊期： 2004年第04期
目的探讨过敏性疾病主要变应原屋尘螨特异性抗原的定位.方法选用屋尘螨过敏患者的阳性血清特异性IgE抗体作探针,制作屋尘螨石蜡切片,HE染色后光镜观察其内部形态结构,免疫组织化学染色分析其特异性抗原定位.结果与结论内部形态结构,消化系统占据大部分体腔,可见口咽部、前中肠(胃)、中肠、后中肠等结构.中肠(尤其是后中肠)见明显的粪便颗粒,体腔见生殖腺等器官.免疫组织化学染色,见雌、雄屋尘螨的多种组织抗原定位均呈阳性反应,其特异性抗原主要定位于口咽部、中肠组织及肠内容物.
作者：付仁龙；刘志刚；邢苗；李荔；邹泽红 刊期： 2004年第04期
微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,C.p)是引起腹泻的重要病原体之一.免疫功能正常的宿主,该虫引起的腹泻多为自限性的[1],而免疫功能受损的宿主(如艾滋病患者等),则腹泻多表现为慢性并常常危及生命[2].迄今为止,隐孢子虫病尚无有效的治疗药物和预防方法.
作者：陶艳琳；程训佳 刊期： 2004年第04期
棘球蚴病又称包虫病.作者在阿尔及利亚工作期间,曾诊治妊娠妇女并发骨盆棘球蚴囊肿1例,报告如下.患者女性,28岁,孕妇.1年前曾做过肝棘球蚴囊肿摘除手术.此次住院是因为骨盆有一肿块并与妊娠子宫相连.
作者：陈洪俊 刊期： 2004年第04期
美丽筒线虫(Gongylonema pulchrum)是许多反刍动物和猪、猴、熊等动物口腔、食道粘膜和粘膜下层的寄生虫.偶见寄生人体引起美丽筒线虫病(gongylonemiasis).
作者：刘义威；谢庆敢；钟福华 刊期： 2004年第04期
患者,女性,32岁,已婚,吉林省人.自查右侧乳房有一似黄豆大肿块,并有轻度疼痛,经上海某妇产科医院检查,右侧乳房外上限有一1.0 cm×1.5cm大小肿块,有轻度压痛,质地较软,无粘连,可活动,诊断为纤维腺瘤.门诊小手术,局麻下取出1.5 cm×1.0cm组织,呈囊泡状、半透明、囊内充满囊液,经病理切片检查拟诊为猪带绦虫囊尾蚴病.为明确诊断,患者于2004年4月来本所检测,ELISA检测囊尾蚴循环抗体呈弱阳性,结合病理切片结果,确诊为猪带绦虫囊尾蚴病.
作者：孙惠珍；常正山；邱持平 刊期： 2004年第04期
蛲虫病是小儿常见的肠道寄生虫病,感染率高达40%～70%.为了解青岛市儿童蛲虫病感染情况,2003年3月至2004年2月在青岛市儿童医院检查蛲虫病的5～12岁2 370人进行了调查,报告如下.
作者：辛克盛；刘慧 刊期： 2004年第04期
恶性疟原虫FCC1/HN分离株(FCC1/HN)是1977年6月由北京生物制品研究所在海南省昌江县采集并建立体外培养,现已被我国多个研究室体外传代培养、广泛使用.本文通过FCC1/HN裂殖子顶端膜抗原(AMA-1)序列变异,讨论其存在的不同克隆问题.
作者：钱锋；张龙兴；潘卫庆 刊期： 2004年第04期
血清前白蛋白(prealbumin,PA)、纤维结合蛋白(Fibronectin,Fn)是血浆中的两种时相蛋白,亦是机体蛋白营养的指标[1,2].为评价隐孢子虫感染对机体营养状况的影响,本文对隐孢子虫病流行病学调查中获得的28例患儿进行了血清PA和Fn的检测,结果报告如下.
作者：崔玉宝；邢应如 刊期： 2004年第04期
重庆市涪陵区辖39乡(镇),地处武陵山区的乌江与长江流域的9乡(镇)有15万余人,属斑氏丝虫病低度流行区.1957年发现丝虫病后,经多次普查检出微丝蚴血症者3967例.1982年达到(部颁)基本消除丝虫病标准,1995年达到(部颁)消除丝虫病标准.2003年8月,作者按照<消除丝虫病后监测方案>(以下简称<方案>),在武陵山区的臼涛、山窝、卷洞、焦石4乡(镇)开展了慢性淋巴丝虫病和丝虫病病原学及蚊媒监测调查,报告如下.
作者：杨启志；黎永成；喻珊 刊期： 2004年第04期
医学寄生虫学是一门形态学课程,实验课的目的是在系统学习理论课的基础上,使学生进一步加深对理论课的理解,验证理论,同时培养学生观察、思考、分析问题的能力.对提高人才素质和教学质量具有重要意义.实验课同时也是教学中的一个重要环节,作者在实验课带教中有以下的体会及思索:
作者：耿志辉；施雨露；刘利；李淑红 刊期： 2004年第04期
