目的构建HBV X蛋白真核表达质粒并了解其对反式转录激活作用的影响.方法用亚克隆方法构建HBV X蛋白真核表达质粒,以氯霉素乙酰转移酶转化率分析(CAT试验)揭示HBX蛋白的反式转录激活作用.结果 HBV X蛋白真核表达质粒转染HepaG2 细胞后,以Western Blot 检测发现2 μg、5 μg和10 μg的p5SGUTPLHBXDNA均能有效表达;CAT试验揭示2 μg、5 μg、10 μg的p5SGUTPLHBXDNA对报道基因pHE2×CAT的14C-标记乙酰化氯霉素转化率分别为(45.5 ±25.9)%、(65.6±14.4)%和(68.8±19.7)%.结论本结果为进一步研究HBV X蛋白的反式转录激活作用打下了基础.
作者：杨益大；郑临；杨芊；马亦林 刊期： 2002年第04期
目的了解卡氏肺孢子虫在HepG-2(人肝癌细胞)等8种细胞系的增殖状况,寻找适合卡氏肺孢子虫(Pc)增殖的支持细胞系.方法分别以5×105个虫体接种于8种细胞系上.另采用HepG-2细胞,分别接种不同数量的Pc,观察7 d,比较Pc在不同细胞及不同接种数量的增殖情况.结果在HepG-2细胞上Pc滋养体可增殖7倍左右,增殖高峰大多在第4、5天.接种5×105个Pc,包囊和滋养体均可较好增殖.结论 HepG-2细胞是较好的卡氏肺孢子虫体外培养支持细胞系,接种量以每孔5×105个Pc包囊为宜.
作者：倪小毅；陈雅棠 刊期： 2002年第04期
目的评估巨细胞病毒(CMV)pp65白细胞抗原血症在骨髓移植或外周血干细胞移植后活动性CMV感染早期诊断和CMV病的预测、指导CMV亚临床期感染的抗病毒治疗及抗病毒疗效判断中的价值.方法 1999年9月～2000年4月共收集210份乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血,骨髓移植或外周血干细胞移植患者36例.移植前用ELISA法检测患者CMV特异性抗体IgG和IgM,移植后3周起采用CMV Brite试验盒每周检测1次CMV pp65抗原血症,并计数抗原阳性细胞,直到移植后100 d或治疗后抗原阴转、死亡或出院.移植后患者第1次检测到pp65抗原阳性细胞即开始更昔洛韦抗病毒治疗.结果 36例骨髓移植或干细胞移植患者于移植前CMV特异性抗体IgG均阳性,IgM均阴性;移植后16例出现CMV pp65抗原血症,其中15例出现有症状的CMV感染或CMV病,14例接受更昔洛韦抗病毒治疗,12例治疗后抗原血症阴转、症状消失,死亡2例(病死率14.2%),未经抗病毒治疗者2例均死亡(P<0.01).16例pp65抗原阳性患者中,仅2例CMV特异性抗体IgM阳性.10名健康对照组的CMV特异性抗体IgG均阳性,IgM均阴性,pp65抗原血症检测均阴性.结论本研究结果提示,人CMV pp65白细胞抗原血症检测可作为骨髓移植后CMV病的预测指标,指导移植后抗病毒治疗的开展和疗效评价.pp65白细胞抗原血症出现即开始抗病毒治疗可明显降低病死率.
作者：覃海燕；盛瑞媛；张月秋 刊期： 2002年第04期
目的 p16INK4A基因在与AIDS相关的疾病中有表达缺陷,DNA甲基化可使基因转录下调.本研究观察人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)感染对T淋巴细胞的p16INK4A基因的表达影响及其途径.方法建立感染有野生型和突变体HIV-1病毒的T淋巴细胞Hut 78细胞系,以RT-PCR、定量PCR和Western blotting检测细胞感染后不同时间的DNA甲基化酶(DNMT)1、3a和3b的mRNA(提高40%以上)和蛋白质水平;并由甲基化特异PCR(MSP)了解p16INK4A基因甲基化改变,及通过RT-PCR研究该基因的mRNA表达情况.结果无论野生型抑或突变体HIV-1感染,都能使Hut 78细胞中DNMT1表达增强,DNMT3a和DNMT3b无明显变化.HIV-1感染可引起p16INK4A基因启动子区甲基化水平提高和基因转录水平下调.结论 HIV-1感染可使p16INK4A甲基化水平升高和表达降低,且与该病毒有无复制无关.
作者：房静远；Judy A.Mikovits；Francis W.Ruscetti 刊期： 2002年第04期
目的了解上海地区成人CD4、CD8计数及CD4/CD8比值正常参考值范围.方法选取614例成年人不同年龄组的血标本,根据不同性别、不同年龄组分别进行比较,用流式细胞仪进行CD4、CD8计数检测,得出不同性别及不同年龄组的CD4、CD8计数及CD4/CD8比值,并进行分析.结果 CD4正常值在不同性别及年龄组之间差异无显著性,其正常平均值为726.99±255.21.CD8及CD4/CD8在不同性别及其年龄组之间差异有显著性.CD8计数平均值为539.98±134.07.CD4/CD8平均值为1.49±0.57.结论上海地区成人CD4淋巴细胞计数较国外低100/mm3左右.对获得性免疫缺陷综合征CD4平均值的诊断临界值建议可采用400/mm3.
作者：蒋卫民；潘孝彰；康来仪；潘启超；林庆能；薛以乐；翁心华 刊期： 2002年第04期
目的应用抑制性消减杂交技术构建乙型肝炎病毒(HBV)截短型中蛋白(MHBst)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBV截短型中蛋白反式激活相关基因.方法以HBV截短型中蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-Mt167转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa I酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析. 结果成功构建人HBV截短型中蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到94个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到200～800 bp插入片段.挑取50个插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得23种编码基因,包括19种已知基因和4种未知基因.结论筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、免疫应答及肿瘤发生密切相关的蛋白编码基因,因此可能是HBV截短型中蛋白反式激活靶基因.
作者：刘妍；成军；张跃新；段惠娟；牟劲松；韩萍；李克；李莉；张玲霞；陈菊梅 刊期： 2002年第04期
目的研究HIV/AIDS患者T淋巴细胞激活亚群的变化,探讨其临床意义. 方法用流式细胞仪检测59例HIV/AIDS患者和51例健康献血员的T淋巴细胞,对其中40例患者和所有健康献血员进一步分析T淋巴细胞激活亚群(HLA-DR+ CD4+、HLA-DR+ CD8+和 CD38+ CD8+);用bDNA病毒定量检测仪检测59例HIV/AIDS患者的血浆HIV病毒载量. 结果与正常人组相比,HIV组和AIDS组的T淋巴细胞各激活亚群的百分比均显著升高,所有激活亚群均与T4细胞计数成反比,而与病毒载量成正比. 其中,CD38+ CD8+亚群的百分比与T4细胞计数和病毒载量的相关性为密切,相关系数分别为r=-0.603和r=0.523 (P<0.01).结论 HIV/AIDS患者的T淋巴细胞发生持续和异常的免疫激活,细胞激活程度与疾病进展高度相关,测定这些激活的T细胞亚群变化不仅有助于评价HIV/AIDS患者的免疫状况、判断病毒复制的活跃程度,而且对预示疾病进展和临床疗效评价方面均具有重要价值.
作者：李太生；邱志峰；王爱霞；马小军；刘正印；盛瑞媛 刊期： 2002年第04期
目的探讨深圳市孕产妇输血传播病毒(TTV)感染情况及其在母婴间的传播途径.方法应用套式-聚合酶链反应(Nest-PCR)对400例正常孕产妇分娩前的血清及其新生儿的脐血血清标本、产妇的乳汁配对进行TTV DNA检测,对阳性的母亲及其新生儿进行6个月随访,并对其中13对TTV DNA阳性的母血、母乳及其婴儿的血,共做32株克隆,通过DNA序列测定比较分析母婴TTV感染株之间核苷酸的序列同源性.结果在400对配对标本中,62例孕妇血清、4例新生儿脐血清、20例母乳检测出TTV DNA,孕母TTV感染率15.5%(62/400),出生时母婴TTV传播率6.5%(4/62),阳性母亲乳汁TTV DNA检出率32.2%(20/62),配对比较母婴间TTV感染株序列同源性为97.4%～99.8%,经6个月随访母血TTV DNA阳性的婴儿血TTV DNA由阴转阳率为38.1%(16/42).结论 TTV可通过围产期和哺乳期母婴传播的途径感染,对胎儿的危害及新生儿生长发育的影响值得重视.
作者：杨跃萍；蒋小玲；王忠；陈心春；马为民；徐六妹；周伯平；杨德华 刊期： 2002年第04期
目的研究国内临床耐氟康唑白念珠菌的吡咯类药物作用靶酶--细胞色素P-450羊毛固醇14-α脱甲基酶的基因ERG11突变. 方法用酶消化和碱裂解法抽提基因组DNA,PCR扩增ERG11基因的读码框片段,将目的片段与PBS载体(Bluscript M13)连接,重组体转入DH5α中,从而测定序列. 结果在15株耐药菌中共发现了12个有义点突变、17个无义点突变和一个菌株的部分移码.12个有义点突变的氨基酸变异是F72L、D81G、D116E、K128T、Y132H、E266D、D294G、S361P、M374V、P386L、H400R和Q474K,突变主要靠近羧基端;而敏感株的氨基酸变异为F72L、K128T和E266D,靠近氨基端.耐药株的D294G、S361P、M374V、P386L、H400R和Q474K氨基酸变异与文献报道不同.结论耐药株和敏感株的点突变不同, D294G、S361P、M374V、P386L、H400R和Q474K变异位点可能与耐药性有关,做整段编码基因的功能表达,有助于明确变异与耐药的关系.
作者：龙丰；张永信；兰和魁；王荫榆；朱德妹；任大明 刊期： 2002年第04期
目的明确肝纤维化血清学指标对诊断肝纤维化的临床价值.方法对114例肝穿病理确诊的慢性肝炎轻、中、重度患者,同时用放射免疫法进行血清Ⅲ型胶原的前胶原氨端肽原(PⅢNP)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、层黏蛋白(LN)的检测.应用受试者工作特征(ROC)曲线分析方法,以肝纤维化病理分期作为金标准对以上肝纤维化血清学指标诊断肝纤维化价值进行分析.结果通过ROC分析,PⅢNP 、HA、PCⅢ、C-Ⅳ、LN的曲线下的面积(AUC)分别为0.800、0.728、0.727、0.583和0.463.联合检测可提高肝纤维化诊断的特异性,但灵敏度尚不高.结论血清纤维化指标对于临床诊断有一定的指导意义,但尚不能代替肝活检,血清学联合检测尚有一定的可取之处.
作者：郑敏；蔡卫民；翁红雷；刘荣华 刊期： 2002年第04期
患儿男,2岁半.因皮肤黏膜黄染2年余,院外多方治疗无好转入院.体检:体温36.2°C,脉搏104次/min,呼吸36次/min,体重13 kg.神志清,精神可,全身皮肤黏膜及巩膜重度黄染,颈部可触及6个1.5 cm×1.5 cm的淋巴结,心、肺未见异常,肝剑突下3 cm,质韧,无触痛,脾未触及.
作者：孙丽；刘晓英 刊期： 2002年第04期
患者男,58岁,因进食不洁水果后,当晚自感左下腹隐隐作痛,伴周身不适,午夜3时突然因左下腹剧痛而醒,寒战、发烧(40°C),即肌内注射安痛定注射液1支.
作者：赵建平；周秀岚；王虹；白晓红 刊期： 2002年第04期
患者,男,41岁,江西人.因咳嗽、发热1个月,高体温达40.6°C,外院拟诊为肺部感染,经抗生素及激素治疗无效,于2000年6月13日入院.体检:体温39.2°C,脉搏96次/min,呼吸20次/min.神志清,精神萎靡.皮肤、巩膜无黄染,全身皮肤未见瘀点、瘀斑,左颈部见一蜘蛛痣.左肺听觉语音减弱,心率96次,律齐、无杂音.腹软,肝肋下3cm、剑突下4cm,脾肋下2cm,质地硬.腹水征(-).下肢无水肿.神经反射正常,无病理征.
作者：王新宇；卢洪洲；潘孝彰；翁心华 刊期： 2002年第04期
患者男,21岁,因头晕,胸闷、心悸、腹痛、腹泻2周于2000年2月23日以病毒性心肌炎收住内科.入院时体检无异常体征,肝脾肋下未触及.
作者：徐立群；徐旭东 刊期： 2002年第04期
女性,29岁,农民,泰国人,1996年行剖宫产时发现HIV感染,未治疗;近两年来出现阴道分泌物增多,呈脓性、伴搔痒、有臭味,间断治疗无效.本次以畏寒、发热、咳嗽、食欲不振、乏力1个月,出现颜面疱疹4 d于2001年2月28日收住我科.
作者：王辉；宋正己；杨欣平 刊期： 2002年第04期
目前,已发现乙型肝炎病毒(HBV)变异对乙型肝炎的发病、血清学诊断和抗病毒治疗均有一定影响.HBV的基因变异主要体现在两方面:一是病毒基因型的演变,即HBV基因组在不同携带者之间的差异性;二是感染个体出现的HBV突变.因此,基因型的研究对于进一步明确乙型肝炎发病机制、寻找治疗对策是有其重要意义的.
作者：黄晶；高志良 刊期： 2002年第04期
目前霍乱弧菌至少被分为190多个血清群,霍乱弧菌新菌株不断产生、并被发现,使流行情况变得复杂.此外,针对霍乱弧菌的不同生存状态,采用过去的免疫学和生物学方法不能很好检测、鉴别.目前,分子生物学和核酸技术的发展为我们快速检测、鉴别霍乱弧菌提供了可能.现就霍乱弧菌的分子遗传学特征及其基因检测方面的研究进展作一综述.
作者：胡子有；马文丽；郑文岭 刊期： 2002年第04期
丙型肝炎(丙肝)较乙型肝炎更易慢性化,丙氨酸转氨酶(ALT)反复异常是其特征,对应用干扰素治疗急性丙肝的过程中慢性化进展情况及早期应用.干扰素能否预防慢性化研究尚少.国外资料显示干扰能能够减少急性丙肝慢性化率[1],国内报道较少.因此,我们就干扰能治疗急性丙肝预防其慢性化情况进行了观察.
作者：李修岭；王修齐；杨玉秀；丁松泽 刊期： 2002年第04期
虽然麻疹的预防接种已使麻疹的发病率和病死率大幅度下降,但在已经免疫接种的人群中仍有发生甚至有较高的发生率.麻疹除临床表现如卡他症状、结膜充血、发热、咳嗽、皮疹外还可以有各种并发症.呼吸系统并发症如喉炎、支气管炎、肺炎等文献均有报道,但严重并发症低氧性呼吸衰竭(ARDS)发病率低,国内文献未见报道.现将1999年4月～2001年5月温州地区3次麻疹流行期间收住我院儿科重症监护病房(PICU)的4例麻疹并发ARDS的患儿资料分析报道如下.
作者：单小鸥；陈益平；严纯雪；何时军 刊期： 2002年第04期
我国自1965年广泛推行麻疹疫苗接种以来,麻疹的发病得到有效控制,麻疹的流行特点和临床特征也有了很大的变化.现将本院2000年与1965年收治的135例和222例麻疹患者在临床特征方面作一比较,以了解疫苗接种后麻疹发病的规律.现报道如下.
作者：叶俊茂；万炯 刊期： 2002年第04期
手足口病是一种常见的小儿急性传染病,2000年5～8月山东省招远市暴发了小儿手足口病大流行.在3个多月里,我院竟收治了1 698例患儿,现报道如下.
作者：王晓华 刊期： 2002年第04期
肾综合征出血热(HFRS)多伴有急性肾功能衰竭(ARF),目前临床上缺乏早期诊断急性肾衰的方法.我们对36例HFRS合并ARF患者早期进行了西司他汀(Cystatin C)及血清肌酐(Scr)浓度测定,现报道如下.
作者：钟光辉；涂阳科；裘晓蕙；杨敏 刊期： 2002年第04期
我国是慢性乙型肝炎(CHB)高发区,虽然目前有多种抗HBV药物用于CHB的临床治疗,但疗效不尽人意,且价格昂贵.寻找治疗CHB和慢性乙型肝炎病毒携带者的有效方法仍是当前急需解决的问题.
作者：周伯平；陈心春；马为民；李美忠；王火生；毕胜利 刊期： 2002年第04期
作者：朱启镕 刊期： 2002年第04期
肾综合征出血热(HFRS)的病原--汉坦病毒(Hantavirus,HV)在我国已成功分离近21年.在这段时间里,我国不仅在该病的病原学、流行病学、发病机制等基础研究方面取得了持续的发展,而且在该病的预防和临床救治实践中也取得了显著的成绩.
作者：白雪帆；黄长形 刊期： 2002年第04期
作者： 刊期： 2002年第04期
