目的从人的外周血树突状细胞(DC)的抗原递呈方面研究慢性乙型肝炎的发病机制,并诱导出针对HBcAg特异性的细胞毒T淋巴细胞(CTL).方法取健康人DC和患者DC,比较两组的抗原递呈功能是否存在差异.以HBcAg体外冲击致敏DC,与自体T淋巴细胞共育,诱导出HBcAg特异性CTL;以HepG2细胞为对照靶细胞,转染HBV DNA的HepG2215细胞为靶细胞,分别测定CTL在效靶比为2:1、6:1和20:1时对HepG2细胞的非特异性杀伤率及对HepG2215细胞的特异性杀伤率,并比较患者组与正常组特异性杀伤率的差异.结果患者DC的抗原递呈功能(1099.267±239.12,1374.8±364.155,2717.78±1589.72)较健康人(3147.933±726.57,3843.000±1060.85,5486.867±1790.64)弱;健康组与患者组CTL对HepG2各效靶比的非特异性杀伤作用差异无显著性.健康组与患者组CTL对HepG2215的特异性杀伤作用差异有显著性;患者组CTL的活性(7.1±4.33,15.68±3.3,27.66±4.59)较健康组(20.76±6.08,33.97±8.00,49.63±9.48)弱.结论用HBcAg体外负载患者DC,能诱导出抗原特异性的CTL,这些CTL能特异性地杀伤相应靶细胞.
作者：周雨迁；邓庆丽；詹俊；邵静；黄志明；魏菁；智慧 刊期： 2004年第01期
目的研究外源指导序列(EGS)体外逆转大肠埃希菌临床分离株耐氯霉素菌为敏感菌的能力.方法构建含EGScat1+2(二位点)并含四环素抗性基因的EGS重组质粒.常规CaCl2法将重组质粒导入临床分离对四环素敏感且耐氯霉素大肠埃希菌E4758菌株中,通过菌落PCR鉴定,并利用分光光度计A600检测阳性转化菌t-E4758在含不同浓度氯霉素LB液体及固体培养基中的生长情况.结果耐氯霉素的临床分离大肠埃希菌E4758菌株在浓度为35μg/ml,70 μg/ml,105μg/ml,170μg/ml的氯霉素LB培养皿中均生长良好,而导入EGScat1+2(二位点)的转化菌t-E4758在上述浓度时均不能生长,表明转化菌t-E4758恢复了对氯霉素的敏感性.结论EGS具有逆转临床耐药大肠埃希菌为敏感菌的能力.
作者：万齐全；齐俊英；陈如 刊期： 2004年第01期
目的快速检测6种疱疹类病毒DNA.方法在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物,一对扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型、爱泼斯坦-巴尔病毒和人巨细胞病毒4种病毒,另一对扩增水痘-带状疱疹病毒和人类疱疹病毒6型2种病毒.经DNA聚合酶链反应(PCR)扩增,并对扩增产物进行分子克隆序列分析后,选择BamHⅠ或BstUⅠ酶切对扩增产物进行鉴别.结果6种标准病毒株PCR扩增后产物为510～592 bp,其小检出量为0.1fg,与乙型肝炎病毒、真菌、细菌和人类基因组DNA无交叉反应.用该方法检测临床89份脑脊液(CSF)和75份血标本中的疱疹类病毒,13份(14.6%)CSF和26份(34.7%)血标本为阳性,通过BamHⅠ或BstUⅠ两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒.同时用酶联免疫吸附(ELISA)法检测该标本的HSVⅠ/Ⅱ、EBV和CMV这4种病毒的IgM,10例阳性.这4种病毒的PCR阳性检出率为30.7%,而ELISA法为13 3%(P＜0.05),具有显著的差异性.38例正常健康儿童的血和9份非病毒感染的CSF标本6种疱疹类病毒DNA均为阴性.结论PCR加限制性内切酶片段长度多态性分析具有特异敏感,快速准确的特点,为疱疹类病毒感染的早期快速诊断提供了有效的手段.
作者：董关萍；吕娟芬；尚世强；余钟声；俞锡林；宋莉莉；邵祝洪 刊期： 2004年第01期
目的研究结核病Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗结核杆菌感染小鼠的治疗作用.方法用结核杆菌强毒株攻击小鼠后,接种Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗,观察该疫苗对结核杆菌感染的治疗作用.结果疫苗接种后14d,测得卡介苗组、注射pcDNA3组、注射pcDNA3-hsp70组及Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗免疫小鼠的血清IFN-γ分别为(121.54+56.39)pg/ml、(192.00+64.36)pg/ml、(542.33+99.77)pg/ml及(1336.98+129.64)pg/ml,嵌合DNA疫苗组与前三组比较差异有显著性(P＜0.01).肝、脾组织涂片细菌计数及组织培育菌落记数,嵌合DNA疫苗组与其他组比较差异有显著性(P＜0.01).结论Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗与卡介苗及单一hsp70DNA疫苗相比,具有更好的免疫治疗效果.
作者：史小玲；李晖；钟森；张建军；邓存良；黄永茂；卢润生；吴建林；卫帮富；蒋绍双 刊期： 2004年第01期
目的探索C基因截短型重组HBV载体的复制、包装和表达.方法采用分子克隆、定点突变技术构建C基因截短型HBV载体;瞬时转染HepG2细胞,在荧光显微镜下观察外源目的基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达;提取转染细胞胞内、胞外DNA分别进行半巢式聚合酶链反应(PCR)、非变性凝胶电泳杂交技术、southern blot杂交定量分析及常规PCR等分析,检测重组HBV载体的复制、包装及子代病毒的生成.结果经酶切鉴定,C基因截短型HBV载体构建成功;转染HepG2细胞,外源目的基因能够高效表达;在辅助载体的辅助下,C基因截短型HBV载体能够在肝细胞进行复制,包装,通过定量分析,C基因截短型HBV载体的包装效率比C基因非截短型HBV载体提高4～8倍;另外,C基因截短型HBV载体可以在辅助载体的辅助下包装成携带外源目的基因的子代病毒颗粒分泌到胞外.结论C基因部分截短不影响HBV载体外源基因的表达和病毒的复制,而且可以提高载体的包装效率.
作者：韩聚强；胡大荣；孙殿兴；胡学玲；李娟；范公忍；刘超英；吴忆贫 刊期： 2004年第01期
目的快速、准确地检测水中存在的肠道致病菌.方法采用基因芯片技术对水中常见肠道致病菌进行检测和鉴定,包括检测靶基因的扩增、基因芯片的制备、杂交反应和杂交结果的检测与分析四个步骤.结果应用基因芯片对涉及9个菌属的143株致病菌在相同的条件下进行了杂交检测,得到菌属(科)特异性的杂交图谱,从而达到对细菌进行检测鉴定的目的.结论制备的基因芯片能够同时检测沙门菌属、志贺菌属、埃希菌属、葡萄球菌属、变形杆菌属的细菌以及小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血性弧菌等.
作者：靳连群；李君文；晁福寰；王升启；王新为；郑金来；宋农；古长庆 刊期： 2004年第01期
目的了解2004年我国首例社区获得性散发严重急性呼吸综合征(SARS)病例的流行病学、临床、病原学检查特点及预后转归.方法对患者流行病学及临床资料进行回顾性分析,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫荧光试验检测SARS-IgM/IgG抗体,荧光聚合酶链反应(PCR)测定SARS-CoV RNA.结果患者2003年12月16日以发热起病,持续8 d,有咳嗽、气促等症状,白细胞及T淋巴细胞计数降低,影像学检查示双肺密度增高影.起病前无流行病学依据,81名接触者均未出现发热等异常情况.12月27日被诊断为SARS疑似病例,2004年1月5日确诊为SARS.经对症支持等综合治疗痊愈出院.对多份血清进行平行检测,SARS-IgM阴转阳,滴度呈4倍以上升高,SARS-IgG在起病一周内出现,抗体滴度很快呈现4倍以上升高.在咽拭子中检测出SARS-CoVRNA.中和试验结果阳性.结论该患者为2004年我国首例社区获得性散发SARS确诊病例,其无流行病学依据,临床表现不重,抗体出现早,病情恢复快.
作者：张复春；唐小平；尹炽标；杨湛；陈燕清；刘晋新；雷春亮；魏绍静 刊期： 2004年第01期
目的为探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3的功能,在真核生物酵母细胞中表达HCV NS3基因.方法用聚合酶链反应(PCR)的方法以HCV全长质粒pBRTM/HCV-1为模板扩增HCV NS3基因,克隆到pGEM-T载体中,双酶切后回收连接到酵母表达质粒pGBKT7中表达.提取酵母蛋白质,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析.结果成功构建HCV NS3基因酵母表达载体,Western免疫印迹显示了HCV NS3在酵母细胞中表达.表达产物在胞内存在,相对分子质量为70 000.结论HCV NS3蛋白在酵母中表达成功.
作者：李克；王琳；成军；张玲霞；陆荫英；李莉；刘妍；段惠娟 刊期： 2004年第01期
目的定量观察核糖体内部进入位点(Internal ribosome entry site,IRES)特异性抑制性RNA(inhibitor RNA,IRNA)对细胞内HCV IRES介导的HCV C基因表达的抑制作用.方法构建IRES特异性IRNA的真核表达载体(pcRz-IRNA),将该质粒与pcHCVcluc(含HCV 5′非编码区、核心区与荧光素酶基因)共转染人肝细胞癌(HHCC)细胞株,对转染后72 h细胞表达HCV C抗原进行间接免疫荧光染色,用激光共聚焦显微镜对其含量进行定量分析.用荧光素酶检测试剂盒对其活性进行检测.结果共转染细胞可表达HCV C抗原,同对照组相比,IRNA组荧光量明显下降.结论在IRNA与HCV共转染细胞中,IRNA对HCV IRES介导蛋白翻译具抑制作用.
作者：梁雪松；周永兴；连建奇；贾战生；聂青和 刊期： 2004年第01期
患者,男,39岁,因间歇右上腹疼痛2年,加重2 d,于2000年12月1日入院.腹部B超检查:胆囊炎,胆囊积液,胆囊多发性结石,胆总管轻度扩张,右肝管多发性结石.
作者：刘友生；严辉；邓东湘；唐建忠；刘和群 刊期： 2004年第01期
患者男,24岁.因内外混合痔手术后张口、排尿困难3d于2002年2月7日入院.缘于2002年1月30日在诊所行内外混合痔(内切外扎)手术后,于2月4日晚出现小便淋漓不尽,肛门紧缩感,次日出现张口困难,低热,并逐渐发生频繁的短暂抽搐,于7日下午急诊收住我院.
作者：陈从新；刘波 刊期： 2004年第01期
患者男,23岁,因不慎摔倒致脑震荡入我院脑外科治疗,入院后第15天,无明显原因出现发热、咳嗽,咳痰,体温达39℃,体检无异常发现,予物理降温无效,后改用地塞米松注射液10 mg静脉滴注,体温稍有下降,但于数小时后复又增高,持续在39～40.5℃之间.
作者：彭培峰；宁文锡；吴静 刊期： 2004年第01期
流行性脑脊髓膜炎(流脑)是由呼吸道传播引起的化脓性脑膜炎症改变.多发于冬春季节,临床以发热、头痛、呕吐、意识不清为主要表现,儿童发病率高.我科于2002年12月～2003年3月共收治流脑患儿20例,现分析如下.
作者：余花；莫晨玲；马秀珍 刊期： 2004年第01期
金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SAU)是临床上常见病原菌,其对抗生素的耐药性日趋严重,特别是近20年来耐甲氧两林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistance staphylococcus aureus,MRSA)有逐年增高的趋势且这些菌株具有多重耐药特征[1].为了解金黄色葡萄球菌对抗生素耐药性的变迁,以便临床合理选用抗生素,我们调查了近年来临床分离的SAU耐药谱,并进行分析,现报告如下.
作者：余方友；胡龙华；谭立明；贾坤茹；傅颖媛 刊期： 2004年第01期
自1994年起获得性免疫缺陷综合征/人类免疫缺陷病毒(AIDS/HIV)在中国已进入广泛流行的快速增长期.近年来艾滋病机会性感染者不断增多,其临床表现多不具备相关典型表现,这给临床诊断、治疗带来一定困难,其中艾滋病患者深部真菌感染显得较为突出.我院于2000年1月至2003年1月期间共收治艾滋病96例次,其中17例经真菌培养阳性确诊深部真菌感染,现对其分析总结如下.
作者：刘俊；王辉；李俊义 刊期： 2004年第01期
流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)是一种重要的病原菌,也是儿童呼吸道感染的常见致病菌,由于该菌生长营养要求较高,需要X因子和V因子,而且受革兰阳性细菌生长的干扰,临床检出率往往偏低.我们在巧克力琼脂培养基中加入Isovttex因子促进Hi的生长,并在其中加万古霉素来抑制革兰阳性菌的生长,大大的提高了Hi的检出率,并对26株Hi进行了产β-内酰氨酶及其耐药率的分析,报告如下.
作者：沈定树；余素飞；王丽珍；陈慧红；陈雪娇；姜彩琴 刊期： 2004年第01期
乙型肝炎病毒(HBV)具有泛嗜性,可在肝外组织器官中感染并复制.我们曾报道[1]乙型肝炎肝硬化患者脑组织中存在HBV感染.为进一步了解脑组织中HBV抗原表达与血清尤其肝组织中HBV复制水平的关系,我们应用免疫组织化学技术、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对33例乙型肝炎肝硬化死亡患者脑组织HBsAg、HBcAg及血清、肝组织中HBVDNA含量进行了检测,并进行比较分析,现报道如下.
作者：商庆华；徐传镇；卓海龙；陈崇兴；张光曙 刊期： 2004年第01期
近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂的广泛应用,以及肿瘤、器官移植等免疫低下人群的不断增多,念珠菌、隐球菌等深部真菌感染的发生率呈现明显上升趋势.一些新的致病性真菌或真菌的新特性也在不断地被认识,而对致病性真菌的鉴定则是其认识的基础与关键[1].我们应用真菌核糖体保守区及其内转录第2间隔区基因(ITS2)序列同源性分析,为致病性真菌的分子鉴定提供一个客观依据.
作者：朱利平；章强强；翁心华；张永信；李莉；王家俊 刊期： 2004年第01期
我国目前传播人类免疫缺陷病毒(HIV)主要途径为经血传播,如静脉吸毒,输血等,我们曾报道了经血传播HIV和HBV/HCV重叠感染的特征[1,2].而国外报道HIV传播的主要途径为性途径,在经性途径传播的HIV感染者中HBV/HCV重叠感染状况和感染特征不甚明确,我们以HIV感染的德国男性同性恋者为研究对象,首先对其HBV/HCV重叠感染状况进行调查,并总结了经性和经血传播HIV感染者HBV/HCV重叠感染特点及差异.
作者：朱彪；吴南屏；吴灵娇；Armin Bader 刊期： 2004年第01期
乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个全球性的问题,严重地影响了我国人民的健康.目前研究发现HBV的各地病毒株有差异并根据核苷酸序列的差异分为A～H 8个基因型,认为HBV基因型可能与疾病的预后进展有一定的相关性.对长春市212例血清乙型肝炎病毒标志(HBVM)阳性的慢性肝病患者进行血清HBV基因型的检测与观察,现将结果报告如下.
作者：赵振国；陈亚洁；李奉山；何敏；赵文静；刘薇 刊期： 2004年第01期
乙型肝炎病毒(HBV)的慢性感染是引发肝细胞癌的主要危险因子,HBV诱导细胞恶性化的发病机制还未完全弄清,已有许多研究提示HBV X蛋白(HBxAg)对多种增强子及启动子有反式激活作用[1,2],在HBV诱导肝细胞癌的发生中起着重要作用.筛选肝细胞中与HBxAg结合的蛋白对探讨HBV致癌的细胞效应机制提供了重要线索.
作者：陆荫英；李克；王琳；刘妍；成军；张玲霞 刊期： 2004年第01期
干扰素(IFN)是目前治疗慢性乙型肝炎(CHB)公认的有效药物,其HBeAg和HBV DNA的近期阴转率为40%～50%.影响IFN疗效的因素很多,如血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,肝脏病变活动性,HBV前C区基因变异及IFN中和抗体等.本实验对HBV感染的慢性肝病患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IFN受体表达水平进行检测,并观察其与IFN疗效间的关系,现报告如下.
作者：汤群；杨金龙；何生松 刊期： 2004年第01期
近年来,肠源性内毒素血症(intestinal endotoxemia,IETM)与肝病的关系日益受到重视.许多动物实验证实,各种实验性肝损伤均可发生IETM.
作者：赵龙凤；李红；王勤英；韩德五 刊期： 2004年第01期
作者：王建设；朱启镕 刊期： 2004年第01期
对严重急性呼吸综合征(SARS)的药物治疗已经积累了一些经验,但是由于SARS是一种新现传染病,对它的病原学、流行病学、发病机制、临床特征、影响预后的因素等等都还有待深入研究,所以,还不能认为前一阶段所采用的各种药物治疗方案是完全成熟的.早期由于SARS的病原体尚未明确,治疗措施属于探索性的,不合理治疗在所难免;世界卫生组织(WHO)宣布变异冠状病毒为SARS的病原体之后[1],在治疗用药上考虑到了抗病毒、抗菌、免疫抑制和免疫调节的联合;此后,随着经验的积累,临床医师对SARS的认识水平不断提高,药物治疗方案趋于合理,但不合理用药,甚至矛盾用药的现象仍然存在,有必要深入探讨.
作者：缪晓辉；周先志 刊期： 2004年第01期
禽流感(avian influenza),全称禽类流行性感冒病毒感染,是由A型流感病毒引起禽类的一种从呼吸系统感染到败血症等多种症状的传染病,禽类感染后病死率很高.1878年禽流感首次发生于意大利,当时称之为鸡瘟.
作者：卢洪洲；潘孝彰 刊期： 2004年第01期
