目的 利用AdEasy腺病毒载体系统构建血管内皮生长因子165(VEGF165)重组腺病毒,并在293T细胞中扩增.方法 将PCR获取的VEGF165基因酶切并插入到pAdTrack-CMV中,构建成腺病毒穿梭质粒pAdTrack-VEGF165,经Pme Ⅰ酶切线性化后,采用电穿孔转化到事先电转化腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌感受态细胞中,挑选同源重组菌落.提取质粒并用Pac Ⅰ酶切鉴定,线性化重组质粒pAdEasy-VEGF165转染293T细胞,包装成重组腺病毒颗粒,荧光显微镜下观察绿色荧光表达,并扩增收集重组腺病毒,测定病毒滴度.结果 经限制性内切酶检测、基因测序及和绿色荧光观察证实成功构建了携带VEGF165基因的重组腺病毒,并扩增出109 pfu/mL的高滴度重组腺病毒.结论 成功构建了携带VEGF165基因的重组腺病毒载体,为研究骨组织工程血管化局部基因治疗奠定了基础.
作者：高全文；宋慧锋；柴家科；柳春明 刊期： 2008年第05期
目的 探讨在牵张区截骨部位加入骨基质明胶(Bone matrix gelatin,BMG),以诱导骨的再生,促进牵张区骨痂愈合,并缩短间歇期及固定期.提高成骨质量,减少并发症.方法 选用6只雄性成年杂种狗,随机选取一侧作为实验组(牵张区截骨部位加入BMG),另一侧作为对照组.分别在下颌骨体部安放牵张器,共牵张7 d,通过不同时间点的X线观察、组织学观察和灰度分析来评价骨牵张的程度.结果 计算机辅助灰度间接计量统计学分析结果:第1周时,对照组和实验组的骨密度间接计量值,两者比较差异无统计学意义.第3周、5周、8周时,对照组和实验组的骨密度间接计量值,两者比较,差异有统计意义.结论 在牵张区截骨部位加入BMG,能够诱导骨的再生,可促进牵张区骨痂愈合,缩短牵张成骨整个过程,提高成骨质量,减少并发症.
作者：卢卫华；曾融生；王茹；钟锦文 刊期： 2008年第05期
目的 建立高效、快速获得大量高纯度雪旺细胞的方法,为组织工程神经构建提供优质、足量的种子细胞.方法 取新生6～7 d的小鼠,在解剖显微镜下分离双侧坐骨神经,0.25%复合胶原酶37℃消化90 min,然后将细胞悬液接种于预先用层粘蛋白铺盘的培养瓶,贴壁培养48 h后,0.05%复合胶原酶37℃消化30 min,振荡分离雪旺细胞与成纤维细胞.经过两次纯化后,运用免疫细胞化学和流式细胞仪检测所得的雪旺细胞的纯度.结果 经过两次纯化后,P75NTR免疫细胞化学及流式细胞仪检测证实,通过本方法可获得纯度为99%以上的雪旺细胞,每个25 cm2培养瓶可获得(102.8±5.9)×104个细胞.结论 复合胶原酶差速消化法是一种高效、快捷的雪旺细胞纯化方法,仅需5 d即可制备高纯度的雪旺细胞.
作者：洪坦辉；金羽青；戴传昌；董佳生；祁佐良；王毅敏；刘伟；曹谊林 刊期： 2008年第05期
目的 以磷酸钙双相陶瓷为材料,采用3种成型方法制备多孔生物陶瓷支架,比较不同制备方法所获得的多孔陶瓷的孔结构,为骨组织工程提供适合的支架材料.方法 本实验用不同配比的H2O和SiO2溶胶配制浆料,以添加致孔剂法、冷冻干燥法及有机泡沫浸渍法制备陶瓷坯体,经高温烧结得到多孔双相陶瓷支架.通过扫描电镜(SEM)观察了陶瓷块的孔结构、孔径及孔的连通性.同时,检测了多孔陶瓷的气孔率及力学强度,从而评价其作为骨组织工程支架材料的可行性.结果 本研究采用的3种制备方法获得的多孔陶瓷,均具有连通的孔结构.添加致孔剂法获得陶瓷的孔径为72±30 μm,气孔率为92.3%;冷冻干燥法获得的陶瓷孔径较小(23～47 μm),气孔率为74%～87%;有机泡沫浸渍法制备出的孔径大(164±46 μm),气孔率为90.2%.力学强度测试结果显示,有机泡沫浸渍法制备的多孔陶瓷的抗压强度大(71±18 Kpa);添加致孔剂法其次,抗压强度为18±5 Kpa;冷冻干燥法获得的多孔陶瓷抗压强度为14～44 Kpa,抗压强度低.结论 3种制备方法均能够制备出具有连通孔结构的高气孔率的多孔磷酸钙陶瓷,以有机泡沫浸渍法和添加致孔剂法制备的多孔陶瓷力学强度较高,更适合作为骨组织工程支架材料.
作者：何晨光；杨兵；赵莉；崔磊 刊期： 2008年第05期
目的 比较去基底膜与保留完整基底膜的异种脱细胞真皮基质(Xeno-ADM)移植免疫学方面的差异.方法 建立SD大鼠皮下脱细胞真皮基质(ADM)移植模型,120只SD大鼠随机分为4组:去基底膜组、基底膜组、自体组、空白对照组.分别将带基底膜和去基底膜的Xeno-ADM植人大鼠背部皮下,自体组分别将大鼠自体真皮基质植入大鼠背部皮下,空白对照组不植入任何材料.于术后2～32周进行组织学观察,并采用Elisa和实时定量PCR方法,检测ADM移植后血清中TNFα、IFNγ、IL-6和IgG表达水平的动态变化.结果 移植早期(<16周)基底膜组移植物炎性反应程度较去基底膜组强烈,IgG表达水平在ADM移植2周时高,而TNFα、IFNγ、IL-6表达水平在ADM移植后8周高,上述所有指标在移植后16周时趋向稳定,接近对照组.但3个实验组的TNFα、IFNγ、IL-6和IgG表达水平高低依次为:基底膜组>去基底膜组>自体组.结论 移植早期(<16周),去基底膜的Xeno-ADM移植优于带基底膜的Xeno-ADM移植.基底膜成分是Xeno-ADM移植早期引发宿主免疫反应增强的一个因素.
作者：肖强；张盈帆；潘银根；章建林；孙美庆；刘安堂；张文俊；江华 刊期： 2008年第05期
目的 探讨脱细胞异体真皮与白体瘢痕薄皮复合移植修复瘢痕愈合创面的手术效果.方法 荧光定量PCR对比移植前后Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达,应用免疫组化方法观察胶原蛋白的表达与分布.结果 移植组织Ⅰ、Ⅲ胶原的mRNA表达与自体增生性瘢痕组织的mRNA表达有差异,胶原排列接近正常皮肤组织.结论 脱细胞异体真皮与自体瘢痕薄皮复合移植修复继发瘢痕的创面,组织结构恢复良好,接近正常皮肤,是目前修复大面积深度烧伤患者功能部位创面,实现功能重建的有效方法.
作者：陈骏；汪希；杨军；王丹茹；钱云良 刊期： 2008年第05期
目的 探讨浮肩损伤的临床特征及治疗方法.方法 回顾分析2000年4月至2006年7月收治的,经手术治疗的19例浮肩损伤患者的临床资料.患者均有不同程度的合并损伤,其中肋骨骨折、血气胸和(或)肺挫伤占89.5%.受伤至手术时间3～42 d,平均10.2 d.术后3个月对患者肩关节功能根据Herscovici标准进行评定,并对浮肩损伤的临床特征和治疗进行总结.结果 术后随访3～50个月,平均16.2个月.肩胛颈骨折在目标区上均获解剖复位,锁骨和肩胛骨均愈合.根据Herscovici标准进行评定,优15例(78.9%),良3例(15.8%),可1例(5.3%).结论 浮肩损伤多由高能量直接暴力所致,常伴有合并损伤.切开复位内固定能恢复肩关节的动力平衡及稳定性,可早期进行功能锻炼,是一种较好的治疗方法.
作者：陈又年；刘莉 刊期： 2008年第05期
目的 研究不同初始接种浓度对Beagle犬骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)体外成骨能力的影响.方法 将体外培养扩增的第1代BMSCs制成不同浓度(5×107 eells/mL、5×106 cells/mL、5×105 cells/mL)的细胞悬液,分别接种于60 mm培养皿,观察矿化结节形成的时间;并分别与胶原膜BME-10X复合,比较2 d、5 d、7 d的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性.结果 细胞初始接种密度越高,形成矿化结节的时间就越短;在细胞载体复合物中,同一浓度组的ALP活性随培养时间的延长而增加;在相同天数,5×107 cells/mL组与5×106 cells/mL组、5×105 cells/mL组之间ALP含量有显著差异,而5×106 cells/mL组与5×105 cells/mL组之间则无显著差别.结论 BMSCs体外的成骨能力与细胞的接种密度有关,初始接种密度越高,其体外的成骨能力就越强.
作者：赵欣；闫福华；詹暶；李艳芬 刊期： 2008年第05期
目的 设计合成含IKVAV的两亲性肽,探讨其体外自组装成三维多孔凝胶及体内诱导血管生成的可行性.方法 固相法合成肽,自组装成凝胶,TEM观察凝胶结构.实验组:配制1 wt%的肽溶液,pH值为9.0;对照组:配制16.67%的明胶,pH值为7.4.各取1 mL,分别注射于大鼠脊柱两侧皮下,术后1周观察全身反应及局部皮肤.2周后取材,固定,常规HE染色及VEGF免疫组织化学染色.结果 高效液相频谱仪及质谱仪示肽纯度及分子量分别为95.22%与1 438,TEM示凝胶为交织成网状的纳米纤维.术后1周动物存活良好,无全身不良反应,局部皮肤无红肿、无坏死.实验组:1 wt%的肽体内自组装成凝胶,血管长入凝胶内部,管腔内可发现红细胞;术后2周,VEGF阳性.对照组:明胶内未发现血管,VEGF阴性.结论 本实验合成含IKVAV两亲性肽,在PBS溶液中可自组装成凝胶且体内可诱导新生血管生成.
作者：宋玉林；郑启新；郭晓东；黄华斌 刊期： 2008年第05期
目的 探讨根据不同的损伤类型及程度,选择性运用眶周截骨术及眶内充填术,对50例眶颧部骨折患者的整复治疗效果.方法 根据眶颧部骨折的不同损伤程度,采用眶壁眶缘截骨术,恢复眼眶的解剖结构,并根据骨块复位程度,选用自体或医用材料进行眶周和眶内骨膜下充填,修复眼眶.结果 50例患者术后双侧眼球突出度、面中部对称性,宽度等均较手术前有明显改善.本组有2例长期复视,5例术后有轻度眼球凹陷.结论 眶周截骨复位术,辅助选用眶内材料充填可以有效矫正陈旧性眶颧部骨折畸形.
作者：周栩；韦敏；许铮 刊期： 2008年第05期
目的 比较观察甘草黄酮、熊果苷对体外培养的B16鼠黑素瘤细胞黑素合成的影响.方法 选择系列浓度梯度的药物作用于B16黑素瘤细胞株,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率变化.结果 在实验浓度时,甘草黄酮具有浓度依赖性黑素合成抑制作用,与熊果苷比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 两种化合物均显示有抑制黑素生成的作用,存在一定细胞毒性.
作者：吴品茹；徐慧；陈向东；沈征宇；刘健航 刊期： 2008年第05期
目的 总结采用阔筋膜移植治疗陈旧性跟腱断裂的疗效.方法 对16例患者采用阔筋膜移植修复陈旧性跟腱断裂并随访.结果 全部病例均经2～3年(平均28个月)的随访,按Arner-Lindhohm评定标准判定,临床优良率达93.8%.结论 阔筋膜移植治疗陈旧性跟腱断裂是一种效果较好的方法.
作者：赵磊；王黎明；蒋纯志；桂鉴超；王刚锐；徐杰 刊期： 2008年第05期
膀胱癌是一种高度恶性的肿瘤,其发病率在全世界有逐年上升的趋势.膀胱癌不易早期诊断,临床患者多为进展期或晚期,故手术切除率低,预后差.膀胱癌的发生、发展、侵袭、转移是一个极其复杂的多环节过程,而细胞粘附分子功能异常在侵袭、转移过程中起着重要作用.本文就近年来相关粘蛋白在膀胱癌中的表达做一综述.
作者：赵立明；任玉林；王永翔；赵小东 刊期： 2008年第05期
糖尿病是由于胰岛素分泌或作用不足引起以血糖增高为主要特征的代谢性疾病,糖尿病严重威胁人类的健康和生命,其发病率呈逐年上升趋势,对于糖尿病的治疗多采用药物和外源性胰岛素替代的治疗方法,但仍缺乏根治方法.
作者：叶婷婷；陆颖理 刊期： 2008年第05期
胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESs)是从早期胚胎内细胞团(Inner cell mass,ICM)或桑椹胚中分离出的高度未分化的全能细胞.ES细胞体外诱导分化为黑色素细胞的过程能更明确皮肤黑色素细胞和视网膜黑色素上皮细胞(Retinal pigreented epithelium,RPE)的基因选择性表达程序.
作者：王蕾蕾；王春梅 刊期： 2008年第05期
我科2005年1月至2007年12月共手术治疗体表瘢痕患者127例,采用美容外科技术缝合伤口.拆线后,愈合伤口涂抹瘢痕止痒软化乳膏治疗取得良好效果,现报告如下.
作者：田晓东；韩波；肖晓兰；何友德；李登伦 刊期： 2008年第05期
颈背部脂肪瘤多发生于皮下,且病因不明,大多无边界及包膜,脂肪组织堆积在网状结缔组织中[1],手术切除易引起明显瘢痕,影响美观.我科先后对17例颈背部脂肪瘤患者采用肿胀吸脂技术进行治疗,均取得良好效果,现报道如下.
作者：谭章梅；黄泽春；梁志为；张安利；余涵；侯浪 刊期： 2008年第05期
间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)是一种主要存在于骨髓的未分化多能细胞,具有分化为多种结缔组织细胞的潜能,可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、基质细胞、成纤维细胞和肌腱细胞等[1].
作者：王恒湘；郭子宽 刊期： 2008年第05期
