目的研究神经细胞突起生长诱向因子(β-Netrin)在大鼠脑内的基因表达.方法以地高辛标记的cRNA探针利用组织原位杂交技术检测β-Netrin mRNA在出生后30 d大鼠脑内的表达及其分布.结果(1)脑内β-Netrin mRNA主要定位于神经元;(2)脑内β-Netrin mRNA阳性细胞广泛分布于大脑皮层、边缘系统、小脑、脑干等处的神经核团及嗅球中.其中,梨状前皮质、杏仁核群、海马各区锥体层、小脑浦肯野细胞、小脑内侧顶核及间置核、斜方体内侧核和嗅球僧帽细胞等部位阳性信号较强;中等强度的阳性信号见于额叶皮质、丘脑外侧背核等处.结论原位杂交结果显示β-Netrin mRNA在成年大鼠脑内神经元中有表达,进一步验证了β-Netrin对脑内神经细胞突起的生长具有诱向作用.同时,由于β-Netrin在大鼠嗅觉传导相关通路和海马、大脑皮质内表达量较高,提示β-Netrin可能参与了嗅觉突触联系的形成及与学习记忆有关突触的建立.
作者：孟凡伟；郭慧云；周仁平；张成岗 刊期： 2004年第04期
目的研究依托咪酯(etomidate,ET)在急性分离的大鼠骶髓后连合核(sacral dorsal commissural nucleus,SDCN)神经元的药理学特性.方法采用制霉菌素穿孔膜片钳全细胞记录.结果在大鼠SDCN神经元,ET(10～3000μmol/L)在钳制电位为-40 mV时,可引起内向电流(IET),EC50为(33.35±3.07)μmol/L,该电流可被GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline)及氯通道阻滞剂印防己毒素(picrotoxin)以浓度依赖方式所阻断.结论ET在大鼠SDCN神经元可通过作用于GABAA受体而诱发氯通道电流,此作用可能和全麻状态下脊髓水平的麻醉效应有关.
作者：洪桢；王殿仕；李继硕 刊期： 2004年第04期
目的研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缩小局灶性脑缺血梗死灶的机制.方法用免疫组化ABC法检测在局灶性脑缺血模型上给予生理盐水或bFGF后早期生长反应蛋白-1(Egr-1),bFGF,碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)的动态表达.结果给药组在3 h～3 d各时间段梗死灶均有不同程度的缩小.对照组和给药组Egr-1表达均表现为3～6 h的增强过程,但给药组更强于对照组.对照组12 h见有bFGF表达增强,而bFGFR表达3 h到达高峰,6 h起下降,12 h时bFGFR的表达已恢复至正常水平(出现了配体和受体表达时相上不匹配).给药组bFGF表达提前且增强,3 h即见有bFGF表达增强,6 h时出现第一峰,从而与bFGFR 3～6h的表达增强过程相吻合.结论外源性bFGF能缩小梗死灶,该神经保护作用是通过Egr-1蛋白高表达使内源性bFGF的表达增高且提前,从而与bFGFR的表达增强过程重叠而实现的.
作者：陆锦标；刘颖；叶诸榕；施建英 刊期： 2004年第04期
目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂S-甲基异硫脲(S-methylisourea,SMT)对脂多糖(lipopo1ysaccharide,LPS)诱导多巴胺(DA)能神经元变性的保护作用及其机制.方法48只大鼠随机分成4组(n=12):磷酸缓冲液(PBS)对照组、LPS组、生理盐水治疗对照组和SMT治疗组;此4组又各分成1,7 d两个亚组.立体定向注射5μg LPS致大鼠脑黑质建立PD炎症模型,采用化学比色法检测1 d亚组黑质内NO释放量以及iNOS活性改变;RT-PCR检测iNOS mRNA的表达;酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组织化学染色观察7d亚组黑质DA能神经元的损伤情况.结果与PBS对照组相比,LPS注人黑质导致TH阳性细胞数下降至35%(P＜O.05);同时黑质内NO含量,iNOS活性及iNOS mRNA表达明显增高;SMT治疗组NO释放量,iNOS活性及iNOS mRNA表达显著降低(P＜0.01);TH阳性细胞数亦明显增多,达70%(P＜0.05),生理盐水治疗组对此无明显改善.结论iNOS上调是LPS诱导DA能神经元变性机制中重要的因素之一,iNOS特异性抑制剂SMT可以显著抑制LPS诱导DA能神经元变性及iNOS mRNA的高表达.
作者：黎钢；孙圣刚；马嵘；肖伟忠；童萼塘 刊期： 2004年第04期
目的运用改良消减杂交技术构建大鼠脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库,为寻找在脊髓损伤后的修复过程中起关键作用的分子提供帮助.方法在经典消减杂交的基础上引进SMART反转录、长距离PCR、磁性分离系统、离心柱色谱等方法建立改良消减杂交技术,通过两轮消减杂交构建差异表达基因的cDNA消减文库,并对文库中的差异基因进行批量克隆与生物信息学分析.结果将两轮消减杂交后的差异表达基因转化大肠杆菌JM109以建立差异表达基因文库,库容量大小为2×103.从文库中随机挑取90个克隆进行酶切鉴定与测序分析,得到40个差异基因序列,其中32个已知序列,8个新序列.结论通过改良消减杂交成功建立了脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库,为筛选在大鼠脊髓损伤修复过程中起关键作用的基因,进一步探讨脊髓损伤修复的分子机制奠定了基础.
作者：马振莲；李欣；赵忠良；刘少君 刊期： 2004年第04期
目的观察大鼠脊髓半切后ERK1/2活性的变化及发生变化的细胞类型.方法大鼠行脊髓半横断术后3 d,用免疫组织化学法和免疫荧光双标记法观察磷酸化ERK1/2的变化及其与各种神经细胞标记物的共存状况.结果观察到脊髓半切3 d大鼠的ERK1/2磷酸化程度明显升高.阳性细胞为分布于邻近损伤区周围的具有短突起的小胞体细胞.双标记表明其中的大部分阳性细胞为小胶质细胞和寡突胶质细胞.结论本研究提示脊髓半横断3 d,ERK1/2参与了小胶质细胞和寡突胶质细胞的活化,有可能在脊髓损伤的继发性过程中具有重要作用.
作者：程希平；王春婷；刘惠玲；焦西英；游思维；鞠躬 刊期： 2004年第04期
目的研究3-硝基丙酸(3-NPA)多次预处理对多巴胺能神经元的保护及即早基因N-myc在其中的作用.方法选择C57BL小鼠,应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)制造帕金森病小鼠模型,应用免疫组织化学方法观察3-NPA单次与多次预处理后小鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数量的改变;应用免疫组织化学及蛋白印迹(Western Blot)方法观察即早基因N-myc在中脑黑质中的表达及蛋白水平的变化.结果3-NPA单次预处理后,中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数量由MPTP组的27.3±5.6上升到59.3±11.2(P＜0.05),而3-NPA多次预处理后,阳性细胞数量上升至88.6±14.8(P＜0.01),单次预处理与多次预处理也有显著性差异(P＜0.05);在空白对照组,中脑黑质几乎看不见N-myc阳性细胞(4.1±0.5),经MPTP处理后,N-myc阳性细胞数量明显增加(89.3±12.7,P＜0.01),蛋白水平增加;3-NPA单次预处理后,中脑黑质N-myc阳性细胞数量与MPTP组比较无明显变化(81.8±13.6,P＞0.05);3-NPA多次预处理后,N-myc阳性细胞数量明显减少47.9±11.8(P＜0.05),N-myc蛋白水平也有相同的变化.结论3-NPA预处理对多巴胺能神经元有明显的保护作用,多次预处理较单次预处理效果更加明显,其机制可能与其抑制即早基因N-myc的表达,降低其蛋白水平有关.
作者：邓学军；孙圣刚；曹学兵；李红戈；梁直厚 刊期： 2004年第04期
目的观察短暂无镁处理诱导惊厥后发育不同阶段的神经元NMDA受体亚单位基因的表达,以期进一步阐明惊厥对发育不同阶段的神经元所造成的影响.方法以培养的发育中皮层神经元为研究对象,经短暂无镁处理诱导惊厥样放电,用real-time定量RT-PCR方法检测惊厥后NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B mRNA的表达.结果①培养6,17 d的神经元无镁处理后6 h NR1表达均较对照组增高(P＜0.01),前者增高更明显(P＜0.01).②培养6,17 d的神经元无镁处理后6 h NR2A表达均较对照组增高(P＜0.05).此后其表达较对照组降低(P＜0.01),增高及降低的程度在两者间无明显差异(P＞0.05).③培养6,17 d的神经元无镁处理后6 hNR2B表达均较对照组增高(P＜0.01),后者增高更明显(P＜0.05).此后其表达逐渐降低,在6及17 d的神经元其表达存在差异.结论短暂无镁处理诱导惊厥后在发育不同阶段的神经元NMDA受体亚单位基因表达不同.
作者：曹海燕；姜玉武；王静敏；潘虹；薄涛；吴希如 刊期： 2004年第04期
目的研究成年大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)诱导分化为神经元样细胞不同的方法,寻找它向神经细胞分化的佳条件.方法取纯度较高的BMSCs,通过不同的神经营养因子诱导法和抗氧化剂诱导法,进行抗巢蛋白(nestin)、神经元特异烯醇化酶(NSE)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学染色,观察相应的阳性细胞数.结果诱导第3天A组(EGF:表皮生长因子,bFGF:碱性成纤维细胞生长因子,RA:全反式维甲酸),B组(GDNF:胶质细胞系源性神经营养因子,BDNF:脑源性神经营养因子),C组(EGF,bFGF,GDNF,BDNF和RA)的Nestin阳性细胞数较多,其中以C组多,而D组(抗氧化剂)Nestin阳性细胞数少于前三组.A,B,C组的NSE,GFAP染色阳性细胞数较D组少,但D组有部分细胞发生死亡.诱导第7天A,B,C组的NSE,GFAP阳性细胞数较第3天时明显增多,C组多,B组其次,Nestin阳性细胞数比例较第3天时明显减少.而D组的NSE,GFAP阳性细胞数少于其第3天时;C组诱导成神经细胞比例较高,阴性对照组和空白对照组极少或无阳性细胞.此外,神经营养因子诱导法生成神经样细胞的比例都多于胶质样细胞.结论抗氧化剂诱导法分化诱导快,而神经营养因子诱导法分化诱导效率高,诱导后细胞生长状态明显好于前者,各种神经营养因子联合作用影响BMSCs的增殖和分化.
作者：叶民；陈生弟；陆国强；梁梁；刘卫国 刊期： 2004年第04期
目的观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)是否能改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能,以及其对脑缺血周边区脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法线栓法复制大鼠大脑中动脉梗死模型,皮下给予rhG-CSF,10μg/(kg.d),连续5 d.进行神经功能评分并采用免疫组织化学法观察脑组织中BDNF的表达.进行nestin和BDNF的免疫双标染色.结果手术7,14,21 d干预组的神经功能缺损评分分别为4.00±0.89,3.83±1.17,3.50±1.38,对照组分别为5.50±1.38,5.83±1.47,5.66±1.63,干预组明显低于对照组,差别有显著性(P＜0.05).干预组梗死边缘区的BDNF免疫阳性细胞数较对照组明显增加(P＜0.05).梗死边缘区可见nestin和BDNF双阳性细胞.结论粒细胞集落刺激因子可增加脑缺血之后梗死边缘区BDNF的表达和改善神经功能.
作者：赵延欣；吕传真；罗玉敏 刊期： 2004年第04期
RNA干扰(RNAi)是指生物体内利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱发序列特异的转录后基因沉默(PTGS)的现象,它可以通过抑制蛋白表达模拟基因敲除技术.RNAi主要通过dsRNA被核酸酶Dicer切割成21～25nt的小干扰RNA(siRNA),由siRNA介导识别并靶向切割同源mRNA分子而实现.随着研究的不断深入,RNAi的作用机制将逐步被阐明,其技术也将日趋完善和成熟,并将得到广泛的应用.本文就RNAi技术的研究进展及其在阿尔茨海默病、帕金森病等神经变性性疾病研究中的应用作一综述.
作者：吴云成；赵永波 刊期： 2004年第04期
脑不对称是机体普遍存在的生物学现象.研究证实,大脑的不对称性可以影响免疫功能.通过动物实验以及临床观察发现,大脑左右两半球对免疫功能具有相反的调节作用,而且,动物及人类行为不对称与免疫系统间也存在密切的关系.新近的研究表明脑不对称亦可影响细胞因子的产生.总之,脑不对称对免疫功能的调控存在异质性,这一发现不仅丰富了神经-内分泌-免疫调节网络的知识,也为临床某些疾病的研究开拓了更为广阔的领域.
作者：苏芸；李康生 刊期： 2004年第04期
人类基因组计划已经完成,这一伟大的成就标志着生命科学研究进入一个新时代--后基因组时代,其中包括蛋白质组(即蛋白质组学)的研究.双向电泳和质谱技术是蛋白质组学的核心技术,将这两种技术应用于神经科学研究,能够进一步了解神经系统复杂结构及其发育规律,揭示神经系统疾病发生机理,并为其诊断和新药研制提供有益的依据.
作者：郑秀娟；郑志竑 刊期： 2004年第04期
帕金森病(PD)是一种常见的老年神经变性疾病,它的发病机制与遗传因素和环境因素共同作用有关,但其内在的联系尚不十分清楚.α-synuclein可能起到联系基因和环境因素在PD中的发病机制的作用,而多巴胺导致的氧化应激则可能是神经变性的共同途径.本文就α-synuclein和氧化应激在PD发病机制中作用等方面的研究作一综述.
作者：戚辰；刘振国 刊期： 2004年第04期
作者： 刊期： 2004年第04期
