目的探讨NMDAr(N-甲基-D-天冬氨酸受体)在神经细胞膜表面定位,对比不同成像方法的特点,建立纳米尺度神经细胞膜表面蛋白单分子三维标记的免疫细胞化学新方法.方法应用原子力显微镜,对分布在云母表面的抗NMDAR1亚单位IgG-葡萄球菌蛋白A-胶体金颗粒免疫标记复合物分子进行扫描,明确其特定的三维结构作为对照标准,然后扫描结合了免疫标记复合物分子的神经细胞膜表面,对表面形貌作出对比后确定目的抗原的定位和复合物三维结构.并与光镜、激光共聚焦、扫描电镜等方法进行对比.结果在空白云母表面,免疫复合物分子在原子力显微镜下呈现出均匀分散粒径为49 nm的特征性球形结构.在神经元表面结合免疫标记物后可以发现有大量的粒径为53 nm的球形或双球形(短棒状)结构,颗粒均匀,截面为双峰或单峰.光镜下染色成片状结果,在共聚焦显微镜下荧光呈颗粒点状分布,扫描电镜结果为单个或结合颗粒,缺乏三维成像能力.结论原子力显微镜下免疫胶体金标记技术可以在纳米尺度对目的膜受体蛋白进行定位和表面三维结构测定.NM-DA受体蛋白可以结合一个或两个胶体金复合物,与传统成像手段相比,原子力显微镜下胶体金标记方法可以对单个膜NMDA受体蛋白抗原进行定位、定性、定量标记测定.
作者：郁毅刚；徐如祥；姜晓丹；蔡颖谦；柯以铨；Qian-Ming Yao 刊期： 2005年第02期
目的用影响突触前细胞外钙内流及或细胞内钙储池释放钙的措施,研究大、小微抑制性突触后电流(mIPSCs)的一些特性.方法采用盲法电压钳全细胞记录技术.结果①无钙液中加或不加EGTA(200 mmol/L)灌流时,均可逆地使大mIPSCs较正常含钙液灌流时明显增多,小mIPSCs的平均频率明显下降;增加细胞外液钙(4 mmol/L)浓度,小mIPSCs的频率增加,大mIPSCs变化不明显.Cd2+(100 μmol/L),仅轻度降低小mIPSCs平均频率至对照组的(87.3±30.0)%(n=13).②carbachol(100 μmol/L)使小mIPSCs增加至对照组的315.63%.然而,无钙液中加carbachol,小mIPSCs不增加.含钙液和无钙液中加carbachol均可使大mIPSCs的比例增加.③Thapsigargin(8 μmol/L)可使小mIPSCs的平均频率增加至对照组的(132.1±27.4)%.④U73122(40μmol/L)可使小mIPSCs的平均频率降低至对照组的(74.7±29.6)%.⑤Procaine(2 mmol/L)及咖啡因(10 mmol/L)均可降低小mIPSC的平均频率.较高浓度的兰尼定(30-50 μmol/L)也降低小mIPSCs的频率.结论改变灌流液的钙浓度,小mIPSCs的频率受到明显影响.大mIPSCs的出现或增加主要与钙储池释放Ca2+的机制有关.
作者：王红；蔡浩然 刊期： 2005年第02期
目的观察多巴胺和乙酰胆碱对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的原代胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在转录和翻译水平上的影响.方法培养原代胶质细胞,多巴胺和乙酰胆碱预处理30 min后,加入LPS刺激12 h和24 h,分别采用RT-PCR和细胞免疫组化来观察iNOS在转录和翻译水平的变化,利用Griess方法测量了上清液中内源性生成的NO.结果多巴胺能明显抑制iNOS的转录;乙酰胆碱在转录水平上对iNOS无影响,但二者在蛋白水平上都能够抑制iNOS的表达和NO的生成.结论多巴胺和乙酰胆碱通过不同的方式抑制LPS刺激的原代胶质细胞iNOS的表达.
作者：刘佳福；刘振国；周海燕；陈生弟；陆国强；梁梁 刊期： 2005年第02期
目的探讨谷氨酸对大鼠背部皮神经自发传入放电的影响.方法采用体内分离脊神经背侧皮支单纤维记录方法,在皮神经感受野注射谷氨酸受体的激动剂谷氨酸钠(0.3 mmol/L,10μl),观察对皮肤感觉神经传入放电的影响及时程变化.结果将谷氨酸钠注射入Aδ和C类感受单位的感受野,注射过程中(7 min)和注射后(10 min)每分钟的平均传入放电数与注药前比较均显著增加(P＜0.05).但Aβ感受单位注射过程中和注射后平均传入放电数与给药前相比无显著性差异(P＞0.05).同时还发现谷氨酸钠对Aδ和C类初级传入末梢的兴奋作用可见于所观察的整个时段.结论谷氨酸可能参与外周痛敏化过程.
作者：曹东元；郭媛；张琪；田雨灵；王会生；赵晏 刊期： 2005年第02期
目的分析神经胶质瘤中缓激肽B2受体表达水平与病理分级的相关关系,为缓激肽及其类似物的临床应用提供实验依据.方法采用神经胶质瘤患者术后标本,用H&E染色进行神经胶质瘤的病理诊断及分级,用免疫组化法和Western Blot法测定不同病理分级的神经胶质瘤中缓激肽B2受体的表达水平.结果H&E染色显示26例神经胶质瘤中Ⅰ级为9例,Ⅱ级为9例,Ⅲ级为8例,Ⅳ级为0例.胶质瘤边缘水肿带不表达缓激肽B2受体,B2受体位于胶质瘤细胞.Western Blot结果显示在三组不同病理分级的神经胶质瘤中,B2受体表达水平为Ⅰ级与Ⅱ级(39480.88±5119.96对51354.25±6168.77,n=8,t=2.447,P＜0.05),Ⅰ级与Ⅲ级(39480.88±5119.96对73032.13±8802.71,n=8,t=7.710,P＜0.001),Ⅱ级与Ⅲ级(51354.25±6168.77对73032.13±8802.71,n=8,t=5.704,P＜0.001);神经胶质瘤中缓激肽B2受体表达水平与其病理分级Ⅰ级～Ⅲ级呈显著正相关(r=0.895,P＜0.001),呈Ⅰ级＜Ⅱ级＜Ⅲ级状况.免疫组化法显示在三组不同病理分级的神经胶质瘤中,B2受体阳性区域面积占切片面积的百分比值为Ⅰ级与Ⅱ级(3.54%±1.51%对8.47%±3.45%,n=8,t=3.698,P＜0.01),Ⅰ级与Ⅲ级(3.54%±1.51%对15.94%±1.68%,n=8,t=15.562,P＜0.001),Ⅱ级与Ⅲ级(8.47%±3.45%对15.94%±1.68%,n=8,t=5.505,P＜0.001);神经胶质瘤中缓激肽B2受体阳性区域面积占切片面积的百分比值与其病理分级Ⅰ级～Ⅲ级呈显著正相关(r=0.878,P＜0.001),呈Ⅰ级＜Ⅱ级＜Ⅲ级状况.结论神经胶质瘤B2受体表达水平与其病理分级Ⅰ级～Ⅲ级呈显著正相关,提示利用缓激肽及其类似物开放血肿瘤屏障的疗效差异可能与B2受体表达水平有关.
作者：赵逸松；薛一雪；刘云会；付伟；姜乃佳；安平；王萍；杨智航；王玉勤 刊期： 2005年第02期
目的观察6-羟多巴胺毁损的帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型大鼠脚桥核(pedunculopontine nucleus,PPN)神经元放电频率和放电形式的变化.方法采用在体玻璃微电极细胞外记录法,记录正常对照组和PD模型组大鼠PPN神经元的电活动.结果对照组和PD组大鼠PPN神经元的放电频率分别为(9.0±0.8)Hz[(0.5-25.2)Hz,n=56]和(16.1±1.6)Hz[(1.2-49.7)Hz,n=57],PD组大鼠的放电频率显著高于对照组(P＜0.001).在对照组大鼠脚桥核,68%(38/56)的神经元呈现规则放电,27%(15/56)呈现不规则放电,5%(3/56)为爆发式放电;在PD组大鼠脚桥核,具有规则、不规则和爆发式放电的神经元比例分别为39%(22/57)、47%(27/57)和14%(8/57),PD组大鼠具有不规则放电的神经元比例明显高于对照组(P＜0.05).结论PD大鼠PPN中神经元的放电频率增高和不规则放电增多,这可能在帕金森病的病理生理变化中具有重要作用.
作者：王勇；张巧俊；刘健；冯洁；褚玉霞；高蕊；刘娅萍 刊期： 2005年第02期
目的探讨高浓度锌损伤后PC12细胞的死亡类型和肌苷对该死亡类型的影响.方法用MTT比色法测定不同浓度氯化锌(50、100、200、400 μmol/L)或肌苷(0.1、0.5、1.0、2.0 mmol/L)作用PC12细胞12 h后的存活率;用Hoechst33342/PI荧光双染色、Annexin-V结合实验及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测200μmol/L氯化锌、2.0 mmol/L肌苷作用PC12细胞12 h后细胞死亡类型的变化.结果锌从100 μmol/L作用浓度开始可明显降低细胞存活率;200 μmol/L锌可引起(56.5±7.2)%坏死、(24.4±2.5)%的正常和(19.1±7.6)%的细胞凋亡.肌苷从0.5 mmol/L作用浓度开始可显著提高锌损伤的细胞存活率;与单独锌作用相比,2.0 mmoL/L肌苷降低锌引起的坏死细胞数至(27.9±2.2)%,而使正常和凋亡细胞数分别增加到(33.8±2.8)%和(38.4±4.9)%.结论随锌浓度的增高PC12细胞的存活率逐渐降低,肌苷可浓度依赖性地保护锌致伤的PC12细胞;高浓度锌可造成PC12细胞的坏死和凋亡,但肌苷能降低坏死而不是使细胞凋亡.
作者：史明；郑春霞；游思维 刊期： 2005年第02期
作者： 刊期： 2005年第02期
作者： 刊期： 2005年第02期
作者： 刊期： 2005年第02期
伏核是脑奖赏中枢的重要组成部分,参与成瘾药物的强化、耐受、成瘾过程及药物戒断综合征的表达.对伏核功能解剖、受体激动与信号转导、基因转录与分子表达、神经元可塑性与行为变化等方面的深入研究,将帮助我们揭示药物成瘾的中枢机制,进而为临床戒毒治疗提供理论依据.
作者：衡立君；高国栋 刊期： 2005年第02期
