目的 通过小鼠坐骨神经损伤模型,比较C57BL/6小鼠和B6-St小鼠(Short tail mice)外周神经再生能力的差异.方法 选用C57BL/6小鼠作为对照组,B6-St小鼠为实验组,每组各10只,雌雄各半,夹伤各组小鼠左侧坐骨神经,建立周围神经的损伤模型.手术后8d、12d、16d进行足迹实验,计算坐骨神经功能指数(SFI);手术后21 d,进行电生理检测,记录复合肌动作电位(CMAPs);计算小鼠双侧腓肠肌湿重比;夹伤一侧的腓肠肌制作病理切片并染色,检测肌纤维横切面积(CSA).结果 与C57BL/6小鼠相比,B6-St小鼠术后8d、12d、16 d SFI值略有下降(P＞0.05);B6-St小鼠坐骨神经夹伤处的复合肌动作电位和C57BL/6小鼠趋于一致(P＞0.05);腓肠肌湿重比组间差异无统计学意义(P＞0.05);根据病理切片统计分析,两组小鼠肌纤维横截面积CSA相似(P＞0.05).结论 B6-St小鼠与C57BL/6小鼠的周围神经再生能力相类似.
作者：吴刘成；杨文杰；范海华；易剑峰；田家玮；史祎敏；蒋茂荣 刊期： 2018年第02期
目的 探讨体外筛选效率较高的引导核糖核酸(guide ribonucleic acid,gRNA)的方法.方法 以家兔扭转蛋白2A(torsin family 2 member A,TOR2A)基因的gRNA设计和筛选为例,介绍gRNA简单的体外筛选方法.首先根据TOR2A基因的外显子序列在线设计gRNA,选择3条gRNA序列(也可更多),将其分别插入到T7启动子之后,体外转录gRNA并纯化备用.设计包含gRNA打靶序列的一对引物,以基因组DNA为模板进行PCR扩增并胶回收PCR产物.将gRNA,PCR产物和Cas9内切酶组成的体系进行酶切实验,琼脂糖电泳判定gRNA引导的酶切效率.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示第1条gRNA未能引导Cas9内切酶对含打靶位点的PCR产物进行DNA酶切,第2条gRNA(GCTTGTCCATCTCGTCGAAG)和第3条gRNA(TCTCTTCCTCTTCGACGAGA)引导Cas9进行了比较彻底的酶切,第2、3条gRNA可用于后续研究.结论 此体外筛选方法是一种简单、可行和实用的gRNA的体外筛选策略.
作者：成大欣；徐丽然；于清清；高守翠；王晓靖；刘懿；刘恩岐；赵四海 刊期： 2018年第02期
目的 测定和比较东方田鼠洞庭湖种群(DTH)(长江亚种)和青铜峡种群(QTX)(指名亚种)的繁殖及生长特性.方法 东方田鼠雌雄1∶1长期同居法饲养繁殖,观察两种群东方田鼠的窝产仔数、胎间隔、初生体质量、离乳体质量等繁殖指标.两种群田鼠雌雄各选30只,测定不同时间点的体质量,并用Von Bertalanffy模型方程拟合其生长曲线.结果 DTH窝产仔数(4.70±1.15)只,胎间隔(30.78±10.21)d,出生体质量(4.09±0.13)g,离乳体质量(27.31±1.10)g;QTX窝产仔数(3.58±1.00)只,胎间隔(35.60±12.48)d,初生体质量(4.37±0.09)g,离乳体质量(28.22±0.46) go从生长曲线可见,两种群东方田鼠的体质量性二型分化分别出现在14d和28 d,雄性田鼠的体质量显著高于雌鼠.拟合结果显示,两种群田鼠雌性体质量生长曲线体质量拐点出现时间比雄性鼠早.结论 DTH田鼠繁殖能力较QTX高,两个种群田鼠雌雄鼠的体质量均有明显的性二型分化特征,雌体较雄体早熟.
作者：柏熊；林金杏；王晓东；冯洁；高捷；谢建云 刊期： 2018年第02期
目的 建立人源非小细胞肺癌(NSCLC)异种移植模型,鉴定移植模型与原代肿瘤组织间组织形态结构、病理结构的一致性.方法 取临床肺癌新鲜手术切除组织块26例,12h内移植于裸小鼠背部皮下组织内,肿瘤长至500 mm3取出再传至下一批裸小鼠背部,如此重复,稳定传代至第4代,分别采用HE染色和免疫组织化学比较原代患者肿瘤组织与移植瘤组织结构和病理结构是否具有一致性.结果 成功建立并稳定传至第4代的患者来源的移植瘤(PDX)模型共9例,6例肺鳞癌,3例肺腺癌.PDX模型保留了原代患者肺癌细胞的异型性和原有排列结构.病理学特性有些变化,但没有统计学意义上的差异.结论 建立的NSCLC PDX模型保留了原代患者肺癌细胞的异型性、原有排列结构和病理学特性,为临床前药效的个性化筛选评估以及肺癌的研究提供了有效工具.
作者：钱丽萍；余飞；瞿叶清；翟青新；王玉娟；方天 刊期： 2018年第02期
目的 研究硒化卡拉胶(KSC)对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导的小鼠体液免疫应答的影响.方法 随机分成7个组,每组7只ICR小鼠.分组:阴性对照组(生理盐水)、单纯抗原组(18EU HepA-1)、铝佐剂组[Al(OH)3 0.3 mg+18EU HepA-1]、KSC实验组(KSC 1 mg+18EU HepA-1、KSC 0.5 mg+18EU HepA-1、KSC 0.25 mg+18EU HepA-1、KSC 0.1 mg+18EU HepA-1),皮下多点免疫注射,注射总体积300μL,免疫1次.免疫注射后及其后4周、8周、12周、16周尾静脉采血,取血清用间接酶联免疫吸附法测定抗-甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体滴度.在实验期间,观察小鼠的健康状况,并于免疫后16周,取KSC佳剂量组及阴性对照组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏组织,制备病理切片,进行对比观察.结果 除阴性对照组外,其余各组在各个检测时间点均检测到抗HAV IgG抗体,且存在先升高后降低的趋势,铝佐剂组在12周达到峰值,其余各组在8周达到峰值.KSC 0.5 mg组在8周、12周抗体水平高于单纯抗原组(t=3.103,t=2.573,P＜0.05),KSC 0.25 mg组在12周抗体水平高于单纯抗原组(t=2.602,P＜0.05).本次实验的佳剂量为KSC 0.5 mg.试验期内,观察小鼠各项生理指标未见异常,KSC 0.5 mg组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织均未观察到病变.结论 KSC能够作为佐剂增强HepA-1诱导的小鼠体液免疫反应.
作者：贾森泉；金晓；李晓红；王海璇；胡凝珠；胡云章 刊期： 2018年第02期
目的 探讨鸭肠炎病毒(DEV)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)中γ干扰素(IFNγ)的表达情况及初步机制.方法 分别提取感染DEV后24h、36h、48 h、60h的DEF总RNA,反转录成cDNA,使用特异性引物,运用荧光定量PCR方法,检测IFNγ及几个相关干扰素刺激基因(ISGs)mRNA水平的变化.结果 感染DEV的细胞相对于未感染的细胞,删的mRNA在24 h、36 h、48 h、60 h均显著上调,且相关ISGs包括抗黏液病毒基因(Mx)、DEAD框蛋白50(DDX50,是一种ATP依赖的RNA解旋酶)、2'-5'寡腺苷酸合成酶L(OASL)等基因的mRNA表达水平也均显著上调.结论 DEV感染DEF能够诱导IFNγ产生及相关ISGs表达的上调.
作者：李思琪；尹海畅；赵丽丽；王怡平；金建丽；陈洪岩 刊期： 2018年第02期
目的 建立用于牛源性样本中牛副流感病毒3型(BPIV3)RT-PCR检测方法.方法 选择已发表的BPIV3神经氨酸酶(HN)基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物,建立BPW3 RT-PCR方法.并对方法的特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价.同时用建立的RT-PCR方法检测137份牛源性样本.结果 建立的BPIV3 RT-PCR方法与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;可检测病毒小滴度为6 lgTCID50/mL;BPW3cDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带;应用建立的方法检测137份牛源样本,核酸阳性率为14.6％.结论 建立的BPIV3荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本中BPIV3核酸的检测.
作者：王吉；付瑞；李晓波；王淑菁；王莎莎；李威；秦骁；巩薇；岳秉飞；贺争鸣 刊期： 2018年第02期
目的 了解福建省实验兔球虫的感染情况.方法 采集福建省6个地级市2家实验兔生产企业和12家使用单位的实验兔粪样,通过饱和盐水漂浮法对卵囊进行收集,测定每克粪便中卵囊数(OPG)并对孢子化的卵囊进行鉴定.结果 本次调查共收集和分析了195个样本,阳性样本28个,总感染率为14.36％,OPG平均值为2 333.33.2个实验兔生产企业感染率为22.22％,12家实验兔使用单位感染率为13.10％.共检出10种兔球虫,均为混合感染,以斯氏艾美耳球虫为优势虫种.普通级实验兔的球虫感染率为15.30％,清洁级实验兔未见球虫感染.幼兔球虫检出率高,感染率为17.50％,青年兔次之,成年兔感染率低,感染强度高.我省生物制药企业实验兔球虫感染强度大,OPG平均值为5 678.39,感染率也较高.在医院、高校等科研单位,实验兔也存在不同程度的球虫感染.结论 福建省实验兔球虫感染率较低.但日常工作中还是应进一步加强实验兔球虫病的监测与防治,并建议将兔球虫病纳入国家标准中普通级实验兔必要时的检测项目.
作者：温福利 刊期： 2018年第02期
目的 建立一种啮齿类螺杆菌(helicobacter rodentium)的快速检测方法.方法 根据啮齿类螺杆菌16S rRNA的基因序列设计了1对特异性引物,建立了啮齿类螺杆菌SYBR Green Ⅱ荧光定量PCR检测方法.结果 在102拷贝/μL～107拷贝/μL浓度范围中标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系.该方法特异性良好,仅对啮齿类螺杆菌产生特异性扩增,且灵敏度可达到30拷贝/μL,组内和组间的变异系数均小于2％,具有良好的重复性.结论 建立了SYBR GreenⅡ荧光定量PCR检测啮齿类罗杆菌的一种方法.
作者：孙靖谕；谢灵志；冯洁；于宁；钱淼；曹舒扬；张泉 刊期： 2018年第02期
目的 探讨壬二酸作为佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其佐剂效应.方法 分别将四种不同剂量的壬二酸(0.5 mg,1 mg,2 mg,3 mg)与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为佐剂组1、佐剂组2、佐剂组3、佐剂组4,同时设空白对照组、单纯抗原组、铝佐剂组,共免疫1次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAV IgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于8、12周达到峰值.免疫后4周,佐剂组4(壬二酸3 mg)产生的抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平与铝佐剂组相比较差异有统计学意义(P＜0.05,t=2.640).同时,佐剂组4在免疫后4周、8周和12周产生的抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平较高,显著高于单纯抗原组(P＜0.05,t值分别为3.134、2.751、2.743).结论 适当剂量的壬二酸可快速、显著提高HepA-1诱导小鼠的体液免疫应答,有望成为一种新型的人用疫苗佐剂.
作者：李晓红；金晓；贾森泉；胡凝珠；胡云章；李建芳 刊期： 2018年第02期
目的 探讨弹针进针法在大鼠针刺实验中应用的优势和劣势,为大鼠的针刺实验研究提供技术支持.方法 应用弹针进针法和单手进针法两种进针方法针刺6月龄SD雄性大鼠,分别取大鼠的肾俞和后三里(足三里)穴,并以弹针法与单手进针法进针的平均耗时、进针过程中尝试针刺的平均次数、留针过程中(15 min)毫针的脱落情况为评价依据,评估弹针法在动物针刺实验中的应用并加以分析.结果 针刺后三里(足三里)时,单手进针法平均耗时优于弹针进针法,且尝试针刺的平均次数较少;针刺肾俞时,弹针进针法的平均耗时和尝试针刺的平均次数均少于单手进针法.留针过程中,弹针进针法毫针的脱落情况优于单手进针法.结论 在方便弹针的取穴和体位下,弹针进针法能明显缩短进针用时,提高进针的成功率,留针过程中还能减少动物的应激反应,避免毫针脱落,可以在针刺实验中推广应用.
作者：张伟波；徐平；吴丽洁；高原；温珮彤；虎力 刊期： 2018年第02期
实验动物是生命科学研究和生物医药研发的载体,生命科学和生物医药产业的发展也极大地推动了实验动物行业的快速发展.“十三五”国家科技创新发展规划也对实验动物提出了新的发展方向和任务,如何稳步有序发展实验动物产业值得深入探讨.尽快修订并发布《实验动物管理条例》,加大对实验动物科技工作的支持,发挥各级学会、协会和联盟的作用,加强合作,破解难题,抓住机遇,对于促进实验动物产业化发展具有重要意义.
作者：郭大伟；朱冠；金东庆 刊期： 2018年第02期
实验动物是医科院校教学科研工作中的重要载体和工具,其在医科院校教学与科研工作中扮演着重要角色,实验动物管理工作直接影响着院校教学及科研质量与效率,其中信息化管理是未来实验动物管理的发展方向.本文着重分析了实验动物信息化管理应该具备的便捷高效、规范准确、实时跟踪、可追溯性、数据共享等特点,介绍了我校实验动物信息化管理过程中,在动物饲育管理、设施监控管理、授权管理、信息监控管理、仪器预约管理、实验管理与教学管理等方面采取的主要措施,为广大医科院校的实验动物管理工作提供参考.
作者：李莉；赵善民；崔淑芳 刊期： 2018年第02期
通过阐述实验动物微生物监控的理念,结合自身实际情况,从环境质量控制、动物质量控制、人员管理等三个主要控制点对高校实验动物屏障设施微生物监控管理进行了探讨,以期对高校实验动物屏障设施微生物监控管理提供有益借鉴,使其制定出符合自身设施的动物微生物监测计划.
作者：彭丽娜；王朝霞 刊期： 2018年第02期
理想的动物模型是人类探究疾病、进行基础医学研究的重要工具,对人类疾病机理研究和药物及疗法的有效性和安全性评价有着不可替代的作用.随着人类科学的不断进步,对于利用高等动物作为实验对象开展相关研究的需求与日俱增,其中非人灵长类占有很大的比例.由于没有遗传背景均一的近交系猴,因此只能通过使用更多的实验动物来消除因个体间差异而导致的实验误差.经体细胞克隆技术而产生的实验猴,其遗传背景完全一致,可有效地减少个体间的差异,进而减少实验中非人灵长类实验动物的用量,从整体上提升非人灵长类实验动物福利.
作者：王立娜；陆勇；孙强 刊期： 2018年第02期
建立检测兔斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)环介导等温扩增技术(LAMP)的方法.方法 根据E.stiedai的ITS 1-5.8sRNA-ITS2基因序列设计特异引物,通过优化反应条件,建立E.stiedai的LAMP检测方法.结果 25μL的反应体系中Bst聚合酶的优添加量是1.5 μL,DNA的优添加量是75 ng,环引物、内引物和外引物的优浓度依次是0.8 μmol/L、1.6 μmol/L和0.15 μmol/L,在63℃反应1h后能特异性地扩增目的基因,并且具有较高的灵敏度.结论 建立了E.stiedai的LAMP检测方法,为E.stiedai感染的快速检测提供了新思路.
作者：温福利 刊期： 2018年第03期
目的 评价刺山柑果实精制提取物对弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的治疗效果.方法 采用弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原为造模剂分别建立大鼠类风湿性关节炎模型,测定刺山柑精制提取物对关节炎大鼠足趾肿胀抑制率和相关炎症因子表达的影响.结果 刺山柑精制提取物对大鼠佐剂性关节炎继发性病变具有一定的治疗作用,治疗效果均持续至实验结束,其中刺山柑高剂量的抑制率基本稳定在20％以上,对大鼠关节周围组织滑膜内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)有一定下调作用.刺山柑提取物对Ⅱ型胶原诱导的大鼠类风湿关节炎足趾肿胀也具有显著抑制作用,100 mg/kg剂量组在给药后3d,开始出现一定程度的抑制足关节的肿胀,给药后14d抑制率达到40.3％ (P＜0.05).结论 刺山柑精制提取物具有抑制弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的作用,能有效缓解其关节附件的肿胀,其作用机制可能是通过下调TNF-0c、IL-1、IFN-α等相关炎症因子的表达.
作者：周海凤；乐心逸；王娴娴；丁广宇；李默影；沈龙海；吴彤 刊期： 2018年第03期
目的 评估恩度联合顺铂治疗恶性腹腔积液的疗效及增效机制.方法 建立小鼠H22肿瘤腹水模型,随机分为生理盐水组、单独恩度组(10 mg/kg/d)、单独顺铂组(2.5 mg/kg/5 d)和恩度顺铂联合组1(每日给予恩度)、联合组2(隔日给予恩度),每组18只.治疗结束后每组取6只动物腹水样品进行蛋白浓度、红细胞数量、肿瘤细胞数量、肿瘤细胞凋亡比例测定,其余小鼠观察各组荷瘤寿命,以对照组基本死亡为实验结束的节点.结果 (1)与生理盐水组相比,恩度、顺铂单独或联合处理组给药期间体质量、腹围增长速度和腹水量均显著降低(P＜0.01),其中联合组小鼠体质量、腹围增长速度和腹水量显著低于单纯恩度或顺铂组小鼠(P,＜0.01).(2)联合组2小鼠腹水中红细胞含量显著低于生理盐水组、单纯恩度组和单纯顺铂组(P＜0.01).生理盐水组小鼠腹水中肿瘤细胞数量显著高于恩度、顺铂单独或联合处理组(P＜0.01).生理盐水组小鼠腹水中肿瘤细胞凋亡率显著低于单纯顺铂组、联合组1和联合组2(P＜0.01),但与单纯恩度组相比差异无统计学意义.(3)Logrank分析显示恩度联合顺铂对于小鼠的生存时间有显著延长作用(P＜0.01).结论 恩度和顺铂联用具有协同作用,可有效抑制小鼠腹水产生,减少腹水中红细胞渗透率,延长小鼠生存期;其中每日给予恩度效果优于隔日给予.
作者：严俊；卢国丰；王纯；闵新 刊期： 2018年第03期
目的 获得自然杀伤(NK)细胞缺陷的小鼠动物模型,并研究溶酶体运输调节因子(Lyst)基因的功能.方法 采用CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠的Lyst基因:针对小鼠Lyst基因编码区第50个外显子,设计CRISPR/Cas9靶点引物(sgRNA),并重组构建pUC57-Lyst-sgRNA载体.将重组质粒体与Cas9质粒分别利用T7 RNA聚合酶体外转录为mRNA,并按比例显微注射入小鼠受精卵,将受精卵移植到受体动物.获得子代小鼠后,利用PCR扩增和测序方法筛选Lyst基因发生改变的动物个体.结果 显微注射移植后获得7只F0代基因敲除小鼠,且毛色均发生了明显的变化.结论 利用CRISPR/Cas9技术可以构建Lyst基因缺陷小鼠,外观表型与已有的文献报道一致.
作者：艾东旭；钟德刚；孙菲；李钰；李崇；秦佟童；高梦樵；董施施；孙兆增；李莲瑞 刊期： 2018年第03期
目的 探讨大鼠放射性心脏损伤(RIHD)模型的建立及观察不同时间点超声心动图、心电图及血清标志物的变化规律.方法 清洁级SD雄性大鼠90只,随机分为正常对照组和照射组,其中照射组分为5 Gy、10 Gy、20 Gy、30 Gy 4个不同剂量组,每组18只,瓦里安直线加速器分别给予不同剂量照射心脏,照射后2周、4周、12周末分批处死大鼠.处死前称量大鼠体质量,超声测左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP),记录心电图,酶联免疫法检测大鼠血清肌酸激酶同工酶(CKMB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ变化(CTnⅠ),称取心脏质量.结果 同正常对照组比较,照射组大鼠随照射剂量增加,LVEF、LVSP逐渐下降,LVEDP逐渐上升(P＜0.05或P＜0.01);心电图随照射剂量增加,心率加快,ST段抬高明显(P＜0.05或P＜0.01);血清CKMB、CTnⅠ值不同程度升高(P＜0.05或P＜0.01);30 Gy组同20Gy组比较,检测指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单次20 Gy照射大鼠全心,至第4周末,发生大鼠RIHD,模型制备成功.
作者：马金柯；高世乐；胡宗涛；王崇；高杉；董六一；刘阳；唐正中 刊期： 2018年第03期
目的 检测睡眠不足对大鼠体质量、部分血液指标、激素水平及免疫水平的影响,研究睡眠对青少年生长发育的作用.方法 利用一种平台式睡眠剥夺仪构建小鼠慢性睡眠剥夺模型,持续观察20d.观测睡眠剥夺对小鼠体质量及部分血液学指标,血清中皮质酮、生长激素、白介素-2及脾脏皮质酮受体水平,MicroCT检测小鼠骨量指标.结果 与作息正常对照组小鼠比较,睡眠剥夺组小鼠体质量及血液学指标,血清中皮质酮、生长激素、白介素-2(IL-2)及脾脏皮质酮受体(GR)水平都都出现明显变化.MicroCT检测表明,睡眠剥夺组小鼠骨量指标显著劣于对照组.结论 睡眠不足影响小鼠正常生长发育,对小鼠整体的免疫功能和神经系统功能等造成潜在的损害.提示睡眠在青少年生长发育中具有重要作用.
作者：张雅荃；杨文静；林丽芳；阮文婕 刊期： 2018年第03期
目的 尝试采用多层试验组合策略筛查不同浓度的1,2-己二醇眼刺激/腐蚀性.方法 采用自下而上的组合策略,即以“鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)”和“牛眼角膜混浊/渗透性试验(BCOP)”两项不同敏感程度的体外方法逐层筛查有刺激性的1,2-己二醇浓度范围,后以兔眼刺激试验(Draize试验)确认其眼刺激性的安全范围.结果 HET-CAM试验:体积分数0.625％及以下浓度的1,2-己二醇无刺激性,体积分数1.25％有轻刺激性,体积分数2.50％有中度刺激性,体积分数5.00％～10.0％有强刺激性/腐蚀性.BCOP试验:体积分数2.50％～5.00％浓度的1,2-己二醇有轻刺激性或刺激性,体积分数10.00％有严重腐蚀性.经Draize试验确认体积分数5.00％浓度的1,2-己二醇无刺激性,体积分数10.00％有轻刺激性.结论 在本试验条件下,1,2-己二醇无眼刺激性的高浓度为体积分数5.00％.
作者：陈秀娟；黄宇锋；刘香梅；庞增雄；江漪；李培宁；李光先；陈梓灵；孙侠；王强 刊期： 2018年第03期
