本研究旨在观察毛钩藤碱对人乳腺癌细胞的抑制作用,并探讨其分子机制.选取人正常乳腺上皮MCF-10A细胞、乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞作为研究对象,采用CCK-8法检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),采用Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3以及胞浆中细胞色素C (cytochrome C,Cyt C)的蛋白水平.结果显示,毛钩藤碱可显著降低MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞存活率,且该作用呈时间和剂量依赖性(P＜0.05);毛钩藤碱作用MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞48 h的IC50分别为447.79和179.06μmol/L;毛钩藤碱可诱导MDA-MB-231细胞发生凋亡和MMP去极化(P＜0.05),促进线粒体释放Cyt C(P＜0.05),激活caspase 9和caspase 3 (P＜ 0.05),这些作用均可被线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)特异性阻断剂环孢素A (cyclosporin A,CsA)显著抑制(P＜0.05);此外,毛钩藤碱显著下调MDA-MB-231细胞Bcl-2蛋白水平并上调Bax蛋白水平(P＜0.05).以上结果提示,毛钩藤碱可诱导MDA-MB-231细胞发生凋亡,这可能与其调低Bcl-2/Bax蛋白比值,从而引起MPTP持续开放和Cyt C释放,终导致caspase 9和caspase 3活化有关.
作者：黄器伟；翟娜娜；黄涛；李道明 刊期： 2018年第01期
本研究旨在探索巨噬细胞在骨骼肌损伤修复中的作用及其机制.将小鼠随机分为损伤组、未损伤对照组、剔除组和剔除对照组.损伤组和剔除组小鼠用钝物击打构建骨骼肌挫伤模型,剔除组和剔除对照组小鼠用氯膦酸盐脂质体腹腔注射构建巨噬细胞剔除模型.骨骼肌钝挫伤后1、3、7和14d取双侧腓肠肌,HE和Masson染色观察损伤骨骼肌再生和纤维化瘢痕愈合过程,real-time PCR及Western blotting检测骨骼肌中炎症因子、趋化因子和氧化应激因子表达变化.结果显示,骨骼肌损伤后14d,损伤组组只存在少量再生肌纤维,而剔除组存在大量再生肌纤维,两组肌纤维直径差异具有显著性(P＜0.05).伤后14d,剔除组胶原纤维面积所占百分比显著高于损伤组(P＜ 0.01).与未损伤对照组相比,损伤组多种促炎细胞因子、趋化因子和氧化应激因子表达均显著上调.与损伤组相比,剔除组中多种促炎细胞因子、趋化因子和氧化应激因子的表达在损伤后期(损伤后7～14 d)均显著增加.以上结果提示,骨骼肌损伤修复过程中多种炎症因子、趋化因子和氧化应激因子表达上调,剔除巨噬细胞后,上述因子的表达在损伤后期进一步上调,且骨骼肌再生能力受损,纤维化修复加剧.这些结果表明巨噬细胞在骨骼肌损伤修复过程中发挥了重要作用,炎症和氧化应激可能参与了剔除巨噬细胞损害骨骼肌再生这一过程.
作者：刘晓光；陈佩杰；赵淋淋；曾志刚；肖卫华 刊期： 2018年第01期
微小RNA (microRNAs,miRNA)是一种短链的非编码RNA,它通过抑制RNA的翻译或促进RNA的降解调控多种细胞活动和机体的发育.机体主要通过转录和转录后两个层面对miRNA的表达进行调控,其中对miRNA转录水平的调控决定了miRNA表达的特异性,而目前我们对其转录后调控的机制还知之甚少.本研究旨在证实RNA结合蛋白HuR是否通过与pri-miRNA中富含AU的序列相结合调节miRNA的表达.利用生物信息学方法对pri-miRNA中的AUUUA模体进行筛查,发现在hsa-let-7c下游富含AUUUA模体,而hsa-miR-21则不具备这一模体.通过转染HuR质粒到HEK293T细胞构建过表达模型,然后用Westem blot和real-time PCR分别检测HuR蛋白和miRNAs表达水平.结果显示,过表达HuR能够促进成熟hsa-let-7c而非hsa-miR-21表达.而过表达缺失RNA识别模体3(RNA recognition motif,RRM3)的突变体HuR则不能促进hsa-let-7c的表达.以上结果提示RRM3是HuR介导成熟hsa-let-7c表达的关键序列,而HuR在调控miRNA生物合成中可能扮演了一种新的角色,即在转录后水平调节miRNA的表达.
作者：宋峣；冯伟；施国敏；陈超；张幼怡 刊期： 2018年第01期
小胶质细胞是中枢神经系统中主要的免疫细胞.本研究旨在探讨乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)抑制小胶质细胞炎症反应的具体机制.原代培养Sprague-Dawley (SD)大鼠小胶质细胞,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导建立炎症反应模型,ACh处理24 h后,用Western blot检测多种炎性因子、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor l,IGF-1)和α7烟碱型乙酰胆碱受体(c7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)的蛋白表达,用ELISA检测多种炎性因子和IGF-1的释放情况,用慢病毒转染沉默α7nAChR后观察ACh作用的变化.结果显示,LPS可促进小胶质细胞的激活,上调诱生型一氧化氮合酶(induciblenitric oxide synthase,iNOS)蛋白表达,增加白介素1β (interleukin-1β,IL-lβ)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的表达和释放,减少神经营养因子IGF-1的表达和释放,ACh能逆转LPS的这些作用;LPS可下调小胶质细胞的α7nAChR蛋白表达,ACh逆转该作用;α7nAChR-shRNA慢病毒转染小胶质细胞后,ACh对抗LPS的作用消失.以上结果提示,ACh对抗LPS诱导的小胶质细胞炎症反应的保护作用是通过α7nAChR实现的,这为今后神经炎症疾病的治疗提供了新的治疗靶点.
作者：蒋永莹；李霖；沈卫星；邱一华；彭聿平 刊期： 2018年第01期
本研究旨在探讨不同浓度的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对小鼠海马长时程增强的影响.将30日龄C57BL/6J小鼠随机分为空白组、不同浓度(50,100,200 nmol/L) CGRP组,CGRP+ CGRP阻断剂组,每组10只.外源性给予海马区脑片不同浓度的CGRP,用离体细胞外场电位记录检测其对小鼠海马突触传递及长时程增强的影响.结果显示,给予不同浓度CGRP对小鼠海马突触前递质的释放没有明显的影响,但100和200 nmol/L CGRP可易化海马长时程增强的诱发,表现为长时程增强幅度的增加,并且这一作用可被CGRP特异性阻断剂CGRP8.37阻断.以上结果提示,CGRP可通过特异性受体浓度依赖性促进小鼠海马长时程增强的诱发.
作者：武鑫；郑婉君；吕明惠；苏少华；张松江；高剑峰 刊期： 2018年第01期
为了观察偏侧咀嚼模型大鼠的三叉神经运动核(trigeminal motor nucleus,MoS)及咬肌H反射的变化,以探讨长期偏侧咀嚼可能涉及的运动中枢功能可塑性机制,本研究取成年Wistar大鼠54只随机分为偏侧咀嚼1月(n=10)、3月(n=10)和16月(n=7)模型组及相应对照组.模型组采用左侧(建模侧)临床牙冠间断磨除法建立偏侧咀嚼大鼠模型.在麻醉状态下进行双侧Mo5生物电活动细胞外记录,同时进行双侧咬肌H反射试验并记录各侧咬肌肌电(electromyography,EMG).实验结果显示:1、3、16月的模型组大鼠建模侧Mo5神经元自发放电频率均低于非建模侧和相应对照组左侧;给予左侧咬肌神经电刺激在1、3月模型组大鼠建模侧Mo5诱导反应的潜伏期均长于相应对照组左侧;给予左侧咬肌神经电刺激诱导咬肌H反射时,3、16月模型组大鼠建模侧H波幅值低于相应对照组左侧.本研究结果提示,偏侧咀嚼降低了废用侧Mo5神经元的兴奋性,可能是偏侧咀嚼涉及的运动中枢功能可塑性机制之一.
作者：王云；余兰芳；汪萌芽 刊期： 2018年第01期
胶质淋巴系统是一个由星形胶质细胞终足上的水孔蛋白-4介导的脑脊液-脑组织液快速交换流动系统,其在功能上发挥着清除脑组织液中代谢产物(如乳酸)和异常蛋白(如β-淀粉样蛋白)的作用,又被称作脑内的类淋巴系统.一系列研究显示该系统功能在睡眠及麻醉时大大增强,而在衰老、脑外伤、阿尔茨海默症、中风和糖尿病时则显著降低.胶质淋巴系统是近年来神经科学领域的一个突破性发现,该发现加深了我们对脑脊液循环流动及其在脑内稳态维持中所起作用的理解.本文简要回顾了胶质淋巴系统概念的形成,综述了该领域近年来的研究进展,并对其未来的研究方向和临床应用进行了展望.
作者：王琳辉；王紫兰；陈文悦；陈铭佳；徐广银 刊期： 2018年第01期
甲烷(CH4)是结构简单的碳氢化合物,之前认为只有哺乳动物的口腔和胃肠道中的产甲烷菌才能生成CH4.但是近年来研究显示,动物体内的胆碱及其代谢物也能分解或转变成CH4,这种内源性CH4具有保护细胞膜免受活性氧(reactiveoxygen species,ROS)的攻击以及促进细胞膜修复的作用.此外,外源性CH4具有较强的抗炎、抗氧化、抗凋亡的生物学效应,提高脑、心脏、肝脏等多种组织器官的抗氧化能力,减轻其氧化应激损伤和炎症损伤的程度,对多种临床疾病的治疗具有研究和应用价值.因此,本文综述近年来CH4在哺乳动物体内的合成代谢及其抗炎、抗氧化和抗凋亡的生物学功能方面的新研究进展,为预防和治疗氧化应激相关疾病的研究提供新的治疗策略和切入点.
作者：胡静芸；蔡明；王茜；娄淑杰 刊期： 2018年第01期
上丘-丘脑枕结节-杏仁核通路是哺乳动物脑内的视觉皮层下通路之一.近来的研究提示这条通路和情绪相关的视觉信息处理有关.本综述提出这条通路可能更多地涉及到个体的警戒而不是简单的早期视觉信息处理,并且讨论了其生物学意义.在早期视觉过程中,大脑检测的不是“空间位置”,也不是“是什么物体”,而是警告大脑的信号:“有情况出现!”,使大脑进入一种警戒状态.这种警戒状态对物种生存至关重要.因此,我们认为在视觉早期,对物体“出现”和“消失”的检测较之“质地”和“形状”等特征信息收集等更为重要.拓扑知觉和皮层下通路的存在可能就是机体视觉警戒的神经基础.“警戒”可能正是皮层下通路存在的生物学意义之一.
作者：王磊；杨丽川；孟千力；马原野 刊期： 2018年第01期
细胞焦亡是一种依赖于caspase-1和caspase-4/5/ll的程序性细胞死亡方式,参与感染性疾病和神经系统疾病等的发展过程.细胞焦亡主要由经典炎症小体途径和非经典炎症小体途径介导,而经典炎症小体途径在脑卒中中活化并且加重脑损伤,抑制炎症小体和下游分子能减轻损伤发挥保护作用.经典炎症小体途径介导了脑卒中损伤,因而焦亡成为脑卒中干预的潜在靶点.本文就细胞焦亡与脑卒中关系的研究进展进行综述,旨在为相关领域的研究提供参考.
作者：唐标；邓常清 刊期： 2018年第01期
抑郁症是一种常见的心境障碍性疾病,对人群健康的危害日益加重.胃肠疾病是一类兼具动力学改变和器质性病变的系列疾病,主要包括功能性胃肠病、胃食管反流病、胃炎、胃溃疡.近年来,抑郁症共病胃肠疾病的现象普遍,但是在临床诊疗过程中,患者多被医生诊断为单方面抑郁症或胃肠疾病,造成患者治疗延迟,甚至无效.本文综述了抑郁症共病胃肠疾病的一些临床症状表现,并以两者涉及的可能发病机制为出发点,找寻其共病的神经生物学通路,从而提高人们对抑郁症共病胃肠疾病的重视程度,并为共病的临床与基础研究及兼具治疗作用的药物研发提供依据.
作者：张涛；令狐婷；张潇；田俊生；秦雪梅 刊期： 2018年第01期
胰岛素是经典的代谢调节激素,新近研究表明胰岛素除调节代谢外,还可直接激活细胞“生存信号”,发挥心血管保护作用,提示糖尿病与心血管病之间有内在联系;胰岛素抵抗致该保护机制受损是糖尿病促发心血管疾病的一个重要机制.结合本研究组在此方面的工作,本文简要综述代谢相关心血管病发病机制及胰岛素在心血管保护方面的研究进展.
作者：张海锋；张星；高峰 刊期： 2018年第01期
通过吗啡啉(morpholino,MO)电转染敲降斑马鱼视网膜内目标基因表达是研究基因功能的有效手段,但现有方法存在局限性.本文旨在发展一种优化的成年斑马鱼视网膜MO电转染方法.优化要点是在电极内侧涂抹超声凝胶,并使用方形电极而不是圆形电极.结果显示,使用超声凝胶可有效减少电转染所致视网膜损伤并简化实验步骤,采用方形电极显著提高了MO电转染效率.用本方法敲降视网膜再生相关基因Ascl1a显著抑制了视网膜祖细胞的生成.本方法是对现有MO电转染方法的优化.
作者：侯海涛；吕金阳；张志强；陆颖；周翠萍；周天球；张书强；徐绘 刊期： 2018年第01期
本文旨在探讨血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2,ACE2)激动剂三氮脒(diminazene aceturate,DIZE)对小鼠肢体缺血再灌注(limb ischemia-reperfusion,LIR)引发的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用.雄性8周龄野生型和人ACE2 (hACE2)转基因ICR小鼠随机分为:野生对照组(W组)、野生模型组(WL组)、野生模型DIZE干预组(WLD组)、hACE2转基因对照组(T组)、hACE2转基因模型组(TL组)和hACE2转基因模型DIZE干预组(TLD组),每组6只.采用常规止血带套扎双侧后肢的方法复制小鼠LIR模型.各DIZE干预组在LIR前预先腹腔注射DIZE (15 mg/kg),持续4周.LIR结束时,计算肺组织脏器系数和湿干质量比(wet/dry weight ratio,W/D);计数肺泡灌洗液细胞并检测蛋白浓度;HE染色后观察肺组织形态变化并进行病理损伤评分;用ELISA法测定肺组织中血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)和Ang (1-7)水平;用Westem blot 检测肺组织血管紧张素Ⅱ受体1(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1)和Mas受体蛋白表达变化.结果显示:(1)WL和TL组小鼠均有明显的肺损伤,TL组小鼠肺损伤轻于WL组,而DIZE可减轻WL和TL组小鼠肺损伤.(2) WL组小鼠肺组织Ang Ⅱ水平升高,Ang (1-7)水平降低,TL组小鼠这两种蛋白没有明显变化,而DIZE可降低WL和TL组Ang Ⅱ水平,升高WL组Ang (1-7)水平.(3) WL和TL组小鼠肺组织AT1和Mas受体蛋白表达升高,而DIZE可逆转WL和TL组AT1蛋白表达的变化,并进一步上调这两组Mas受体蛋白表达.以上结果提示,DIZE可能通过调控局部肺组织ACE2-Ang (1-7)-Mas轴改善肾素-血管紧张素系统稳态失衡,减轻LIR所致小鼠ALI,从而发挥保护作用.
作者：李树民；王枭鹰；刘帆；杨秀红 刊期： 2018年第02期
Apelin是一种新型的内源性活性肽.本研究旨在探寻下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN) apelin是否能够改善开胸手术创伤大鼠的心功能,以及是否参与了电针的保护作用.将大鼠随机分为正常对照组、开胸手术创伤组和开胸手术创伤+电针内关组,采用荧光定量PCR法检测各组大鼠PVN区apelin及其受体(apelin receptor,APJR) mRNA的表达,然后通过多通道同步记录技术观察PVN微量注射外源性apelin-13(6 mmol/L,0.1μL)对开胸手术创伤组大鼠的血压、心率以及延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla,RVLM)神经元放电活动的影响.结果显示:与正常对照组比较,创伤组大鼠PVN区APJR mRNA的表达显著减少(P＜0.05),apelin mRNA的表达也有下降趋势;对开胸手术创伤大鼠施电针双侧内关穴后,PVN区APJR和apelin mRNA的表达水平又有所恢复.PVN微量注射外源性apelin-13可明显升高开胸手术创伤组大鼠的平均动脉压和心率(P＜0.05),RVLM神经元单位放电频率也有升高趋势.以上结果提示,PVN区apelin能够改善开胸手术创伤大鼠心功能,也可能参与了电针的保护作用.
作者：张环环；王雅静；郑超；汪萌芽；朱大年 刊期： 2018年第02期
甲状腺功能减退症(甲减)患者的动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)及冠心病风险指数显著增加,但机制不清楚.巨噬细胞功能紊乱是促进AS斑块形成及发展的重要环节,本研究旨在探讨甲状腺激素对巨噬细胞功能的直接影响,为甲减相关AS的机制研究提供新思路.用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,建立体外巨噬泡沫细胞模型,并观察不同浓度甲状腺素(thyroxine,T4)对巨噬泡沫细胞功能的改善效应.分别采用MTT法、划痕实验、β-半乳糖苷酶染色实验检测巨噬细胞增殖、迁移功能及细胞衰老情况;ELISA法检测巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及白细胞介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)情况;Western blot检测参与巨噬细胞增殖、迁移等过程的粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的磷酸化水平.结果显示:oxLDL可显著抑制巨噬细胞增殖和迁移、促进其衰老及分泌TNF-α、MCP-1和IL-1β,而T4可浓度依赖性逆转oxLDL对巨噬细胞上述功能的影响;oxLDL可使巨噬细胞磷酸化FAK蛋白表达上调,而T4可浓度依赖性降低FAK蛋白磷酸化水平.上述结果提示,T4可呈浓度依赖性地调控巨噬细胞增殖、迁移、衰老及炎性因子分泌等功能.
作者：宁瑜；张铭；杜芸辉；张慧娜；李林忆；秦彦文；温婉婉；赵全明 刊期： 2018年第02期
本文旨在探讨微小RNA-498 (miR-498)影响类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中Th17细胞分化的作用机制.从50例RA患者和50例对照人群中分别收集外周血,分离PBMCs.流式细胞术检测CD4+IL-17+T(Th17)细胞或者CD4+ FOXP3+T(Treg)细胞比例,并分析Th 17/Treg比值.Real-time PCR检测细胞中miR-498和STAT3基因表达,Western blot检测STAT3的蛋白表达,ELISA检测外周血血清或细胞上清中IL-17的浓度.荧光素酶报告基因实验验证miR-498靶向结合STAT3的3'非翻译(3'untranslated region,3'UTR).miR-498 mimic或/和pcDNA-STAT3瞬时转染CD4+T细胞,进一步考察miR-498影响Th17细胞分化的机制.结果显示,RA患者的PBMCs中,Th17细胞比例显著高于对照,且Th 17/Treg比值也显著高于对照(P＜0.05).miR-498低表达而STAT3高表达于RA患者的PBMCs中,且RA患者血清中的IL-17浓度显著高于对照(P＜0.05).在转染野生型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor后,荧光酶活性、STAT3的基因和蛋白表达均明显改变(P＜0.05),但是在转染突变型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor,上述指标没有显著变化(P＞0.05).此外,miR-498 mimic转染CD4+ T细胞后,显著降低Th17细胞比例,且细胞分泌IL-17的水平减少(P＜0.05),而与pcDNA-STAT3共转CD4+T细胞后,Th17细胞比例明显提高,细胞分泌IL-17的水平增加(P＜0.05).以上结果提示,在RA患者CD4+T细胞中,过表达miR-498靶向下调STAT3,进而抑制Th17细胞分化.
作者：项海燕；潘峰；鄢巨振；洪理泉；张腊红；刘玉华；冯晓；蔡成松 刊期： 2018年第02期
本文旨在观察研究内源性CO在大鼠离体心脏缺血再灌注中的作用.大鼠经内源性CO激动剂原卟啉氯化钴(CopP)和内源性CO抑制剂锌原卟啉(ZnPP)处理后,采用Langendorff离体心脏灌流系统完成心脏缺血再灌注模型,停灌(缺血)时间设定为30 min,分别采集离体心脏稳定期和再灌注后30 min心功能指标参数,ELISA方法检测心肌组织cGMP含量,比色法测定血浆中内源性CO的含量以及再灌注10 min时灌流液中肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)等心肌酶的指标.结果显示,停灌前离体心脏跳动平稳,CoPP组、ZnPP组和对照组心脏各项功能指标均保持稳定,三组间心功能指标无明显差异;再灌注后,三组间心功能指标出现显著性差异(P＜0.05),与停灌前相比,对照组和ZnPP组心功能均明显下降(P＜0.05),且ZnPP组下降较为显著,而CoPP组仍能保持停灌前水平.与此同时,三组大鼠体内CO含量、离体心肌酶学指标和再灌注后恢复稳定时间也有明显的差异(P＜0.05),和对照组相比,CoPP组复灌稳定恢复时间减少,灌流液中CK和LDH含量显著减少,血浆内源性CO含量和心肌cGMP含量显著增加,而ZnPP组则呈现截然相反的结果.以上结果提示,内源性CO可维持一定的心脏舒缩能力、缩短心脏复跳时间,在心脏缺血再灌注中起到了保护作用.
作者：周振；马爽；刘杰；纪巧荣；曹成珠；李晓娜；汤锋；张伟 刊期： 2018年第02期
激活胆碱能受体结合去极化电流诱导产生的持续性放电(persistent activity,PA)是神经元产生可塑性的一种特征表现.小鼠初级听皮层(primary auditory cortex,AI)神经元PA的产生与毒蕈碱受体(即M型受体)密切相关,但其涉及的毒蕈碱受体亚型尚不清楚.本研究采用离体脑片全细胞膜片钳技术结合药理学方法,探讨幼年小鼠AI第Ⅴ层锥体神经元PA与毒蕈碱受体亚型之间的关系.结果显示,激活胆碱能受体并同时注入去极化电流可诱导锥体神经元产生PA.M1、M2和M3受体拮抗剂分别能阻断PA的产生,而M4受体拮抗剂对PA的产生没有影响.该结果表明M1、M2和M3毒蕈碱受体均参与幼年小鼠AI第Ⅴ层锥体神经元PA的形成,而M4毒蕈碱受体不参与PA的形成.
作者：贾慧娟；王欣；付欣；杜小凤；郑维维；罗峰 刊期： 2018年第02期
本研究旨在探讨血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对INS-1胰岛细胞凋亡及硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)表达的影响,并分析其可能的作用机制.体外常规培养大鼠胰岛细胞株INS-1,使用CCK-8试剂盒检测不同浓度和不同作用时间的Ang Ⅱ对细胞存活率的影响,确定佳作用浓度及作用时间为1×10-6 mol/L和24 h;在上述浓度及作用时间条件下,使用流式细胞术及Western blot检测细胞凋亡;Western blot检测Ang Ⅱ对TXNIP、碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element-binding protein,ChREBP)及血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)蛋白表达的影响;Real-time PCR检测TXNIP及ChREBP mRNA表达;IF/ICC法观察TXNIP、ChREBP及AT1R的表达变化.结果显示Ang Ⅱ可浓度依赖性及时间依赖性地降低细胞活力(P＜ 0.05,n=6)并上调TXNIP的表达(P＜ 0.05,n=6);与对照组相比,Ang Ⅱ组细胞凋亡率、ChREBP及ATlR的表达均明显增高(P＜ 0.05,n=6).使用AT1R受体抑制剂替米沙坦(telmisartan,TM)后,Ang Ⅱ对INS-1细胞TXNIP及ChREBP的诱导作用被抑制(P＜0.05,n=6),Ang Ⅱ诱导的细胞活力降低及细胞凋亡升高被逆转.上述结果表明,Ang Ⅱ可通过ATlR增加ChREBP活化而上调TXNIP的表达,促进细胞凋亡,提示TXNIP可能在糖尿病时Ang Ⅱ诱发胰岛细胞凋亡中发挥作用,并有望成为糖尿病新的治疗靶点.
作者：冯艳金；王瑾；曹竹杰；李丹；霍海燕；张许梅；焦向英 刊期： 2018年第02期
糖尿病可以引起硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interaction protein,TXNIP)表达增加,而TXNIP可以结合内源性硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)并抑制其活性.本研究旨在探讨TXNIP对INS-1胰岛β细胞增殖的影响及机制.构建TXNIP过表达(Ad-TXNIP-GFP)和半胱氨酸247位点突变的TXNIP过表达(Ad-TXNIPc247s-GFP)腺病毒载体并感染INS-1细胞,用EdU法和Ki67法检测细胞增殖,用Western blot检测ERK和AKT蛋白磷酸化水平.结果显示,TXNIP和TXNIPc247s(不能与Trx特异性结合并抑制其活性)蛋白过表达均显著抑制INS-1细胞增殖,且TXNIP过表达细胞增殖的受抑制程度大于TXNIPc247s过表达细胞.另外,TXNIP和TXNIPc247s过表达均抑制INS-1细胞ERK和AKT的磷酸化.以上结果提示,TXNIP过表达可能通过Trx依赖途径以及非Trx依赖途径抑制ERK和AKT的磷酸化,进而抑制INS-1细胞增殖.
作者：曹竹杰；冯艳金；李丹；王瑾；霍海燕；张许梅；焦向英 刊期： 2018年第02期
听觉系统具备随着环境的变化来改变自身结构和功能的能力,这种能力称为听觉可塑性.中脑下丘(inferior colliculus,IC)是听觉系统重要的中继站,外侧丘系背核(dorsal nuclei of lateral lemniscus,DNLL)上行输入对IC神经元的声反应特性具有重要的定型作用.本研究旨在探讨DNLL上行输入在IC神经元可塑性形成中的作用.以昆明小鼠为实验动物,持续电刺激对侧DNLL,采用单单位细胞外记录的方法观察IC神经元的可塑性变化.结果显示,95％的受抑制IC神经元和86％的受易化IC神经元在对侧DNLL 30 min电刺激停止后仍表现出可塑性的变化.在对侧DNLL电刺激停止1h后,74％的受抑制IC神经元发生的可塑性变化消失,26％的受抑制IC神经元发生的可塑性变化仍然存在.以上结果提示,对侧DNLL上行输入可引起IC神经元的可塑性变化,并维持较长时间,这有利于提高IC神经元的声信号检测能力.
作者：杨丹丹；郑维维；赵莎莎；罗峰；王欣 刊期： 2018年第02期
