目的 研究聚乙二醇化重组复合干扰素(PEG-IFNcon)对小鼠免疫功能的影响.方法 以重组复合干扰素(IFNcon,商品名:干复津)为对照,分别采用鸡红细胞吞噬法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定巨嗜细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖作用,以3H-TdR掺入法测定刀豆蛋白A(Con A)诱导的淋巴细胞增殖活动.结果 PEG-IFNcon能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,显著改善环磷酰胺所致的小鼠淋巴细胞功能降低作用,在50~150 μg/mL剂量范围内亦能增强小鼠Con A诱导的淋巴细胞增殖反应.结论 PEG-IFNcon可显著增强小鼠免疫功能.
作者:赵媛;赵伟;姚文兵;赵艳玲;高向东 刊期: 2007年第03期
目的 研究1种高纯度牛凝血酶的制备工艺.方法 采用不同终浓度的Ba2+吸附、硫酸铵分段盐析从牛血浆中提取凝血酶原,用Ca2+激活,活化的凝血酶用CM-Sepharose Fast Flow离子交换柱纯化.结果 用冷冻1周血浆制备的凝血酶粗品产量、比活明显高于来自新鲜血浆的粗品;Ba2+终浓度在0.107 mol/L以上时凝血酶的产量较高;凝血酶原的佳激活条件为:Ca2+终浓度0.05 mol/L,37℃,30~60 min;CM-Sepharose Fast Flow柱制备的凝血酶比活达到2 000 U/mg以上.结论 该工艺适用于高纯度凝血酶的制备.
作者:朱天新;袁彩君;任晚琼 刊期: 2007年第03期
目的 观察华蟾素对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIKC)的表型变化及其对肝癌的细胞毒作用.方法 采集健康供者的外周血单个核细胞(MNC)培养,收集非贴壁细胞并加入白细胞介素2(IL-2)诱导培养CIKC,将华蟾素加入CIKC,用四甲基偶氯唑盐(MTT)法检测CIKC杀伤BEL7402肝癌细胞株的活性.结果 CIKC经华蟾素加入培养后,CIKC细胞群的CD3+CD8+,CD3+CD56+细胞比例和杀伤活性较单纯的CIKC更高.结论 华蟾素有助于CIKC的细胞毒活性.
作者:蒋淑莲;文剑;杜建霞 刊期: 2007年第03期
目的 生物合成L-苯基乙酰基甲醇(L-PAC).方法 在10%石油醚/水两相体系中,利用固定化酵母细胞生物合成L-麻黄素的重要中间体L-PAC.结果 确定在佳温度28℃,pH 6.46,活化时间30 min,反应时间10 h,苯甲醛浓度为3 mL/L,添加少量β-环糊精等的条件下,以2%海藻酸钙和10%聚乙烯醇为复合载体,生物合成L-PAC,产量可达8.34 g/L.结论 为生物合成L-PAC提供了一种很好的方法.
作者:戴冕;许激扬;宁华中 刊期: 2007年第03期
目的 从单环刺螠中分离纯化单环刺螠抗血栓组分(ATCUU),并进行有关药效学研究.方法 新鲜单环刺螠经过抽提,离心并超滤得到粗提物,并通过DEAE离子交换和凝胶色谱进行分离纯化,得到具有抗血栓作用的组分.并采用动物模型,进行了该组分的抗血栓作用的药效学研究.结果 经分离纯化得到的ATCUU,经口给药后能明显减少动脉血栓的湿重和干重,显著延长大鼠的凝血时间,凝血酶原时间和血浆凝血酶时间,且显示一定的量效关系.结论 ATCUU具有较好的溶栓效果,有望开发成为新的溶栓药物.
作者:刁勇;居海亮;许瑞安 刊期: 2007年第03期
目的 探讨沙棘总黄酮(TFH)对神经细胞的保护作用及其机制.方法 采用培养PC12细胞NaCN及缺糖引起的细胞损伤模型,以及Na2S2O4、KCl分别诱导PC12细胞缺氧损伤和Ca2+超载损伤模型,研究TFH对神经细胞损伤的保护作用.结果 TFH对PC12细胞损伤有明显的保护作用.结论 TFH具有保护神经细胞的作用.
作者:王华;徐志州;高向东;钱云飞;姚文兵 刊期: 2007年第03期
目的 构建抗癫痫肽(anti-epilepsy peptide,AEP)/GST融合表达载体,原核表达GST-AEP融合蛋白.方法 从克隆载体质粒pGEM-T/AEP中双酶切,得到AEP片段;通过中间载体puc18,转换酶位点;后将AEP基因克隆入表达载体pGEX-4T-1质粒中,构建融合表达载体pGEX-4T-1/AEP;转化感受态大肠杆菌DH5α,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得GST-AEP融合蛋白;SDS-PAGE分析表达产物,确定蛋白质高表达条件;超声裂解法鉴定蛋白质可容性;凝胶薄层扫描确定蛋白质相对表达量.结果 经酶切鉴定、测序证明,AEP基因已正确插入到pGEX-4T-1中,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量约为36 000的融合蛋白,该融合蛋白以包涵体形式存在,约占总蛋白质的70%左右.结论 pGEX-4T-1/AEP载体构建成功,融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达.
作者:张德安;王宗仁;高碧峰;邵中军;李晶华;马静 刊期: 2007年第03期
目的 提取天葵子多糖,并对其进行定性定量分析.方法 采用水提醇沉法提取天葵子多糖,用苯酚-硫酸比色法测定多糖粗提物中的总糖含量,咔唑-硫酸法测定酸性多糖含量,双缩脲法测定蛋白质含量,凝胶过滤法测定相对分子质量(Mr),气相色谱法确定天葵子多糖的单糖组成及摩尔比.并对其进行红外光谱分析.结果 总糖含量为80.4%,酸性糖含量为6.8%,蛋白质含量为16.6%,Mr约为6.3×104,天葵子多糖含葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖,摩尔比例为6.23∶2.04∶3.15∶1.03∶1.多糖结构含非O-型呋喃糖苷键.结论 天葵子多糖为5种单糖组成的混合物.
作者:周丽伟;陈彦;孙玉军 刊期: 2007年第03期
目的 比较3种测定低分子量透明质酸(LMWHA)相对分子质量(Mr)方法.方法 分别采用特性黏度法、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法及多角度激光散射仪结合凝胶渗透色谱(GPC/MALLS)法测定LMWHA的Mr,并对所得结果进行对比分析.结果 对于Mr介于10 000~100 000范围内的LMWHA,特性黏度法测得的Mr值与GPC/MALLS法测得的Mr值基本相同,而HPGPC法由于所用标准Mr对照品结构上的差异,测得的Mr与其它两种方法测得的值差异较大.结论 在一定Mr范围内,特性黏度法和GPC/MALLS法均可用于测定LMWHA的Mr.
作者:王彦厚;王凤山;郭学平 刊期: 2007年第03期
目的 利用基因重组技术在大肠杆菌中高效表达人过氧化氢酶(catalase,CAT).方法 从人cDNA文库中获得CAT编码基因,并利用pMAL-c2x、pBV221质粒分别构建了融合和非融合表达载体并进行了表达和活性检测.结果 融合表达与非融合表达均可获得可溶性蛋白质,非融合的表达产物具有CAT活性,而融合表达产物在切除融合蛋白质(MBP)部分后表现出明显的CAT活性.结论 从大肠杆菌表达体系能表达具有生物活性的CAT,此项研究为后续重组酶性质的研究和开发利用奠定了基础.
作者:耿风廷;赵晓瑜;高珊 刊期: 2007年第03期
目的 研究玉米降血压肽在体内外对血管紧张素转化酶(ACE)的活性抑制作用及机制,为探讨降血压肽的降压机制提供实验依据.方法 用反相高效液相色谱法测定玉米降血压肽在体外对ACE的抑制动力学,同时测定多次给药12周后SHR大鼠体内不同组织的ACE活性和血浆AngⅡ浓度.结果 玉米降血压肽竞争性抑制ACE活性,IC50为15.0 μmol/L,玉米降血压肽能显著降低血清、主动脉和肺ACE活性(P<0.01),而对心、脑、肾的ACE活性抑制作用不显著(P>0.05),同时玉米降血压肽能显著降低血浆中血浆AngⅡ浓度(P<0.01).结论 玉米降血压肽对体内外ACE都有竞争性抑制作用,但在体内不同部位其抑制效果不同,同时其降压作用是通过抑制ACE活性、降低AngⅡ浓度来实现的.
作者:刘冬;李世敏;张丽君 刊期: 2007年第03期
目的 分离、纯化亚麻籽木酚素--开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG),并研究其对裸鼠乳腺移植瘤生长的影响.方法 从亚麻籽中提取、纯化SDG,高效液相色谱分析其纯度;选用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对裸鼠进行异种移植;第6周将移植成功的裸鼠随机分为3组:对照组、SDG组和亚麻籽组.每周测量瘤体大小并计算瘤表面积,同时记录裸鼠体重、摄食量.第10周处死动物,测量瘤体质量、瘤块大小,记录肿大淋巴结数.肝脏、肺脏进行病理切片检查.结果 获得纯度为88.0%的SDG产品;与对照组相比,SDG、亚麻籽2组肿瘤表面积、瘤块质量、瘤体积明显降低(P<0.05),肿大淋巴结有所减少.各组动物体重及摄食量无明显差别,肝、肺均未见肿瘤转移.结论 SDG可抑制裸鼠MDA-MB-231细胞乳腺移植瘤的生长.
作者:王晓蕾;张莲英;胡晓燕;孙道旭;吴伟芳;刘传华;刘贤锡 刊期: 2007年第03期
目的 丙烯醛是一种具有高反应性的不饱和脂肪醛,它是丙烯胺的代谢产物,在体内外对各种细胞具有毒性作用.本研究探讨丙烯醛对成年小鼠心肌细胞氧自由基及钙浓度的影响及细胞凋亡的作用.方法 采用改良langendorff方法分离成年小鼠心肌细胞.分别应用DCF及Fura-2 AM测定细胞内氧自由基水平及钙离子钙浓度,WST法测定心肌细胞存活率,观察凋亡DNA片段及细胞凋亡的形态变化.结果 应用1 μmol/L丙烯醛可明显增加心肌细胞内氧自由基水平及钙离子浓度,分别达到用药前的12倍及2倍.而且,丙烯醛引起心肌细胞损伤是一种剂量依赖性的,应用25,50及100 μmol/L丙烯醛治疗的心肌细胞存活率明显低于对照组(P<0.01).丙烯醛处理心肌细胞后,可观察到DNA断裂片段及典型的凋亡细胞形态变化.结论 丙烯醛可引起成年小鼠心肌细胞的凋亡,其作用可能是由于细胞内氧自由及钙浓度的增加.
作者:王丽娟;胡健;齐国先 刊期: 2007年第03期
目的 考察不同色谱条件下N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-Ala-L-Gln)及其有关物质的色谱行为,建立L-Ala-L-Gln有关物质的高效液相色谱含量测定方法.方法 氨基键合硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调pH值至4)70∶30为流动相;流速为1.0 mL/min;检测波长为215 nm;柱温为40 ℃.结果 L-Ala-L-Gln在10~100 μg/mL浓度范围内呈良好线性关系(r=0.999 8),并且可以同时测定含量和有关物质,重复性试验RSD为0.81%(n=6).结论 此法简单,分离度良好,结果准确,可以用于L-Ala-L-Gln的含量和有关物质的检测.
作者:何盛江;宋力;张现涛;刘实 刊期: 2007年第03期
目的 研究1种高效分离纯化绿豆胰蛋白酶抑制剂(MBTI)的方法.方法 采用硫酸抽提,硫酸铵分级沉淀,缓冲液溶解沉淀,用相对分子质量(Mr)为30 000的超滤膜去除大分子蛋白质,Mr为5 000的超滤膜除盐及小分子蛋白质,亲和色谱纯化,得MBTI,高效液相色谱法(HPLC)和SDS-PAGE电泳法分别测定其纯度和Mr,以酪蛋白为底物测其活性.结果 纯化的MBTI经HPLC和SDS-PAGE鉴定为2条蛋白质带,其Mr分别为12 000和8 000,其活性约为大豆蛋白酶抑制剂的3倍.结论 超滤法与亲和色谱结合能快速高效地分离纯化MBTI.
作者:刘同祥;牛建昭;许惠玉;屠衡青;王继峰 刊期: 2007年第03期
目的 确定透明质酸酶(HAase)催化透明质酸(HA)水解的适条件.方法 HAase不同条件下催化HA水解,反应结束后利用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测量反应产物的相对分子质量及其分布系数.结果 HAase催化HA水解受温度、pH值、酶浓度、底物浓度、反应时间等因素的影响.结论 HAase催化HA水解的适反应条件是底物浓度为10 g/L,酶浓度为150 000 U/L,pH为5.0,反应温度为50℃.
作者:崔向珍;刘爱华;王凤山;郭学平 刊期: 2007年第03期
目的 考察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Gm-csf)对乙型肝炎疫苗免疫原性及诱导的体液免疫效果的加强作用.方法 将Gm-csf和乙肝疫苗分别采用4种不同的免疫顺序,联合免疫BALB/c小鼠.定期用酶联免疫吸附法检测小鼠产生的抗乙型肝炎表面抗原(抗-HBsAg)的抗体水平.结果 联合免疫Gm-csf,可提高小鼠产生的抗-HBsAg抗体水平;②单次免疫后7 d,混合疫苗组的血清抗体滴度高,为疫苗组的7.5倍;直至免疫后35 d,混合疫苗组仍为高,为疫苗组的9.2倍;③二次免疫后14 d,混合疫苗组血清中抗体滴度与疫苗组相比有显著性提高(P<0.05),随后GM+疫苗组、混合疫苗组和疫苗+GM组血清中抗体滴度都先后达到峰值,分别为疫苗组的10.0,10.1,8.2倍.④小鼠血清中抗体水平达到稳定状态后,用乙肝疫苗原液进行挑战实验,抗体快速达到峰值,分别为挑战实验前的9.2,5.2,12.8,4.8倍.结论 通过Gm-csf的联合免疫,可提高乙型肝炎疫苗的免疫原性,增强乙型肝炎疫苗诱导的体液免疫水平.
作者:周兴军;王世聪;宋欣;李立敏;董爱华;王惠欣;谢德娟;冯利 刊期: 2007年第03期
目的 建立二羟基丙酮(DHA)发酵过程中产物和残余甘油底物的高效液相色谱检测方法.方法 流动相为乙腈-水(90∶10),色谱柱为Lichrospher 5-NH2(4.6 mm×250 mm),用紫外检测器在271 nm处检测DHA,用示差折光检测器检测甘油.结果 DHA的线性范围为2.00~12.00 mg/mL,低检出限(LOD)和低定量限(LOQ)分别为0.30和1.20 mg/mL.甘油的线性范围为1.00~10.00 mg/mL,LOD和LOQ分别为0.22和0.50 mg/mL.结论 此文建立的DHA和甘油的检测方法精密度好,准确性高,不受发酵液中其他杂质的影响,可以应用于DHA发酵过程中底物和产物的检测.
作者:陈菁;陈建华;周怡雯;周长林 刊期: 2007年第03期
钙调神经磷酸酶是迄今发现的唯一受Ca2+或钙调素调节的丝氨酸苏氨酸蛋白质磷酸酶,参与多种细胞功能的调节.该酶的抑制剂在移植免疫等方面的研究方兴未艾.此文综述了国外对该酶抑制剂的研究进展.
作者:于倩;葛志强 刊期: 2007年第03期
在细胞生长和分化过程中,变异性剪接是许多基因表达过程的一部分.CD44作为多功能黏附分子,有10个变异外显子能发生选择性拼接,从而产生CD44s和CD44v,其中CD44v主要表达在转移性肿瘤细胞表面.在许多恶性瘤组织中可见到不同CD44v分子的表达.此文综述了CD44分子与各种肿瘤侵袭转移的相关性.
作者:钱皓;凌沛学;王凤山;张天民 刊期: 2007年第03期
此文综述了对多糖抗肿瘤活性的新研究进展,包括多糖抗肿瘤作用途径、影响多糖抗肿瘤作用的因素以及多糖在肿瘤治疗上的应用现状,并对多糖抗肿瘤研究进行了展望.
作者:李松;吴青华;陈畅;顾黎 刊期: 2007年第03期
肽类抗生素是一类广泛存在于自然界各种生物中的活性肽,具有抗细菌、真菌、病毒、原虫,抑杀癌细胞,调节免疫等活性,有望成为继传统抗生素之后一类新的治疗药物.此文对肽类抗生素的制备、结构、活性、作用机制以及在医药工业方面的研究与应用进行了综述.
作者:李娜;王凤山;厉保秋 刊期: 2007年第03期
目的 研究玻璃酸钠(SH)在氯霉素滴眼液中所起的作用.方法 采用对比实验法,测定氯霉素滴眼液和含SH的氯霉素滴眼液的运动黏度.给家兔的2只眼结膜囊内分别滴入氯霉素滴眼液和含SH的氯霉素滴眼液各50 μL,采集泪液测定药物浓度,对2种滴眼液做家兔眼刺激实验.结果 含SH的氯霉素滴眼液比氯霉素滴眼液的运动黏度大,对眼部不引起刺激性,可以延长药物在泪液中的滞留时间.结论 SH能增加氯霉素滴眼液的黏度,延长药物在泪液中的滞留时间,提高药物疗效.
作者:袁素华;凌沛学 刊期: 2007年第03期
目的 建立1种快速检测硫酸软骨素的新方法.方法 采用高效液相色谱法对硫酸软骨素进行直接分析,色谱柱采用Plenomenex(R) Reze RoS-organic Acid H+(8%).结果 硫酸软骨素在1.742~8.71 mg/mL浓度范围内同峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 8),具有较好的重现性.结论 此方法具有快速、准确、重复性好等优点.
作者:赵振锋;段钢 刊期: 2007年第03期
目的 建立透明质酸钠眼内植入物细菌内毒素检查法.方法 制备供试品的浸提液,确定其细菌内毒素限值,进行干扰试验.结果 制成每1 mL含供试品1 mg的浸提液对试验无干扰作用.结论 此品可采用细菌内毒素检查法.
作者:祝清芬;丁勃 刊期: 2007年第03期