SOCS(Suppressor of cytokine signaling),是一种细胞因子信号通路抑制蛋白,目前认为该蛋白家族可以调节LIF(Leukemia inhibitory factor)、G-CSF(Granulocyte colony-stimulating factor)、IL-6 (Interleukin-6)、IL-10 (Interleukin-10) 、IFN λ(interferon λ)等30多种细胞因子,而这些因子是机体抵抗入侵的外来病原体的主要免疫防御反应.病毒在感染宿主的过程中通过劫持宿主中的SOCS蛋白,从而对细胞中的JAK/STAT、NF-κB等与抗病毒因子调控相关的信号通路以及对T细胞的分化的调控调节病毒感染.近年来,大量的文献证实SOCS蛋白的变化与病毒感染的程度以及愈后的器官损伤具有紧密的联系,使得SOCS蛋白作为抗病毒靶点的研究尤为重要.本文主要讨论SOCS蛋白通过调控JAK-STAT、NF-κB等信号通路,在病毒感染过程中发挥的作用和作用机制.
作者：侯敏；刘新；张文艳 刊期： 2017年第02期
猫疱疹病毒1型(Feline herpesvirus-1,FHV-1)是引起猫科动物以上呼吸道感染和眼部溃疡为主要特征的猫传染性鼻气管炎的病原.该病毒在全球范围内流行,对宠物猫及虎、豹等野生猫科动物的健康造成了严重的威胁.本文介绍了FHV-1的基因组结构、编码蛋白及其生物学功能、病毒融合宿主细胞机制,以期为该病致病机制的深入研究与防控策略的制定提供参考.
作者：牛江婷；伊淑帅；王开；董浩；胡桂学 刊期： 2017年第02期
人肠道病毒D68型属于小RNA病毒科、肠道病毒属、D组病毒,1962年发现于美国加利福尼亚州儿童鼻咽拭子中,后来罕有报道.近年来该病毒在全球多个国家引致暴发,并出现以呼吸及中枢神经系统疾病为主要症状的重症患者,因而引起广泛关注.然而,EV D68暴发的缘由尚不清楚,当前迫切需要研发特异有效的预防及治疗药物来遏制病毒的危害.本文就EV-D68已有研究进展作一综述,为该病毒后续研究提供依据.
作者：周振威；王涛 刊期： 2017年第02期
艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)引起的人类严重的单一病因疾病,以全身免疫系统严重损害为特征.高效抗逆转录病毒疗法(Highly active anti-retroviral therapy,HAART)的应用已经成功地将艾滋病从一种致死性疾病转变为慢性可控性疾病.但长期接受HAART治疗的艾滋病患者一旦停药,患者体内潜伏的HIV会迅速反弹.艾滋病无法彻底治愈的原因是患者体内HIV病毒潜伏储存库的存在.“Shock and kill”策略是使用HIV潜伏感染激活剂(Latency-reversing agents,LRAs)诱导潜伏HIV前病毒复制及表达,然后联合HAART将病毒一网打尽,同时由于细胞病变效应和/或HIV特征性免疫反应使潜伏细胞的半衰期大大缩短,终达到功能性治愈的目的.因此,高效、安全且特异性促进潜伏库衰减的LRAs成为现今艾滋病治愈研究的热点.本文聚焦国内外前沿研究,对具有临床发展前景的HIV潜伏感染激活剂做一综述,为未来LRAs药物的研发指明方向.
作者：王海鹏；陈承聪；王芳香；张萱萱；刘叔文；李琳 刊期： 2017年第02期
HIV-Tat蛋白是由HIV-1病毒感染细胞后分泌的反式转录激活因子,在HIV感染神经损害中发挥重要作用,是引起艾滋病相关脑病的重要致病因子.自噬即自我吞噬,主要作用是供给机体营养,但异常自噬则引起细胞死亡.HIV-Tat蛋白可以诱导神经细胞自噬,从而使细胞死亡,但引起自噬的机制及信号转导通路不清楚.本文主要从HIV-Tat蛋白诱导神经细胞自噬的机制、信号转导通路等方面进行综述,旨在为进一步研究HIV-Tat蛋白与细胞自噬的关系及寻找新的治疗药物靶点提供参考.
作者：李娟；杨根梦；仝品芬；李桢；曾晓锋；代解杰 刊期： 2017年第02期
为研究中国水痘-带状疱疹病毒(Varicella Zoster Virus,VZV) gH(Glycoprotein H)、gK (Glycoprotein K)、gI(Glycoprotein I)糖蛋白基因特征,选取2007～2015年在中国六省收集的VZV疑似患者的疱疹液或咽拭子标本,经聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法进行阳性鉴定及3个糖蛋白的全基因片段扩增,所得序列与GenBank中已公布的疫苗株及野毒株序列进行比对分析.结果筛选出12份阳性VZV标本,gH、gK、gI与水痘疫苗株核苷酸和氨基酸同源性相比分别为99.8％～100％、99.8％～100％,99.8％～100％、99.6％～100％,99.9％～100％、99.7％～100％;与疫苗株相比在gH、gK、gI糖蛋白基因位点上12份阳性标本分别至少有一个核苷酸差异;与GeneBank中已报告的野毒株相比核苷酸和氨基酸同源性分别为99.6％～100％、99.3％～100％,99.7％～100％、99.3％～100％,99.7％～100％、99.7％～100％.本研究通过分析中国六省VZV糖蛋白gH、gK、gI的基因特征,发现这三个糖蛋白高度保守,抗原性稳定,为了解中国水痘带状疱疹病毒野毒株糖蛋白本底资料,丰富基因数据,从分子水平上为疫苗效果的评估、基因组学的研究提供基础数据.但中国地域辽阔,人口众多,还需每年连续监测并进一步扩大VZV病毒监测的地域.
作者：齐梦缘；吴秋华；杨玉颖；李云逸；牟君杰；李崇山；朱贞；许文波；许松涛；许晓光 刊期： 2017年第02期
为探讨2013年引起中国大陆麻疹复发的麻疹野病毒中和抗原血凝素(Hemagglutinin,HA)的变异动态,本研究对1993～2013年中国大陆流行的麻疹病毒H1基因型血凝素(HA)编码基因和氨基酸变异进行系统分析,为评价中国疫苗对2013年流行的麻疹野病毒的保护效果提供科学依据.选取2013年8株麻疹病毒代表株,扩增HA基因编码区序列(1 854bp)并进行序列测定和分析.从GenBank上下载45株1993～2012年中国流行株、中国疫苗株上海191(S-191)和长春47(C-47)和24株WHO参考株HA基因编码区序列,MEGA5.05构建亲缘关系树和进行氨基酸位点比对,分析重要中和抗原位点的变异.使用BioEdit进行同源性关系分析.根据HA基因序列的亲缘性关系分析,2013年麻疹病毒代表株均位于H1a亚型的第3分支,且2000年以后分离的H1a亚型的麻疹野毒株均属于该分支;8株2013年麻疹病毒代表株核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.6％～99.8％和97.8％～100.0％,与1993～2012年H1a基因亚型麻疹病毒的核苷酸和氨基酸同源性分别为97.6％～99.6％和97.0％～99.6％,与中国疫苗株S-191和C-47的核苷酸和氨基酸同源性分别为94.3％～94.7％和94.6％～95.4％;与中国疫苗株S-191原型野病毒氨基酸序列比对,1993～2013年麻疹病毒代表株HA主要中和抗原位点未发生重大变异,但包括2013年代表株的近年流行的H1a麻疹毒株在氨基酸第240位由丝氨酸突变成了天冬酰胺(Ser240Asn),导致潜在的糖基化位点NLS238～240的缺失,但H1基因型麻疹病毒均保留有4个潜在的糖基化位点.中国大陆流行的麻疹病毒H1基因型在重要的中和抗原位点均保持稳定,中国使用的麻疹疫苗对中国现流行的麻疹病毒H1a亚型具有较好的保护效果.中国应继续加强流行麻疹病毒血凝素基因的动态监测,以评价我国疫苗对流行麻疹野病毒的保护效果,为我国消除麻疹提供疫苗使用的科学依据.
作者：高凌玉；张燕；王慧玲；任丽；毛乃颖；许松涛；许文波 刊期： 2017年第02期
为了解石家庄地区儿童病毒性脑炎病原学特点,同时研究病原学资料与临床资料之间的联系.本研究采用实验室全自动工作站,结合实时荧光定量PCR方法检测2015年10月～2016年9月河北省儿童医院神经内科收治的诊断为病毒性脑炎患儿的脑脊液样本,并结合临床资料进行分析.159例病毒性脑炎患儿中66例(41.5％)检出病毒阳性,肠道病毒58例,EB病毒3例,人疱疹病毒6型1例,4例为合并感染,分别为肠道病毒合并EB病毒3例,肠道病毒合并人疱疹病毒6型1例.肠道病毒是石家庄地区儿童病毒性脑炎常见的病原.运用SPSS21.0统计分析软件对实验数据进行统计学分析.肠道病毒脑炎于炎热季节高发.不同病原病毒性脑炎患儿的年龄分布无显著差异.不同病原病毒性脑炎患儿的脑脊液样本采集时间分布无显著差异.不同病原病毒性脑炎患儿的临床症状和体征、MRI结果、EEG结果无显著差异.
作者：于盼辉；王佶；李静洁；颜腾飞；陈晨；申辛欣；孙素真；马学军 刊期： 2017年第02期
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV),又称人类疱疹病毒8型(Human herpesvirus 8,HHV-8),是艾滋病感染者中发病率高的肿瘤卡波氏肉瘤的致病性病原体.本实验对KSHV裂解期蛋白-病毒白细胞介素6(Viral interleukin-6,vIL-6)抑制宿主固有免疫机制进行初步探讨.利用仙台病毒刺激人胚肾细胞(HEK293T)激活抗病毒固有免疫,观察vIL-6过表达后对IFN-β的作用及机制,利用实时定量PCR检测IFN-β基因表达及双荧光素酶实验分析IFN-β基因启动子的活性.过表达vIL-6后,IFN-β基因mRNA水平表达明显下降,进一步实验证明vIL-6可抑制IFN-β基因启动子活性,且vIL-6可特异性作用于IFN-β基因启动子PRDⅢ-PRDI区.本研究首次证实了KSHV vIL-6可通过抑制IFN-β启动子活性从而调控IFN-β表达,且这种作用主要通过IRF-3信号途径.
作者：徐妍妍；周国平；徐华国 刊期： 2017年第02期
对不明原因发热病人开展登革病毒和基孔肯雅病毒合并感染的检测,明确合并感染的可能性,为防御这两种虫媒传染病的传播提供依据.通过流行病史调查,临床症状和实验室检测对两名从泰国普吉岛旅行归来的发热病人进行了登革病毒和基孔肯雅病毒感染的诊断.两名患者在泰国旅行停留10天,在此期间两人均有蚊虫叮咬史.回国3天后两患者相继出现高热症状(39℃以上),且伴有皮疹,肌肉酸痛和乏力.实验室血常规检测发现轻度血小板降低伴淋巴细胞减少,登革病毒IgG/IgM快速诊断试剂盒检测发现一名患者登革病毒IgM阳性.实时荧光RT-PCR检测证实两患者血液中登革病毒和基孔肯雅病毒核酸均阳性,同时用RT PCR方法扩增获得了登革病毒C-prM蛋白部分基因,经测序和同源性分析,证实感染登革病毒属于Ⅰ型登革热病毒.这是我国首次出现的输入性登革病毒合并基孔肯雅病毒感染病例,本研究建议对流行病史和临床症状满足的病例要同时进行两种病毒的实验室检测.
作者：张瑾；徐翮飞；薛晓宁；朱可；陈晓光；张娟；林元；张齐 刊期： 2017年第02期
本实验室自2011年开始在鄱阳湖周边地区开展家禽养殖户和活禽市场环境中的禽流感病毒监测,在2011～2016年的监测过程中,通过病毒分离和深度测序,发现了一株H12N2亚型禽流感病毒,这是在中国首次检出该亚型病毒.该标本来自一份鸭粪便标本,采集自江西省余干县的一个家禽养殖场.病毒的8个片段分别与来自鸭或者野禽中的病毒为接近.对病毒的全基因组系统进化分析表明,该病毒属于欧亚谱系.HA蛋白裂解位点序列为PQAQDR/GLF,属于低致病性禽流感病毒,受体结合位点分析表明病毒对α-2,3唾液酸受体亲和力较好.病毒NA的茎部没有氨基酸的缺失,但是PB1蛋白的L13P和L473V可以增强病毒聚合酶在哺乳动物中复制的能力和病毒对于哺乳动物的毒性.M1蛋白N30D突变和T215A突变提示会增加流感病毒对于哺乳动物的致病性.本次从家禽养殖场环境中检出野鸟相关的禽流感病毒进一步说明了在该地区进行禽流感病毒监测的重要性,以及在家禽-野鸟界面加强生物安全措施的必要性,需要持续进行监测,为禽流感病毒的暴发提供预警,为人感染禽流感病毒提供风险评估的依据.
作者：张恒；袁辉；陈涛；曾晓旭；赵翔；傅伟杰；谢昀；祝菲；焦铭；刘晓青；王大燕；舒跃龙 刊期： 2017年第02期
本研究通过对中国山西省2009～2015年哨点医院所采集的发热伴出疹症候群(Rash and fever syndrome,RFS)监测病例中六种病毒性病原体(麻疹病毒,风疹病毒,肠道病毒,水痘-带状疱疹病毒,人类小DNA病毒B19和登革病毒)进行描述性流行病学研究,阐明RFS在人群和时间的分布特点,揭示山西省2009～2015年RFS六种病毒病原谱构成及其流行规律,为山西省进一步开展RFS的预防和控制工作提供科学依据.在2009年1月1日至2015年12月31日期间,山西省共检测RFS监测病例846例,检出RFS病毒性病原阳性病例504例,阳性率为59.57％.其中麻疹病毒阳性192例(38.10％),肠道病毒阳性93例(18.45％),风疹病毒阳性87例(17.26％),水痘-带状疱疹病毒阳性83例(16.47％),人类小DNA病毒B19阳性48例(9.52％),登革病毒阳性1例(0.20％).RFS阳性病例主要集中在15岁以下的儿童和学生,不同性别之间病原检出率无统计学差异,但不同年龄组的病原谱构成略有差异.RFS发病呈现出明显的季节性,3～8月为其发病高峰.监测数据提示我国应加强RFS系统性和连续性监测,将15岁以下的儿童和青少年作为重点监测人群,不同省份和地市可根据实际发病情况制定出具体的、有针对性的监测方案,以阐明本省或本地区RFS病毒病原的构成及其流行规律和疾病负担.
作者：邱琪；柴志凯；郜慧；任斌知；常少英；许文波；王英；崔爱利 刊期： 2017年第02期
本实验将基于埃博拉病毒表面糖蛋白抗原GP基因序列,按照哺乳动物密码子使用频率优化,并与人IgG恒定区构建融合蛋白GP-Fc基因序列,重组蛋白序列插入基因疫苗载体pVR中,构建重组蛋白基因疫苗pVR-modGP-Fc.通过基因疫苗导入系统免疫小鼠,用间接ELISA和间接免疫荧光对抗体效价进行评估.实验结果显示,重组蛋白GP-Fc的基因疫苗可以很好的刺激小鼠产生特异性抗体,免疫周期结束后,小鼠血清中结合效价终点达到高剂量组1∶300 000及低剂量组1∶180 000,同时血清中的抗体可以很好地结合表达GP抗原的细胞表面,表现出很强的荧光信号.通过该研究我们验证重组蛋白基因疫苗pVR-modGP-Fc可以很好地诱导BALB/c小鼠产生较高滴度的抗原特异性IgG,具有较好的免疫原性.
作者：杨韧；张晓光；王娇；朱莹；曹玉玺；曾毅 刊期： 2017年第02期
致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)是西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒等重要的媒介.蚊浓核病毒(Mosquito densovirus,MDV)是特异性感染蚊类的病毒,对蚊虫具有明显的致病性.为研究MDV对致倦库蚊的致病效应,我们使用不同浓度埃及伊蚊浓核病毒(Aedes aegypti densovirus,AaeDV)感染致倦库蚊不同发育阶段的幼虫、蛹与成蚊,测定其感染率与死亡率,结果证实AaeDV对致倦库蚊1～2龄幼虫、3～4龄幼虫、蛹和雌雄成蚊的感染率分别为93.33％±2.49％ 、66％±3.74％、2.67％±0.94％、23.33％±3.40％和24.00％±1.63％,感染率与其发育阶段有关而与性别无关.AaeDV对幼虫的杀伤效果具有剂量依赖性,且与发育阶段有关,在1×1011拷贝/mL浓度下,新孵化龄幼虫和3～4龄幼虫的死亡率高达95.33％±0.74％和61.67％±2.07％.因此AaeDV对致倦库蚊具有生物防制的潜在价值.
作者：王衍海；赖植发；顾金保 刊期： 2017年第02期
本研究基于2009～2015年我国北京、河北、湖南、山东、山西、陕西六个地区脑炎脑膜炎症候群监测数据,针对腮腺炎病毒引起的脑炎脑膜炎(简称腮腺炎脑炎脑膜炎)病例检出情况和流行病学特征进行系统分析.结果显示,2009～2015年期间,我国六个监测地区腮腺炎病毒是引起病毒性脑炎脑膜炎的主要病原之一.在6 002例脑炎脑膜炎监测病例中,共检测到489例腮腺炎脑炎脑膜炎病例,腮腺炎病毒阳性检出率为8.15％.通过流行病学分析,发现腮腺炎脑炎脑膜炎和普通腮腺炎的流行病学特征是一致的.腮腺炎脑炎脑膜炎发病主要集中在冬春季节;15岁以下的儿童和青少年是腮腺炎脑炎脑膜炎的主要发病人群,占腮腺炎脑炎脑膜炎总病例数的89.16％,腮腺炎病毒检测的阳性病例数和阳性检出率男性高于女性;发病人群主要为散居儿童、学生和幼托儿童;腮腺炎脑炎脑膜炎临床表现主要症状以发热、恶心、呕吐和精神萎靡为主.部分患者还表现为嗜睡、抽搐、意识障碍、脑膜刺激征、颈项强直等中枢神经感染症状.15岁以下儿童和青少年是我国预防腮腺炎脑炎脑膜炎的重点人群,也是腮腺炎病毒减毒活疫苗免疫接种的重点人群.本文通过对2009～2015年脑炎脑膜炎症候群监测病例中腮腺炎脑炎脑膜炎病例进行分析,初步阐明了腮腺炎病毒在我国病毒性脑炎脑膜炎症候群中检出情况和流行特征,为我国腮腺炎的防控,尤其是腮腺炎病毒引起的脑炎脑膜炎的防控提供了一定的基础数据.
作者：崔爱利；邱琪；李芳彩；李俊华；王常银；许青；谢正德；刘钢；李琦；韩旭；张创业；任斌知；史伟；余鹏博；许文波；吴宏伟 刊期： 2017年第02期
丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是导致人类肝脏疾病的重要病原体.长链非编码RNA(Long noncoding RNA,IncRNA)参与了许多疾病和生物过程的调控,但是lncRNA在HCV感染中的作用还了解很少.本研究旨在筛选HCV感染人肝癌细胞系Huh7.5.1后差异表达的长链非编码RNA(lncRNA),并研究相关lncRNA对细胞增殖及周期相关基因表达的影响.首先,分析HCV感染Huh7.5.1细胞72h前后lncRNA芯片表达谱;然后采用实时荧光定量PCR(Reverse tanscription-quantitative real time PCR,RT-qPCR)的方法对芯片中差异表达明显的17条IncRNA进行细胞水平验证;进一步采用CCK8以及ki67细胞增殖实验研究差异表达明显的lncRNA对细胞增殖的影响;后采用RT-qPCR探讨lncRNA对细胞周期蛋白基因cyclin B1/D1/E1的mRNA表达的影响.lncRNA芯片检测结果与RT-qPCR验证的相符的lncRNA中,发现HCV感染Huh7.5.1细胞后上调和下调明显的两条lncRNA分别是RP11-288L9.1与ADAM20P1,而沉默RP1l-288L9.1能抑制细胞周期蛋白基因cyclin B1/D1/E1的表达水平,并抑制Huh7.5.1细胞增殖.首次发现HCV感染后上调的RP11-288L9.1能促进细胞周期蛋白基因的表达水平和Huh7.5.1细胞增殖,另一种下调的ADAM20P1对细胞增殖影响不大.研究结果为HCV感染及肝癌细胞增殖提供了潜在的诊断标志物和治疗的新型靶点,具有一定的参考价值.
作者：付忠晓；李舒；向田；谢焱；章晓联 刊期： 2017年第02期
为了解重庆地区流行的7型腺病毒(Human adenovirus 7,HAdV-7)基因型型别,从全基因组水平探讨HAdV-7b和HAdV-7d可能的致病性差异,收集儿童急性下呼吸道感染患儿的呼吸道分泌物标本分离培养,提取DNA后进行HAdV-7基因型别鉴定、限制性酶切分析和全基因组测序,再利用MEGA6比较分析.本研究在2009年6月～2013年1月间共收集4334份急性下呼吸道感染患儿的鼻咽抽吸物标本,随机选取2411份进行病毒分离培养,共有164份(164/2411,6.8％)鼻咽抽吸物HAdV阳性,其中HAdV-7 87例.限制性酶切分析显示,随机挑选的3株HAdV-7分离株均为HAdV-7d.CQ1198株行全基因组测序并与其他HAdV-7全基因组构建进化树,结果发现16株中国地区的HAdV-7为HAdV-7d基因型,且上述16株HAdV-7与7d2的同源性为99.9％,与7b的同源性为98.2％.相较于ak40株(HAdV-7b),CQ1198共有49处核苷酸替换,其中20处可导致非同义替换;4处核苷酸插入,其中24 bp和18 bp 2个片段插入分别位于病毒相关RNAⅡ(Virus-associated RNAⅡ,VA RNAⅡ)和L3的pⅥ区域.HAdV-7可有多个基因型致病,且一直处于进化过程中,其主要流行基因型由HAdV-7b变为HAdV-7d.应加强对HAdV分子流行病学监测,明确其进化规律,为HAdV疫苗研发提供分子流行病学依据.
作者：任洛；付扬喜；郑首燕；王鹂鹂；倪科；王莉佳；臧娜；谢晓虹；邓昱；刘恩梅 刊期： 2017年第02期
本研究通过透射电镜观察自噬体的形态学结构,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞自噬相关蛋白LC3 Ⅱ和磷酸化mTOR (p-mTOR)表达量的动态变化趋势,探索番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染对细胞自噬的影响.结果显示,MDRV-YB株感染的DF-1细胞中可见典型的包裹胞浆成分的双层膜结构;MDRV感染番鸭成纤维细胞(MDFs)和DF-1细胞后0～60h内,其LC3Ⅱ表达量均呈现先升高后降低的趋势,且均在感染后36 h达到大值,其p-mTOR表达量均呈现先降低后回升的趋势,且分别在感染后36h和24h达到低值;灭活MDRV组细胞未见LC3Ⅱ表达.结果表明MDRV能够诱导感染的MDFs和DF-1细胞持续较长时间细胞自噬,而灭活的MDRV不能引起细胞自噬.
作者：吴异健；崔龙萍；黄诗杭；王全溪；吴晓平；周五朵；朱二鹏；黄一帆；吴宝成 刊期： 2017年第02期
为了研究Ⅰ类新城疫病毒在中国的分布及分子演化特征,2011～2015年按照《国家动物疫病监测与流行病学调查计划》,随机从国内26个省市945个采样点共采集家禽口咽、泄殖腔拭子及环境样本53 176份,通过病毒分离和RT-PCR对中国Ⅰ类新城疫病毒的分布和分子特征进行了调查分析.结果显示,2011～2015年共分离到Ⅰ类新城疫病毒1 472株,其中,2011年病毒分离率高,随后病毒分离率有所下降;Ⅰ类新城疫病毒分布范围广,在中国22个省市均分离到病毒,病毒主要分布于华东、华中、华南和西南地区;活禽批发市场和农贸市场的Ⅰ类新城疫阳性率明显高于养殖场和屠宰场;分离株主要来源于鸡(1 182株),鸭、鹅、鸽子和环境样本中也存在Ⅰ类新城疫病毒;所有分离株可划分为3个基因型(1～3型),其中基因3型为近年来中国流行的主要基因型.
作者：王静静；吕艳；赵云玲；郑东霞；左媛媛；于松梅；刘华雷；王志亮 刊期： 2017年第02期
以脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)作为病毒载体,寻找基因组里理想的外源基因插入位点,为构建多价疫苗奠定基础.猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征等多种疾病.脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)宿主谱广,能够天然感染多种哺乳动物.本研究采用EMCV NJ08毒株cDNA感染性克隆,将PCV2 ORF2基因插入EMCV L蛋白基因第6位及第7位氨基酸之间,拯救获得重组EMCV rNJ08/Cap,拯救病毒含有分子遗传标记.Western Blot和IFA结果显示,该重组病毒成功表达Cap蛋白.重组病毒rNJ08/Cap在BHK-21细胞上生长曲线和病毒蚀斑大小与亲本病毒NJ08相似,证明EMCV可以作为表达外源基因的病毒载体,为PCV2和EMCV疫苗研究奠定了重要基础.
作者：李亮；范慧；武迪；王先炜；姜平；白娟 刊期： 2017年第02期
为了研究干扰素刺激基因Viperin对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抗病毒作用,本研究构建了猪源Viperin基因(sViperin) pCI-sVIP表达载体,并在MARC-145细胞上观察了其对PRRSV复制的抑制作用.结果为:过表达sViperin蛋白可以抑制PRRSV在MARC-145细胞上的复制,且具有剂量依赖作用.sViperin蛋白抑制了病毒的入胞,但其对病毒的装配和释放没有影响作用.共聚焦实验证明sViperin蛋白主要定位于内质网等细胞器.sViperin蛋白和PRRSV GP5、N蛋白在细胞内存在共定位现象.CO-IP实验证明sViperin蛋白可以和PRRSV N蛋白存在相互作用.该研究为该病毒新型抗病毒药物研究奠定了重要基础.
作者：方剑玉；白娟；郭小参；白献晓；朱文豪；姜平 刊期： 2017年第02期
本文旨在通过酵母双杂交技术研究杨扇舟蛾颗粒体病毒(ClanGV)的经口感染因子PIF0和其他经口感染因子PIF1～PIF6之间的互作关系.首先根据ClanGV的基因组序列信息,利用在线软件TMHMMServer v.2.0对PIF0～PIF6进行跨膜区分析,确定需要扩增的片段.然后以诱饵载体pGBKT7和捕获载体pGADT为出发载体,构建了PIF0的重组诱饵载体(B0)和PIF1～PIF6的重组捕获载体(A1～A6).自激活实验证明,重组诱饵载体B0没有自激活特性,可以进一步开展蛋白的互作研究.酵母双杂交结果证明,PIF0作为诱饵载体时,可以与PIF3和PIF5的重组捕获载体发生蛋白相互作用,与PIF1、PIF2、PIF4和PIF6都没有互作现象.本研究结果将有助于揭示PIF0在ClanGV经口感染过程中的功能,并可为阐明ClanGV的经口感染机制以及开发新型病毒杀虫剂和增效剂奠定基础.
作者：梁振普；吴慧；张小霞；张亲；王彩平；刘雅静；张俊庆；桑思瑶 刊期： 2017年第02期
利用生物信息学软件对编码中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV) VP2结构蛋白的密码子进行优化来提高VP2蛋白表达量,并进行免疫原性研究确定VP2蛋白的免疫原性.通过对17株囊状幼虫病毒(SBV)和7株中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的VP2基因序列进行比对,选取代表毒株(GenBank:HM237361.1)CSBV-LN株VP2基因作为参考序列,并用在CSBV所有毒株中保守性相对较强的氨基酸替换CSBV-LN株VP2对应位置的氨基酸,通过在线软件(http://www.jeat.de/和http://genomes.urv.es/OPTIMIZER/)对其密码子进行优化,构建原核表达质粒pET-28a-optiVP2,并转化入BL21(DE3)中,进行诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Westren blot鉴定正确后,将表达蛋白纯化并免疫至自来杭母鸡,对免疫鸡的抗体水平和淋巴细胞增值指数进行检测,研究CSBV VP2蛋白的免疫原性.同时,收集免疫后鸡蛋制备卵黄抗体,经纯化再与CSBV相互作用后,接种于3日龄蜜蜂幼虫,观察接种后幼虫死亡率,研究卵黄抗体中和CSBV病毒能力.结果显示,优化后的optiVP2能够在大肠杆菌中高效表达,其表达产物具有良好免疫原性,表达产物接种白来杭母鸡可诱导产生抗体,制备的卵黄抗体具有中和CSBV的作用.本实验实现了CSBV结构基因VP2在原核系统的高效表达,鸡免疫实验表明其具有良好免疫原性,并且可诱导鸡产生保护作用中和抗体,为进一步开发防治CSBV的生物制剂提供了帮助.
作者：李芳兵；费东亮；张皓淳；胡影；魏东；张鹤；岳金金；马鸣潇；曲祖乙 刊期： 2017年第02期
对中国分离株慢性蜜蜂麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)Ch1编码区全基因序列进行克隆、测序、分析.利用RT-PCR方法和生物信息学软件,对本实验室分离到的Ch1株CBPV编码区的基因序列进行克隆,测序,与GenBank收录的CBPV毒株进行同源性比较,并以RdRp为靶基因构建了遗传进化树.结果显示,CBPV Ch1株的编码区由RNA1(GenBank No.KU950353)和RNA2(GenBank No.KU950354)两部分构成,全长5 979个核苷酸.其中RNA1片段全长3 674个核苷酸,编码3个开放阅读框,RNA2片段全长2 305个核苷酸,编码4个开放阅读框,RNA2片段中ORF2和ORF3,可能编码两个结构蛋白,分别命名为SP1和SP2.RNA1和RNA2核苷酸序列与2005年法国分离株Fr2核苷酸序列同源性高,分别为96.1％和95.5％,但预测蛋白SP1核苷酸序列同源性与2006年乌拉圭分离株Ur1核苷酸序列同源性高(96.9％).基于RdRp为靶基因进行了遗传进化分析表明,Ch1株与Fr2株位于同一分支,且在该区域,Ch1株与Fr2株的核苷酸序列同源性高(96.5％).本实验成功分离到一株CBPV(KU950353,KU950354),并命名为Ch1株,完成了Ch1株CBPV的编码区的序列测定以及核苷酸序列与推导的氨基酸序列同源性比较及遗传进化分析,为研究CBPV的致病机制和免疫机制提供重要信息.
作者：魏东；钟义；张皓淳；姜莉莉；费东亮；胡影；李芳兵；张鹤；岳金金；马鸣潇 刊期： 2017年第02期
动物源性呼吸道病毒及媒介传播病毒所导致的新发突发传染病对公共卫生及社会经济危害重大.为了阐明这两类重要新发突发病原体起源、演化与传播扩散的生物学基础,及其鉴别的分子标记,由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所牵头、舒跃龙研究员作为项目首席科学家,凝集了10家我国新发突发传染病应对一线单位和微观组学、计算生物学和群体遗传学优势平台单位的“重要新发突发病原体发生与播散机制研究”项目获得了“十三五”国家重点研发计划专项资助.该项目将围绕“分子标记的筛选——分子标记的验证——分子标记指标体系的形成”三个环节,从病原体与宿主、个体与群体、基因型与生物表型三个方面,分子、细胞、动物和群体4个层面,筛选及验证同病原发生、传播、致病、耐药相关的病原及宿主关键分子标记,建立一套基于分子调频理论的新发突发传染病分子标记指标体系.
作者：舒跃龙；周剑芳；肖恒怡；高海女 刊期： 2017年第02期
初步建立了寨卡病毒(Zika virus) IgG抗体的间接ELISA检测方法,为开发相应的血清学诊断试剂提供理论依据.选取寨卡病毒四种抗原,即E蛋白胞外区(Ectodomain)、NS1蛋白、C蛋白和rEⅢ蛋白进行重组表达和纯化,分别包被ELISA板并用间接法检测寨卡病人临床血清和正常人血清,确定每种检测抗原的检测敏感度和特异度.重组表达并纯化的四种寨卡病毒抗原浓度和纯度均达到检测要求.间接ELISA检测结果显示E蛋白胞外区和NS1蛋白的检测敏感度和特异度均达到较高水平,但C蛋白和rEⅢ蛋白的检测敏感度很低,不适合作为寨卡病毒的检测抗原.本研究初步评价了寨卡病毒四种抗原检测相应IgG抗体的敏感度和特异度,为研制血清学诊断试剂奠定了基础.
作者：芜为；邢骁跃；张全福；张硕；李川；李建东；梁米芳；李德新 刊期： 2017年第02期
为了比较RFFIT、FAVN、ELISA及狂犬病中和抗体检测试剂盒(RVNA Kit)等四种方法对狂犬病抗体的检测效果,对65份狂犬病疫苗免疫前、免疫后临床血清样本,分别使用RFFIT、FAVN、ELISA及RVNA Kit方法对狂犬病病毒特异性抗体进行测定,并对检测结果的阳性符合率、相关性及重复性进行分析.检测结果显示,RF-FIT、FAVN及RVNA kit的阳性符合率为100％,三种方法与ELISA试剂盒的阳性符合率为95.38％,对0.5IU/mL～10IU/mL的血清样本进行阳性符合率分析显示,四种方法的阳性符合率为100％;相关性研究结果表明,RF-FIT、FAVN及RVNA Kit之间任意两种方法检测结果的相关系数均超过0.97,但ELISA与其他三种方法检测结果的相关系数均低于0.86;同一份样品的重复性检验结果显示,RVNA Kit和ELISA比RFFIT和FAVN具有更好的重复性,而RVNA Kit的重复性好,其变异系数仅6％.研究结果表明,RFFIT、FAVN及RVNA Kit等三种方法可通用于血清中抗狂犬病病毒中和抗体的检测,而ELISA检测结果与中和抗体效价有一定差距,但在经过优化、校验后ELISA也可以在有效范围内用于狂犬病抗体的检测.
作者：于鹏程；由淑珍；卢学新；陶晓燕；刘淑清；纪军；朱武洋 刊期： 2017年第02期
建立一种通用的检测不同物种来源A组轮状病毒的逆转录实时荧光定量PCR方法(RT-qPCR).根据轮状病毒保守的NSP5基因的保守序列设计引物和探针,建立并优化RT-qPCR检测体系;同时通过9份轮状病毒毒株和96份临床标本的检测对该方法和目前常用的基于NSP3基因的2种RT-qPCR方法进行灵敏度和检出率的比较.新建立的RT-qPCR方法特异性高,重复性好;与基于NSP3基因的方法相比:(1)在临床标本检测中,检出率无差异;(2)9株培养病毒检测中,NSP5体系可全部检出,两个NSP3对照体系NSP3-1和NSP3-2的检出率分别为78.78％(7/9)和88.89％(8/9);(3)NSP5体系与对照NSP3-1体系灵敏度相当,检测下限比NSP3-2体系低100倍.本研究建立的基于NSP5的荧光定量PCR体系灵敏度高,可检测毒株范围广,为检测不同物种来源的A组轮状病毒提供一种新的选择.
作者：曾渊君；李廷栋；鄢小琼；许红梅；杨晗；贾连智；李毅坚；罗国兴；葛胜祥；夏宁邵 刊期： 2017年第02期
