目的 观察鞘内注射甘珀酸(CBX)对腰5脊神经切断(SNT)大鼠机械痛阈及脊髓背角星形胶质细胞标志物(GFAP)和TNF-α、IL-1β表达的影响.方法 36只成年♂ SD大鼠,随机分成3组(n=12),假手术组(Sham组)、SNT+NS组(NS组)、SNT+CBX(CBX组).Sham组仅暴露腰5脊神经,不切断,NS组和CBX组切断腰5脊神经.术后10 d,Sham组和NS组鞘内注射生理盐水10 μl,CBX组鞘内注射甘珀酸5 μg(10 μl),分别于术前1 d,术后1、3、5、7、10 d及给药后1、2、4、6 h随机取6只大鼠测损伤侧机械痛阈(MWT),并采用免疫组化技术观察给药后2 h后损伤侧脊髓背角中GFAP表达的变化,ELISA测定损伤侧脊髓背角TNF-α和IL-1β的水平.结果 3组大鼠术前1 d,MWT差异均无显著性(P>0.05);Sham组术后各时间点与术前相比损伤侧MWT差异无显著性(P>0.05);与Sham组相比,NS组和CBX组术后1、3、5、7、10 d痛阈明显下降(P<0.05);NS组术后10 d给药后1、2、4、6 h,MWT与给药前无差异(P>0.05),但给药后2 h损伤侧脊髓背角GFAP的表达和TNF-α、IL-1β的水平较Sham组明显增高(P<0.05);CBX组给药后1、2、4 h损伤侧MWT较给药前明显提高(P<0.05),6 h无差异(P>0.05),给药后2 h损伤侧脊髓背角GFAP的表达和TNF-α、IL-1β的水平较NS组明显降低(P<0.05).结论单次鞘内注射5 μg CBX可改善脊神经切断大鼠损伤侧机械痛敏行为,该效应可能与其抑制损伤侧脊髓背角星形胶质细胞的活化,减少TNF-α、IL-1β的释放有关.
作者：李雪飞；许倩；许佩龙；谢文强；王洪超；李伟伟；刘健；李伟彦 刊期： 2012年第03期
目的 探讨人参皂苷Rg1 (Ginsenoside Rg1,Rg1) 抗球囊损伤所致血管内膜异常增生的作用机制.方法利用♂ SD (Spragye-Dawley) 大鼠建立颈总动脉球囊损伤引起内膜异常增生模型,制模后次日起,每日腹腔注射Rg1 4、8、16 mg·kg-1,模型组与假手术组给予等体积生理盐水,连续给药14天后取损伤侧颈动脉,石蜡切片后行H.E.染色,光镜下观察颈动脉内膜组织形态学变化,并用Q Win图像处理与分析系统计算新生内膜面积及内膜/中膜面积的比值;比色法检测大鼠血浆中超氧化物歧化酶 (SOD) 的活力和丙二醛 (MDA) 的含量;另用实时荧光定量PCR (Real-Time RT-PCR) 法检测内皮型一氧化氮合酶 (eNOS) mRNA的表达.结果 光镜发现,Rg1给药可明显改善球囊损伤所致血管内膜组织形态学的异常;与模型组比较,Rg1能呈剂量依赖性地减小新生内膜面积和内膜面积/中膜面积的比值(P<0.01).球囊损伤使大鼠血浆SOD活力降低,MDA含量增加,损伤血管壁的eNOS mRNA表达明显下调,而Rg1则使血浆SOD活力明显升高(P<0.05)、MDA含量明显下降(P<0.01).小剂量Rg1使eNOS mRNA的表达趋于升高,中、高剂量Rg1则明显上调eNOS mRNA的表达(P<0.01).结论 Rg1抗球囊损伤所致大鼠颈动脉内膜增生作用可能与其抗氧化和促进eNOS表达,从而增加NO生成有关.
作者：高杨；吴芹；杨丹莉；邓江；黄燮南 刊期： 2012年第03期
目的 探讨RNA干扰介导甲基CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)基因沉默对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响.方法根据MeCP2的碱基序列设计并合成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),通过脂质体LipofectamineTM 2000转染到HSC-T6细胞内,荧光倒置显微镜观察细胞的转染效率,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HSC-T6细胞增殖变化;Quantitative Real-Time PCR检测α-SMA、MeCP2 mRNA的表达;流式细胞术检测HSC-T6细胞周期的变化;Western blot检测α-SMA、MeCP2蛋白的表达.结果将MeCP2-siRNA转染进HSC-T6细胞内,MeCP2基因及蛋白水平明显降低;同时α-SMA mRNA及α-SMA 蛋白的表达水平亦明显降低;靶向封闭MeCP2基因的表达可明显抑制HSC-T6细胞的活化增殖.结论 靶向封闭MeCP2的表达可明显抑制HSC-T6细胞活化增殖,MeCP2可能是潜在的肝纤维化治疗靶点.
作者：陶辉；黄成；杨晶晶；马陶陶；张磊；卞尔保；李政通；章慧；吕雄文；李俊 刊期： 2012年第03期
目的 比较研究中药补骨脂中两种重要组分--补骨脂素与异补骨脂素对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)分化成熟的影响.方法 取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3天换液1次,铺满80%皿底后传代培养.以1×10-5mol·L-1的补骨脂素和异补骨脂素对ROB的分化成熟进行药物干预,比较补骨脂素组、异补骨脂素组和不加药的对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性、碱性磷酸酶阳性克隆数(CFU-FALP)、骨钙素分泌量、钙盐沉积量以及钙化结节数量的差异,Real Time RT-PCR检测IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的基因表达情况.Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量.结果 补骨脂素和异补骨脂素均可促进ROB的分化成熟,具体表现在明显提高ROB的ALP活性,促进钙盐的沉积以及骨钙素的分泌,增加CFU-FALP和钙化结节数量,提高IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的mRNA水平,增强Ⅰ型胶原的蛋白表达,但异补骨脂素的活性明显高于补骨脂素.结论 异补骨脂素促进ROB分化成熟的活性明显高于补骨脂素,提示异补骨脂素是中药补骨脂发挥抗骨质疏松活性的主要有效成分,具有开发为抗骨质疏松新药的潜力.
作者：翟远坤；潘亚磊；牛银波；武祥龙；梅其炳 刊期： 2012年第03期
目的 探讨芝麻素改善2型糖尿病大鼠主动脉内皮功能损伤的作用及可能机制.方法 采用长期高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病大鼠模型.灌服不同剂量芝麻素(120、60 mg·kg-1·d-1)8周后处死动物.离体血管灌流法测大鼠主动脉内皮依赖性舒张反应及NO生物活性,测血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和总抗氧化能力(total antioxidative capacity,T-AOC),Western blot测主动脉内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶亚基P47phox蛋白表达.结果与模型组相比,芝麻素(120 mg·kg-1·d-1)组内皮依赖性血管舒张功能增强,NO活性升高;血清MDA含量降低,T-AOC水平升高;主动脉eNOS蛋白表达增高,NT和P47phox蛋白表达降低.结论 芝麻素可改善糖尿病大鼠血管内皮功能,其机制与上调血管eNOS表达和减轻NO氧化失活有关.
作者：郭莉群；杨解人；孔祥 刊期： 2012年第03期
目的 研究TRB3与肾纤维化的关系和作用机制.方法 结扎♂性C57BL/6小鼠单侧输尿管,建立肾纤维化模型.利用H&E染色和Masson染色确立纤维化病变.在过表达TRB3条件下,利用免疫印迹检测E-cadherin和α-SMA表达改变.在干扰TRB3条件下,利用细胞划痕实验检测细胞迁移.结果 肾纤维化模型组TRB3蛋白表达高于假手术组(P<0.01),且与纤维化严重程度正相关.在大鼠肾小管上皮细胞NRK中过表达TRB3,导致E-cadherin表达降低,而α-SMA表达增高.干扰TRB3降低TGF-β1诱导的HepG2细胞迁移.结论 TRB3在纤维化肾脏组织中表达增高.TRB3可能通过诱导上皮-间叶转化在纤维化的进展中发挥促进作用.
作者：刘进稳；辛冰牧；慕容；花芳 刊期： 2012年第03期
目的 建立豚鼠高胆固醇血症模型,并对形成机制进行探讨.方法 高脂饲料诱导法建立豚鼠高胆固醇血症模型,分别于造模1、2、4周检测血清脂质的动态变化;检测肝脏脂质;酶联免疫分析法测定血清ox-LDL浓度;实时荧光定量PCR法检测肝脏CYP7A1(cholesterol 7a-hydroxylase A1)、肝脏法尼酯X受体(hepatic farnesoid X receptor,FXR)、肝X受体α(liver X receptor,LXRα)、HMG-CoA还原酶mRNA的相对表达;Western blot法检测肝脏LDL-R的蛋白表达情况.结果 豚鼠经高脂饲料诱导1周后,模型组与对照组比较血清TC、LDL-C即发生升高,随造模时间延长,血脂一直维持在较高水平.造模4周后模型组血清ox-LDL、sd-LDL浓度,肝脏TC水平比正常组升高.肝脏HMG-CoA还原酶表达下调,LDL-R蛋白表达量明显高于正常组.值得注意的是豚鼠肝脏法尼酯X受体(FXR)表达明显上调,且肝X受体α(LXRα)表达也明显上调,但二者激活水平相当,终未改变肝脏CYP7A1mRNA的表达水平.结论 高脂诱导豚鼠形成高胆固醇血症主要与外源性胆固醇和低密度脂蛋白的清除发生障碍有关.
作者：宋鑫；高南南；杨润梅；刘芳 刊期： 2012年第03期
目的 硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系.方法 Brdu ELISA法测细胞增殖活性;Boyden小室培养测细胞的迁移率;Western blot测细胞uPA、NF-κB的蛋白水平;细胞免疫化学测NF-κB细胞表达及细胞定位.结果 (1)与对照组(无血清培养基组)相比,10% FCS组细胞增殖活性与迁移率明显增高(P<0.05);与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖及迁移,硼替佐米浓度为(4 μg·L-1),人胃癌SGC-7901细胞增殖活性与迁移率均明显降低(P<0.05);与PDTC组(10 μmol·L-1)相比,两者无明显差别;(2)与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB蛋白表达,硼替佐米浓度为(4 μg·L-1)时uPA、NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05);与NF-κB特异性抑制剂PDTC组相比,两组uPA、NF-κB表达均无明显差别;硼替佐米浓度为(4 μg·L-1)能明显降低NF-κB核蛋白含量,与PDTC组相比,两者无显著差异(P>0.05);(4)细胞免疫化学结果示:硼替佐米(4 μg·L-1)抑制10%FCS诱导人胃癌SGC-7901细胞NF-κB核移位.结论① 硼替佐米抑制血清诱导胃癌SGC-7901细胞增殖迁移及uPA、NF-κB蛋白表达,② 硼替佐米降低胃癌SGC-7901细胞侵袭力可能与其抑制NF-κB活性,降低UPA水平有关.
作者：黄沂；张志锋；施烯；张帆；林学德 刊期： 2012年第03期
目的 观察线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)在糖尿病大鼠不同病程阶段心肌损伤中表达,并分析其作用.方法 采用STZ腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型,造模成功后分别于4周、8周、12周行离体心脏灌流,测定心室动力学指标和心肌组织SOD活性、MDA和羟脯氨酸含量变化.Real-Time qPCR测定左心室前壁心尖组织线粒体ALDH2 mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,糖尿病4周组左室发展压和左心室内压大上升和下降速率无明显变化,但心肌SOD活性降低,MDA和羟脯氨酸含量明显增高,ALDH2 mRNA表达降低;糖尿病8周、12周组左室发展压,左心室内压大上升和下降速率均降低,心肌SOD活性明显降低,MDA和羟脯氨酸含量明显增高,ALDH2 mRNA表达降低;且随着病程的延长,糖尿病大鼠不同时间段相比,动力学、心肌SOD活性、ALDH2 mRNA表达进一步降低,MDA和羟脯氨酸含量明显增高.结论 随糖尿病病程的延长,心肌ALDH2表达逐渐降低,可能与其抗氧化能力逐渐下降,心肌纤维化程度不断加重密切相关.
作者：王晓梅；叶红伟；康品方；王洪巨；高琴；李正红 刊期： 2012年第03期
目的 探讨小鼠局灶性脑缺血模型神经功能指标间的相关性.方法 采用线栓法制备局灶永久性小鼠脑缺血模型,选取不同的神经功能行为学指标并测定梗死质量百分率,对模型损伤程度进行评分,获得指标间的相关系数;选取葛根素、依达拉奉验证上述指标是否可用于药物筛选的研究.结果 术后脑缺血小鼠神经行为学与神经综合功能评分、爬板试验和转角试验相关;脑梗死质量百分比与神经综合功能评分、爬板试验相关,与转角试验不具相关性.葛根素、依达拉奉均明显降低所选指标分值,抑制小鼠的脑缺血损伤.结论 以上指标可用于评估药物对小鼠脑缺血损伤的影响研究.
作者：刘家兰；邓礼娟；原欢欢；王琴；徐晓玉 刊期： 2012年第03期
目的 研究GABAB受体特异性激动剂SKF97541对骶髓后联合核(SDCN) 神经元的作用.方法 在大鼠骶段脊髓横切薄片上,利用全细胞膜片钳法记录骶髓后联合核神经元.电流钳记录模式下,观察SKF97541对神经元膜电位和动作电位发放的影响.电压钳模式下,观察谷氨酸能兴奋性突触后电流(EPSCs)对SKF97541处理的变化.结果 SKF97541(0.5 μmol·L-1)通过作用于GABAB受体,减少SDCN神经元动作电位发放,同时促进细胞膜超极化.SKF97541在电压钳模式下,减少谷氨酸介导的微小EPSCs的频率,但对振幅无影响,提示SKF97541通过作用于突触前GABAB受体抑制谷氨酸释放.突触前刺激引起的突触后电位,也被SKF97541抑制.结论 在骶髓后联合核,SKF97541通过作用于突触后GABAB受体,直接抑制神经元的兴奋性和动作电位发放;并通过突触前GABAB受体,抑制谷氨酸的释放.以上结果提示SKF97541的抑制作用可能抑制骶髓后联合核神经元对伤害性信息的传递.
作者：马红雨；宋世平；董磊；罗丹；吕建晓；杨鲲 刊期： 2012年第03期
目的 研究新型金属铜络合物(N-Cu)在体外对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制.方法将不同浓度的N-Cu (0.3～24 μmol·L-1)作用于体外培养的SMMC-7721细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,FCM法检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR和Western blot法检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 和蛋白表达的变化.结果 N-Cu可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,呈明显的量效与时效关系.随着药物浓度的增加,G0/G1 期的细胞比率上升,G2/M和S期细胞比率下降,并促进凋亡率增加.N-Cu可上调细胞中Bax、Caspase-3基因及蛋白的表达,抑制Bcl-2基因及蛋白的表达,且均呈剂量依赖性.结论 一定浓度的N-Cu可抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期.上调Bax、Caspase-3基因及蛋白的表达,降低Bcl-2/Bax比值,可能是其诱导细胞凋亡的重要机制.
作者：张艳；韩鹏黎；徐霞；程旭芳；王宁；戈士文 刊期： 2012年第03期
目的 探讨诺美孕酮促进实验性大鼠子宫内膜异位症模型细胞凋亡及其作用机制.方法 外科手术法建立大鼠子宫内膜异位症模型;HE染色观察异位内膜病理组织学改变;ELISA测定血清中抗子宫内膜抗体(EMAb)水平;Western blot检测异位内膜组织中Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达情况.结果诺美孕酮(0.5、1.5、15 mg·kg-1)异位内膜萎缩,间质疏松,腺体数目明显减少,腺腔萎缩;诺美孕酮呈剂量依赖性地降低异位内膜厚度和EMAb的浓度;诺美孕酮(0.5、1.5、15 mg·kg-1)异位内膜组织中Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达升高、Bcl-2蛋白表达降低.结论诺美孕酮(0.5、1.5、15 mg·kg-1)可促进大鼠子宫异位内膜细胞凋亡,其作用机制可能与降低EMAb水平、上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达、激活细胞凋亡的内源性途径启动因子Caspase-9蛋白、激活执行因子Caspase-3蛋白表达有关.
作者：郝树芳；周娴颖；谢淑武；周洁芸；郭湘洁；李钊；桂幼伦；朱伟杰；朱焰 刊期： 2012年第03期
目的 研究豹皮樟总黄酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)治疗作用,并初步探讨Toll样受体4(TLR4)在治疗中的作用.方法 将SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组及TFLC组(100、200、400 mg·kg-1).除正常组外,其余各组每天给予脂肪乳剂灌胃连续10周,制备NASH模型.治疗组于造模第6周开始灌胃给予相应剂量的药物.实验10周后,检测血清ALT、AST、TC、TG、TNF-α及肝脏TC、TG含量、TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB核蛋白表达,并行病理组织学检查.结果 模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α水平及肝脏TC、TG含量明显升高,病理组织学检查显示模型组大鼠发生明显的肝细胞脂肪变性、炎症和坏死.TFLC能降低模型大鼠血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α水平及肝脏TC、TG含量,病理组织学检查显示TFLC明显改善大鼠肝细胞脂肪变性及炎症程度减轻.进一步研究发现TFLC能明显抑制TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB核蛋白水平.结论 TFLC对NASH有较好的治疗作用,且与抑制TLR4介导的细胞信号转导通路有关.
作者：王建青；李俊；邹宇宏；鲁超；程文明；吕雄文；金涌；张磊；黄成 刊期： 2012年第03期
目的 观察1′,2′,3′,7′-四氢茶黄素-3,3′-双没食子酸酯(TF3-H4)对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的影响,分析TF3-H4对两群功能相反的CD4+T细胞的作用.方法 免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞,加入ConA或PDB,和TF3-H4共同孵育12 h后收集细胞,流式细胞仪分析细胞表面早期活化标志CD69的表达.结果在ConA和PDB的作用下,两群细胞早期活化标志CD69的表达均升高.TF3-H4(20 mg·L-1)不能抑制PKC激动剂PDB激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69的表达,却能抑制ConA激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69表达;同时,TF3-H4也能明显抑制ConA激活的CD4+CD25+调节性T细胞的CD69表达.结论 茶黄素衍生物TF3-H4可能经由TCR活化途径的上游抑制CD4+CD25-效应性T细胞活化;TF3-H4对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的抑制作用,可能是该类化合物发挥抗炎、抗肿瘤作用的机制之一.
作者：李晓娟；胡义平；刘燕；姜志宏；刘叔文 刊期： 2012年第03期
目的 研究黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对高甘油三酯(HTG)血清致人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 体外培养HUVEC,终浓度为100 mg·L-1、200 mg·L-1、400 mg·L-1的SSTF分别与 HTG氧化损伤的 HUVEC共同孵育16 h,通过检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及细胞内活性氧(ROS)水平的变化,观察SSTF的保护作用,并通过RT-PCR法检测NADPH氧化酶4(NOX4) mRNA表达,Western blot法检测NOX4蛋白表达.结果各浓度组的SSTF均可明显升高HTG氧化损伤的HUVEC的 SOD活性,明显降低MDA含量,减少HUVEC内ROS水平,下调NOX4 mRNA表达和蛋白表达(P<0.01).结论 SSTF对HTG致HUVEC氧化损伤具有保护作用,其可能通过抑制NADPH氧化酶表达进而减少ROS的生成来发挥它的抗氧化作用.
作者：王锦淳；苏佩清；孙丹丹；俞霞；周晓霞 刊期： 2012年第03期
目的 研究芍药苷(PAE)调节胆碱能M受体及其信号通路抗脑缺血的神经保护作用,为脑缺血临床防治提供理论与实验依据.方法在大脑中动脉梗死(MCAO,缺血90 min,再灌24 h)诱导的大鼠局灶性脑缺血模型上,观察缺血同时给予PAE(2.5、5和10 mg·kg-1,ip,14 days)对脑梗死体积及神经症状的影响;于再灌24 h后,分别取皮层、海马和纹状体脑组织,以RT-PCR方法研究PAE对M受体、G蛋白及ATP敏感性钾通道基因表达的影响.结果 PAE可明显降低脑梗塞体积、改善神经功能缺陷;拮抗脑缺血诱导的M1、M3、M4和M5基因表达的降低及M2基因表达的增高;抑制Gi蛋白的病理性增高及Gαq/11蛋白的降低;逆转Kir6.2/Kir6.1的病理性降低.结论 M受体及其通路可能参与PAE的抗脑缺血神经保护作用.
作者：王国峰；尹鲁平；赵霞；陈冬梅 刊期： 2012年第03期
目的 探究海带多糖(laminar polysaccharide,LP)对肾上腺素代谢产物H2O2、甲醛和甲胺损伤血管内皮依赖性舒缩功能的影响.方法 制作大鼠离体胸主动脉环,将血管环分为对照组(加入等量的K-H液)、模型组(分别给予H2O2、甲醛和甲胺孵育)、海带多糖高剂量组(LP-H,给予H2O2、甲醛和甲胺孵育的同时加入高剂量LP)和海带多糖低剂量组(LP-L,给予H2O2、甲醛和甲胺孵育的同时加入低剂量LP),孵育后分别测定PE预刺激后血管环对乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)的舒张反应,及血管环对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的收缩反应.结果 H2O2孵育后,对照组、LP-H、LP-L的舒张反应明显高于模型组(P＜0.05);但各组血管环的收缩反应差异无显著性.甲醛孵育后,对照组、LP-H的舒张反应明显低于模型组(P＜0.05);对照组、LP-L和LP-H的血管收缩反应低于模型组(P＜0.05).甲胺孵育后,对照组和LP-H的血管舒张反应明显高于模型组(P＜0.05);对照组、LP-H的血管收缩反应低于模型组(P＜0.05).结论 海带多糖对肾上腺素代谢产物H2O2、甲醛和甲胺所致的血管内皮依赖性舒缩功能的损伤具有一定的保护作用.
作者：王界年；王圣泳；沈斌；庞广保；韦伍英；黎木兰；封廖芸；黎静 刊期： 2012年第03期
目的 探究大黄素(emodin)对P2X2/3受体介导的三叉神经痛的作用影响.方法 慢性压迫性损伤大鼠眶下神经(CCI-ION)建立大鼠三叉神经痛动物模型,应用von Frey细丝法测试机械痛敏阈值,观察大黄素对三叉神经痛(TN)大鼠机械痛敏阈值的影响.结合原位杂交、PT-PCR、免疫组织化学、免疫荧光、蛋白印迹等方法观察大鼠三叉神经节(TG)中P2X2/3受体的表达变化.结果术后14 d,Ⅲ组(TN模型组)和Ⅰ组(生理盐水对照组)、Ⅱ组(假手术组)、Ⅳ组(TN模型+大黄素干预组)相比较,大鼠手术侧眶下神经面部感觉区域机械痛敏阈值明显降低(P<0.01),大鼠TG中P2X2/3受体表达明显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间相比,大鼠手术侧眶下神经面部感觉区域机械痛敏阈值差异没有显著性(P>0.05);Ⅳ组TG中P2X2/3受体的表达较Ⅲ组低(P<0.01).结论 P2X2/3受体涉及到三叉神经痛,大黄素对P2X2/3受体介导的三叉神经痛有一定抑制作用.
作者：吴饶平；熊伟；欧晓艳；刘晗；邱淑怡；李桂林；徐昌水；刘双梅；梁尚栋；高云 刊期： 2012年第03期
目的 利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性.方法 体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测bFGF对未分化基因Sox-2表达的影响.结果 bFGF对ESC和3T3的半数抑制浓度和ESC的半数抑制分化浓度分别为IC50 ESC=15.2 mg·L-1,IC50 3T3=24.2 mg·L-1,ID50 ESC=1.7 mg·L-1.结论 bFGF发育毒性的判定为弱胚胎毒性.
作者：许华；邓淑琴；何清；苏本金；江海香；黄亚东 刊期： 2012年第03期
目的 观察蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,探讨其诱导凋亡的机制.方法 采用体外细胞培养方法,以不同浓度蓝萼甲素作用于HeLa细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞的存活率;透射电镜观察细胞的形态学变化;流式细胞仪(AnnexinV-FITC)检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达情况.结果 与对照组相比,蓝萼甲素对HeLa细胞有增殖抑制作用,呈剂量、时间依赖趋势;Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上调,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调.结论 蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞有增殖抑制及诱导凋亡的作用,其分子机制可能与线粒体信号通路有关.
作者：黄敬敬；王修珍；蒋小岗；顾振纶；郭次仪 刊期： 2012年第03期
目的 制备针对人淀粉样蛋白前体(APP)β分泌酶切割位点的特异性单链抗体(ScFv),并进行鉴定.方法 设计扩增单克隆抗体细胞株重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗人APPβ分泌酶切割位点单克隆抗体细胞株中扩增出VH和VL基因片段,然后通过重叠引物延伸法(SOE)将VH和VL基因拼接成ScFv基因片段,再将其亚克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达,目的蛋白经镍柱纯化和复性后,用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法对其检测分析.结果 成功从一株抗人APPβ位点单克隆抗体细胞株2H10中扩增出VH和VL并拼接成ScFv片段,片段长744 bp,编码248个氨基酸.PCR、酶切和测序表明表达载体构建成功,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可以表达出约29 ku的目的蛋白,主要为包涵体形式,经镍柱纯化和复性后,获得纯度达90%以上的ScFv蛋白,ELISA和Western blot检测表明可溶性ScFv可以与人APPβ分泌酶切割位点序列短肽和全长APP结合.结论 成功构建并表达人APPβ分泌酶切割位点的特异性单链抗体,为进一步研究其生物学活性奠定基础.
作者：黄巍；周丽荣；周婷；孙红霞；黄晓刚；刘桥 刊期： 2012年第03期
目的 建立正常人肝细胞(HL-7702)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)模型,探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)对胰岛素抵抗的改善作用及其机制.方法 培养HL-7702细胞,利用高浓度胰岛素和地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导IR模型.GOD-POD试剂盒测定细胞葡萄糖消耗量,Western blot检测GLUT1和磷酸化ERK1/2表达水平.结果 FGF-21促进HL-7702细胞葡萄糖的消耗且呈剂量依赖性,与胰岛素联合用药提高葡萄糖消耗量.在随后IR模型实验中,FGF-21改善IR模型细胞葡萄糖消耗量.FGF-21作用24 h,GLUT1的表达量明显增高,p-ERK1/2的含量增强.当加入ERK1/2特异性抑制剂PD98059,FGF-21促ERK1/2的磷酸化作用被抑制.IR模型中,FGF-21仍能提高p-ERK1/2的含量.结论 FGF-21促进HL-7702细胞对葡萄糖的消耗,改善IR HL-7702细胞葡萄糖消耗量,提高葡萄糖转运蛋白GLUT1和ERK1/2磷酸化的表达.
作者：李婷婷；高丽昌；唐禄；张健；李富勇；李海燕；王晓杰；李校堃 刊期： 2012年第03期
目的 研究苦参碱(matrine)对膀胱癌形成和发展的抑制作用及其对大鼠膀胱环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 采用N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝基胺(BBN)诱发大鼠膀胱癌,苦参碱50、100和200 mg·kg-1灌胃给药35周后,分别以病理和免疫组织化学法观察苦参碱抑制膀胱癌的作用和对膀胱组织COX-2蛋白表达的影响.结果 苦参碱对BBN诱导的大鼠膀胱癌变率无影响(P>0.05),但可抑制膀胱癌的生长(P<0.05),并可抑制浸润性膀胱癌的发生率(P<0.05).免疫组化结果显示,与BBN组比较,苦参碱各剂量组均可降低大鼠膀胱癌组织中COX-2蛋白的表达(P<0.05).结论 苦参碱对BBN诱导大鼠膀胱癌的发生无抑制作用,但对膀胱癌的生长和进展具有抑制作用,其机制与抑制大鼠膀胱组织中COX-2蛋白的表达有关.
作者：邓宁；高华；国亚芳；邱晓峰；冯军；郑萍；戴贵东 刊期： 2012年第03期
目的 研究松果菊苷(ECH)对急性脑缺血大鼠纹状体细胞外液中4种氨基酸水平和脑梗死率的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制.方法 SD大鼠随机分为假手术对照组、模型组、阳性药川芎嗪组(CXQ,40 mg·kg-1)、ECH高剂量(ECH 40 mg·kg-1)组、ECH低剂量(ECH 20 mg·kg-1)组和ECH配伍冰片(ECH 40 mg·kg-1,冰片400 mg·kg-1)组.各组大鼠给予相应的药物或者生理盐水腹腔注射,每天1次,连续7 d.在给药d 3,脑纹状体埋置探针套管,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),模型成功后立刻进行微透析.将透析液注入高效液相-荧光检测器(HPLC-RF),此方法较氨基酸分析仪相比较,具有低检测限低等特点,检测各组纹状体细胞外液中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量.结果 与假手术对照组相比,模型组的Asp、Glu、Gly、GABA水平均明显升高;ECH给药组与模型组相比,ECH高剂量组能明显降低Asp、Glu的水平,而ECH低剂量组与ECH配伍冰片组Asp、Glu降低均不明显;ECH高、低组与配伍冰片组对Gly、GABA的影响均不明显;与模型组相比,ECH高、低剂量组能明显地缩小脑梗死面积.结论 ECH对脑神经的保护作用可能与对抗脑缺血后兴奋性氨基酸升高有关.
作者：钟明；陈虹；姜勇；屠鹏飞；刘春丽；张万鑫；马静怡；丁慧 刊期： 2012年第03期
近年来研究发现,高脂饮食(高胆固醇)是阿尔采末病(AD)发病的危险因素之一,高脂饮食能够增加AD的发病率,但胆固醇不能透过血脑屏障进入脑内,所以高脂饮食不能直接导致AD的发生,它是通过何种途径引发AD是许多研究者关注的热点.该文主要围绕高脂饮食引发AD发病的可能机制的研究进展进行了阐述.
作者：何鑫；胡金凤；苑玉和；楚世峰；韩宁；陈乃宏 刊期： 2012年第03期
神经调节蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)是心血管系统中重要的信号蛋白,其在心脏发育及成熟心脏功能维持方面的作用已为人所知.目前研究表明其有可能成为心脏疾病新的治疗靶点.该文综述了关于NRG-1的一些新的研究进展,旨在为NRG-1的临床应用提供理论依据.
作者：肖坚；李宾公 刊期： 2012年第03期
目前针对非小细胞肺癌(NSCLC)的手术、放化疗等治疗手段临床疗效仍很不足,相应的分子靶向治疗药物随着临床抗药性的产生疗效也明显下降.自噬对肿瘤进展具有双重影响作用.在NSCLC临床治疗的各个阶段都应充分考虑自噬效应所起的作用,对其进行合理调节和利用,从而提高各种治疗手段的临床疗效.
作者：陈美娟；詹瑧；张旭 刊期： 2012年第03期
脑缺血疾病是现代人类健康和生命的主要杀手之一.近年研究发现,神经细胞凋亡是脑缺血疾病造成神经系统损伤的重要机制,神经细胞凋亡通路主要包括线粒体通路、死亡受体通路、PARP/AIF通路.基于神经细胞凋亡与脑缺血损伤关系的深入研究,抗凋亡治疗已经成为了治疗脑缺血疾病的重要途径.
作者：宋修云；胡金凤；陈乃宏 刊期： 2012年第03期
众所周知, 适量的光线对视觉的形成是非常必要的.相反,如果光线的强度、光照的时间等超过了视网膜的承受力, 那么将会造成视网膜的光损伤.光损伤后视网膜成分的丢失可能涉及凋亡,而Caspase3是细胞凋亡的的必经之路.重组人促红细胞生成素(rhEPO)可抑制光化学损伤诱导的人RPE细胞的凋亡,对人RPE细胞的光化学损伤有保护治疗作用［1］.本课题建立光损伤模型,应用外源性EPO进行治疗,观察EPO与凋亡、Caspase3的关系,探讨EPO的保护作用,为其临床应用治疗视网膜光损伤类疾病提供理论依据.
作者：姜文静；牛膺筠 刊期： 2012年第03期
有些人认为AD样痴呆是正常脑衰老的结果,皮质失联络是其重要基础.在20~100岁的正常衰老过程中,新皮质突触密度的下降趋向于（但未达到）AD发病的水平,如果出生时突触有缺陷或缺少教育,将引起突触过早下降到出现痴呆的水平.这种突触丧失的影响可能比斑块和神经原纤维缠结大［1］.近年来研究发现AD患者早期即可出现突触的丧失,其认知障碍程度与突触结构和功能的改变密切相关.
作者：刘卓；金英；隋海娟 刊期： 2012年第03期
中药藤黄（gamboge）系藤黄科植物藤黄树（Garcinia hanburyi Hook．F．G）所分泌的干燥树脂,近年来,藤黄的抗肿瘤作用受到高度关注.已有研究证实,新藤黄酸（neogambogic acid, NGA）为藤黄抗肿瘤作用的主要有效成分之一［1-3］.肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上常见的恶性肿瘤之一［4］,同时也是第三大引起患者死亡的肿瘤［5］.为此,本实验探讨了新藤黄酸诱导肝细胞癌HepG2细胞凋亡的作用机制,旨在为进一步开发新藤黄酸提供实验依据.
作者：刘卫海；肖国丽；赖小平；赵爱国 刊期： 2012年第03期
目的 通过建立一种体外稳定培养单个造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)的实验方法,在未来筛选可以促进HSC体外扩增的化合物.方法 通过配制HSCs体外培养液并结合流式分选技术,我们建立了一种在体外不需要基质细胞支持的,稳定的,高通量培养单个HSC形成一个血细胞集落的实验方法.结果 只需培养10~14 d即可观察到化合物对HSC的作用,并结合流式细胞分析技术替代人工计数血细胞分化情况,进一步节省人力,具有客观、重复性强的特点,满足了高通量筛选药物的要求,为后续的研究和化合物筛选工作打下基础.为了验证此方法的可靠性,使用BIO(一种通过抑制糖原合成酶激酶-3,进而可以促进HSC自我更新的化合物)时,实验结果与文献报道的研究结果一致.结论 该实验方法在有关造血干细胞体外扩增的药物筛选方面具有很好的应用价值.
作者：李乔；纪庆；王金宏；许静；田晨；程辉；刘延风；张娜；程涛；高瀛岱 刊期： 2012年第03期
