目的 研究不同动脉对同一血管收缩剂的反应性是否存在差异,及其与L-型钙通道的关系.方法 采用离体血管张力测定实验方法,测定在累积浓度血管收缩剂处理下的大鼠胸主动脉、肾内动脉或冠状动脉的张力变化以及L-型钙通道阻断剂硝苯地平(nifedipine)的影响.结果 苯肾上腺素(phenylephrine,Phe)对冠状动脉无明显影响,但可诱导胸主动脉和肾内动脉产生明显的浓度依赖性收缩,胸主动脉的pEC50明显大于肾内动脉(P<0.05);给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的Phe,胸主动脉收缩的下降幅度大于肾内动脉(P<0.05).5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)对胸主动脉的收缩作用不明显,但可浓度依赖性诱导肾内动脉和冠状动脉收缩;给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的5-HT,冠状动脉收缩的下降幅度明显大于肾内动脉(P<0.05).胸主动脉、肾内动脉和冠状动脉均对血栓素A2类似 物 (9, 11-dideoxy-11α, 9α- epoxymethanoprostaglandin, U46619)产生浓度依赖性收缩,肾内动脉收缩量效曲线的Emax小(P<0.05),胸主动脉收缩量效曲线pEC50大(P<0.05).给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的U46619,冠状动脉收缩的下降幅度大,胸主动脉收缩的下降幅度小.结论 大鼠胸主动脉、肾内动脉及冠状动脉对同一血管收缩剂的反应存在异质性,其中L-型钙通道介导的收缩作用也不同.
作者：刘林；邝素娟；杨慧；饶芳；张梦珍；麦丽萍；林秋雄；单志新；杨敏；邓春玉 刊期： 2018年第04期
目的 观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的影响.方法 Wistar大鼠随机分为正常组、糖尿病组(DM组)、APS低、高剂量组.一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备DM大鼠模型.APS低、高剂量组分别给予200、400 mg·kg-1·d-1APS干预8周.检测大鼠空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、血肌酐、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肾损伤标志物尿肾损伤分子-1 (kidney injury molecule-1,KIM-1)、尿骨桥蛋白(osteopontin, OPN)浓度.检测大鼠肾脏TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases 1,TIMP-1)、TIMP-2水平.结果与正常组比较,DM 组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、尿KIM-1、OPN浓度明显升高;肾脏 TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、TIMP-1、TIMP-2水平明显升高,而肾脏Smad7、MMP-2、MMP-9明显降低.APS明显降低了DM大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、尿KIM-1、尿OPN浓度,并抑制了肾脏TGF-β1/Smads信号通路的活性.结论 APS对DM大鼠有肾脏保护作用,其机制可能与抑制DM大鼠肾脏TGF-β1/Smad信号通路有关.
作者：李承德；王煜；曲敬蓉；张晓俊；毛淑梅；聂克 刊期： 2018年第04期
目的 研究左旋龙脑对人脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氯通道和细胞容积的作用.方法 膜片钳技术记录全细胞氯电流;siRNA 干扰技术下调ClC-3表达;动态图像分析测量细胞容积.结果20 nmol·L-1左旋龙脑能明显激活HUVECs氯电流,电流密度达(79.59 ± 4.90)pA/pF,左旋龙脑激活的电流能被氯通道阻断剂NPPB、DIDS抑制,外向电流抑制率分别为(95.57 ± 2.57)%、(97.28 ± 6.36)%;下调ClC-3氯通道表达后,左旋龙脑激活的氯电流明显减小至(27.03 ± 3.89)pA/pF;左旋龙脑能明显诱导细胞容积缩小(14.38 ± 1.58)%,氯通道阻断剂NPPB阻断左旋龙脑诱导的细胞容积改变.结论左旋龙脑能激活HUVECs的ClC-3氯通道,使Cl-外流诱发细胞容积减小.
作者：梁协稠；陈湛如；许经逵；封洁珠；伍嘉宝；徐剑英；高宏；谭秋婵；陈丽新；王立伟 刊期： 2018年第04期
目的 探讨竹节参总皂苷对小鼠结肠癌肿瘤恶病质的改善作用.方法 BALB/c小鼠皮下接种结肠腺癌CT26细胞建立恶病质模型,模型动物随机分为模型组、竹节参总皂苷低、高剂量组,接种后d4开始灌胃给药,每日给药1次,正常与模型组给予10 mL·kg-1生理盐水,低、高剂量组分别给予20、60 mg·kg-1竹节参总皂苷干预,连续给药27 d后处理动物.观察竹节参总皂苷对恶病质小鼠体质量、胫骨前肌、腓肠肌、脾脏和附睾脂肪的影响;HE染色观察腓肠肌纤维横切面积的变化;流式微球试剂盒检测血清中炎性因子TNF-α和IL-1β的表达;Western blot检测腓肠肌与胫骨前肌中NF-κB、PAX7、MuRF1蛋白表达.结果 与模型组相比,竹节参总皂苷能有效改善恶病质小鼠体质量下降(P <0.05),减少肌肉组织降解(P<0.05),同时竹节参总皂苷明显下调恶病质小鼠体内 NF-κB 表达,降低血清中 IL-1β、TNF-ɑ的水平(P<0.05).结论 竹节参总皂苷明显改善小鼠结肠癌恶病质状态,减少肌肉降解,其机制可能与抑制NF-κB介导的炎性因子表达相关.
作者：周志勇；陈亚昕；李德鸿；宋亚男；张长城；袁丁 刊期： 2018年第04期
目的 观察中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocyte- derived neurotrophic factor, MANF)在佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠膝关节滑膜和血清中的表达情况,分析MANF表达与关节炎症是否具有相关性.方法 SD大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂(Freund complete adjuvant,FCA)制备AA模型;足容积法测量继发侧足肿胀度,关节炎指数(arthritis index, AI)评价AA严重程度,HE染色观察膝关节病理学变化;分别采用Western blot和RT-PCR法检测致炎后不同时期继发侧膝关节滑膜组织中MANF和内质网应激标志蛋白BiP、CHOP的蛋白和mR-NA水平;ELISA法检测致炎后不同时期血清中MANF、C-反应蛋白(C- reactive protein, CRP)、白细胞介素1β(interleu-kin-1 β, IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNF-α)水平,并进行相关性分析.结果 AA大鼠模型建立成功,致炎d 2滑膜组织中BiP表达明显升高,到d 28稍有下降;MANF表达在致炎 d 2略有升高并保持稳定,d 14表达明显上调,随后逐渐下降;而CHOP则保持低水平缓慢上升的趋势;致炎d 14血清中MANF水平明显增高,随后逐渐下降,d 28仍高于正常水平;CRP与MANF变化趋势基本一致;在AA大鼠继发性反应期,MANF水平与关节炎症状、血清IL-1β和TNF-α水平呈负相关.结论 关节炎症能诱导MANF表达和分泌,且MANF水平与关节炎症进展和程度密切相关.
作者：马钰泱；狄泽敏；曹晴；沈玉君；沈玉先；冯利杰 刊期： 2018年第04期
目的 探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响.方法 用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型.运用荧光倒置显微镜观察重组腺病毒的转染效果,qPCR 与 Western blot 法分析 KL mRNA和蛋白表达情况;CCK-8法检测不同浓度DEX作用于MC3T3-E1细胞后的存活率及各研究组细胞的生存情况;流式细胞仪分析各研究组细胞的凋亡率;qPCR 与 Western blot分析凋亡标志物的 mRNA、蛋白表达;免疫荧光分析caspase-9的荧光蛋白表达情况.结果 重组腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨细胞,KL组和KL+DEX组的KL mRNA与蛋白表达量较非转染组明显升高.CCK-8法检测出DEX的适宜干预浓度为2.0 mmol·L-1.DEX组、GFP+DEX组较其余组细胞存活率明显降低、凋亡率明显增加,Bax、Bcl-2的mRNA与蛋白表达分别表现出增加和降低趋势;KL组细胞存活率、凋亡率,以及 Bcl-2、Bax mRNA 与蛋白表达较DEX组及KL+DEX组均明显改善.结论 大剂量DEX的运用能够诱发MC3T3-E1成骨细胞凋亡,上调KL表达具有抵抗DEX诱导成骨细胞凋亡的作用,提示上调KL表达可改善糖皮质激素诱导性骨质疏松,为大剂量使用糖皮质激素所致医源性骨质疏松的治疗提供新的靶点.
作者：黄倩；李宝善；梁霄；刘丹；马厚勋 刊期： 2018年第04期
目的 研究从大米α-球蛋白中获取的活性肽发挥抗动脉粥样硬化功效的机制.方法 大米α-球蛋白经体外消化产物,采用外翻肠囊法收集可吸收组分,利用凝胶色谱和半制备高效液相色谱分离纯化,液相质谱串联测定氨基酸序列.利用TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型来评价肽的功效.检测细胞存活率,筛选肽的合适剂量;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白质印迹检测Bcl-2、Bax、p-p38、血管细胞黏附分子及NF-κB信号通路等蛋白表达水平;酶联免疫检测谷胱甘肽过氧化物酶等氧化应激因子含量.结果 从可吸收组分中获得肽YGEGSSEEG.50 mg·L-1合成肽能够明显抑制TNF-α引起的细胞凋亡,调控Bcl-2/Bax蛋白表达以及阻碍p38蛋白的磷酸化;同时,明显抑制HUVEC产生黏附分子、阻碍NF-κB信号通路的激活;此外,肽对细胞中的氧化应激水平并无明显影响.结论 大米 α-球蛋白肽YGEGSSEEG可通过抑制细胞凋亡和降低黏附分子表达,发挥血管内皮细胞保护作用.
作者：鞠志远；王丽丽；刘丽娅；周闲容；周素梅；佟立涛 刊期： 2018年第04期
目的 阐明一类新型长链查耳酮化合物与肿瘤侵袭的构效关系.方法 以延长骨架提升特异性为基本理念,采用噻吩作为羰基端的主要衍生基团,以TSAHC为先导化合物,得到6个新查耳酮类化合物.采用Transwell法评估所得化合物的抗肿瘤侵袭作用,并对关键蛋白MMP-2进行评估,后采用SYBYL软件对这6个新化合物进行分子对接.结果所得的6个化合物的结构经H-NMR和MS确认,其中化合物2、3显现出较好的抑制肿瘤迁移能力.对接结果显示,该类化合物中的磺酰基与噻吩基团对于化合物与靶点的结合有正贡献.结论 细胞实验和分子对接共同显示,以噻吩为衍生基团的长链化修饰可以有效提高该类化合物抗肿瘤迁移的能力.
作者：赵松峰；张珩；魏涵；刘芝梅；张晓坚；刘子维 刊期： 2018年第04期
目的 探讨鬼箭羽醇提物对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝纤维化的作用与机制.方法 80只C57BL/6♂小鼠随机分成8组:正常组、CCl4组、鬼箭羽醇提物早期治疗组(EAE)和后期治疗组(EAL),治疗组再分别分为低、中、高剂量组(EAE-L/M/H,EAL-L/M/H),每组10只.腹腔注射CCl4制备肝纤维化模型,共30 d,EAE和EAL分别于前15 d和后15 d灌胃不同剂量EA.处死后,HE和Masson染色观察肝组织与胶原纤维变化,ELISA检测血清(ALT)、(AST)、(TNF-α)变化,免疫组化和 Western blot检测 α-SMA、Colla-genⅠ的表达.结果 与正常组相比,EA 各组的肝指数、ALT、AST、TNF-α及α-SMA、CollagenⅠ的表达呈剂量依赖性的低于模型组(P<0.05或P<0.01);EAE和EAL各组肝组织形态与胶原纤维变化也明显呈剂量依赖性优于模型组;且EAE组在HE染色、Masson染色及α-SMA、CollagenⅠ的表达方面,效果明显优于EAL组(P<0.05).结论 EA呈剂量依赖性阻止CCl4所诱导的小鼠肝纤维化,且早期治疗效果明显,其机制可能与抑制TNF-α的生成,进而影响α-SMA、CollagenⅠ的表达有关.
作者：万星；郭琼；刘向东；黄德斌 刊期： 2018年第04期
目的 研究腺苷对肝癌细胞增殖和自噬的作用.方法腺苷作用于HepG2细胞,CCK-8法观察细胞增殖的变化, Western blot研究LC3-Ⅱ和LC3-Ⅰ蛋白的表达,MDC染色观察自噬体数量.结果 腺苷(1.0~4.0 mmol·L-1)作用于HepG2细胞,在12、24、48 h 可明显抑制细胞增殖(P <0.01).低浓度腺苷(0.2、0.5、1.0 mmol·L-1)处理细胞24 h,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ明显降低,腺苷(1.0 mmol·L-1)对HepG2细胞自噬抑制作用强(P<0.01),高浓度腺苷(4 mmol· L-1)反而增强 HepG2细胞内自噬(P <0.05).腺苷(1.0 mmol·L-1)作用细胞24 h,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值在6、12、24 h检测点明显降低,MDC染色显示自噬体减少,在12 h检测点发现LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ低(P<0.01),自噬体基本消失.结论 腺苷抑制肝癌细胞增殖,低浓度腺苷抑制细胞自噬,高浓度腺苷促进细胞自噬,对提高肝癌药物的治疗效果有重要意义.
作者：蒲泽锦；周小涛；李国平；詹浩炼；郭益添；项梦琦；刘丽璇；谭辉；吴灵飞 刊期： 2018年第04期
目的 探讨下丘脑室旁核Epac在大鼠炎症性疼痛发展过程中的作用及其机制.方法 健康成年♂SD大鼠,通过左侧后肢足底中心皮下注射完全弗氏佐剂(complete Fre-und's adjuvant,CFA)建立炎症性疼痛模型,Western blot检测Epac蛋白的表达变化;室旁核给予 Epac激动剂8p-CPT (8p-CPT -2′-O-Me-cAMP)后,测定大鼠热缩足潜伏期(ther-mal withdrawal latency,TWL),观察痛行为变化,并在药效发挥大作用时,取出大鼠下丘脑室旁核,用Western blot检测Epac下游p-MEK1/2蛋白表达情况.结果 与生理盐水对照组相比,CFA组大鼠炎症侧后足d 1、3、5、7、9、11的TWL明显降低(P<0.01),d 13的TWL基本恢复至正常水平;d 6、8、10、12、14的机械缩足反射阈值(paw mechanical with-draw threshold,PMWT)明显降低(P<0.05).与生理盐水对照组相比,CFA组大鼠室旁核Epac1蛋白表达在d 3开始明显降低,且在d 3和d 9均有统计学意义(P<0.05),而Ep-ac2蛋白表达则没有明显变化,p-MEK1/2蛋白表达在d 3开始降低(P<0.05).与室旁核微量注射生理盐水组相比,8p-CPT组大鼠于给药后20 min和1 h热痛敏均明显减轻,TWL明显升高(P <0.05);室旁核 p-MEK1/2蛋白在给药后30 min表达明显升高(P<0.05),2 h后恢复至给药前水平.结论 下丘脑室旁核 Epac1-MEK1/2信号通路可能参与了CFA所致的慢性炎症性疼痛的发展过程.
作者：陈彬彬；黄思婷；花景煜；杜雷；姬宁宁；宋昱；章功良；张咏梅 刊期： 2018年第04期
目的 探讨丹红注射液(Danhong injection, DHI)对大鼠高脂血症的作用及机制.方法 采用高脂饲料制备大鼠高脂血症模型,检测各组大鼠肝脏腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、p-ACC的蛋白表达水平.结果给予丹红注射液后,肝脏AMPK、SREBP-1和ACC的蛋白表达水平明显降低(P<0.05),p-ACC和p-AMPK的蛋白表达水平明显升高(P<0.05).结论 丹红注射液通过增强AMPK的活化,抑制SREBP-1和ACC的活性,促进脂肪酸氧化,减少脂质沉积,有效降低了高脂血症大鼠的血脂水平.
作者：陈娟；汪胡风；邓军；周惠芬；万海同；杨洁红 刊期： 2018年第04期
目的 探讨TGF-β/Smads信号通路在姜黄素改善糖尿病心肌纤维化中的作用.方法 高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg-1建立2型糖尿病大鼠模型,自由饮用300 mg·kg·d-1姜黄素进行干预;天狼猩红染色检测各组大鼠心肌内胶原表达情况;免疫荧光检测各组大鼠心肌内Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ的表达情况;葡萄糖(5.5、20、25、30、35、50 mmol·L-1)刺激大鼠乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)24 h确定佳高糖造模浓度;30 mmol·L-1高糖加姜黄素(10、25、50、100、200 μmol·L-1)刺激CFs 24 h确定佳姜黄素给药浓度;Western blot法检测细胞内Col-lagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3、TβR-Ⅲ的蛋白表达水平.结果 相比于正常组,糖尿病组大鼠心肌组织胶原出现明显沉积,Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ表达明显增多,给予姜黄素治疗后,糖尿病大鼠心肌组织胶原沉积明显减少,Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ表达明显减少;30 mmol·L-1高糖刺激CFs 24 h可以明显促进细胞增殖(P<0.05);而10 μmol·L-1姜黄素可以明显抑制高糖诱导的CFs增殖(P<0.05);30 mmol·L-1高糖诱导CFs 24 h 以后,Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3、TβR-Ⅲ的蛋白表达明显增多(P <0.05),给予25 μmol·L-1姜黄素以后,上述各蛋白表达水平明显下降(P<0.05).结论 姜黄素可通过 TGF-β/Smads信号通路改善糖尿病大鼠心肌纤维化,对糖尿病大鼠心肌具有保护作用.
作者：沈豪；郭霜；刘秀芬；鲍翠玉；徐魁 刊期： 2018年第04期
目的 利用HepaRG细胞,探讨补骨脂二氢黄酮甲醚毒性剂量及其毒性作用机制.方法 MTT法确定毒性及剂量.以浓度为6.25、12.5、25 μmol·L-1的补骨脂二氢黄酮甲醚作用于细胞24 h后,首先利用Hoechst 33342/PI及LDH的方法检测细胞死亡,并检测凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2、caspase-3活性.通过检测线粒体膜电位、ATP含量、线粒体膜通道开放孔开放性及细胞色素C的含量,观察其对线粒体损伤的影响.结果 补骨脂二氢黄酮甲醚给药24 h后,凋亡蛋白Bax/Bcl-2比例、caspase-3活性随药物浓度增大而增加,在6.25~25 μmol·L-1时,其凋亡率呈现明显的剂量依赖性,但在25 μmol·L-1时细胞以坏死为主.作用24 h后线粒体损伤相关指标明显加剧.结论 补骨脂二氢黄酮甲醚作用于HepaRG细胞后通过损伤线粒体诱导细胞凋亡和坏死.
作者：季宇彬；王敏；王姗；罗云；孙桂波；孙晓波 刊期： 2018年第04期
目的 研究康复新液对三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的作用,并初步探讨其作用机制.方法 将♂ SD大鼠分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组和康复新液低、中、高剂量组,以三硝基苯磺酸灌肠诱导大鼠溃疡性结肠炎模型.评估疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)和病理组织学评分(HS),测定脏器指数、血清IL-4、IL-17,结肠黏膜MPO、EGF、TGF-β1的表达水平等.结果 DAI结果提示造模成功,与正常组比较,模型组IL-4、IL-17、EGF、TGF-β1均明显降低,而CMDI、HS、结肠指数及结肠黏膜MPO均明显升高.康复新液各组DAI、CMDI、HS、结肠黏膜MPO均降低(P<0.05或P<0.01),IL-4、IL-17、EGF、TGF-β1水平明显升高(P<0.01).结论 康复新液灌肠能够有效缓解三硝基苯磺酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎,其作用机制可能与下调MPO表达,上调IL-4、IL-17、EGF和TGF-β1水平有关.
作者：张汉超；王朋川；刘衡；耿福能；马秀英；何苗；张成桂；李玥 刊期： 2018年第04期
目的 探讨嘌呤P2X7R及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用.方法 采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,将30只♂ C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10):对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组,后1周,分组进行以下处理,对照组和模型组:给予等剂量的生理盐水腹腔注射(每只约0.2 mL),每日1次;A438079组:根据小鼠体质量,腹腔注射200 μmol ·kg-1的A438079(按7 g·L-1配制 A438079,每只约0.2 mL),每日1次.后1天清晨给予单次31.5%酒精溶液灌胃,剂量为10 mL·kg-1.9 h后小鼠眼眶取血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG).HE染色观察肝脏病理变化;免疫组化方法检测肝组织中P2X7R的表达;Western blot法检测肝组织中的P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18水平.结果 与对照组相比,模型组ALT、AST、TG、TCHO含量明显增强,且肝组织损伤明显;与模型组相比,A438079组ALT、AST、TG、TCHO含量明显降低.与对照组相比,模型组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达明显升高;与模型组相比,A438079组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达水平明显降低.结论 酒精诱导的肝损伤可能与P2X7R-NLRP3信号通路有关.
作者：潮蓉；武小娟；王羽辉；苏倩倩；吕雄文 刊期： 2018年第04期
目的 研究miRNA -99b及mTOR在胶质瘤中的表达水平及其对脑胶质瘤侵袭能力的影响及机制.方法 用re-al-time PCR法检测脑胶质瘤组织与对照脑组织中 miRNA-99b及mTOR的表达.miRNA-99b 模拟物与野生型或突变型mTOR 3′ UTR重组载体共转染后,应用荧光素酶基因报告系统检测miRNA-99b是否与mTOR基因3′UTR结合.应用real-time PCR法和Western blot检测 miRNA-99b模拟物转染 U251细胞后,细胞中 miRNA-99b、mTOR mRNA 和mTOR 蛋白的表达,Transwell 法检测细胞的侵袭能力.mTOR质粒转染U251细胞后,检测细胞中miRNA-99b的表达及细胞的侵袭能力的变化.统计学分析miRNA-99b表达水平与胶质瘤及预后的相关性.结果 脑胶质瘤组织中miRNA-99b表达明显低于对照脑组织,mTOR mRNA表达明显高于对照脑组织;miRNA-99b 模拟物和野生型 mTOR 3′UTR重组载体共转染的 U251细胞的荧光强度明显降低.miRNA-99b 模拟物转染后,U251细胞中miRNA-99b的表达水平上升,而mTOR蛋白及mRNA的表达水平下降,U251细胞及侵袭能力下降.改变mTOR表达后,U251细胞中miR-NA-99b的表达水平无明显变化,升高mTOR表达能够恢复因miRNA-99b抑制的细胞侵袭能力.Kaplan-Meier生存分析及Log-rank检验显示,低表达 miRNA-99b患者的总生存期明显低于高表达组.结论 过表达miRNA-99b可能通过靶向调控mTOR抑制脑胶质瘤细胞的侵袭能力,miRNA-99b可作为脑胶质瘤的治疗靶点.
作者：马鹏举；汲乾坤；李祥生；常海刚；周文科；金保哲 刊期： 2018年第04期
目的 研究天麻素(gastrodin)在甲基苯丙胺(metham-phetamine,METH)诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用,并探讨其作用机制.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,不同浓度的 METH(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mmol· L-1)处理SY5Y细胞,并在6、12、24、48 h观察SY5Y细胞自噬的情况,确定自噬的佳浓度和时间点.提前1h给予1 mmol·L-1天麻素进行干预,用显微镜观察细胞形态变化,采用激光共聚焦显微镜观察LC3-Ⅱ的改变,Western blot检测天麻素干预前后LC3-Ⅱ、Beclin-1以及Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达情况.结果 随着METH浓度(0~3.0 mmol ·L-1)的增加,SY5Y细胞逐渐变圆、突起逐渐变短、消失,同时部分细胞质内可见大小不等的空泡结构形成,细胞间隙逐渐增宽,终细胞呈漂浮状态.随着 METH 浓度的增加, SY5Y细胞LC3-Ⅱ表达水平逐渐增强.激光共聚焦显微镜结果显示,天麻素+METH组LC3-Ⅱ的表达水平比METH组降低.与对照组相比,METH组LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平明显增强(P<0.01),mTOR和Akt差异无显著性,p-mTOR、p-Akt表达水平明显降低(P<0.01);给予天麻素干预后,与METH组相比,LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平降低,而mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt表达水平升高.结论 METH可诱导SY5Y细胞自噬,天麻素可减弱METH诱导的SY5Y细胞自噬,这一作用与天麻素调控Akt和mTOR信号通路密切相关.
作者：杨根梦；李娟；洪仕君；薛凤麟；何永旺；周一卿；曾晓锋；李利华 刊期： 2018年第04期
目的 探讨糖尿病高糖高脂状态对四氯化碳(CCl4)诱导的化学性肝纤维化进展的影响.方法 采用高脂饲料及链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,四氯化碳诱导肝纤维化模型,高脂饲料、STZ及CCl4诱导糖尿病合并肝纤维化模型,动态监测各组大鼠体重、血糖及相关血清学指标;HE染色观察各组大鼠的肝脏病理学变化;Western blot、q-PCR检测各组大鼠肝组织中α-SMA和Collagen I的表达.结果与对照组大鼠相比,糖尿病组和糖尿病合并肝纤维化组大鼠体重明显下降,血糖血脂均升高,肝纤维化组无明显差异;HE染色及血清AST/ALT检测表明,与对照组大鼠肝组织相比,糖尿病大鼠、肝纤维化大鼠及糖尿病合并肝纤维化大鼠肝组织均有不同程度的肝损伤,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠为严重;3组大鼠肝组织α-SMA和Collagen I表达较对照组也不同程度增加,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠为明显,与单纯糖尿病组和肝纤维化组比较,差异有显著性.结论糖尿病可诱发肝损伤,加剧CCl4诱导的大鼠肝纤维化病变.
作者：左龙泉；王欢；汪应红；黄艳 刊期： 2018年第04期
目的 研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombi-nant human acidic fibroblast growth factor, rh-aFGF)卡波姆940凝胶对糖尿病大鼠皮肤创伤修复作用.方法 使用STZ诱导产生SD大鼠糖尿病模型,建立全层皮肤切除和烫伤两种皮肤创伤模型,设置对照组、赋形剂组、90 AU rh-aFGF凝胶组和270 AU rh-aFGF凝胶组4个实验组.用创伤面积和愈合速率评价各组疗效;HE染色观察创面中成纤维细胞、肌成纤维细胞、胶原纤维和毛细血管生长情况;半定量评分评价rh-aFGF诱导的上述指标生长情况.结果 rh-aFGF卡波姆940凝胶明显减少糖尿病SD大鼠全层皮肤切除和烫伤模型的皮肤损伤面积(P<0.05),促进其创伤愈合速率(P<0.05).HE染色结果表明,rh-aFGF卡波姆凝胶明显促进成纤维细胞和胶原纤维增殖评分(P<0.05).结论 rh-aFGF卡波姆凝胶可能在一定程度上保护创面微环境和保护 rh-aFGF发挥生物学活性,促进成纤维细胞增殖和胶原纤维沉积,从而促进糖尿病SD大鼠皮肤创伤愈合过程,有望成为一种治疗糖尿病溃疡的新制剂.
作者：杨选鑫；惠琦；曹高忠；刘建国；杜晓霄；李校堃；王晓杰 刊期： 2018年第04期
异黄酮类植物雌激素是生物黄酮中的一种,其对于机体免疫系统具有调节作用.研究表明,异黄酮类植物雌激素能够维持Th1/Th2平衡,调节免疫细胞及增加宿主对食物致敏原耐受等作用,从而改善过敏症状.该文对异黄酮类植物雌激素对过敏性疾病的作用及其机制做一综述,以期促进其研发利用.
作者：李恋曲；王晓钰；贾志荣；魏盼；吴鹏；洪敏 刊期： 2018年第04期
线粒体是哺乳动物细胞中供应能量、维持胞内稳态等多种功能的细胞器.目前已知有上百种疾病与线粒体功能缺陷有关.研究表明,外源线粒体可直接进入哺乳动物细胞,并可通过局部注射或静脉注射快速转移到动物或人体细胞内.线粒体治疗(mitotherapy)是通过将正常有功能的线粒体移植到具有线粒体缺陷的细胞中,从而对相关疾病进行防治的新策略.移植的线粒体在受体细胞内可发挥能量生成、维持自由基平衡、恢复细胞活力等功能.由于目前对线粒体相关疾病尚缺乏有效的治疗方法,线粒体治疗将为其防治提供一个新的途径.
作者：张华菁；赵孟楠；付琛；付爱玲 刊期： 2018年第04期
人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染引起全身免疫系统严重损害.HIV感染后病毒产物本身及高效抗逆转录病毒治疗均可引起相关神经病变,包括神经认知功能障碍综合征(HIV associated neurocognitive disor-ders,HAND)、外周神经病变等并发症.HIV动物模型可对其相关神经病变的发病机制研究提供帮助,该文主要介绍HIV-1动物模型在相关神经病变病理机制的研究应用.
作者：易智华；周聪发；何雪莹；梁尚栋 刊期： 2018年第04期
糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是糖尿病患者的主要心血管并发症之一,目前,对DCM缺乏有效的治疗措施,而且其病理生理学相当复杂.线粒体是心肌细胞能量的主要来源,在调节能量代谢中起着重要作用.糖尿病患者线粒体肿胀、片段化,从而引起线粒体功能受损,提示线粒体形态受损和功能异常可能在DCM发病中起重要作用.该文从线粒体能量代谢异常、线粒体氧化应激增强、线粒体动力学改变、线粒体心磷脂变化、线粒体钙紊乱等方面,综述了线粒体损伤与DCM发病之间的关系.
作者：刘涛；李晶；鲍翠玉 刊期： 2018年第04期
肌肉萎缩症目前尚无有效的治疗方法,良好的实验动物模型是研发治疗肌肉萎缩药物的基础.在临床前研究中,可用的肌肉萎缩动物模型有小鼠、犬等,秀丽隐杆线虫以通体透明、生命周期短、基因与人类基因具有高度同源性等优势得到研发人员的关注.该文对现有肌肉萎缩线虫模型的特点及其在肌肉萎缩症研究中的应用进行综述.
作者：马淑梅；刘莉 刊期： 2018年第04期
目的 根据聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)沉淀原理,结合超高速离心改进一种简便、快速的细胞外泌体分离方法.方法 采用超高速离心法、PEG6000沉淀结合超高速离心和EXO Quick试剂盒,分别提取巨噬细胞外泌体.通过透射电镜、NanoSight ZS及Nanoparticle tracker(NTA)分析外泌体的形态和粒径;蛋白印迹法鉴定细胞外泌体标志物Alix、TSG101的表达情况.结果 PEG6000沉淀结合超高速离心法获得的外泌体,其粒径分布和差速离心法相当,小于商品化的 EXO Quick 试剂盒.而外泌体表面蛋白 Alix、TSG101在3种方法提取的沉淀物中都有表达.透射电镜结果显示,3种方法均获得典型的盘状囊泡.结论 实验改进的细胞外泌体提取方法操作简洁、效率高,并且成本较低.
作者：王飘飘；王会会；彭代银；张善堂；陈卫东 刊期： 2018年第04期
目的 探索双龙方对大鼠心肌缺血/再灌注后无复流的影响.方法 将200只大鼠随机分为5组,每组40只:模型组、假手术组、双龙方5 g生药/kg组、双龙方2.5 g生药/kg组、双龙方1.25 g生药/kg组.各组大鼠在造模前连续灌胃5d,模型组和假手术组灌胃同体积蒸馏水.给药结束后,对大鼠冠状动脉左前降支进行结扎,假手术动物只穿线不结扎.结扎后4h,实施再灌注.再灌注4h后,采用小动物高分辨率超声影像系统对各组大鼠行超声心动图检查和心肌声学造影;超声检查结束后,于腹主动脉取血,分离血清,测定血清cTnT、CRP、CK、LDH水平;大鼠取血完毕后,取出心脏,切片,分别用硫磺素S和硝基四氮唑蓝(N-BT)染色评估心肌无复流面积和梗死面积.结果 与模型组比较,双龙方组的心肌无复流面积和梗死面积均明显减小(P<0.01或P<0.05);心脏B超显示心功能指标明显改善,左心室前壁缺血区厚度明显增加,收缩末期左心室内径和容积明显降低,短轴缩短率、射血分数和每搏输出量明显提高(P<0.01或P<0.05);心肌声学造影显示心肌血液灌注明显改善,左心室前壁心肌组织的微血管密度、血流速和血液灌注量明显增加(P<0.01或P<0.05);心肌损伤相关的血液学指标未见明显改善,血清cTnT、CRP、CK、LDH水平未见明显变化.结论 双龙方可以明显减小大鼠的心肌梗死面积和无复流面积,可明显对抗心肌缺血/再灌注后的无复流,改善受损心肌组织的血液灌注,改善心功能,抑制心肌损伤.
作者：李峰杰；李贻奎；何萍；郝新梅；李超华；赵乐；郝伟；余丞浩；张金艳 刊期： 2018年第04期
