目的构建弓形虫主要表面抗原SAG1单价基因疫苗及其与棒状体蛋白ROP2的复合基因疫苗,接种BALB/c小鼠,观察疫苗的免疫保护性.方法构建重组质粒pcDNA3.1-SAG1及 pcDNA3.1-SAG1-ROP2.将两核酸疫苗分别免疫小鼠, ELISA法检测血清IgG抗体、IFN-γ、IL-4;流式细胞仪测定T细胞亚群;弓形虫速殖子腹腔攻击感染观察小鼠生存时间.结果获得pcDNA3.1-SAG1、pcDNA3.1-SAG1-ROP2重组质粒;pcDNA3.1-SAG1-ROP2组小鼠IgG抗体(P＜0.05)、IFN-γ(P＜0.01)及CD8+细胞比例(P＜0.05)均高于pcDNA3.1-SAG1组;实验组组均未测到IL-4;复合基因组感染弓形虫后生存时间较单基因组延长(P＜0.01).结论弓形虫不同生活阶段的抗原基因复合疫苗较单基因疫苗具有更好的免疫保护性.
作者：杨婷婷；何深一；张加勤；周怀瑜；丛华；古钦民；李瑛；赵群力 刊期： 2005年第05期
目的了解细胞壁缺陷结核分枝杆菌对动物及细胞的致病作用,初步探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌的致病机制.方法将结核分枝杆菌稳定L型(TBL)接种Vero细胞和PPD试验阴性的豚鼠腹股沟皮下,观察细胞病变和动物的发病情况、PPD反应、组织病理学改变以及分离培养结核分枝杆菌及其L型.结果结核分枝杆菌L型感染72h后,细胞形成空泡、变圆、脱落和裂解,L型粘附于细胞表面或侵入细胞内生长.高剂量L型感染豚鼠,可见局部皮肤红肿及腹股沟淋巴结肿大,但PPD试验阴性.病理学检查可见结核的典型和非典型增生现象,抗酸染色可发现抗酸阳性圆球体.L型感染的动物中,80%病变淋巴结组织可分离到结核分枝杆菌L型,20%可同时检出细菌型.结论细胞壁缺陷结核分枝杆菌仍然具有致病性,但毒力较亲代细菌型明显减弱,不能引起动物形成PPD阳性反应.
作者：陈峥宏；王和 刊期： 2005年第05期
目的了解分离自颅脑外伤病人痰液中鲍曼不动杆菌gyrA基因突变与环丙沙星耐药性的关系.方法用ATB药敏试验条板微量肉汤法测定27株鲍曼不动杆菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析gyrA基因序列.结果 27株菌中除HZ16号菌株对环丙沙星敏感外,其余26株均耐药.序列分析表明HZ16号菌株gyrA基因无突变,其序列已登录GenBank(accession:AY642140),其余26株耐药菌均存在gryA基因突变,导致耐喹诺酮决定区(QRDR)第83位的丝氨酸被亮氨酸取代.其中HZ28号菌株gyrA基因序列也已登录(GenBank:AY642141).结论 gyrA基因突变是导致分离自颅脑外伤病人痰液中鲍曼不动杆菌对环丙沙星耐药的主要原因.
作者：诸葛青云；李芙蓉；黄支密 刊期： 2005年第05期
目的用国标方法和多重PCR方法检测粪样和食品中产气荚膜梭菌分离株.方法采集粪样和食品样品按照国标方法进行分离鉴定,再应用多重PCR方法进行基因型鉴定.结果 346份粪便样品分离与鉴定出了69株产气荚膜梭菌,275份食品样品分离到97株产气荚膜梭菌.经过生化试验鉴定和多重PCR方法鉴定,证实均为A型产气荚膜梭菌,携带β2毒素的产气荚膜梭菌共为53株,另检出了2株肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌.结论初步摸清了我国的粪便中和食品中的产气荚膜梭菌的动态分布.并在食品中发现了导致人食物中毒的肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌,为分子流行病学研究提供了重要理论依据.
作者：梁光军；赵李祥；杨旭芹；贾红；张小荣；文其乙；刘秀梵 刊期： 2005年第05期
目的以煮沸15 min灭活后的大肠杆菌O157为抗原,分4次免疫产蛋鸡,获取高免卵黄.经水稀释法去脂、超滤、盐析等粗分离,DEAE-Sephadex A-50离子交换层析纯化,得到产物IgY为电泳单点纯,且仍保持效价在1:104以上.从分离纯化过程中的跟踪检测表明,其卵黄制备的IgY抗体产量多、效价高、特异性强,可进一步用于大肠杆菌感染的检测研究.
作者：宋宏新；马娜；程军 刊期： 2005年第05期
目的筛选灵敏、特异的SARS病毒核酸检测方法.方法采用世界卫生组织(WHO)和中国疾病预防控制中心(中国CDC)推荐的9对SARS病毒核酸检测引物,同时又选择市售的2种SARS荧光定量PCR试剂,分别对不同稀释度的SARS病毒核酸进行RT-PCR、巢式PCR和荧光定量PCR扩增,比较其检测灵敏度和特异性.结果两种荧光定量PCR试剂可检测SARS病毒核酸灵敏度均为0.1TCID50,与普通RT-PCR方法检测灵敏度(0.1TCID50)相同,而较巢式PCR法(0.01TCID50)略低;采用RT-PCR方法扩增SARS核酸时,以WHO推荐的SAR1s/SAR1as、 BNIinS/BNIAs、 BNIoutS/BnoutAs与中国CDC推荐的CDC-P1+/P1-灵敏度高.结论 RT-PCR扩增时各引物对之间存在明显差异;荧光定量PCR可作为SARS疑似样本检测的首选方法,必要时再采用RT-PCR和巢式PCR法加以确认.
作者：冯燕；卢亦愚；严菊英；史雯；茅海燕 刊期： 2005年第05期
目的探讨致病性鳞翅目刺蛾幼虫形态及所致皮炎患者临床症状,为采取早期控制措施提供科学依据.方法用老熟茶毛虫触刺豚鼠的腹面皮肤、自愿者上肢或自然染毒者,动态观察茶毛虫皮炎的病程,对豚鼠皮炎病灶作常规病理学观察,比较豚鼠、自愿者染毒前、后血象变化.结果自愿者皮肤被幼虫触刺后,表现为红、肿、痛、热,烧灼、麻木感,继而呈现丘疹、斑丘疹、斑块、风团块,部分病例出现周身不适76.64%,烦燥32.71%,腋下淋巴结肿大16.82%.豚鼠皮疹病理切片见表皮水疱、脓疱改变.染毒后白细胞、嗜酸性粒细胞高于染毒前.结论鳞翅目刺蛾幼虫具有致病性,致病机理为机械刺伤、生物毒性和变态反应.
作者：韩方岸；胡云；龚玉华；陆荣住 刊期： 2005年第05期
目的立足于基因组水平考察日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T应答中抑制性因素的参与及可能的调控作用.方法采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对日本血吸虫感染0、3、6、13周小鼠脾脏中的CD+4T细胞进行全基因组分析,获得相关抑制性因子的基因表达谱.结果基因芯片结果显示日本血吸虫感染从急性期至慢性期过程中抑制性因子的表达基因表达逐步上调,呈现基本一致的变化,包括抑制性细胞因子、阻断抗体、细胞凋亡、负调控分子的高表达等.结论从胞内信号转导通路至细胞凋亡的整体水平,多层次因素参与了日本血吸虫感染宿主免疫应答的负调控机制.
作者：季旻珺；苏川；王勇；吴海玮；朱翔；蔡晓萍；张兆松；吴观陵 刊期： 2005年第05期
目的确认贝氏柯克斯体特异的核酸标识.方法用PCR法特异扩增贝氏柯克斯体24kDa, 27kDa、30kDa、34kDa、热休克蛋白B等表面蛋白基因,以及23S rRNA插入序列和16S-23S rRNA 间区序列等基因片段,从DNA电泳凝胶中回收纯化PCR扩增的目的DNA片段,用地高辛随机引物标记法标记目的DNA片段作探针,行DNA斑点杂交.结果 PCR扩得的7个贝氏柯克斯体DNA片段探针只能与贝氏柯克斯体基因组DNA杂交而不能与其他种属的立克次体的基因组杂交,每种探针检测同源目的基因的灵敏度可达到10pg.结论这7种贝氏柯克斯体DNA片段是贝氏柯克斯体特异的DNA片段,可作为贝氏柯克斯体的核酸标识,基于它们的序列设计的引物和探针具有极高的贝氏柯克斯体种特异性.
作者：张军；朱丽娜；张晶波；温博海；陈梅玲；邱玲；牛东升 刊期： 2005年第05期
目的构建牙龈卟啉单胞菌胶原酶基因prtC原核表达系统并鉴定其表达产物的抗原性和免疫反应性,确定牙周损伤与其局部PrtC水平之间的关系.方法采用高保真PCR从牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277 和47A-1株扩增出全长prtC基因片段,T-A克隆后测序.采用pET32a质粒和大肠杆菌BL21DE3株构建prtC基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导目的重组蛋白rPrtC的表达.采用Western blot检测rPrtC的抗原性和免疫反应性.建立ELISA,检测人慢性牙周炎龈下菌斑标本中的PrtC水平.结果牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277 和47A-1株prtC基因核苷酸序列完全相同.与报道的相应序列比较,克隆的prtC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.46% 和99.07%.在不同浓度的IPTG诱导下, rPrtC的产量高达细菌总蛋白的50%左右.rPrtC能与牙龈卟啉单胞菌全菌抗体结合,并能有效地诱导家兔产生特异性抗体.91.39%的人慢性牙周炎龈下菌斑标本中可检出PrtC,重度牙周炎标本中PrtC水平明显高于轻度牙周炎(P＜0.05).结论本研究成功地构建了牙龈卟啉单胞菌prtC基因高效原核表达系统.rPrtC具有良好的抗原性和免疫反应性,可作为研制牙龈卟啉单胞菌疫苗和血清学检测试剂盒的候选抗原.人慢性牙周炎的牙周破坏程度与局部PrtC水平密切相关.
作者：阮萍；罗耀东；严杰 刊期： 2005年第05期
目的对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行生物学活性鉴定及小鼠体内中和活性检测.方法用免疫荧光法检测其结合感染狂犬病毒CVS的鼠脑组织的能力,用小鼠中和实验测定A12表达产物的体内中和活性.结果免疫荧光试验显示A12表达产物与感染CVS的鼠脑细胞有强的荧光反应.小鼠中和试验结果表明,A12 ScFv样品组小鼠有9只存活,而对照组小鼠全部死亡.A12在729倍稀释时能100%保护小鼠抵抗致死量狂犬病毒的脑内攻击.结论 A12对狂犬病毒具有一定的中和活性,有可能被用于暴露后狂犬病的预防.
作者：闭兰；朱蓉；张爱华；孙可芳；赵亚杰；王志友；余模松 刊期： 2005年第05期
目的研究莱姆病螺旋体与梅毒、钩端螺旋体较常出现的交叉反应抗原,明确产生交叉反应的蛋白抗原成分,为精确蛋白免疫印迹法检测莱姆病的阳性判断标准提供参考依据.方法以中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型代表菌株PD91作抗原,用蛋白免疫印迹法对梅毒病人和钩端螺旋体病人的血清进行抗体(IgG和IgM)检测.结果共检测梅毒病人血清196份和钩端螺旋体病人血清68份.伯氏疏螺旋体与苍白密螺旋体抗原在75kDa, 60kDa, 43kDa, 41kDa处有交叉,交叉反应阳性率分别为IgG:8.2%、20.4%、9.2%、17.3%,IgM:7.7%、10.2%、8.7%、9.7%;伯氏疏螺旋体与钩端螺旋体抗原的交叉发生在75kDa, 60kDa, 41kDa,交叉反应阳性率分别为IgG:1.5%、1.5%和13.2%,IgM:8.8%、2.9%、17.6%.结论莱姆病螺旋体蛋白抗原中75kDa, 60kDa, 43kDa和 41kDa蛋白成分与梅毒和钩端螺旋体存在交叉反应.
作者：蒋毅；杨勇；顾黎莉；侯学霞；耿震；万康林 刊期： 2005年第05期
目的检查肺癌患者的耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jiroveci,P.jiroveci)的隐性感染情况,为癌症患者的化疗、肺孢子菌肺炎的预防提供参考依据.方法收集了50份未接受化疗的肺癌患者的肺癌旁肺组织标本及其相关信息,采用Giemsa、GMS病原学染色法和PCR扩增技术检测该组患者P.jiroverci的自然隐性感染率.并对感染者的年龄及性别进行了相关性分析.结果 Giemsa、GMS、PCR三种方法检测到P.jiroveci的隐性感染率分别为:Giemsa法2%;GMS法10%;PCR法为16%.X2检验结果显示三种不同检测方法的检测结果具有显著性差异(P＜0.05).对患者的年龄及性别的相关性分析结果表明,该组患者的P.jiroveci隐性感染情况无性别及年龄相关性.结论肺癌患者携带P.jroveci病原体,感染率为16%,提示这类患者存在发生肺孢子菌肺炎和成为传染源的潜在危险.对比本实验采用的三种检测方法,以PCR技术较为敏感.
作者：王雪莲；孙晓红；逯晓波；安春丽 刊期： 2005年第05期
目的建立致倦库蚊实验室种群,观察其生物学特性.方法采用人工控制温湿度和光照,模拟自然环境的方法,幼虫饲料为牛肝馒头粉,成蚊供血动物为小白鼠.结果在室温24～27℃,昼夜温差＜2℃,相对湿度70%～80%及人工光照12～14h的条件下养殖,成蚊予叮吸小白鼠血.于2003年9月至2004年6月成功繁殖了14个世代.它们的平均孵化率、蛹化率和羽化率依次为84.61%、73.56%、92.28%,经9～12天可完成一个世代的繁殖.羽化后的成蚊1～2天开始交配,雌蚊第3日开始吸血,第5天达吸血高峰.吸血后第3天开始产卵.结论驯化繁殖致倦库蚊成功的关键在于提高成活率、交配率、吸血率,所获数据对进一步了解该蚊的生长繁殖特性及防治提供了有用的参考资料.
作者：冯云；张海林；亚红祥；杨卫红；张云智；俞永新；董关木 刊期： 2005年第05期
目的了解安徽、湖南、江苏省结核分支杆菌的基因型状况及其分子流行病学规律.方法以结核分枝杆菌插入序列IS6110序列为模板,设计一对特异外向引物, 建立一种结核分枝杆菌的快速分子生物学分型方法--IS6110-PCR分型方法,进行三省结核病分子流行病学研究.结果根据IS6110-PCR指纹图谱,191株安徽、湖南和江苏三省的结核分枝杆菌菌株可被分成6个主要的基因型(Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ和Ⅵ),江苏省的主要基因型为I和V型,安徽省的主要基因型为III型,湖南省的主要基因型为I和II型,V型菌株全部为江苏省菌株,IV型菌株全部为湖南省菌株.结论三省之间结核分支杆菌的基因型存在明显的差异,各自存在着独立的流行菌型,其真实原因有待进一步研究.
作者：陈立新；谭云洪；王庆；许卫国；刘志广；高源；赵秀琴；阳波；阚晓宏；万康林 刊期： 2005年第05期
细菌性脑膜炎是中枢神经系统(central nerve system, CNS)常见严重的感染.尽管抗生素的广泛使用,但细菌性脑膜炎的发病率仍有5%-40%,而幸存者神经系统后遗症的发生率高达30%.细菌性脑膜炎的高感染率和死亡率是由于其发病机制目前还不清楚[1-4].
作者：陈丽丹；曹虹 刊期： 2005年第05期
巴通体(Bartonellae)是一类兼性细胞内寄生的革兰阴性小杆菌或小球杆菌,在系统发育分类中,巴通体属包括Bergey系统细菌学手册中立克次体目内的巴通体属(Bartonella)和罗沙利马体属(Rochalimaea)[1].在1990年以前,人们仅知道杆菌样巴通体(Bartonella bacilliformis)引起的卡里翁氏(Carrion)病和五日热巴通体(B.qintana)引起的战壕热.然而,到目前为止已有10余种新的巴通体已被发现,其中某些种已证明能够引起人的感染(表1)[1,9-10].
作者：鲍莺莺 刊期： 2005年第05期
近年来,随着免疫抵制剂、抗肿瘤药物、广谱抗生素、介入治疗等的广泛应用,免疫障碍病,尤其是艾滋病的广泛流行,器官移植的大量开展,系统性真菌感染日益多见,这里就其国内外流行因素,简要分析.
作者：吴绍熙；郭宁如 刊期： 2005年第05期
东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum Thomas),分布在长江中下游地区的湘、鄂、赣、皖、苏、浙,主要为害农作物与林木,可传播钩端螺旋体病和流行性出血热,汛期可致疫病暴发[1],是湖南省八大害鼠之一.
作者：李波；张美文；王勇；王广力 刊期： 2005年第05期
20世纪50年代以前,三日疟曾在福建省流行,60年代中期消灭了三日疟,近年来,三日疟在全国也非常罕见.本病例为输入性病例,患者与一同伴去坦桑尼亚(疟疾流行为严重的国家之一)考察咖啡种植园地,当时两人都感染了疟疾,其同伴因感染恶性疟治疗无效死亡.本患者因发热到我所就诊,确诊为三日疟,经治疗已痊愈,报道如下.
作者：李莉莎；谢汉国；欧阳榕；吴金俊 刊期： 2005年第05期
恙虫病病人焦痂内容物直接涂片检查恙虫病立克次氏体,能快速为临床诊断提供病原学依据.一般可以采用Gimenez、Macchiavello、Giemsa等多种染色方法.我们使用Macchiavello染色法建立了恙虫病焦痂涂片检查方法,并对105例检查结果进行了分析.现将情况报告如下.
作者：赵晓华；徐华昆 刊期： 2005年第05期
鼠疫是一种自然疫源性疾病,病原体为鼠疫耶尔森氏菌.鼠疫菌的生物学特性具有重要的生态学和流行病学意义.本文对广西2000～2002年分离自病人淋巴液及自死黄胸鼠脏器的15株鼠疫菌进行糖醇酵解试验、营养需求、脱氮反应、毒力因子测定.运用高分子生物学手段可为鼠疫疫源地结构及性质的确定提供科学依据,对及时发现和控制疫情具有流行病学重要价值.现将研究结果报道如下:
作者：秦石英；黄德蕙；林新勤；梁江明；鲁翠芳；韦锦平；周树武；陈达宗 刊期： 2005年第05期
马尔尼菲青霉菌(Penicillium Marneffei)是法国Capponi等1956年从越南的竹鼠(Rhizomys sinensis)中分离出的一种青霉[1].是唯一具有温度双相性的青霉,既能像大多数真菌一样在常温(30℃以下)腐物寄生,还能在37℃的较高温环境中生长,因而具有深部致病力,已成为很重要的人类致病菌[2].马尔尼菲青霉病是由马尔尼菲青霉菌引起的一种少见深部真菌感染性疾病.它被认为是东南亚地区艾滋病患者常见的机会性感染之一,误诊率极高[3].在我国艾滋病患者合并马尔尼菲青霉菌感染的报道甚少.现将我院收治的一例艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染病例的鉴别诊断结果报道如下.
作者：李云；王惠萱；张悦；李雪梅 刊期： 2005年第05期
肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)是儿童和青年人呼吸道感染的常见病原体,国内外已从该人群呼吸道感染标本中分离出多株MP.15～20%非典型肺炎是由肺炎支原体感染引起的,在流行季节甚至可达到50%.这些疾病临床表现相对轻微,但是这种病原体引起的并发症或雷诺现象甚至可以危及生命.目前,国内外都相继将聚合酶链反应(PCR)技术应用于本病实验室诊断的研究,其方式各有差异.在以往的工作中,曾有国外学者采用套式聚合酶链反应检测呼吸道咽拭子标本的Mp DNA,发现该方法具有较高的敏感性和特异性.为此,我们进一步将采集的呼吸道咽拭子标本在支原体培养基上培养24 h后,再应用套式PCR技术进行检测,以期建立一种更加灵敏、特异的支原体肺炎的早期诊断方法.
作者：王佳贺；李萍；王桂珍 刊期： 2005年第05期
钩虫病是一种我国广大农村常见的肠道寄生虫病,其主要危害是成虫在肠道内导致宿主的慢性失血[1].本院近发现1例美洲钩虫胃、肠重症感染患者,报告如下.
作者：言敢威；舒衡平；肖桂林；章洁；徐绍锐 刊期： 2005年第05期
我省近年来积极推行结核病控制策略(DOTS),认真执行<全国结核病防治规划(2001-2010)>,加大宣传力度,充分利用综合医院转诊及乡村医生推荐病人等渠道,大限度地发现肺结核病人和疑似病人,促进了肺结核病人发现率的提高.现报告如下.
作者：林淑芳；李卫林 刊期： 2005年第05期
为了解宁波市蛙类自然感染曼氏裂头蚴情况,以便于进行健康教育,达到防治曼氏裂头蚴病和保护环境的目的.我们于2002年6月～2004年8月,对宁波市农贸市场出售的青蛙进行调查,现将结果报告如下.
作者：叶丽萍；孙亚维；许国章；鲁锋；张吉楠 刊期： 2005年第05期
冠状病毒检测新方法及其在其他病原体检测中的应用前景冠状病毒与人和动物的许多疾病有关.迄今至少已发现了13个种属多个抗原表型的冠状病毒,其中人冠状病毒包括HCoV OC43和HCoV 229E两个抗原型,是引起人类上呼吸道感染的重要病原体.
作者：王芝敏 刊期： 2005年第05期
在世界许多国家,狂犬病仍然持续威胁着人们的健康.每年世界各地报告有超过5万人死于该病,在80多个国家中大约有1000万人需要接受暴露后治疗,这些国家中狂犬病储存宿主依然存在(主要为犬和野生动物).
作者：丁岗强；余光开 刊期： 2005年第05期
