目的 强化大肠杆菌合成辅酶Q10(CoQ10)的能力.方法 利用途径工程的基本原理,对大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中链长控制基因ispB进行遗传操作,并强化表达该途径中多个功能基因.结果 首次成功用来自Gluconobacter suboxydans的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因ddsA原位替换大肠杆菌染色体上ispB基因,构建得到原位替换株JKL;同时强化表达CoQ生物合成途径的相关基因,发现在ubiCA和ddsA协同表达的重组菌pDCA/JKL中CoQ的合成能力比JKL提高了2.3倍,CoQ10合成量提高了2.5倍.检测该重组菌中ubiA的转录水平,发现其mRNA相对拷贝数是对照JKL的125倍.结论 成功获得的重组大肠杆菌在降低内源性CoQ8合成能力的同时具备合成较长侧链CoQ10的能力,且通过强化表达相关基因使合成CoQ10的能力得到了提高.
作者：孔璐；傅楠；叶江；吴海珍；张惠展 刊期： 2009年第05期
目的 制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性.方法 将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转/N.E.coli BL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni-NTA亲和柱纯化目的 蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性.结果 30℃时重组蛋白质包涵体表达量高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500 mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上.MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(ICso=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%.结论 大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应.
作者：高鹏；赵健；傅文彬；王富军；袁勤生；刘建文 刊期： 2009年第05期
目的 观察石榴皮水提物对中华大蟾蜍心电活动的影响.方法 腹腔分别注射1,10,100 mg/mL 3种不同浓度的石榴皮水提物溶液1 mL,记录麻醉状态下,中华人蟾蜍给药前后Ⅱ导联心电图波形的变化,观察其心率,P波、R波、S波、P-R段、S-T段、QRS波群持续时间及波幅变化.结果 与给药前相比,10,100 mg/mL 2种浓度的石榴皮水提物均使动物心率显著变慢:随着给药时间延长心率变慢更趋明显,一直持续到给药后30 min;而1 mg/mL组的心率随实验时间的延长也变慢,但无显著差异.3组动物P波、R波、S波、P-R段及S-T段的持续时间和波幅变化与给药前相比均尤显著差异;10mg/mL组的QRS波群时程在给药15～30 min期间显著延长.结论 10,100 mg/mL石榴皮水提物对麻醉蟾蜍的心率和心电活动均有抑制作用;石榴皮水提物对麻醉蟾蜍心电活动的调节作用主要表现为影响心室的去极化过程,对心房去极化及复极化过程的影响均不显著.
作者：祝建平；刘瑜；张立盈；崔希云；艾洪滨 刊期： 2009年第05期
目的 研究大黄鱼类IV型抗冻蛋白基因编码产物的功能.方法 从大黄鱼肝脏SSH cDNA文库筛选到的类似极地鱼类IV型抗冻蛋白的EST序列出发,用RACE方法克隆IV型抗冻蛋白基凶全长cDNA,RT-PCR分析此基因在大黄鱼不同组织内的表达.构建原核表达载体pGEX-4T-Lycarp并表达蛋白质,亲和层析纯化GST融合蛋白,分析它的体外细菌抗冻保护作用.结果 大黄鱼类IV型抗冻蛋白基因cDNA全长664 bp,包含372 bp开放阅读框,编码124个氨基酸,经Signal P 3.0软件预测其N端前20位氨基酸为信号肽,氨基酸序列与长角杜夫鱼IV型抗冻蛋白同源性高达52%:RT-PCR分析表明其mRNA仅在肝脏表达;重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,初步纯化后分析体外细菌抗冻保护作用表明,融合蛋白抗冻活性并不明显.结论 大黄鱼类IV型抗冻蛋白不具有显著的抗冻活性,这与大黄鱼不能在低温下生存吻合.
作者：张晓；吴海珍；卫玮；徐红艳；张元兴 刊期： 2009年第05期
目的 表达融合2种具有对虾抗菌肽活性的新型抗菌肽.方法 利用overlap-PCR连接并扩增对虾抗菌肽Penaeidin-3和Penaeidin-4的嵌合基因序列,定向插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建此嵌合基因的表达质粒.将表达质粒转化至E.coli BL21(DE3),经终浓度1.0 mmol/L IPTG分别在37℃和15℃诱导表达4 h和14 h,SDS-PAGE分析嵌合蛋白质的表达,用抑菌圈法测定产物的抑菌活性.结果 获得了含有Penaeidin-3和Penaeidin-4嵌合基因的表达质粒;18%SDS-PAGE电泳显示,大肠杆菌中表达的嵌合蛋白质相对分子质量约14.7×103,主要以包涵体形式存在,包涵体15℃的表达量高于37℃的表达量;包涵体复性后,对枯草杆菌和溶藻弧菌具有明显的抑菌活性.结论 实现了2种对虾抗菌肽嵌合基因在大肠杆菌中的表达.
作者：郝淼闻；范立强；刘一；赵健；李素霞；袁勤生 刊期： 2009年第05期
目的 研究提取茶藨子木层孔菌总多糖的佳条件.方法 用蒽酮-硫酸法测定总多糖含量,以提取温度、时间、次数、溶剂用量等4项因素,设计3个水平进行正交试验.结果 佳工艺为15倍量水,90℃提取4 h,共3次.结论 本实验确定的佳条件稳定性好且简便易行.
作者：刘玉红；王凤山 刊期： 2009年第05期
草苁蓉为传统中药,含多种活性成分.草苁蓉多糖有增强免疫力、抗衰老、抗癌、消炎等多种活性,而且无毒、无副作用,本文对草苁蓉多糖的来源、结构、药理作用及含量测定作一综述.
作者：梁敏；卜秀玲；刘瑛 刊期： 2009年第05期
超氧化物歧化酶(SOD)是重要的消除体内自由基的金属酶,它的抗氧化功能不足或受损时可诱发或引起多种疾病.补充SOD制剂在临床有重要价值.本文对与人体相关的SOD在医药临床方面的研究和应用作一综述.
作者：陈勉；朱希强 刊期： 2009年第05期
褪黑素是主要由哺乳动物松果体分泌的一种神经激素,具有广泛的生物活性,在许多领域得到应用.现从工业化角度,综述褪黑素的7种化学合成方法,并评述其主要优缺点,通过综合比较,提出了具工业化价值的褪黑素合成方法,即以邻苯二甲酰亚胺、1,3-二溴内烷和对甲氧基苯胺为主要原料,用微波辅射法制备.
作者：崔成红；谭新旺；臧恒昌 刊期： 2009年第05期
软骨素为糖胺聚糖家族一员,是某些细菌产生的荚膜多糖成分,也是动物体内合成硫酸软骨素的前体.细菌软骨素合酶的发现引起了广泛关注,因为此酶的应用可使通过化学或生物修饰生产硫酸软骨素及其类似物成为可能.本文对现已发现的细菌软骨素合酶系统作一综述.
作者：陈祥娥；凌沛学 刊期： 2009年第05期
高良姜是临床常用的中药材.为有效地开发和利用这一野生中药资源,本文综述了高良姜的道地性、化学成分、药理作用及机制等方面的研究进展.
作者：朱家校；何伟；马建春 刊期： 2009年第05期
对近年多肽类药物的各种分析方法,包括生物检定法、免疫分析法、同位素标记示踪法、色谱、质谱、核磁共振、色谱光谱联用技术等的研究进展作一综述.
作者：王小平；容蓉；田景振 刊期： 2009年第05期
超广谱β-内酰胺酶介导的细菌耐药性发展迅速,已成为临床上抗生素应用的重要限制.我国以CTX-M型ESBLs为常见.CTX-M介导的细菌耐药性的传播与近年来头孢类药物的大量使用有密切的关系,而其中非医源性传播则可能与食物链有关.
作者：段荣帅；房晓；凌沛学 刊期： 2009年第05期
过敏性结膜炎是过敏性眼病中的常见类型.现依据近年发表的相关文献,对过敏性结膜炎药物治疗的研究进展作一综述.
作者：王玉玲；韩保萍；杜国辉 刊期： 2009年第05期
目的 寻找比例合适的稀释剂,提高盐酸布替萘芬乳膏微生物限度方法学验证实验中实验菌的回收率.方法 调整稀释剂pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中聚山梨酯80的比例,按照中国药典2005年版二部微生物限度检查法检查.结果 pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液含15%聚山梨酯80的实验菌蚓收牢明显高于含5%,10%,20%聚山梨酯80的回收率.结论 pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液含15%聚山梨酯80的实验菌回收率为适宜.
作者：裴小捷；韩超；杜凤梅；宋燕；郭芳 刊期： 2009年第05期
目的 建立检查硫酸软骨素注射液细菌内毒素的方法.方法 用中国药典2005年版附录细菌内毒素检查法.结果 硫酸软骨素注射液浓度0.025 mg/mL,用灵敏度0.125 EU/mL的鲎试剂检测细菌内毒素无干扰因素的影响.结论 硫酸软骨素注射液可用鲎试剂检查细菌内毒素.
作者：嵇扬；高锦；王文俊；胡丹；沈娟；聂渝琼 刊期： 2009年第05期
目的 建立HPLC测定硫酸阿托品滴眼液的含量和有关物质的方法.方法 采用C18柱,磷酸缓冲液-甲醇(85:15)为流动相,检测波长206nm.结果 硫酸阿托品浓度在25.98～519.5 μg·mL-1之间与峰面积呈良好的线性关系(r=0.99999),低检出限8.25 ng,平均回收率99.71%,RSD O.30%.结论 此法准确度、精密度好,可用于测定硫酸阿托品滴眼液的含量和有关物质.
作者：白若琬；朱建东；潘继飞；韩文芳；武利芬 刊期： 2009年第05期
目的 建立HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6含量及有关物质的方法.方法 采用Zorbax SB-C10色谱柱(4.6mm/1×150 mm,5μm),流动相己烷基磺酸钠缓冲液-甲醇(92:8),流速1.0 mL/min,柱温35℃;检测波长含量测定291nm,有关物质检查275 nm.结果 维生素B6在9.976～498.8 μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=1.000 0,n=F6),平均回收率100.82%(n=9,RSD=0.63%),低检测限3.7 ng.结论 该方法简便、灵敏、准确,专属性强、重现性好,可用于测定维敏酸钾洗眼液中维牛素B6的含量及有关物质.
作者：刘燕；李睿；李永春；邢玉仁 刊期： 2009年第05期
目的 建立测定咽清颗粒中绿原酸含量的方法.方法 以反相C18色谱柱为固定相(250 mm×4.60 mm,5 μm),乙腈-0.4%磷酸溶液(12:88)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长327 nm.结果 绿原酸进样量10～60 μg·mL-1范围内与峰面积积分值旱良好的线性关系(r=0.999 9);平均回收率97.17%,RSD=1.73%(n=9).结论 本方法简便、可靠、准确,可用于测定咽清颗粒中绿原酸的含量.
作者：赵宇；崔晶；边逸群；周文 刊期： 2009年第05期
目的 了解客观评价我院腹腔镜胆囊切除术预防性使用抗菌药物的情况.方法 随机抽取我院2008年1至5月100例腹腔镜胆囊切除术患者的出院病历,统计分析术前、术中、术后使用抗菌药物的品种,给药疗程,联合用药及手术时间.结果 抗菌药物使用率为100%,其中预防性抗菌药物使用率27%,术后抗菌药物使用率100%,术中患者无使用抗菌药物.预防性使用抗菌药物术前平均2.8 d,术后平均疗程4.7 d.结论 腹腔镜胆囊切除术预防性使用抗菌药物存在用药特征把握不严、用药种类选择不当、预防用药时间不对、用药疗程过长等问题,需加强抗菌药物使用规范化.
作者：徐蕾 刊期： 2009年第05期
本文对光度滴定法定量原料及Cosequin(R)DS咀嚼片中的硫酸软骨素钠进行了方法验证与发展.光度滴定条件是:0.1%(w/v)氯化十六烷基吡啶为滴定剂,光度指示检测波长420 nm.在0.6～1.4 mg/mL浓度范围内,硫酸软骨素钠的标准曲线呈线性(r≥0.99).将咀嚼片粉碎成细粉并用水提取后,经0.45μm膜滤器过滤.回收率97%～103%.光度滴定法具有良好的专属性、准确度、精密度且线性卓越,非常适用于定量检测原料及Cosequin(R)DS咀嚼片中的硫酸软骨素钠.2001年由Elsevier Science B.V公布.
作者：Liang Z M；樊志萍 刊期： 2009年第05期
