p73是近发现的p53家族的一员,它与p53不仅在蛋白结构上具有较高的同源性,功能也具有一定的相似性,被认为是一种潜在的抑癌基因.但随着研究的深入,发现P73在功能和调控机制上与P53都具有不同点.P73具有诱导细胞凋亡的能力,其机制与P53不同.P73在很多肿瘤中的表达高于相应的正常组织,这与经典的抑癌基因也不同.因此对于p73基因仍需进一步的研究.
作者：赵中海；朱立新；耿小平 刊期： 2004年第01期
蛋白质组学是针对蛋白质组研究的一门新兴学科,近年来发展迅速,其相应方法学也取得很大进展.文章介绍了近年来差异表达蛋白质研究的方法学进展,包括双向凝胶电泳技术、凝胶内差别电泳、同位素亲和标签技术、蛋白质芯片和蛋白质组的多维液相分离-质谱分析等方法.
作者：侯彦强；仲人前；孔宪涛 刊期： 2004年第01期
泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白的选择性降解.此途径参与体内许多重要的生理功能,包括细胞周期的调控、抗原提呈、转录调控、凋亡等,许多疾病的发生都由于该途径的异常引起,本文对其组成、作用机制及功能与当前的研究进展、未来的研究方向等进行综述.
作者：尹会男；柴家科 刊期： 2004年第01期
脆性X智力低下蛋白 (fragile mental retardation protein,FMRP) 的表达缺失引起一种遗传性智力低下疾病--脆性X综合征.此蛋白是一种RNA结合蛋白,与mRNAs转运及多聚核糖体和突触的功能有关.因此,要了解脆性X综合征的发病机理,关键在于找到与FMRP蛋白结合的mRNAs,以及FMRP与这些靶mRNAs的结合对它们的代谢和翻译有何影响.
作者：梁琦；邹柯；沈岩 刊期： 2004年第01期
肠产毒性大肠埃希菌定植因子为近几年发现的一种重要的细菌致病菌毛,它能使大肠杆菌粘附于宿主肠粘膜而不被肠蠕动和肠分泌液所清除,再通过其分泌肠毒素导致婴幼儿和旅行者腹泻.菌毛亚单位的保守区域、抗原决定簇组成、定植因子质粒与毒力编码基因的联系,对研制广谱重组菌毛疫苗具有重要指导意义.本文综述了近几年来有关定植因子菌毛的研究进展,以及与各类肠毒素编码质粒的相关性和疫苗研究概况.
作者：钟贞；马永平；邱宗荫；宋方洲 刊期： 2004年第01期
内质网应激 (ER stress) 是真核细胞的一种保护性应激反应,通过ER stress细胞降低胞内未折叠蛋白的浓度,阻碍未折叠蛋白发生凝集,哺乳动物细胞ER stress过程比原生动物和酵母细胞要复杂,但都具有一些共同的特点.
作者：方欢；申宗候 刊期： 2004年第01期
减毒的沙门氏菌是一种非病原性细菌,能靶向肿瘤并产生局部抗肿瘤的效应.减毒的沙门氏菌能选择性地在肿瘤组织中复制,表达编码治疗性蛋白的效应基因是肿瘤基因治疗有应用前景的一种途径,这种方式也将成为目前实体瘤放疗、化疗的一种辅助的治疗方法.
作者：赵丽华；李妍涵；韩忠朝 刊期： 2004年第01期
目的克隆大鼠肾胆绿素还原酶(BVR)的cDNA序列后在大肠杆菌中表达、纯化并进行鉴定.方法采用RT-PCR方法利用设计合成的一对特异性引物从大鼠肾组织扩增BVR的cDNA序列,构建pMW172a-BVR重组质粒,转化扩增后进行序列测定,证实同GenBank [053850]公布的大鼠肾BVR的cDNA序列相同后,阳性重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)中表达并进行纯化.结果 SDS-PAGE鉴定其分子量为33 ku,分光光度仪检测具有催化胆绿素还原为胆红素的活性,证实为胆绿素还原酶.实验还测定了Km值,以NADH和NADPH分别作供氢体,测得Km值分别是380 μmol/L、3.5 μmol/L.结论通过克隆表达获得了有活性的大鼠BVR酶蛋白,为进一步研究BVR的性质及功能奠定了基础,也为血红素加氧酶的研究提供了便利条件.
作者：吕昌莲；孙建平；刘明；王秀宏；周虹 刊期： 2004年第01期
目的克隆人源性纤溶酶原Kringle5(K5)基因,构建K5分泌型杆状病毒载体,并检测其在肌细胞中的表达.方法引物中加入前胰岛素原信号肽基因序列,PCR产物经AgeⅠ和AccⅠ双酶切后装入pFB载体中构建为pFBK5,将其转染肌细胞C2C12,经Western 印迹检测重组蛋白的表达并用MTT试验进行初步活性鉴定.结果成功扩增出了K5基因序列,测序正确,转染了pFBK5的C2C12细胞及上清中均检测到了特异性的14 ku蛋白条带且其对ECV304细胞产生剂量依赖性抑制作用,而转染空载体对照组无相应蛋白表达.结论人源性纤溶酶原K5分泌型杆状病毒载体构建成功,表达的重组蛋白具有生物活性,为进一步的病毒制备奠定了基础.
作者：尹桂芝；李彪；尤蓓；陆林；张一帆；赵龙；于金德 刊期： 2004年第01期
目的观察重构型caspase-7的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用.方法用反转录PCR方法获取野生型人caspase-7基因,用重组PCR构建了两种重构型caspase-7基因,即大、小亚基序列次序颠倒的rev-ca2spase-7以及N-端带有绿脓杆菌外毒素转膜结构域部分肽段的融合蛋白(PEⅡ-rev-caspase-7)的基因.将两种重构型caspase-7基因克隆入表达载体pIRES2-EGFP, 脂质体法转染肿瘤细胞,通过荧光显微镜观察、电镜观察、MTT检测等方法检测重组基因的表达及其对肿瘤细胞的促凋亡活性.结果成功获得了caspase-7基因,构建了rev-caspase-7基因和rev-caspase-7与绿脓杆菌外毒素(PE)转膜肽段的融合蛋白(PEⅡ-rev-caspase-7)基因及其表达载体.将两种重构型caspase-7转染肿瘤细胞后,证实细胞发生凋亡.结论两种重构型caspase-7均可以有效地诱导肿瘤细胞发生凋亡.
作者：于翠娟；孟艳玲；贾林涛；裘秀春；王智；刘湘丽；王成济；苏成芝；杨安钢 刊期： 2004年第01期
目的定点诱变热休克蛋白-乳头瘤病毒表位融合蛋白的基因中编码半胱氨酸的密码子,解决下游纯化工作中产生多聚体蛋白的问题.方法在对蛋白质序列进行计算机表位预测及生物学特性分析的基础上,利用PCR的定点诱变技术,使原始基因序列中编码半胱氨酸的TGC突变为编码甘氨酸的GGC,克隆并表达了该基因编码的蛋白质.结果经克隆、测序后证实已成功获得突变基因,其编码的融合蛋白经纯化后没有多聚体的产生.结论利用PCR定点诱变技术对基因进行突变,在不改变蛋白质抗原性质的基础上,优化蛋白质序列,提高蛋白质纯化质量和效率.
作者：田亚萍；张培因；王艳姝；王燕媚；许艳；胡晓平；吴秀丽；王丽颖 刊期： 2004年第01期
目的利用肝细胞表面存在特异的脱唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR),探索ASGPR介导的vp3基因肝细胞靶向性治疗肝癌的方法.方法将携带vp3基因的质粒通过多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)与该受体的天然配体脱唾液酸粘蛋白(asialoorosomucoid,Asor)结合,获得Asor-PLL-vp3复合物;通过体外转染、放射性同位素标记检测和动物实验鉴定该复合物的肝细胞靶向性.结果成功制备了较纯的可溶性的蛋白-核酸复合物;体内外实验结果表明Asor-PLL-vp3复合物具有良好的肝细胞靶向性.结论通过制备Asor-PLL-vp3复合物,利用ASGPR介导实现了vp3的肝细胞靶向性基因转移,证实了该复合物具有体内靶向性治疗肝癌的可行性.
作者：孙军；王宇哲；屈伸；彭冬君；宗义强 刊期： 2004年第01期
目的探讨血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与乳腺肿瘤发生过程中组织学改变的关系.方法实验中所用的肝脏特异性IGF-1基因缺失 (LID) 小鼠,其循环中IGF-1水平仅为正常小鼠(对照组小鼠)的25%.管饲化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导产生原发性乳腺癌.结果对照组肿瘤晚期可见广泛的鳞状上皮化生,而LID鼠肿瘤晚期出现广泛增生,极少出现化生.与对照组相比,鼠乳腺肿瘤的潜伏期均明显延长,LID小鼠可触及的乳腺肿瘤发病率明显下降,其肿瘤的出现也明显延迟.结论在致癌剂DMBA诱导的乳腺肿瘤模型中,IGF-1水平决定了乳腺肿瘤发生的组织学类型.
作者：吴毅平；Derek LeRoith；Shoshana Yakar 刊期： 2004年第01期
目的研究巨噬细胞(Mφ)分泌的载脂蛋白E(ApoE)在贫含ApoE的极低密度脂蛋白(ApoE-poor-VLDL)导致Mφ泡沫化中的作用.方法建立稳定表达ApoE3的U937细胞系,该细胞系分别与FITC标记的不同浓度的ApoE-poor-VLDL及ApoE-rich-VLDL孵育,以细胞内荧光强度/蛋白浓度为观测指标,观察外源性ApoE3的表达对U937细胞摄取VLDL两亚组分的影响.结果外源性ApoE3的表达显著促进U937细胞摄取ApoE-poor-VLDL(P＜0.05),而对ApoE-rich-VLDL的摄取无显著影响(P＞0.05).结论 Mφ分泌的ApoE可能参与到ApoE-poor-VLDL中,提高其中ApoE的含量,从而介导Mφ摄取ApoE-poor-VLDL,是ApoE-poor-VLDL导致Mφ内脂质堆积的主要原因.
作者：周洁；冯友梅；陈娟 刊期： 2004年第01期
目的研究CSF1PO、TH01和TPOX复合扩增佳体系.方法设计正交实验进行聚合酶链式反应(PCR),应用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离显带技术检测扩增片段.结果佳反应体系组成为: 10×PCR buffer2.5 μl、0.72 mmol/L dNTP、2.5 mmol/L MgCl2、2.0 U Taq酶,各基因座引物终浓度 (μmol/L) CSF1PO:0.4, THO1:0.4,TPOX :0.6.结论获得复合扩增条件各反应因素较为满意的参数.
作者：范晶；熊勇华；胡娜；杨辉；许杨 刊期： 2004年第01期
