ASPPs(含有富含脯氨酸结构域、锚蛋白重复区及SH3结构域的蛋白)是一类新发现的凋亡调节蛋白,它们能够特异性地调节P53蛋白家族的凋亡活性.ASPPs由ASPP1、ASPP2和iASPP 3个同源性很高的成员组成,其中ASPP1、ASPP2可正向调节P53活性,而iASPP的功能恰好与之相反;越来越多的研究表明,此类蛋白功能多样,可参与多条细胞信号通路.ASPPs的异常调控与肿瘤发生、发展密切相关,有望成为肿瘤治疗的新靶点.
作者：刘航；王敏 刊期： 2007年第05期
Notch信号通路是一条进化上十分保守的信号转导系统.Notch受体通过与配体的相互作用转导细胞信号,从而在细胞增殖、分化、凋亡中发挥重要的调控作用.Notch信号通路平衡细胞增殖、分化、凋亡的重要性提示其可能与肿瘤细胞的异常调控相关.近来研究发现,在许多肿瘤细胞系中存在notch基因的异常活化,且失控的Notch信号与肿瘤细胞的生长调控相关.文章综述了就新近有关Notch信号通路的生理功能及其对肿瘤细胞的调控作用.
作者：付亚娟；叶枫；吕卫国；谢幸 刊期： 2007年第05期
淋巴转移是恶性肿瘤的主要转移途径.研究发现淋巴系统结构特点是淋巴转移的解剖学基础;肿瘤淋巴管内皮特异性标志物检测有助于明确淋巴管生成;肿瘤内和肿瘤旁组织内存在新生淋巴管,淋巴管密度的表达强度与淋巴结转移密切相关;血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)家族的研究为揭示恶性肿瘤淋巴转移机制提供了重要的研究途径.
作者：吴玉梅；李力 刊期： 2007年第05期
FBI-1是一个新近发现的和转录相关的胞内蛋白,属于POK蛋白家族成员.FBI-1通过直接结合DNA或者与其他蛋白形成复合物影响目的基因的转录水平,从而推动肿瘤的生长、促进细胞黏附拮抗凋亡、促进前体细胞分化.
作者：王黎芳 刊期： 2007年第05期
CCL25和CCL28是CC趋化因子家族成员,主要表达于胸腺树突状细胞和黏膜上皮细胞,CCL25和CCL28相应的受体分别是CCR9和CCR10,表达于T淋巴细胞和B淋巴细胞.CCL25和CCL28及其相应受体对循环IgA浆母细胞和T淋巴细胞的归巢起重要作用,而且CCL28还具有广谱的抗微生物活性.
作者：乔新安；朱彦彩；都军霞；范沛；林茂旺；杨国宇 刊期： 2007年第05期
抑癌蛋白泛素化机制在肿瘤发生发展过程中扮演重要角色.其中,NEDD4-1介导的PTEN泛素化与Cowden综合征密切相关,Livin介导的Smac/DIABLO泛素化,以及癌性锚蛋白重复序列、转录因子E4F1等介导的P53泛素化均在肿瘤发生过程中扮演重要角色.近期研究表明,这些介导抑癌蛋白泛素化的新分子有望成为肿瘤治疗的靶点.
作者：张燕捷；房静远 刊期： 2007年第05期
染色体组蛋白的共价修饰在调节染色体结构,控制基因的转录等方面发挥重要的作用.组蛋白H3第4赖氨酸的甲基化作为共价修饰的方式之一,可以调控基因的转录激活.随着对组蛋白甲基化转移酶及相关作用蛋白研究的深入,人们对组蛋白H3第4赖氨酸的甲基化的功能也有了更深的了解.目前研究发现它与癌症也有很密切的关系.
作者：刘鑫；江军；叶进；侯晓华 刊期： 2007年第05期
肿瘤干细胞的鉴定成功对肿瘤发生的观点产生了新的挑战.干细胞大的特点是非对称性分裂从而实现自我更新,如果这一过程被扰乱则会发生肿瘤.肿瘤抑制基因hscrib、hdlg被认为在这一分子机制中调节命运决定子在子代细胞中的分配.细胞极性是上皮组织的一个标志性特点,极性丢失与上皮的恶性转化密切相关.研究表明hScrib、hDlg是维持正常上皮极性的关键因子,在多种上皮性恶性肿瘤的发生中可能起一定作用.
作者：丁田；万小云；谢幸 刊期： 2007年第05期
单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)是保持了亲本抗体的抗原识别特异性及亲和活性的小功能性抗体片段,其良好的可塑性及广泛作用已使之成为研究的热点.scFv相关的研究成果不仅改进了已有的肿瘤和病毒感染诊治方法,还提出了新颖的抗肿瘤、抗感染思路,如靶向肿瘤新生血管及细胞外基质相关蛋白的提出改变了以往仅针对肿瘤细胞的狭隘治疗思维.文章综述了scFv在抗肿瘤和抗感染方面的研究及应用.
作者：田锋；彭国平 刊期： 2007年第05期
哺乳动物细胞对于遗传毒性的刺激会产生一系列应答,如细胞周期阻滞,DNA修复和细胞凋亡等.Gadd45a在DNA损伤诱导的细胞应答中发挥重要作用.细胞内外环境的多种因素在转录水平、转录后水平、翻译后水平等多个层次对Gadd45a进行精确调节.Gadd45a通过与Cdc2相互作用调控细胞周期G2-M检测点,直接抑制Aurora-A激酶参与中心体稳定性的调节,通过G1-S期调控参与维持基因组的稳定性.Gadd45a参与p38/JNK、MAPK、线粒体介导的凋亡途径和NF-κB介导的生存通路调控.
作者：李云峰；钱海利；林晨 刊期： 2007年第05期
寡核苷酸微阵列技术是检测细胞或组织中miRNA表达谱的有效方法.目前应用于微阵列分析的miRNA标记技术主要有直接标记法、加尾标记法、基于逆转录反应的标记方法和基于miRNA克隆扩增的标记方法.在实际应用中应根据各个方法的优缺点来选择符合实验要求的标记方案.
作者：刘涛；汤华 刊期： 2007年第05期
目的 研究5-脂氧合酶激活蛋白(5'-lipoxygenase activating protein,FLAP或ALOX5AP)的表达抑制对胰腺癌细胞PANG-1凋亡的诱导作用.方法 通过siRNA抑制胰腺癌细胞FLAP的表达,用流式细胞仪检测Annexin-Ⅴ标记的凋亡细胞,用Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白的表达和裂解水平.结果 FLAP siRNA有效抑制了胰腺癌细胞PANG-1中FLAP的表达.转染了FLAP siRNA的胰腺癌细胞出现凋亡.在细胞凋亡过程中,Bcl-2水平下降,而细胞色素C、caspase-3水平逐渐增高.结论 FLAP的表达抑制可以诱导乳腺癌细胞通过Bcl-2和caspase-3途径发生凋亡.
作者：欧阳涛；黎健 刊期： 2007年第05期
目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)、Foxp3 mRNA和血浆IL-6表达的意义.方法 对38例SLE患者和16例正常人采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Tregs百分率,RT-PCR检测Foxp3 mRNA表达,ELISA法检测IL-6水平.结果 ①SLE活动组和非活动组的CD4+CD25+Tregs水平均显著低于正常对照组(P＜0.01);②SLE活动组的Foxp3 mRNA表达水平明显低于正常对照组(P＜0.05);③SLE活动组和非活动组血浆的IL-6水平均显著高于正常对照组(P＜0.01),而且活动组显著高于非活动组(P＜0.05);④38例SLE患者的CD4+CD25+Tregs水平与SLEDAI评分呈显著性负相关(P＜0.01),Foxp3 mRNA水平与CD4+CD25+Tregs呈显著性正相关(P＜0.01),血浆IL-6水平与SLEDAI评分之间呈显著性正相关(P＜0.01),血浆IL-6水平与CD4+CD25+Tregs/CD4+细胞比值呈显著负相关(P＜0.05).结论 CD4+CD25+Tregs和Foxp3以及IL-6可能在SLE的发生和发展中发挥重要作用.
作者：萧文泽；胡绍先；杨柳；柯丹；孔芳；秦瑞芳；苏敏 刊期： 2007年第05期
目的 应用重组腺相关病毒作为基因导入的载体,将CYP450表氧化酶2J2基因导入到自发性高血压大鼠(SHR)体内,观察其对SHR血压的影响.方法 15只雄性SHR随机分为3组,分别予以病毒悬浮缓冲液,rAAV-GFP和rAAV-2J2尾静脉注射(1×1012 pfu/只).用尾套法监测大鼠尾动脉血压,持续6月;实验结束前采用Millar导管检测心功能.采用Western印迹法检测目的基因在大鼠体内的表达.结果 2J2组的血压从第2月开始下降,并保持相对较低的水平,而对照组则缓慢上升,两者间有显著性差异.2J2组心内大收缩压,收缩末压,dp/dt max和dp/dt min的绝对值与对照组相比较均显著下降.2J2组大鼠的心搏出量和心输出量与对照组相比较显著增加.结论 CYP表氧化酶及其代谢产物EETs对心肌的负性肌力调节机制可能是其调节高血压的重要机制之一.
作者：肖斌；周昌清；李袁静；熊小菊；汪道文 刊期： 2007年第05期
目的 表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的Nono(non-POU-domain-containing,octamer-binding protein)融合蛋白并制备抗Nono多克隆抗体.方法 构建pET-28a(+)-Nono重组表达质粒,转入Rosetta(DE3)大肠埃希菌,以IPTG诱导6×His-Nono融合蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化出的蛋白免疫BALB/C小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western印迹检测多克隆抗体的特异性.结果 在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的His-Nono融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫小鼠,获得了高特异性的抗Nono抗血清.结论 成功构建pET-28a(+)-Nono原核表达质粒,表达并纯化出高纯度的目标蛋白,制备出高滴度、高特异性的多克隆抗体.
作者：林玲；杨晓敏；吕京澴；韩晓 刊期： 2007年第05期
目的 研究高氨基酸血症对肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,探讨氧化应激在其中的作用.方法 大鼠肾小球系膜细胞分为不同培养环境下的对照组(C组)、高氨基酸组(HA组)、维生素E组(HAE组).培养24 h后用荧光染料2',7'-Dichloroluorescin diacetate(20 μmol/L)测定各组细胞内活性氧产物(reactive oxygen specie,ROS)的生成情况从而反应细胞内氧化应激水平,培养24 h后采用RT-PCR检测各组CTGF mRNA表达,培养48 h后采用Western印迹检测各组CTGF蛋白的表达.结果 HA组氧化应激水平、CTGF mRNA及蛋白的表达均明显高于C组(P＜0.05);HAE组其氧化应激水平、CTGF mRNA及蛋白表达较HA组明显降低(P＜0.05),且与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 高氨基酸血症可使肾小球系膜细胞氧化应激水平升高并产生过多的CTGF,抗氧化剂维生素E可减轻系膜细胞氧化应激及CTGF的表达,提示高氨基酸诱导的CTGF表达增多可能与氧化应激有关.
作者：柯小苏；曾红兵；邵菊芳 刊期： 2007年第05期
目的 含人生长抑素受体2亚型(human somatostatin receptor subtype 2,hSSTr2)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的腺病毒重组质粒的构建及表达.方法 采用PCR方法将hSSTr2以及IRES-EGFP基因亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV中,获得pShuttle-CMV/hSSTr2-EGFP,经Pme Ⅰ酶切,去磷酸化后转化含pAdeasy-1的超感受态BJ5183菌,细菌内同源重组构建腺病毒质粒pAdeasy-1/hSSTr2-EGFP(pAd-SIG),将其转染HEK293细胞进行病毒包装与滴度测定.重组腺病毒感染MCF-7细胞,流式细胞术检测其表达.结果 酶切、PCR及基因测序证实重组腺病毒质粒pAd-SIG构建成功,病毒滴度为8.2×109 IU/ml,流式细胞术结果显示hSSTr2在MCF-7细胞中表达阳性率为86.59%.结论 成功构建了重组腺病毒质粒pAd-SIG,并能在真核细胞表达,为体内外研究hSSTr2效应提供了基础.
作者：袁晓梅；何勇；雷萍；邢薇；吴砂；代维；朱慧芬；沈关心 刊期： 2007年第05期
目的 构建人隔蛋白7(SEPT7,hCDC10/SEPT7)的表达载体并对U251人脑恶性胶质瘤细胞系进行转染且检测其表达.方法 RT-PCR方法扩增SEPT7 cDNA片段,并将扩增的片段插入pCDNA3真核表达载体,构建成含SEPT7 cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,以脂质体介导该质粒转染人脑恶性胶质瘤细胞系U251,应用RT-PCR和免疫荧光染色鉴定转染细胞中hCDC10/SEPT7的表达.用流式细胞术对转染前后的U251细胞进行细胞周期分析.结果 成功构建含SEPT7 cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,并使其稳定转染U251细胞,在转染的细胞中,证实有SEPT7 mRNA表达上调.细胞周期检测结果G0/G1期细胞增多,SPF降低.结论 成功构建SEPT7表达载体,并在人脑恶性胶质瘤细胞系获得表达,延迟细胞周期进展.
作者：贾志凡；浦佩玉；康春生；王广秀；张志勇；裘明哲；黄强 刊期： 2007年第05期
目的 探讨14,15-EET促进肿瘤细胞增殖的机制.方法 Tca-8113培养于含10%小牛血清的DMEM,必要时更换无血清DMEM使其进入静止期.用14,15-EET和/或抑制剂处理后收集细胞蛋白,用Western印迹检测EGFR和p44/42 MAPK(ERK1/ERK2)的磷酸化水平.结果 14,15-EET以剂量依赖性方式刺激EGFR和p44/42 MAPK(ERK1/ERK2)蛋白磷酸化,该效应能够被特异性的EGFR抑制剂AG1478阻断.MTT分析显示,AG1478能够完全取消14,15-EET诱导的Tca-8113细胞增殖效应.结论 EGFR的活化是花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物14,15-EET丝裂原信号途径中的关键事件;在该途径中EGFR的活化是p44/42 MAPK(ERK1/ERK2)活化的上游事件.
作者：程黎明；赵硕生；王勇；李旭光；汪道文 刊期： 2007年第05期
目的 探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1基因(VKORC1)-1639 G/A与细胞色素P450酶2C9基因(CYP2C9)1061 A/C多态性对中国汉族人华法林应用剂量的影响.方法 应用PCR-RFLP方法检测129例长期口服华法林的患者VKORC1-1639 G/A及CYP2C9 1061 A/C多态性,并按基因型分组,分别比较VKORC1和CYP2C9不同基因型间平均华法林剂量.结果 病例组检出VKORC1-1639 AA、AG、GG型分别有96例(74.4%)、30例(23.3%)、3例(2.3%),等位基因A和G频率分别为86%、14%,CYP2C9 1061 AA、AC、CC型分别有117例(90.7%)、11例(8.5%)、1例(0.8%),等位基因A和C频率分别为95%、5%;病例组与正常人组VKORC1-1639、CYP2C9 1061各基因型分布差异无统计学意义;VKORC1-1639不同基因型间患者所需华法林平均剂量AA型低于AG型,后者又要低于GG型;携带CYP2C9 1061 C等位基因的患者(AC和CC型)华法林平均剂量要低于AA型.结论 华法林应用剂量偏低可能与VKORC1-1639G→A和CYP2C9 1061A→C转变有关,VKORC1-1639 AA型占多数可能是中国汉族人群所需华法林剂量普遍较低的重要原因.
作者：章伟平；陈慧；骆杰伟；吴小盈 刊期： 2007年第05期
目的 分析高浓度血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)时细胞内活性氧(ROS)、NOX4 mRNA水平和细胞凋亡的变化.方法 倒置显微镜下观察人脐静脉内皮细胞形态;免疫组化法检测人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子相关抗原的表达;RT-PCR检测HUVECs中NOX4的表达;流式细胞仪检测各组细胞内ROS生成量和细胞凋亡率,Hoechst染色分析细胞凋亡.结果 高Ang Ⅱ刺激HUVECs时,NOX4 mRNA表达上调,细胞内ROS生成增加,细胞凋亡增加.结论 高Ang Ⅱ上调HUVCEs内NOX4 mRNA表达并促进细胞内ROS生成和细胞凋亡.
作者：屈顺林；满永；丁莉；黄秀清；王抒；柯丽琴；杨向东；黎健 刊期： 2007年第05期
