凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)是存在于线粒体膜间隙中的黄素蛋白,它不仅具有氧化还原和电子传递功能,还具有促细胞凋亡功能,从而在维持细胞正常生理活动中具有重要作用.在外界死亡触发信号刺激下,AIF可转移到细胞核,引起不依赖经典Caspase途径的细胞凋亡,其以染色质凝集和DNA大片段断裂为特征.P53、Bcl-2、热休克蛋白-70、钙调蛋白参与了AIF诱导凋亡的发生.
作者：张军；胡大海 刊期： 2008年第01期
胚胎干细胞在没有白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的条件下培养时可以分化成心肌细胞,这些细胞表达一些收缩蛋白,如肌浆球蛋白重链(myosin heavy chain, MHC)和肌球蛋白轻链-2V(ventricular myosin light chain, MLC2V).很多研究者进一步从转录因子的角度研究了控制心脏发育的转录因子在胚胎干细胞向心肌细胞分化过程中的表达,结果表明心脏转录因子GATA4、肌细胞增强因子2C(myocyte-specific enhancer factor 2C, MEF2C)和NKx2.5控制着心脏相关基因的表达,它们在心脏发生进程中发挥重要的转录调控作用.研究同时发现多条信号通路参与了心肌细胞分化的调节.此外,纯化胚胎干细胞源性心肌细胞用于治疗心肌梗塞亦是一个关键问题.然而,胚胎细胞向心肌细胞分化的分子机理还有待进一步研究.
作者：张小勇；黎健 刊期： 2008年第01期
难治性癫痫的耐药机制尚不十分清楚.多药耐药基因(MDR)是首个被发现与难治性癫痫相关的基因,其表达产物P-糖蛋白(Pgp)在难治性癫痫脑组织中表达增强,颞叶癫痫耐药机制则可能与MDR-1a mRNA及MDR-1b mRNA的高表达相关,特异性Pgp抑制剂能显著提高部分抗癫痫药物在难治性癫痫中的作用.对它们的深入研究可能会为难治性癫痫的治疗提供新途径及为新的抗癫痫药物的研究提供靶点.
作者：谢彦；陈赪；孙红斌 刊期： 2008年第01期
在心脏中细胞内游离Ca2+是一种关键的第二信使,Ca2+稳态的改变会显著影响许多心脏功能包括收缩、舒张和心脏发育.钙离子在内质网中主要与钙网织蛋白（calreticulin,CRT）结合,钙网织蛋白水平的改变显著影响细胞内Ca2+稳态,其在胚胎发育过程中丰度的变化以及crt基因敲除可损伤心脏发育而导致胚胎死亡揭示了CRT在心脏发育中所起的重要作用.Crt缺陷揭示了Ca2+依赖的控制点是心肌纤维形成过程中早期事件的关键.
作者：原慧萍；黎健 刊期： 2008年第01期
在哺乳动物精子发生中,存在着特异而精细的转录调控.生精细胞中活跃的转录活动,终止于圆形精子细胞向长型转变的过程之初.睾丸特异性转录调控包括:转录装置的过度表达、睾丸特异性转录因子及启动子的利用,特异性的转录调控途径.转录后调控的作用也十分重要.这些分子事件与卵子发生中的转录调控互有异同.
作者：夏小雨；陈学进 刊期： 2008年第01期
瞬时感受器电位离子通道蛋白(transient receptor potentialion dannel protein,TRP) 是一类组织分布非常广泛的非选择性阳离子通道蛋白.到目前为止,有超过30个TRP通道家族成员在哺乳动物中先后被克隆.TRPV1是近年研究较多、机制较为清楚的TRPV亚家族成员之一,主要分布于外周感觉神经.研究表明,TRPV1通道蛋白可被多种外源或内源性介质敏化或激活,其主要生理功能是感受热、痛等伤害性刺激,且与炎症、咳嗽等多种病理过程密切相关.
作者：隋峰；霍海如；姜廷良；杜新亮 刊期： 2008年第01期
Toll样受体7(TLR7)是表达在哺乳动物细胞内涵体膜表面的跨膜信号传导受体,通过识别单链RNA,激活天然免疫系统,同时通过诱导浆细胞样树突状细胞(pDC)分泌Ⅰ型干扰素(IFN-α)来调控获得性免疫反应.TLR7尤其在抗感染与自身免疫方面发挥重要作用.在深入研究TLR7及其信号通路的基础上,以其作为药物干预靶点,对治疗相关感染性疾病、自身免疫性疾病具有重要的科学意义和应用价值.
作者：邓筠；沈南；王元 刊期： 2008年第01期
Maf家族蛋白是一群结构相似、具有典型的碱性结构域和b-Zip基序的转录因子,可以与细胞核内含有b-Zip基序的其他家族的转录因子结合形成同源或异源二聚体,再与DNA上的特异性序列Maf识别元件(Maf recognition elements,MARE)结合,调节相应基因转录.在胚胎母系红细胞的增值、转移和分化,眼晶状体的发育,Th2细胞的极化,胰岛素的产生,及细胞凋亡中都起到了关键的作用.
作者：运晨霞；吴光；王坤 刊期： 2008年第01期
Maf家族蛋白是一群结构相似、具有典型的碱性结构域和b-Zip基序的转录因子,可以与细胞核内含有b-Zip基序的其他家族的转录因子结合形成同源或异源二聚体,再与DNA上的特异性序列Maf识别元件(Maf recognition elements,MARE)结合,调节相应基因转录.在胚胎母系红细胞的增值、转移和分化,眼晶状体的发育,Th2细胞的极化,胰岛素的产生,及细胞凋亡中都起到了关键的作用.
作者：张春智；浦佩玉 刊期： 2008年第01期
编码肝细胞生长因子酪氨酸激酶受体的c-met原癌基因具有控制细胞生长、侵袭和抗凋亡的作用.Met活化失调在肿瘤发生及其获得侵袭性表型中都有重要的作用.c-Met抑制剂可有效抑制肿瘤细胞生长及转移,从而为抗肿瘤治疗提供了新方法.我们综述了针对c-Met信号途径的抗肿瘤药物开发的4种途径:受体/配体拮抗剂;针对TK催化活性的小分子抑制剂;阻断受体与其下游效应因子的相互作用;降低细胞表面c-Met受体数量.
作者：李雪；崔宇杰 刊期： 2008年第01期
层黏连蛋白是细胞外基质重要的成分之一.67 ku层黏连蛋白受体(67 ku laminin receptor,67 LR)是层黏连蛋白的一个非整合素受体.它是一种多功能蛋白,既参与核糖体的组装、成熟过程,又参与细胞的信号转导,还可作为多种病毒的细胞膜受体.可以和层黏连蛋白相互作用,调节肿瘤的增殖、黏附、微血管形成,加速细胞外基质的降解,促进肿瘤的侵袭转移,其作用机制可能与MAPK信号通路有关.67 LR在多种肿瘤中高表达,还可以作为肿瘤免疫治疗的靶标.
作者：薛会丽；林德馨；郑大利 刊期： 2008年第01期
指数富集的配基系统进化(SELEX)是一种从大容量寡核苷酸文库中经反复分离扩增步骤得到针对靶分子的高亲和力高特异性核酸配基—适配体的体外筛选技术.SELEX技术自1990年发展至今,已涌现出多种筛选模式和分离方法.筛选特异结合蛋白质的SELEX技术发展直接影响和指导了适配体在蛋白质功能调控方面的应用.文章综述了多种SELEX技术在筛选蛋白质方面的发展近况,适配体在蛋白质功能研究中的应用,筛选过程中关键性因素的确定及适配体的前后期修饰.
作者：张朝阳；郭磊；李一林；唐吉军；郭兴杰；谢剑炜 刊期： 2008年第01期
目的 构建含VLDL-R配体结合结构域融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达与纯化.方法 利用PCR技术扩增LBR1-8的DNA片段,将其克隆至原核表达载体pET28a (+)中,随后将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌Rosetta中,利用IPTG诱导蛋白表达并优化其表达条件,表达产物经Ni+-NTA亲和层析柱纯化回收,并采用SDS-PAGE和Western 印迹对目的 蛋白进行分析和鉴定.结果 构建的重组表达质粒经PCR,酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,含有重组质粒的表达宿主经过IPTG诱导成功表达了LBR1-8,并经优化确定了佳的诱导表达条件.结论 成功构建pET28a (+)-LBR1-8表达质粒,表达并经纯化得到了LBR1-8.
作者：夏文豪；吕玲肖；刘志国；屈伸 刊期： 2008年第01期
目的 探讨一氧化氮(nitric oxide,NO)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾脏间质纤维化的作用及其可能的非血流动力学作用机制.方法 成熟Sprague-Dawley雄性大鼠24只,随机分为4组:Ⅰ组假手术组、Ⅱ组模型组、Ⅲ组L-精氨酸(L-Arginine)组、Ⅳ组L-NG-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组.UUO术后28 d处死各组大鼠,应用病理染色技术检测肾组织小管间质损伤指数,免疫组织化学法检测肾组织纤维连接蛋白(fibronectin,FN),RT-PCR技术检测肾组织精氨酸酶(Arginase)mRNA的表达.结果 与Ⅰ组相比,Ⅱ组肾脏小管间质损伤指数及肾脏组织FN的表达增加(P＜0.01);与Ⅱ组相比,Ⅲ组损伤指数及FN的表达减少(P＜0.01),Ⅳ组增加(P＜0.01).与Ⅰ组相比,Ⅱ组肾组织 Arginase mRNA表达升高(P＜0.01);与Ⅱ组相比,Ⅲ组Arginase mRNA表达降低(P＜0.05),Ⅳ组升高(P＜0.01).结论 NO通过减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)增生延缓肾脏间质纤维化,其对肾脏的保护机制可能部分是通过降低肾脏组织中Arignase mRNA的表达而实现的.
作者：杜罕；吕永曼；邵菊芳；贾琳 刊期： 2008年第01期
目的 构建人miR-16真核表达载体,为研究其基因表达调控机制建立实验基础.方法 从人类基因组 DNA中扩增miR-16的前体序列,引入酶切位点和polyT转录终止序列,酶切后插入siRNA表达载体pSuper中,构建miR-16真核表达载体pmiR-16,然后进行酶切和测序鉴定;同时构建含miR-16完全互补序列及乙肝表面抗原HBsAg的报告质粒pXF3H-HBs.将pmiR-16与pXF3H-HBs共转染肝癌细胞系HepG2,通过HBsAg ELISA检测试剂盒检测表达产物HBsAg的改变,鉴定真核表达载体pmiR-16的生物学活性.结果 成功构建了人miR-16真核表达载体pmiR-16及其报告质粒.pmiR-16与pXF3H-HBs共转染HepG2后,pmiR-16组HBsAg的基因表达与对照组相比显著降低,证实pmiR-16转染真核细胞后具有生物学活性.结论 miR-16真核表达载体的成功构建为进一步研究其基因表达调控机制建立了实验基础.
作者：张小勇；余冰；倪明；陈姗姗；吕婷婷；江敏；杨银柯；陆蒙吉；杨东亮 刊期： 2008年第01期
目的 优化长片段寡核苷酸芯片制备、探针标记及杂交条件.方法 通过直接标记方法优化芯片的点样浓度、点样后的固定方法.探索两种靶基因标记方法,并优化杂交液及各种杂交条件.结果 采用70 mer寡核苷酸探针,点样浓度在10 μmol/L时就可获得满意的荧光强度.探针点样后37 ℃水合,然后在3 600 mJ条件下进行紫外交联固定效果好.样品采用生物素间接标记较CY3直接标记信号强度强,成本相对低廉.优化出的杂交液成分:50 %甲酰胺、5×SSC、0.5 %SDS,杂交时间为8 h,杂交温度为65 ℃.结论 通过此试验优化了制备病原体长探针寡核苷酸芯片的制备方法,样品标记策略和杂交液及杂交温度,为下一步制备多种病原体的寡核苷酸芯片检测系统奠定了基础.
作者：庞靖祥；韩金祥；高雪芹；潘继红 刊期： 2008年第01期
目的 研究源自白血病细胞系J6-1的突变型P2X7受体对白血病细胞Ramos的影响.方法 用RT-PCR、共聚焦显微镜检测P2X7受体的表达、定位及BzATP刺激下受体的聚集;MTT法测定细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期.结果 突变型P2X7受体稳定表达于Ramos细胞细胞膜及细胞质;细胞增殖明显增强;300μmol/L BzATP增加细胞死亡率;100μmol/L BzATP诱导P2X7受体聚集.结论 该突变体促进Ramos细胞增殖;激动剂诱发P2X7受体聚集,过量激动剂导致细胞死亡.
作者：马媛媛；郑国光；张海燕；王琳；种靖慧；吴克复 刊期： 2008年第01期
目的 研究ZAKβ与 YWHAZ蛋白之间的相互作用.方法 以ZAKβ为诱饵蛋白,利用酵母双杂交筛选人类肝脏cDNA文库,经GST Pull-down、免疫共沉淀和细胞共定位实验分别验证ZAKβ与猎物蛋白在体外和细胞内的相互作用,构建ZAKβ的截短体以确定相互作用的区域,用磷酸化抗体检测ZAKβ在相互作用中的磷酸化作用,并通过流式细胞仪检测这对蛋白相互作用对细胞周期的影响.结果 利用酵母双杂交筛选到一个能与ZAKβ相互作用的蛋白YWHAZ,并在体外和细胞内都验证了这二者的相互作用,发现这两个蛋白都能共定位于293 T细胞的胞质中,确定了ZAKβ的N端1～250氨基酸为与YWHAZ蛋白相互作用的区域.体外实验发现了这二者的相互作用涉及到磷酸化反应,发现这对蛋白的相互作用能提高293T细胞的G2期水平.结论 首次发现并证实了ZAKβ和 YWHAZ之间的相互作用,发现该相互作用涉及到磷酸化过程并能够对细胞周期产生影响.
作者：赵晶；王玮；马雅婷；施慧莉；霍克克 刊期： 2008年第01期
目的 构建大鼠脂联素基因(AdipoQ)乳杆菌原核表达载体,为脂联素及重组益生菌的进一步研究奠定基础.方法 用TRIzol试剂从大鼠脂肪组织提取总RNA,经RT-PCR方法扩增全长的AdipoQ cDNA 片段,将PCR产物亚克隆入质粒pMG36e载体,对重组质粒pMG36e-AdipoQ进行序列验证后,将重组子经电穿孔转化嗜酸乳杆菌,经SDS-PAGE初步分析重组菌Lb-PMG36e-AdipoQ对目的 基因AdipoQ的表达情况.结果 从大鼠脂肪组织中扩增得到735 bp片段AdipoQ基因,经双酶切鉴定及测序分析,证明AdipoQ已插入pMG36e载体中.构建的pMG36e-AdipoQ原核表达载体被成功转入乳杆?并成功表达出分子量约为30 ku的蛋白质,与核苷酸序列推断的蛋白大小相符.结论 成功构建了大鼠脂联素基因乳杆菌原核表达载体,并在乳杆菌中获得蛋白表达,为脂联素及重组益生菌的进一步研究提供了可能.
作者：傅念；卢放根；阳学风 刊期： 2008年第01期
目的 分析HDL对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内NADPH氧化酶4(NADPH oxidase4,NOX4)及其亚组分p22phox、p67phox、Rac1与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响,研究HDL对LDL的拮抗作用.方法 用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养HUVEC;用RT-PCR、Western印迹观察NOX4、p22phox、p67phox、Rac1表达的变化;用流式细胞仪检测细胞内ROS的变化.结果 HDL处理HUVEC能下调NOX4和p67phox mRNA和蛋白水平,但不影响p22phox和Rac1的表达.高浓度LDL刺激HUVEC时,NOX4表达上调,细胞内ROS生成增加,但p22phox、p67phox和Rac1的表达没有明显变化.用HDL预处理再加高浓度LDL刺激时,NOX4表达下调,ROS生成量减少;结论 HDL可通过下调HUVEC NOX4表达降低ROS水平.
作者：王蕾；国汉邦；张小勇；屈顺林；丁莉；满永；王抒；黎健 刊期： 2008年第01期
目的 建立一种聚丙烯酰胺凝胶快速脱色的方法及干胶的简易制作.方法 将滤纸条置于自来水中并加热作为脱色液,脱色完全后,用培养皿作为支持物制得干胶.结果 与结论本法所用脱色液脱色彻底﹑快速,所制干胶光滑平整,保存时间长.
作者：张晓楠；王爽；侯颖 刊期： 2008年第01期
