目的制作大鼠肝脏血管铸型标本,收集血管铸型的层片数据,为计算机辅助重建肝脏血管数字模型奠定基础.方法选用过氯乙烯塑料作为溶质、丙酮为溶剂配成8%～10%填充剂(含油画颜料),注入大鼠活体肝脏血管系统内(40例),待溶剂挥发后凝固成型,盐酸腐蚀除去细胞和结缔组织,即可得到大鼠肝脏血管铸型标本.将标本用石蜡包埋、切片,对石蜡块每一切面进行拍照,获取血管的层片图像数据.结果此方法能成功地制作出大鼠肝脏血管铸型标本(36例),肝动脉充盈直径为0.8～0.2mm、门静脉2.0～0.1mm、肝静脉为2.2～0.2mm.每一标本拍照收集约150张层片.结论此方法是为计算机重建大鼠肝血管树数字模型获取实验数据的一种可行方法.
作者：吴仕和；徐迎新；尹太；宋旭华；王金晶；李荣 刊期： 2004年第03期
目的探讨急性胰腺炎(AP)大鼠心功能和心肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的改变及其机制.方法以5%牛磺胆酸钠胰胆管注射(1ml/kg)制成大鼠急性胰腺炎模型,检测AP大鼠左心室收缩末压(LVESP)、左心室压力变化率大值(±dp/dt max)、cTnI、血清肿瘤坏死因子(TNF) -α和淀粉酶的变化,探讨AP大鼠心功能和cTnI的改变及其机制.结果术前大鼠LVSP和±dp/dt分别为(15.5±1.4)kPa、(537.2±70.4)和(402.7±51.3)kPa/s,AP大鼠LVSP和±dp/dt max呈进行性下降,1、2、3h时LVSP和±dp/dt分别为(13.8±1.2)kPa、(388.8±42.6)和(251.2±24.7)kPa/s;(11.9±0.8)kPa、(285.8±27.9)和(172.5±12.4)kPa/s;(10.2±0.7)kPa、(107.9±20.5)和(126.9±9.6)kPa/s,各时间段比较差异有显著性(P<0.05),同时伴有血清TNF-α、和淀粉酶升高;3h后cTnI明显升高(P<0.05).结论 AP大鼠心功能进行性降低,cTnI升高,心肌受损,TNF-α可能介导了其过程.
作者：王成友；程书榜；倪勇；梁浩辉；徐敏 刊期： 2004年第03期
目的大鼠多器官功能不全综合征(MODS)结肠动力变化并探讨其机制.方法将Wistar大鼠分成2组:正常对照组和MODS模型组.观测2组大鼠1h排便的粪点数、2组结肠平滑肌环行肌条振幅、平滑肌细胞长度及钙离子的变化;测定平滑肌细胞三磷酸肌醇(IP3)和血清一氧化氮(NO)含量的变化.结果在10-4mol/L乙酰胆碱和10-1mol/L氯化钾的作用下,MODS组肌条收缩振幅小于对照组.正常对照组平滑肌细胞的长度分别是(49.1±11.8)μmol和(69.2±15.7)μmol;MODS模型组平滑肌细胞的长度分别是(65.1±18.5)μmol和(87.2±23.7)μmol.正常对照组各组数据与MODS模型组相应的数据相比有明显差别(P<0.05).MODS模型组粪点数、钙离子浓度和IP3含量较正常对照组低;而NO较正常对照组高(P<0.05).结论 MODS情况下,结肠平滑肌的运动功能减弱与平滑肌胞浆钙离子和平滑肌细胞IP3含量降低以及NO增加有关.
作者：陈哲宇；齐清会 刊期： 2004年第03期
目的研究抗白细胞介素-2受体(CD25)单克隆抗体参与大鼠心脏移植排斥反应及调节细胞因子(CK)表达的作用及其机制.方法建立大鼠颈部心脏移植动物试验模型,实验动物随机分为4组,分别单独或联合应用环孢霉素A(CysA)及CD25单克隆抗体(舒莱)来干预心脏移植排斥反应,观察其供心存活时间,并应用RT-PCR的方法检测移植物局部CK如白细胞介素(IL)-1β、IL-2、CD25、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ在移植术后1、3、5、7、9、11和14d 动态表达水平的动态变化.结果 B、C、D组移植心存活时间显著延长,分别为(26.4±5.7)、(29.2±7.1)、(55.0±11.6)d,尤以CysA+舒莱组显著(P<0.05).CD25的表达在各组中的变化较为明显,在用药组明显降低(P<0.05);IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的表达在移植心延长组较强,而IL-2、CD25、IFN-γ、TNF-α的表达则相对较弱.各组细胞因子(CK)表达的高峰时期均与移植物的存活时间及病理变化有一定的关系.结论CK表达在移植排斥反应中发生了相应的变化,并与干预的因素及移植物存活时间有密切的关系,其作用机制多样.二联用药对整个CK网络的作用方式是TH1类CK向TH1类CK整体偏离,而这是这种免疫偏离的机制使本组移植心存活时间延长显著.
作者：夏家红；蒋雄刚；黄毅；杜心灵；张凯伦；肖诗亮；杨辰垣 刊期： 2004年第03期
目的了解家猪在不同条件下肝脏耐受血流阻断的安全时限,为临床设计肝脏血流阻断的方法和掌握肝脏血流阻断安全时限提供依据.方法观察正常家猪在无转流条件下阻断肝血流、门-颈静脉转流条件下肝血流阻断60、90、120min四组动物的肝脏功能状态、组织病理改变和术后存活情况.结果无转流动物,阻断入肝血流30min内出现严重循环功能障碍死亡.门-颈静脉转流动物,阻断入肝血流60、90min,出现一过性肝功能障碍,术后3d逐步恢复,肝组织轻度的变性坏死并长期存活;阻断入肝血流120min,术后出现持续加重的肝脏功能损害,肝组织广泛严重水样变性和大片坏死,术后3d动物全部死亡.结论正常家猪在门-颈静脉转流条件下可耐受入肝血流阻断90min.
作者：丁钧；董家鸿；杨占宇；李昆；董树虹；韩本立 刊期： 2004年第03期
目的观察常温短暂热缺血后低温保存对供心的影响.方法建立猪原位心脏移植模型,随机分为对照组(C组)和热缺血组(H组).H组供心切取前常温缺血5min.供心4℃保存4h测定含水率、MDA、ATP含量,原位末端标记法检测心肌细胞凋亡;两组供心行原位心脏移植各8例,观察移植后血浆肌钙蛋白I(cTnI)水平、心排量(CO)和再灌注2h的心肌超微结构和凋亡.结果与C组比较,H组供心低温保存后含水率、MDA高于C组,而ATP明显降低,差异均有显著性(P<0.05);C组cTnI漏出少,CO高于H组(P<0.05);H组心肌细胞结构改变明显,凋亡水平高于C组(P<0.01).结论热缺血使供心能量消耗,诱导再灌注后心肌细胞凋亡,一定程度上导致了供心移植后早期功能异常.
作者：池一凡；侯文明；王海波；孙忠东；艾登斌；于建宪 刊期： 2004年第03期
目的应用腓肠神经移植替代损伤的双侧海绵体神经恢复大鼠的勃起功能.方法将48只雄性SD大鼠随机分为3组:神经移植组、神经损伤组及假手术组.2、4个月后,海绵体神经电刺激检测大鼠勃起功能,免疫组织化学法检测海绵体内nNOS阳性神经纤维.结果 2个月后神经移植组与神经损伤组大鼠对海绵体神经电刺激均无勃起反应,两组海绵体内nNOS阳性神经纤维数目差异无显著性(P>0.05);而4个月后神经移植组大鼠勃起功能较神经损伤组差异有显著性(P<0.05),海绵体内nNOS阳性神经纤维数目也显著高于神经损伤组(P<0.05),与假手术组差异无显著性(P>0.05).结论腓肠神经移植替代损伤的双侧海绵体神经可恢复大鼠的勃起功能.
作者：崔殿生；胡礼泉；李世文；郑新民 刊期： 2004年第03期
目的研究慢性胰腺炎与细胞外基质(ECM)代谢失衡的关系,探讨慢性胰腺炎的发病机制.方法应用含有4096条人类全长基因的cDNA表达谱芯片,分别对6例慢性胰腺炎及正常胰腺组织标本的基因表达谱进行分析.结果在6例慢性胰腺炎组织中,均有差异表达的基因207条,占芯片基因数的5.01%.从中筛选出与ECM代谢有关的显著表达差异基因18条,其中表达上调基因10条,下调基因8条.结论转化生长因子(TGF)-β1持续性高表达造成的ECM代谢紊乱,可能是导致慢性胰腺炎胰腺纤维化发生、发展的重要因素.
作者：何少武；胡先贵；金钢 刊期： 2004年第03期
目的观察去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物力学特性.方法取液氮保存的人同种主动脉带瓣管道,采用低渗液-去污剂(1%去氧胆酸)-核酸酶法去除了同种心脏瓣膜组织中所有的细胞成分,组织基因组DNA含量下降91%,保留了完整的细胞外基质.测定去细胞前后组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比.结果与去细胞前相比,只有管壁组织的含水量去细胞前与去细胞后比较明显增加(P<0.01),瓣叶组织含水量、组织厚度、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比差异无显著性(P>0.05).结论去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物力学特性稳定,符合机体的要求,且为受体细胞化组织工程心脏瓣膜的研制提供了可靠的天然的纤维支架材料.
作者：崔彬；刘迎龙；谢宁；于存涛；张恩平 刊期： 2004年第03期
目的观察深Ⅱ度烫伤大鼠上皮组织修复过程中皮下脂肪组织内脂肪细胞转化生长因子(TGF)-β1、2、3亚型的表达特点及生物学意义.方法将36只Wistar 大鼠随机分为正常对照组(A组,n=6)和单纯烫伤组(B组,n=30).利用大鼠5%深Ⅱ度烫伤模型,于伤后1、3、7、14和21d采取全层创面皮肤标本,采用免疫组织化学染色法检测真皮下脂肪细胞TGF-β1、2、3的表达,并以病理学染色观察肉芽组织的形成及创面的收缩情况.结果正常皮肤组织内脂肪细胞中均有TGF-β1、2、3的表达.单纯烫伤创面愈合的过程中,伤后1d,脂肪组织内脂肪细胞膜表面TGF-β1表达较弱,但TGF-β2、3的表达较强,伤后3d,脂肪细胞TGF-β1表达有所增强,TGF-β2、3的表达进一步增强.此时创面深层脂肪组织内有新的微小血管形成.至14d,创面收缩,脂肪组织TGF-β1表达维持在较高水平,TGF-β2、3的表达也较高.真皮浅层大量的微小血管形成,密度明显增强.21d创面完全愈合,在新愈合组织内有一定量的血管形成,TGF-β各亚型的表达有所减弱,但TGF-β2、3的表达仍强于TGF-β1.结论组织修复过程中,脂肪细胞释放的TGF-β可能有助于肉芽组织充填和微小血管网的形成,在创面愈合中扮演重要角色.
作者：程飚；付小兵；刘文忠；方利君；孙同柱；盛志勇 刊期： 2004年第03期
目的探讨大鼠脂肪变性供肝减体肝移植术后的肝再生方式及相关机制.方法采用79%标准饲料、20%猪油、1%胆固醇混合喂饲,同时以50%乙醇灌胃每日1ml/100g,时间为4周,诱导供肝脂肪变性形成,大鼠60%减体肝移植模型.观察和比较术后1、3、7、14d时PCNA、BrdU免疫组织化学及新鲜分离的肝细胞的流式细胞术结果及肝再生率.结果脂肪变性供肝减体肝移植术后1、3、7d的肝再生率较正常明显减低(P<0.01);各时点的PCNA标记指数(P<0.01)和BrdU标记指数差异均有非常显著性(P<0.01);脂变供肝术后的肝细胞增殖指数(PI)在7d时高(26.31%),而正常供肝在3d时高(42.01%).结论大鼠脂肪变性供肝减体肝移植术后肝再生的高峰时间滞后、周期延长.
作者：叶晟；韩本立；董家鸿；朱瑾；李昆；张玉君 刊期： 2004年第03期
目的观察肝硬化、肝癌组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达以及和血管内皮生长因子(VEGF)相关性.方法对146例手术切除后的肝硬化和肝癌标本进行连续切片和免疫组织化学检测,比较同一组织细胞中HIF-1α表达的临床病理意义,并分析HIF-1α和VEGF表达的相关性.结果 HIF-1α普遍表达在肝硬化、肝癌组织中;较来源的肝硬化组织而言,肝癌组织中HIF-1α的表达显著下调(P<0.05)并与组织分化程度有关(P<0.05),与癌栓形成、预后无关(P>0.05);HIF-1α与VEGF在肝硬化、肝癌组织中的表达显著相关(r=0.923,P<0.05).结论肝硬化、肝癌组织中VEGF的表达依赖于HIF-1α;肝细胞癌变后缺氧程度减轻.
作者：王海平；陈孝平；丁磊；何松清；Ali.Muthanna 刊期： 2004年第03期
目的探讨乙酰肝素酶(HPSE)反义寡脱氧核苷酸(AS-ODN)对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制活性.方法设计合成分别互补于HPSE mRNA 5＇未翻译区和起始密码区的AS-ODN1、AS-ODN2及相应对照NS-ODN1、NS-ODN2,在脂质体介导下以250nmol/L终浓度转染人乳腺癌MDA435细胞,以RT-PCR和Western blot分别检测HPSE mRNA和蛋白表达,以基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭力.结果 AS-ODN2组的HPSE mRNA相对表达量、蛋白表达量和侵袭细胞数(0.62±0.04、12.70±1.70、61.00±9.00)与脂质体对照组(1.60±0.04、36.20±2.10、178.00±17.00)和NS-ODN2组(1.48±0.03、35.50±2.30、174.00±20.00)相比较均显著降低(P<0.01);而AS-ODN1组与脂质体对照组和NS-ODN1组相比较差异均无显著性(P>0.05).结论互补于起始密码区的HPSE AS-ODN可通过下调HPSE表达显著抑制人乳腺癌细胞株MDA435的侵袭力.
作者：张友磊；傅志仁；陈学云；杨佳荟；王元和；沈茜 刊期： 2004年第03期
目的探讨不同冲洗液冲洗对人工关节置换术后感染的预防作用.方法将54只家兔分成5组,各组动物于右侧膝关节股骨远端置入钴-铬-钼合金假体,关节腔内加入1×108cfu/ml浓度的金黄色葡萄球菌菌液100μl.对照组伤口不予冲洗.生理盐水冲洗组、洗必泰冲洗组、活力碘冲洗组和庆大霉素生理盐水冲洗组则于加入菌液3min后分别用生理盐水、0.05%洗必泰、0.10%活力碘和庆大霉素生理盐水(24万U/500ml)各150ml冲洗创面2min.术后14d通过观察局部炎症表现、脓液性状和细菌培养来判断是否发生感染.结果对照组、生理盐水冲洗组和活力碘冲洗组感染率均为100%.洗必泰冲洗组感染率为90%.庆大霉素生理盐水冲洗组感染率为9.1%,明显低于对照和其他各组(P<0.01).结论庆大霉素生理盐水冲洗创面能明显降低含有置入假体的金黄色葡萄球菌污染关节的感染率,可有效预防人工关节置换术后感染.
作者：陈廖斌；平安松；王华；顾洁夫 刊期： 2004年第03期
目的应用化学交联法制备抗人成骨肉瘤单克隆抗体(OSMcAb)-人血清白蛋白(HSA)-甲氨蝶呤(MTX)偶联物并进行体外细胞毒性实验.方法采用碳二亚胺、活化酯及SPDP法制备OSMcAb-HSA-MTX间接偶联物;同时应用活化酯法制备出OSMcAb-MTX;并进行体外靶细胞结合实验、细胞毒性实验和集落形成抑制实验.结果化学交联法制备出的偶联物的性质及药物含量稳定.抗体蛋白活性保存良好.集落形成抑制实验中,OSMcAb-HSA-MTX、OSMcAb-MTX的IC50(μg/L)分别为2.550±0.114、2.710±0.145,它们杀伤作用均明显大于游离MTX(IC50为5.510±1.529)(P<0.05).24h细胞毒性实验中,OSMcAb-HSA-MTX、OSMcAb-MTX的对MG-63细胞、T24细胞的IC50(μg/L)分别为66.5:3785和79.8:3025,偶联物杀伤作用在靶细胞明显强于非靶细胞(P<0.01).结论以化学交联法制备OSMcAb-HSA-MTX偶联物方法可行;偶联物OSMcAb-HSA-MTX在体外具有良好的抗肿瘤作用.
作者：詹新立；周江南；赵自平；蒋欣；李官成 刊期： 2004年第03期
目的观察α-干扰素(INF)对部分肝切除后裸鼠残肝移植性人肝癌细胞生长的影响.方法将人肝癌组织(取自人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,肝癌细胞株Bel-7402)植入30只BALB/c nu/nu裸鼠肝脏,建立人肝癌原位移植瘤模型,随机分为3组,每组10只.A组为对照组;B组行部分肝切除(占肝脏总体积65%)同时每天注射生理盐水;C组行部分肝切除后第1天起,以INF-α300000U/d进行皮下注射.术后30d处死裸鼠,测量肿瘤大小和重量,计算肿瘤体积及抑瘤率,检测肿瘤组织微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 B组肝癌组织MVD和VEGF表达较A组明显增强(P<0.05),肿瘤重量和体积亦明显增加(P<0.05).C组肝癌组织MVD和VEGF表达较B组明显减低(P<0.01),肿瘤重量和体积亦明显减少(P<0.01),肿瘤生长抑制率达到63%.结论部分肝切除可促进新生血管的形成,加速残肝原位移植瘤的生长,INF-α可抑制瘤组织内VEGF的表达和新生血管的形成,同时明显抑制残肝肿瘤细胞的生长.
作者：陈亚进；杜丽云；闵军 刊期： 2004年第03期
目的观察大鼠诱癌过程中c-myc mRNA的动态演变规律以及乌司他丁对其表达的影响.方法将SD大鼠120只分为正常组、诱癌组和干预组.利用诱癌剂3-甲基-2-甲氨基偶氮苯(DAB)喂养SD大鼠来制作肝癌模型.各组于肝癌开始造模后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24周分别活杀取肝叶标本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测c-myc mRNA的表达.结果 c-myc基因在正常大鼠肝组织内呈阳性表达,从肝脏染毒开始即升高.在癌变期(14～24周),c-myc mRNA的表达量亦逐渐增高(5.69±1.35)～(8.16±2.18).乌司他丁的干预不能抑制c-myc mRNA的表达量的升高,但能推迟其表达量的升高的时间.结论 c-myc作为一种致癌基因可能是肝癌的启动基因和维持基因,其表达量也是一种肝细胞癌的恶性程度和进展期的标志基因.乌司他丁在一定程度上可抑制肝损伤和肝细胞癌的发生,但不能抑制c-myc基因的表达.
作者：方驰华；张伟；龚加庆 刊期： 2004年第03期
目的探讨下肢缺血预处理对未成熟心肌保护作用的机制.方法采用双下肢缺血预处理(DLIP)大白兔Langendorff离体心脏灌注模型.分为4组,每组大白兔6只:E1组,动物麻醉后反复3次阻断双下肢血流5min,松开5min,建立模型,灌注15min转为工作心15min,全心停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;E2组,双下肢缺血预处理前静脉注射超氧化物歧化酶至双下肢缺血预处理完毕,重复E1组方法;E3组,静脉注射蛋白激酶C(PKC)阻滞剂多粘菌素B(PMB),时间10min,重复E1组方法;E4组,静脉注射ATP敏感性钾通道(mitoKATP)阻滞剂(5-HD),时间10min,重复E1组方法.以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、心肌组织ATP和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体钙依赖性ATP酶(Ca2+-ATPase)活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m、超氧阴离子自由基(O2-)作为观察指标.结果 E1组左心室功能恢复优于其他各组(P<0.05),心肌ATP含量、SOD活性、Ca2+-ATPase活性、[ATP]m均优于其他各组(P<0.01),心肌含水量低于其他各组(P<0.05),MDA含量、CK、LDH漏出率、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+含量低于其他各组(P<0.01).结论下肢缺血预处理对缺血再灌注未成熟心肌的保护作用机制可能是通过心肌PKC通路的激活和mitoKATP通道的开放起作用.
作者：孙忠东；池一凡；杨铁南；侯文明；牛兆倬；唐子龙 刊期： 2004年第03期
目的观察不同速率生长的胶质瘤细胞的葡萄糖代谢状态.方法用C6细胞克隆培养得到不同细胞形态、不同生长速率的细胞株.分别检测生长快的C64细胞和慢的C61细胞的胞内葡萄糖、ATP浓度,同时检测两种细胞的己糖激酶蛋白和它们的胞质/线粒体己糖激酶活性.结果 C64细胞内检测不到葡萄糖,C61细胞内葡萄糖浓度为(0.17±0.05)μmol/g蛋白;C64细胞、C61细胞内ATP浓度分别为(10.16±1.51)μmol/g蛋白和(7.57±0.32)μmol/g蛋白.条带的吸光度分析显示C64细胞的己糖激酶Ⅰ稍高于C61细胞;C64细胞线粒体己糖激酶活性约为C61细胞的3倍,但其胞质己糖激酶活性仅为C61细胞的一半.结论葡萄糖转运系统与肿瘤细胞的葡萄糖摄取、葡萄糖代谢状态及生长速度等密切相关.
作者：李方成；余进；陶宗玉；李军亮；林吉惠 刊期： 2004年第03期
目的探讨微血管内皮细胞(MVEC)在体外培养中形成血管样结构的细胞外基质条件,为体外组织工程血管化提供实验基础.方法在纤维蛋白原浓度为2g/L的纤维蛋白凝胶中加入不同浓度的血管内皮细胞生长因子165(VEGF165),进行MVEC的立体培养,观察有无血管样结构形成.结果在VEGF165为10μg/L组和20μg/L组中,MVEC在立体培养中形成血管样结构.VEGF165为20μg/L组比VEGF165为10μg/L组形成血管样结构的时间更早、结构更长.VEGF165为5μg/L组和对照组均无血管样结构形成,但可见细胞团聚.结论 VEGF165浓度为20μg/L或10μg/L时,MVEC在纤维蛋白凝胶立体培养中可形成血管样结构.VEGF165诱导形成血管样结构的长度与剂量有依赖关系.
作者：吴仕和；徐迎新；阎锡蕴；宋旭华；尹太；王金晶；李荣 刊期： 2004年第03期
目的探讨超高分子聚乙烯磨损颗粒(UHMWPE)的大小对人工关节松动的影响.方法从翻修髋关节术所获得组织中提取超高分子聚乙烯磨损颗粒(平均直径9.41、5.96、0.56、0.33μm),将其与Ceridust 3615 R 颗粒(模型颗粒)(平均直径14.27、6.39、1.74、1.01、0.54和0.28μm)分别刺激人单核/巨噬细胞,并检测培养上清液中的骨溶解介质.结果随着UHMWPE颗粒直径的减少,其刺激单核/巨噬细胞分泌白细胞介素-1β,白细胞介素-6和细胞坏死因子α的作用明显增强,而Ceridust 3615 R 颗粒的大小对单核/巨噬细胞的刺激作用影响不明显.结论单核/巨噬细胞对UHMWPE磨损颗粒与Ceridust 3615 R颗粒的反应明显不同,运用模型颗粒研究人工关节松动的机制仍须谨慎.
作者：丁悦；Bertram Barden；刘尚礼；黄东生；Franz l(o)er 刊期： 2004年第03期
目的构建载有白细胞介素-10(IL-10)基因的,能在肝星状细胞(HSC)稳定表达的重组腺病毒载体,为将来的肝纤维化基因治疗提供基础.方法将IL-10cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒PAdTrack-CMV,得到重组质粒PadTrack-CMV-IL-10.采用电穿孔法将质粒PadTrack-CMV-IL-10与腺病毒骨架质粒PadEasy-1共转化E.coliBJ5183细胞,通过在细胞内同源重组,生成带有IL-10基因的重组腺病毒载体.重组腺病毒质粒经过293细胞的扩增及CsCl的纯化,感染HSC细胞.结果经形态学、病毒DNA酶切、聚合酶链反应(PCR)和逆转录(RT)-PCR等方法的鉴定,证实了载体构建的正确性,经测定,病毒滴度为2.5×1010efu/ml.结论成功构建带有IL-10cDNA的重组腺病毒载体,所携带的IL-10载体能够转染大鼠HSC并在HSC中稳定表达,为进一步的研究打下了基础.
作者：熊亮发；冷希圣；郭晏同；魏玉华；李涛；赵力 刊期： 2004年第03期
目的微囊包裹猪原代肝细胞并进行普通培养,观察肝细胞形态变化.方法在不含小牛血清的RPMI 1640培养基中培养,光镜下观察培养过程中肝细胞形态变化,检测不同时期培养上清中白蛋白及尿素含量.结果微囊肝细胞可较长期存活,微囊肝细胞组与游离肝细胞组上清蛋白分泌在前3d差异无显著性(P>0.05),4d后差异有显著性(P<0.05),而上清尿素合成在前2d差异无显著性(P>0.05),3d后差异有显著性(P<0.05).结论微囊材料可制备微囊化猪原代肝细胞,并进行体外培养,与游离肝细胞比较具有更好分泌合成功能.
作者：刘应生；章乐虹；林景泰；杨学伟；向荣超；胡以则 刊期： 2004年第03期
目的探讨检测胆汁和胆管刷取物中K-ras基因突变对胆管癌的诊断价值.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和DNA测序检测K-ras基因突变,胆汁标本23例,胆管刷取物14例,胆管癌组织10例.结果经PCR-SSCP银染分析,胆管癌胆汁、胆管刷取物和胆管癌组织中K-ras基因突变率分别为54.6%(6/11)、60.0%(6/10)和60.0%(6/10),胆管良性病变均无突变.经DNA测序分析发现,6例胆管癌中2例为点突变,4例为插入突变.同一病例的胆汁、胆管刷取物和癌组织中的K-ras基因突变及突变类型相一致.结论检测胆汁和胆管刷取物中K-ras基因突变对胆管癌的术前定性诊断有一定的实用价值.
作者：塔西乌；王炳生；刘银坤；姚礼庆；艾志龙；刘岚 刊期： 2004年第03期
目的观察单核细胞、NK细胞和T细胞在猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应(DXR)中的作用.方法建立湖北白猪-云南猕猴的腹腔异位心脏移植模型,实验分为2组:对照组(n=5),不使用中华眼睛蛇毒因(Y-CVF);实验组(n=4)应用Y-CVF完全清除受者体内补体.2组受体猴均采用环孢素A(CsA),环磷酰胺(CTX)和甲基强的松龙(MP)三联免疫抑制治疗.免疫组织化学方法检测移植心组织中细胞间黏附分子(ICAM)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、单核细胞、NK细胞和T细胞的表达.结果对照组3个移植心在15～60min内发生超急性排斥反应(HAR),另2个分别存活22h及6d,移植心均未见明显的炎性细胞浸润及ICAM-1和TNF-α的表达.实验组移植心存活时间分别为8、10、13和13d,移植物浸润细胞中可见大量的单核细胞(50%),少量的NK细胞(8%～10%),CD4+T细胞(15%)和CD8+T细胞(25%).移植物血管内皮细胞表面出现ICAM-1的表达上调,移植物间质中出现TNF-α的表达增加.结论单核细胞、NK细胞和T细胞介导的移植物损伤,在应用Y-CVF处理的猪-猕猴DXR发生中发挥重要作用.
作者：陈栋；曹荣华；郭晖；陈刚；王西墨；沈世乾；孙黔云；王虹；陈丽君；吴瑛；朱建国；王婉瑜；熊郁良；陈实 刊期： 2004年第03期
目的研究FasL基因转染胃癌细胞中Caspase-3的表达并观察其与胃癌细胞凋亡的关系.方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和免疫组织化学检测Caspase-3在FasL基因转染的SGC-7901胃癌细胞中的表达,流式细胞术、原位末端标记(TUNEL)检测胃癌细胞凋亡.结果 Caspase-3在SGC-7901母系细胞中低水平表达,转移FasL基因后的SGC-7901/FasL细胞的Caspase-3的表达显著升高(P<0.01),同时胃癌细胞凋亡率升高(25.4% vs 7.2%,P<0.001),凋亡率与Caspase-3的表达呈明显正相关关系(r=0.647,P<0.01).结论 Caspase-3在胃癌发生中起重要作用;FasL基因转染的胃癌细胞的凋亡与其Caspase-3的表达增加有密切关系.
作者：郑世营；葛锦锋；赵军；王志刚；仲宁 刊期： 2004年第03期
目的用5-溴-2'脱氧脲嘧啶核苷(BrdU)标记法观察大鼠胰腺导管中成体干细胞的增殖变化情况,探索其变化规律.方法自鼠尾静脉注入链脲菌素(STZ)造成大鼠胰岛β细胞损伤后,于注射后第1、2、3、6、9天分别取3只大鼠处死,处死前12h,腹腔注入5-溴-2'脱氧脲嘧啶核苷(BrdU)标记胰腺导管上皮细胞中s期细胞,用免疫组织化学法观察胰腺导管上皮中干细胞的增殖变化.结果注入链脲菌素后,大鼠的导管上皮细胞显著增殖(P<0.001),于48h迅速达到高峰,分类导管中主导管、中导管、小导管于48h达到高峰,共同导管于72h达到高峰.结论胰岛β细胞的损伤可以激活胰腺导管中的干细胞,于损伤后48h细胞增殖为活跃.
作者：李兵；许评；苏红；宋春芳 刊期： 2004年第03期
目的观察重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)-2诱导犬自体原位气管移植段软骨再生过程中的剂量效应.方法 4组小鼠气管移植段各环间软组织中植入rhBMP-2胶原缓释系统,其rhBMP-2含量分别为1、2、5和10mg.将移植段气管原位移植,4周后观察标本大体和组织学改变,并将测得的新生软骨面积进行比较.结果 rhBMP-2植入组移植段环间均有不同程度的软骨再生,随植入物中rhBMP-2含量的增加,新生软骨面积分别为:(1768.1±449.0)、(2364.1±444.3)、(3000.7±488.3)、(3188.3±388.3)pixel.4组新生软骨面积差异有显著性(F=5.246,P<0.01).结论 rhBMP-2诱导气管移植段软骨再生的作用具有剂量效应.
作者：李小飞；张涛；程庆书；刘锟；卢强；汪健 刊期： 2004年第03期
目的观察人骨肉瘤中Survivin基因表达,探讨其与细胞凋亡关系及对骨肉瘤生物学行为的影响.方法采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记技术对38例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织Survivin mRNA及骨肉瘤中Caspase-3蛋白和细胞凋亡进行检测.结果较正常骨(0%)和骨软骨瘤(6.7%),Survivin mRNA显著表达于骨肉瘤(65.8%)中,并与骨肉瘤WHO分型和转移有关(P<0.05);骨肉瘤中Caspase-3蛋白与凋亡细胞阳性率分别为71.1%和63.2%,凋亡指数(AI)均值为8.3%;Survivin阴性组AI显著高于阳性组(P<0.01);Survivin与Caspase-3表达不相关.结论 Survivin选择性表达于骨肉瘤中,通过抑制细胞凋亡,参与骨肉瘤发生发展,其可能是判断骨肉瘤预后的重要参考指标.
作者：高大新；吕刚；张海燕；黄涛 刊期： 2004年第03期
目的观察反义转化生长因子(TGF)-β1基因对骨肉瘤细胞恶性表型的逆转作用.方法将反义TGF-β1基因转染骨肉瘤细胞MG-63后,以G418(400mg/L)筛选14d,获得转染细胞系.分别检测细胞周期、细胞凋亡和明胶酶A(MMP-2)表达,并观察转染细胞软琼脂克隆形成数和裸鼠体内致瘤能力.结果与MG-63和空载体转染细胞MG-pcDNA3相比,反义基因转染细胞MG-TGF-β1(-)的G0/G1期细胞从56.2%和60.1%增至71.6%,S期细胞从19.1%和17.8%降至12.9%,MMP-2 mRNA表达明显减少.MG-TGF-β1(-)的软琼脂克隆形成数从48.6±8.1和45.2±4.7减至28.2±5.6,裸鼠体内形成肿瘤的体积(83.4±27.4)mm3也明显小于MG-63组(191.3±21.5)mm3和MG-pcDNA3组(204.2±30.7)mm3.结论反义TGF-β1基因转染骨肉瘤细胞可以逆转肿瘤细胞的恶性表型,抑制肿瘤的侵袭和转移.
作者：刘勇；郑启新；杜靖远；杨述华；邵增务；肖宝钧；郭晓东；段德宇 刊期： 2004年第03期
1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]是维生素D在体内唯一有活性的形式,以往认为其功能为调节钙、磷的代谢.近来,随着对其功能研究的深入,已有实验表明1,25-(OH)2D3具有抑制机体免疫功能的作用[1].因此,我们研究了1,25-(OH)2D3的上市药物罗盖全对不同系小鼠间皮肤移植术后免疫器官的作用,以期为临床器官移植的抗排斥治疗提供实验依据.
作者：张进生；管德林；许建军；刘振红；张长品；陈晓 刊期： 2004年第03期
我们检测胆囊癌组织及正常胆囊组织中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及碱性成纤维生长因子(bFGF)的表达及测定胆囊癌组织中微血管密度(MVD),探讨一氧化氮(NO)及bFGF与胆囊癌血管生成的关系.
作者：牛新捷；王作仁；张云锋；吴胜利 刊期： 2004年第03期
本研究旨在观察国人正常二尖瓣环的解剖形态特点,以指导临床上对瓣环进行环缩,提高手术效果.
作者：李继勇；张健群；万彩红；管玉龙；曹向戎 刊期： 2004年第03期
本研究采用免疫组织化学方法分别检测肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中p27、细胞周期素D1和细胞周期素E蛋白的表达,并进而探讨这些蛋白与肿瘤临床病理特征的关系.
作者：张伟；杜成友；徐尔侃 刊期： 2004年第03期
黄芪甲甙是黄芪单体之一,除了有抗炎,降压,改善心肌缺血等作用外,还具有抗脂质过氧化及清除自由基作用,我们观察了黄芪甲甙对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.
作者：于芹超；朱同玉；张永康 刊期： 2004年第03期
我科自1999年1月至2003年1月选用松质骨螺纹钉治疗股骨颈骨折患者26例,取得良好临床效果.
作者：黄子辉；欧书锦；朱泽伟 刊期： 2004年第03期
白细胞介素(IL)-6属于促炎症性细胞因子,广泛参与机体的免疫反应[1-3],细胞黏附分子(ICAM)-1是白细胞功能相关抗原的配体,为细胞膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族,此二类因子在免疫应答和器官移植免疫排斥反应中起重要作用[4-6].我们通过监测40例肾脏移植术后患者血清IL-6和ICAM-1水平的改变,探讨此二类因子在肾移植急性排斥反应监测中的意义.
作者：赵磊；周春燕；马潞林；陈忠新；郭应禄 刊期： 2004年第03期
我们通过常规细菌培养、免疫组织化学和聚合酶链反应(PCR)方法检测小型猪火器多发伤后血中及脏器中的细菌,对火器多发伤时检测肠道细菌移位的方法进行探讨.
作者：杨兴东；黎沾良；陆连荣；于勇；杨英祥 刊期： 2004年第03期
目的探讨心脏瓣膜置换术后室性心律异常的相关因素和规律,提高防治措施.方法将147例心脏单瓣膜置换、双瓣膜置换及瓣膜置换加左房血栓清除患者按术式分成3组,按术式、血清钾浓度、主动脉阻断时间、心胸比例、心功能等在术后60h内分成5个时间段,分别观察记录偶发、频发室性早搏、室性二联律、三联律、室速、室颤例次,然后进行组间、多因素分析对比研究.结果血钾<3.5mmol/L与>4.1mmol/L组间对比,差异有非常显著性P<0.01;主动脉阻断时间>90min与<60min组间相比,差异也有非常显著性P<0.01;心胸比>0.8与<0.8组间相比,差异有显著性P<0.05;心功能Ⅳ级与心功能Ⅱ级组两组相比,差异有非常显著性P<0.01.结论心脏瓣膜替换术后引起室性心律增多的主要因素依次为血清钾<3.5mmoI/L组,主动脉阻断时间>90min组,心功能Ⅳ级组,心胸比>0.8组,及体外循环时间>150min组,心率<60次/min组,AMP<50mmHg组,CVP>20cmH2O组,及异丙基肾上腺素应用>48h组.
作者：张德奎；樊健；单清华；靳树仁；张书海；孙国林 刊期： 2004年第03期
目的探讨磁共振影像(MRI)和分子生物学标记在评价垂体腺瘤侵袭性行为中的作用.方法对45例垂体腺瘤患者术前的MRI、术中所见结果和术后组织标本免疫组织化学分析结果进行研究.结果 45例垂体腺瘤中,MRI预测海绵窦侵袭的敏感性为60%,特异性为85%,阳性预测值为83%,阴性预测值为63%.免疫组织化学分析侵袭性垂体腺瘤的微血管密度(MVD)、Ki-67标记指数、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP-9)表达分别为52.52±11.18、2.74±2.83、4.73±0.64、3.05±1.04,明显高于非侵袭性垂体腺瘤的34.96±18.69、1.25±1.45、3.09±1.48、0.67±0.74(P<0.01、<0.05、<0.01和<0.01);侵袭性垂体腺瘤的抗转移基因nm23表达为1.55±1.52,明显低于非侵袭性垂体腺瘤的4.08±1.18(P<0.01);而侵袭性垂体腺瘤的原癌基因c-myc标记指数和癌基因bcl-2表达分别为1.07±1.54、2.34±1.75与非侵袭性垂体腺瘤的0.35±0.73、1.66±1.79比较无明显相关(P>0.05).结论增强扫描的MRI对海绵窦侵袭性垂体腺瘤的术前判断有一定参考价值;MVD、Ki-67、VEGF、MMP-9和nm23表达与垂体腺瘤的侵袭性存在一定的关系,可能为侵袭性垂体腺瘤的临床治疗提供依据.
作者：潘力雄；刘运生；赵继红 刊期： 2004年第03期
肝细胞作为非兴奋细胞的代表,迄今已经发现其存在多种类型的离子通道,利用膜片钳技术开展肝细胞膜离子通道研究近年来受到基础医学和临床医学的广泛重视,现就膜片钳技术在肝细胞离子通道研究中的应用进行综述.
作者：汪进益；张宗明 刊期： 2004年第03期
目的探讨10-羟基喜树碱(HCPT)对人肝癌细胞HepG2体外生长及其小鼠肾包膜下移植瘤的影响.方法用10-HCPT处理HepG2细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其生长指数(GI),软琼脂克隆形成试验检测其克隆形成率;建立HepG2小鼠肾包膜下移植瘤模型,每天腹腔注射10-HCPT,第6天处死动物,测量瘤块体积.结果 10～360mg/L浓度10-HCPT处理组HepG2细胞GI分别为84.72%～47.65%,与对照组比较明显降低(P<0.05).90～360mg/L 10-HCPT处理组HepG2软琼脂克隆形成率分别为38.80%～25.20%,与对照组比较亦明显降低(P<0.01),两者均具有量效依赖关系.3×10-3～9×10-3mg/30g剂量10-HCPT处理组小鼠肾包膜移植瘤体积分别为2.93～1.88mm3,与对照组比较明显缩小(P<0.01).结论 10-HCPT对HepG2的体外生长及其小鼠肾包膜移植瘤均具有明显抑制作用.
作者：祝葆华；姚榛祥；江黎明；吴平；杨展；何惠娟 刊期： 2004年第03期
目的观察膀胱癌肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)联合不同细胞因子瘤灶内过继免疫抗癌的效应及对机体全身抗肿瘤免疫机制的影响.方法建立BTT739动物模型,分离、培养TIL.采用正交设计实验方法,将TIL、白细胞介素(IL)-2、-4及三因素交互组合悬液分别直接注射至瘤体内,定期测量肿瘤体积,免疫治疗2周后检测NK细胞活性、T淋巴细胞转刺激指数,观察组织学及超微结构变化.结果比较对照组,治疗2周时各TIL相关组均不同程度抑制了膀胱肿瘤体积的增长,且NK细胞活性及T淋巴细胞转化增殖能力得以提高(P<0.05).TIL/IL-2疗法明显抑制了瘤体的增长,免疫治疗1周后即表现出协同增强效应(P<0.05),而NK细胞活性及T淋巴细胞转刺激指数也显著提高(P<0.05).TIL/IL-2/IL-4组获得了较强的抗癌功效,但与TIL/IL-2组差异无显著性(P>0.05).超微结构变化显示出TIL强烈的溶癌现象.结论 TIL在细胞因子特别是IL-2协同下瘤灶内注射的局部免疫疗法,具有较强的抗膀胱癌效应,并显著提高了机体全身抗瘤免疫功能.
作者：王志勇；于满；张利国；高树欣；赵立军 刊期： 2004年第03期
目的探讨聚β-羟基丁酸脂(PHB)的生物相容性和PHB改性方法.方法以明胶作为改性材料对PHB进行改性,并与人肾上腺细胞共同培养,通过形态学、细胞增殖和细胞分泌三方面来评价改性PHB的生物相容性.结果 PHB对肾上腺细胞无毒性,对细胞增殖和分泌功能无影响(P均>0.05).结论PHB是一种较为理想的细胞载体材料,可应用于肾上腺细胞移植.
作者：吴天鹏；胡平；张孝斌；李伟 刊期： 2004年第03期
目的观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)PC-3细胞表达Survivin蛋白、细胞凋亡、增殖的影响.方法设计并合成特异性靶向Survivin的ASODN.PC-3分为6组:空白对照组、脂质体转染对照组、正义链转染对照组、200、400和600nmol/L ASODN转染组.作用24h后收获各组细胞.观察细胞形态变化及超微结构变化,免疫组织化学法和流式细胞术法检测各组细胞Survivin表达情况,流式细胞术检测各组细胞增殖指数(AI)和凋亡指数(PI),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测ASODN对细胞的生长抑制率.结果电镜下可见到典型凋亡样改变;各ASODN转染组细胞Survivin表达有不同程度减弱;200、400和600nmol/L ASODN转染组AI和PI分别为(8.50±0.79)%,(13.78±0.56)%,(21.31±1.67)%和(37.80±1.72)%,(25.10±2.18)%,(19.90±0.97)%,分别与对照组相比差异有显著性(P<0.05),而AI和PI在各对照组间差异无显著性(P>0.05).转染后第3天200、400和600nmol/L ASODN组相对于空白对照组的抑制率分别为60.0%、66.0%、78.6%.结论 Survivin ASODN转染后能下调Survivin蛋白表达,诱导PC-3细胞凋亡,抑制PC-3细胞增殖.
作者：高晓康；杨波；王禾；袁建林；邵国兴；康福霞 刊期： 2004年第03期
目的观察中药泽泻的有效部位提取物对实验性大鼠尿草酸钙结石形成和间α胰蛋白酶抑制物(IαI)表达的影响.方法采用乙二醇和氯化铵诱导形成大鼠肾草酸钙结石模型,将健康成年雄性Wistar大白鼠随机分成对照组(A组)、成石组(B组)、泽泻组(C组).用免疫组织化学和计算机图像分析技术检测IαI在肾组织的表达情况,并测定血、尿生化和草酸钙晶体在肾组织的分布.结果泽泻组大鼠肾组织草酸钙晶体分布、血生化等指标均明显低于结石模型组;泽泻组大鼠肾组织IαI的灰度值为218.32±7.58、肾钙含量(7.32±1.59)mg/g、24h尿钙分泌量(5.34±1.10)μmol/24h,模型组大鼠IαI的灰度值为203.40±14.69、肾钙含量(12.63±2.29)mg/g、24h尿钙分泌量(8.53±1.73)μmol/24h,两组间差异均有显著性(P<0.05).结论泽泻的乙酸乙酯浸膏的乙酸乙酯洗脱液提取物可能通过抑制肾组织内草酸钙晶体的形成和减少肾IαI的表达,从而能抑制尿结石的形成.
作者：曹正国；刘继红；周四维；尹春萍；吴继洲 刊期： 2004年第03期
目的探讨DDX24基因在膀胱移行细胞癌(TCC)发生发展的作用.方法采用核酸分子原位杂交,应用RNA探针对32例TCC组织与8例正常组织的DDX24基因表达情况进行检测.结果显示DDX24基因在正常组织中高表达而在TCC组织中表达下调或不表达,并且表达程度与TCC的分级、分期呈负相关.结论 DDX24基因对TCC的生物学行为有重要影响,其表达程度可作为TCC的恶性程度的一指标.
作者：严伟；孙颖浩；杨庆；王林辉 刊期： 2004年第03期
目的探讨低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的分子机制.方法采用细胞增殖动力学和细胞形态学观察低剂量MMC对EJ细胞死亡和增殖的影响,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测增殖,脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞,流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期,免疫组织化学观察Fas、FasL、半胱氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达.结果 EJ细胞增殖抑制率为67.18%.凋亡率为(69.40±0.80)%(P<0.05).G0/G1期出现凋亡峰.Fas、Caspase-3蛋白上调表达,分别为(65.49±6.28)%、(63.56±5.05)% (P均<0.05).Fas与FasL的表达具有相关性(r=0.871,P<0.05).结论 MMC诱导EJ细胞凋亡的分子机制可能与上调细胞表面的Fas表达,启动Caspase凋亡信号传导,促进细胞凋亡有关.
作者：赵长林；徐惠绵；刘佳；孔垂泽；李宏 刊期： 2004年第03期
目的通过观察盐酸阿霉素(ADM)联合4-羟苯维胺酯(HPR )对人膀胱移行癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,探讨两药对膀胱行癌细胞是否存在协同作用.方法应用四甲基偶氮蓝比色(MTT)法检测0.05mg/L阿霉素及10-6、5×10-6、10-5mol/L不同浓度4-HPR对膀胱癌细胞株T24的细胞毒作用,应用流式细胞仪检测4-HPR、阿霉素或两药联合应用时对T24细胞生长抑制率.结果单用5μmol/L的4-HPR、0.05mg/L阿霉素诱导T24细胞凋亡率分别为8%和21%,两药联合后凋亡率达52%(P<0.05).0.5mg/L阿霉素对T24细胞凋亡率为52%,联合1、5μmol/L的4-HPR后凋亡率上升至81%和94%(P<0.05).结论 4-HPR能诱导T24细胞凋亡,存在浓度和时间依赖性,4-HPR与阿霉素联合用药对膀胱癌细胞有明显生长抑制和凋亡诱导的协同作用,能缩短产生抑瘤效果的作用时间,减少阿霉素的用量.
作者：钱立新；刘训良；吴宏飞；张炜；包娟；刘佳；周建伟 刊期： 2004年第03期
目的探讨125I偶联Ki-67基因反义寡核苷酸(125I-ASODN)对人肾癌细胞生长及凋亡的调控作用.方法采用氯胺-T法将10μmol/L浓度的Ki-67反义寡核苷酸(ASODN)与125I偶联,125I-ASODN放射浓度为2.59MBq/L,脂质体包装后转导肾癌786-0细胞系.采用免疫组织化学、Western印迹技术检测Ki-67表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,免疫组织化学脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡.结果 125I-ASODN处理组肾癌细胞Ki-67表达阳性率(21.5±1.2)%降低,Ki-67蛋白(49.9±4.5)%降低,与ASODN处理组(29.9±0.4)%、(82.1±1.9)%比较差异有非常显著性(P均<0.01).细胞增殖抑制率125I-ASODN处理组(47.9±3.6)%与ASODN处理组(21.8±2.5)%比较差异有非常显著性(P<0.01).凋亡细胞阳性率125I-ASODN处理组(28.9±1.3)%与ASODN处理组(15.7±0.5)%比较差异有非常显著性(P<0.01).结论125I-ASODN较之ASODN具有更强的抑制肾癌细胞增殖、促进凋亡作用.
作者：郑骏年；孙晓青；陈家存；温儒民；李望；刘俊杰 刊期： 2004年第03期
目的探讨Uroplakin Ⅱ基因(UPⅡ)在原发和转移性膀胱移行细胞癌(TCC)中表达与意义.方法收集45例膀胱癌(其中TCC 39例,非TCC 6例)患者的癌组织,外周静脉血标本,提取总RNA,行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测UPⅡ基因mRNA的表达.25例其他部位肿瘤及8例非肿瘤患者组织标本和静脉血作为对照.结果 45例膀胱肿瘤组织标本中,UPⅡ基因在TCC组织中平均阳性率82.1%(32/39),6例非TCC类型膀胱癌0表达.在T1、T2、T3、T4期膀胱TCC患者组织中UPⅡ基因阳性率分别为76.5%、71.4%、90.9%、100.0%;在患者外周血中UPⅡ基因阳性率分别为5.9%、14.2%、72.7%、100.0%.在组织和外周血中低分期(T1、T2)与高分期(T3、T4)TCC表达UPⅡ基因阳性率差异有显著性(P<0.05).其中4例转移者均阳性,接受全身化疗后3例未再表达.25例其他部位肿瘤组织标本,7例肺癌在组织中有1例阳性表达,外周静脉血中0表达;5例肾移行细胞癌在组织中2例阳性,外周静脉血0表达;8例非肿瘤患者组织标本及外周静脉中0表达.结论组织及外周血中UPⅡ表达阳性率与肿瘤分期,是否转移呈相关性;检测TCC患者血中UPⅡ基因可作为监测TCC患者是否转移的指标,并可在一定程度上反映化疗疗效;其他类型膀胱癌未见UPⅡ表达;UPⅡ基因是TCC较有潜力的组织特异性的靶标基因.
作者：陈方敏；童强松；曾甫清；汪良；郑丽端；董继华；鲁功成 刊期： 2004年第03期
目的探讨盐酸特拉唑嗪诱导人前列腺间质细胞凋亡的机制.方法在原代体外培养的人增生前列腺间质细胞中加入不同浓度的盐酸特拉唑嗪、转化生长因子(TGF)-β1及TGF-β1抗体,用原位凋亡法(TUNEL)检测细胞的凋亡状况,TGF-β1酶联免疫粘附试验(ELISA)试剂盒检测细胞悬液A值.结果盐酸特拉唑嗪和TGF-β1均可诱导体外培养的人前列腺间质细胞凋亡,且具有浓度依赖性;加入特异性TGF-β1抗体后细胞凋亡率减少72.7%(P<0.01);盐酸特拉唑嗪组细胞悬液TGF-β1浓度的A值较对照组高87.5%(P<0.01).结论盐酸特拉唑嗪诱导人前列腺间质细胞凋亡通过或至少部分通过细胞自分泌TGF-β1引起.
作者：谢克基；汤平；魏鸿蔼；王良圣；胡建波；钟惟德 刊期： 2004年第03期
目的在HeLa细胞中表达抗前列腺特异抗原(PSA)/抗人CD3双特异性单链抗体(scFv)融合基因,并进行亲和活性测定.方法在已经构建抗PSA/CD3双特异性scFv融合基因基础上,将融合基因克隆入真核表达载体pSecTag2-B中,并转染HeLa细胞进行表达.表达产物纯化后,用流式细胞仪进行亲和活性测定.结果经SDS-PAGE和Western印迹实验证实,表达产物的Mr约为65000.纯化后经流式细胞仪检测,可特异性地结合PC-3细胞和人外周血单个核细胞(PBMC).结论获得了可与PC-3细胞和PBMC特异结合的抗PSA/CD3双特异性scFv,为进一步临床应用奠定了基础.
作者：武国军；王智；王栋；于磊；王禾；白玉杰；曹云新；药立波 刊期： 2004年第03期
目的探讨外源性人p27kip1的高表达对前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭能力的影响.方法利用携带人p27kip1基因的腺病毒(Ad-p27kip1)体外转染人前列腺癌PC-3细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法分别检测目的基因不同水平的表达,通过细胞生长试验、流式细胞仪分析技术以及Boyden小室法检测PC-3转染前后细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞体外侵袭力的变化.以Ad-X-gal病毒作为对照.结果 RT-PCR、Western印迹法检测转染Ad-p27kip1后PC-3细胞的p27kip1-mRNA(320bp)、p27蛋白(27×103)表达阳性,转染后对PC-3细胞的生长有抑制作用,出现明显的G0-G1期阻滞,早期细胞凋亡率有所增加,与对照组比较差异有显著性,Boyden小室法检测转染后体外侵袭力受到明显抑制.结论重组腺病毒介导的人p27kip1基因在体外对前列腺癌细胞系PC-3的细胞增殖和侵袭力有明显抑制作用,可望作为前列腺癌基因治疗的有效工具.
作者：邱镇；孙颖浩；许传亮；王元天；顾正勤；刘智勇 刊期： 2004年第03期
目的用气管夹闭窒息法建立一种稳定的心肺复苏动物模型.方法家兔呼气末夹闭气管窒息法致心脏停搏,夹管后8min行标准心肺复苏5min,观察窒息和复苏期间的MAP与心电图变化.结果气管夹闭前MAP为(111±7)mmHg(1mmHg=0.133kPa),夹闭后MAP明显下降时间为(172±20)s,降至50mmHg时间为(228±33)s,5min时为(27±12)mmHg,7min时为(8±4)mmHg,MAP变化与心电图变化一致;自主循环恢复16例,未恢复2例,心肺复苏成功率为89%.结论该模型具有稳定、简单、重复性好的特点,能够满足心肺复苏实验研究需要.
作者：何明丰；张英俭；黎练达；梁章荣；徐文冲；魏华；刘绍辉；涂泽松 刊期： 2004年第03期
膀胱肿瘤在我国占恶性肿瘤的第8位,是泌尿系统常见的肿瘤.膀胱肿瘤的生物学行为复杂多变,易复发、多发和浸润转移.因此,阐明膀胱癌发生发展的规律,寻找有效的防治方法一直是基础医学和临床医学工作者所面临的重要课题.近年来,随着分子生物学、免疫学等相关学科的发展,人们对膀胱癌发生、浸润转移、治疗和预后等领域进行了大量的研究,对膀胱肿瘤有了更为深入的了解.
作者：夏术阶 刊期： 2004年第03期
1992年加拿大麦克玛斯特大学循证医学工作组发表在JAMA上的第1篇循证医学文章,标志循证医学(EBM)概念和命名的正式形成,揭开当代循证医学实践的序幕.1997年David Sackett教授执笔的第1本循证医学专著How To Practice and Teach Evidence-Based Medicine以多国文字出版,2000年再版,预示循证医学理论及实践体系的日臻完善.这门新兴交叉学科以其全新的价值观、方法论和在医学实践、研究、管理中显示出巨大应用前景.国际临床流行病学专家David Sackett教授认为:随机对照实验(RCT)是过去半个世纪中医疗卫生领域重要的发展;未来20年重要的发展将是借助Cochrane协作网传播RCT的系统评价.目前重大的挑战之一是为一线工作的医生提供有用的信息,帮助他们采纳证据和实施循证医学.
作者：李幼平；何英 刊期： 2004年第03期
