目的 建立单极电凝免缝合技术在猪零缺血肾部分切除术中应用的动物模型.方法 选取6头贵州小型猪,行与腰骶肌平行切口,暴露一侧肾脏,在不阻断肾动脉的情况下于中极剪下约2cm×2 cm×2 cm肾脏组织,单极电钩电凝止血,不缝合肾脏创面.术中记录手术时间及肾脏出血量.术后3只猪饲养1个月,观察尿液颜色、毛色、行动反应能力等变化.3只猪于术后第7天处死,取术肾观察手术创面病理改变.结果 6头猪手术均安全顺利进行,单极电凝功率越大,止血效果越好,调试到100W时电钩呈喷凝状态,所有创面出血完全停止.术中平均手术时间60 min(30 ～90 min)、平均出血量约42 ml(30 ～60 nl).术后3头猪观察1个月,均存活.尿槽均未见肉眼血尿,毛色有光泽,反应敏捷,无明显失血性表现.术后第7天,3头猪取术肾,肾周无血肿,术肾创面无血凝块;苏木素-伊红(HE)染色显示:创面从外至内分为凝固层、坏死层和水肿层.结论 以小型猪为实验对象,在零缺血肾部分切除术中应用单极电凝免缝合技术,安全、可靠.
作者：徐元高；裴军；宋赏；冯梅；李凯；徐述雄；罗光恒；王元林；石华 刊期： 2019年第01期
目的 建立永生化人脐静脉内皮细胞(HUVECs)系并探讨永生化对HUVECs增殖、凋亡及成瘤性影响.方法 扩增并提取猿猴病毒40大T抗原(SV40LT)和人端粒酶反转录酶催化亚基(hTERT)基因,反转录病毒载体介导感染HUVECs;筛选2周;聚合酶链反应(PCR)扩增后行琼脂糖凝胶电泳成像鉴定目的基因是否转入HUVECs;细胞计数法比较细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、裸鼠成瘤实验检测细胞恶性转化.结果 筛选出抗嘌呤霉素阳性克隆,SV40LT、hTERT成功转入HUVECs;永生化组细胞生长曲线上移,细胞增殖第5、6、7天,SV40LT永生化组及hTERT永生化组与HUVECs组细胞数目差异有统计学意义(P＜0.05),hTERT永生化组和HUVECs组细胞数目差异有统计学意义(P＜0.05);HUVECs组细胞总凋亡率为(11.2±0.9)％,SV40LT永生化组HUVECs总凋亡率为(3.4±0.4)％,hTERT永生化组HUVECs总凋亡率为(2.8±0.4)％,SV40LT永生化组、hTERT永生化组凋亡率均低于HUVECs组(均P＜0.05);两种永生化细胞株不具成瘤性.结论 SV40LT、hTERT基因能使HUVECs发生永生化,永生化HUVECs增殖能力增强,凋亡率下降,无恶性转化.
作者：李盛波；郑勇斌 刊期： 2019年第01期
目的 观察第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)抑制剂牛细小病毒bpV(pic)对神经干细胞(NSCs)增殖及分化的影响.方法 取胚胎16 d SD大鼠的大脑皮层,制成干细胞悬液,细胞分组为:A组(对照组):不做任何处理;B组(实验组):bpV处理组(培养液中含bpV).于第5天用免疫荧光染色观察两组干细胞球的数量,行细胞计数试剂盒(CCK-8)试验检测NSCs增殖,免疫荧光染色检测NSCs分化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组细胞在第5天时PTEN和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的表达.结果 实验组的每个低倍视野(×50)干细胞数量为60±5,明显多于对照组(40±3,P＜0.01).CCK-8试验证实实验组在425nm处的吸光度值为0.997±0.085,高于对照组(0.788±0.083,P＜0.01).实验组NSCs分化为神经元的百分率为(27.860±1.927)％,明显多于对照组[(13.120±1.130)％,P＜0.01];而分化为胶质细胞的百分率为(61.900±1.840)％,明显少于对照组[(77.520±1.035)％,P＜0.01];分化为少突胶质细胞的百分率实验组为(5.320±0.975)％,对照组为(4.460±0.586)％ (P ＜0.05);分化为其他细胞的百分率实验组为(4.780±0.572)％,对照组为(4.900±1.208)％ (P ＞0.05).实验组NSCs中PTEN的表达量是照组NSCs中PTEN表达量的2.13倍(P＜0.01),而实验组NSCs中mTOR的表达量是照组NSCs中mTOR表达量的3.62倍(P＜0.01).结论 PTEN抑制剂bpV(pic)可促进神经干细胞增殖,并在一定程度上促进神经干细胞向神经元分化.
作者：刘倩倩；姚麒；龚佩佩；蒋锐；杨甫；沈剑虹 刊期： 2019年第01期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-96对SW620结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测SW620、SW480、HT-29、HCT116、LoVo、CaCo-2结直肠癌细胞,NCM-460正常结肠上皮细胞中miR-96的表达,应用LipofectamineTM 3000将miR-96抑制物、miR-96阴性对照(NC)转染到SW620细胞,Real-timePCR检测miR-96表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力,Westem blot检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、p-Smad4蛋白表达.结果 Real-time PCR结果表明miR-96在SW620(2.42 ±0.20)、SW480(1.75±0.12)、HT-29(1.43±0.11)、HCT116(1.52±0.12)、LoVo(1.73±0.14)、CaCo-2(1.36±0.13)结直肠癌细胞中的表达量显著高于NCM-460 (0.39±0.02)细胞(P均＜0.01),miR-96抑制物组(0.45±0.03) miR-96表达量较miR-96 NC组(2.35±0.32)降低(P＜0.01).CCK-8实验结果表明miR-96抑制物组(0.389±0.034)细胞活力较miR-96 NC组(0.586±0.058)降低(P＜0.01).Transwell实验结果表明miR-96抑制物组[(28.37±2.84)个]细胞迁移数目较miR-96 NC组[(128.45±12.84)个]减少(P＜0.01),miR-96抑制物组侵袭数目[(23.60± 2.30)个]较miR-96 NC组[(133.57±13.36)个]减少(P＜0.01).Western blot结果表明miR-96抑制物组中MMP-2、MMP-9、Vimentin、TGF-β1、p-Smad4表达量较miR-96 NC组下调(P均＜0.01),miR-96抑制物组中E-cadherin表达量较miR-96 NC组上调(P＜0.01).结论 下调miR-96表达能显著抑制SW620结肠癌细胞迁移及侵袭,与抑制TGF-β1/Smad4信号通路有关.
作者：胡思锋；王庆光；李耀锋；孟凡美；姜超 刊期： 2019年第01期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-221p的靶点及其对胃癌细胞生物学功能的影响.方法 通过生物信息学预测miR-221的可能靶点,并构建plenti-miR-221过表达载体,包装慢病毒,通过感染高转移胃癌细胞GC9811P建立miR-221稳定表达细胞株(观察组),同时建立对照细胞株(对照组).采用Western blot检测对照组和观察组细胞miR-221靶基因蛋白表达水平,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测对照组和观察组细胞增殖能力,采用Transwell检测对照组和观察组细胞侵袭能力,采用流式细胞术分析对照组和观察组细胞的凋亡水平,采用体内移植瘤实验分析对照组和观察组细胞肿瘤生长以及转移.结果 生物信息学分析显示miR-221可能的靶基因是HMBOX1.与对照组(1.12±0.23)比较,观察组细胞HMBOX1蛋白表达水平(0.32±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.976,P＜0.01).与对照组比较,观察组细胞增殖能力明显增加,差异有统计学意义(F=3.102,P＜0.01).Transwell定量分析显示观察组细胞侵袭能力[(125.43±15.32)个]显著高于对照组细胞侵袭能力[(57.40±9.81)个],差异有统计学意义(t=3.190,P＜0.01).观察组细胞凋亡水平[(12.78±3.56)％]明显低于对照组细胞凋亡水平[(25.43±7.54)％],差异有统计学意义(=2.918,P＜0.01).观察组细胞在裸鼠体内生长速度明显高于对照组,差异有统计学意义(F =3.012,P＜0.01).观察组体内成瘤后腹膜内转移病灶数量(15.26±3.29)明显高于对照组小鼠(6.19±2.01),差异有统计学意义(t=2.991,P＜ 0.01).结论 miR-221可靶向作用于HMBOX1,促进肿瘤细胞增殖和侵袭,降低细胞凋亡,进而促进肿瘤发生和转移.
作者：马钊；谷军保；鲍学斌 刊期： 2019年第01期
目的 探讨依托咪酯对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法 PC12细胞随机分为正常组,H2O2组(200 μmol/L H2O2),依托咪酯低、中、高浓度组,并分别检测各组细胞活力、凋亡、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9活性、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)及bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白表达.结果 与正常组比较,H2O2组(0.38±0.03比0.65±0.06)细胞活力降低(P＜0.01),细胞早期[(15.64±1.56)％比(2.32±0.23)％]及晚期凋亡率[(24.61±2.46)％比(2.09±0.21)％](P＜0.01)、MDA含量(P＜0.01)、Caspase-3[(4.39±0.44)比(0.58±0.05)](P＜0.01)、Caspase-9[(2.95±0.29)比(0.48±0.04)]活性提高(P＜0.01),SOD、CAT及GSH-Px活性降低(P＜0.01),bcl-2表达量下调(P＜0.01),bax表达量上调(P＜0.01).与H2O2组比较,依托咪酯低、中、高浓度组细胞活力提高(P＜0.01),细胞凋亡率(P＜0.01)、MDA含量(P＜0.01)、Caspase-3、Caspase-9活性降低(P＜0.01;P＜0.01),SOD(P＜0.01)、CAT(P ＜0.01)及GSH-Px(P＜0.01)活性提高,bcl-2表达量上调(P＜0.01),bax表达量下调(P＜0.01).结论 依托咪酯可能通过提高抗氧化能力及抵抗细胞凋亡抑制H2O2引起的PC12细胞损伤.
作者：张建军；王东；尚峰 刊期： 2019年第01期
目的 探讨急性酒精性肝损伤大鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)细胞亚群及细胞因子的变化及其意义.方法 36只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组.连续2周以10 ml/kg的剂量给模型组大鼠灌服30°、40°或50°白酒,对照组大鼠则灌服等体积的蒸馏水,末次灌胃12h后处死.采用谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)检测试剂盒检测大鼠外周血AST、ALT及TBIL表达水平;采用苏木素-伊红(HE)染色评估对大鼠肝功能损伤状况;采用流式细胞术分析大鼠外周血Th17和Treg细胞亚群表达变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、IL-35水平.结果 与对照组AST(130.66±12.07) U/L、ALT(60.49±6.20) U/L及TBIL(30.83±3.22) μmol/L比较,模型组血清AST(195.61±20.74) U/L、ALT(88.16±9.33) U/L及TBIL(48.54±5.41) μmol/L的表达水平显著上调,差异有统计学意义(t =3.419、3.174、4.058,P＜0.05);病理染色结果显示模型组大鼠肝组织受到严重损伤;与对照组大鼠外周血Th17[(2.48±0.30)％]和Treg[(7.74±0.79)％]细胞亚群及Th17/Treg比率(0.33±0.07)比较,模型组大鼠Th17细胞亚群比例显著上调[(5.87±0.61)％],Treg细胞亚群比例显著降低[(3.25±0.35)％],Th17/Treg比值显著升高(1.76±0.22),差异有统计学意义(t=4.331、4.428、5.663,P＜0.01);与对照组IL-6 (28.06±3.03) ng/L、IL-17 (21.39±2.63) ng/L、TNF-α (70.56±6.99) ng/L、IL-10(25.67±2.42) ng/L、IL-35[(33.17±3.25) ng/L]比较,模型组大鼠血清IL-6[(62.81±6.55) ng/L]、IL-17[(52.46±5.40) ng/L]、TNF-α[(161.17±17.32) ng/L]的表达水平显著上调,IL-10[(15.72±1.70) ng/L]、IL-35[(19.66 ±2.03) ng/L]的表达水平显著降低(t=4.220、4.316、4.207、3.574、3.618,P＜0.05),差异有统计学意义.结论 急性酒精性肝损伤大鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡及相关炎性细胞因子的表达失调,可能在酒精性肝损伤的发生发展中起重要作用.
作者：王天宝；田玉伟；朱斌 刊期： 2019年第01期
目的 探讨丙戊酸钠(VPA)逆转染色体组蛋白低乙酰化水平对肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原(PCNA)、乙酰肝素酶(HPA)表达的影响及其可能的相关机制.方法 建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为实验组和对照组,分别给予腹腔注射丙戊酸钠和二甲基亚砜,观察两组裸鼠肿瘤生长,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学方法检测移植瘤组织PCNA和HPA表达.结果 实验终点测量实验组和对照组移植瘤体积分别为(0.261±0.070) cm3和(0.396±0.010) cm3(t=-42.321,P＜0.05),重量分别为(0.51±0.07)g和(0.83±0.14) g(t-26.116,P＜0.05),差异有统计学意义;实验组和对照组裸鼠移植瘤组织中PCNA mRNA和HPA mRNA的表达分别为(0.491±0.060比0.899±0.038,t=-112.316,P＜0.05)和(0.438±0.016比0.829±0.036,t=-127.768,P＜0.05),差异有统计学意义.实验组和对照组PCNA蛋白和HPA蛋白测定值分别为(0.816±0.063比1.592±0.071,t=-17.561,P＜0.05)和(0.879±0.083比1.792±0.170,t=-17.140,P＜0.05),差异均有统计学意义.结论 VPA可能通过逆转染色体组蛋白低乙酰化水平下调PCNA和HPA表达,达到抑制肝癌细胞增殖、减弱肝癌细胞侵袭转移能力的效果.
作者：高峰；张猛；耿艳；杨季红 刊期： 2019年第01期
目的 探讨肝激酶B1(LKB1)对肝癌细胞生物学功能的影响及与术后复发的关系.方法 采用分子生物学技术构建LKB1过表达慢病毒载体,包装慢病毒感染高转移肝癌细胞MHCC97H,建立LKB1对照MHCC97H细胞株(对照组)和LKB1过表达MHCC97H细胞株(观察组).采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析对照组和观察组细胞的增殖能力,采用Transwell分析对照组和观察组细胞的侵袭能力.并选取我院接受治疗的142例晚期肝癌患者作为研究对象,取肿瘤组织,免疫组织化学分析LKB1表达,并分组分析LKB1高表达和低表达患者术后复发率.结果 成功构建LKB1过表达MHCC97H细胞株.与对照组细胞比较,观察组细胞株MHCC97H细胞的增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组细胞[(87.12±9.25)个]比较,观察组细胞的侵袭能力[(28.32 ±7.32)个]显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学分析LKB1低表达组患者98例,比率为69.01％,高表达44例,比率为30.99％.高表达组患者术后2年和3年复发率分别为27.27％和47.62％,低表达组患者术后2年和3年复发率分别为40.82％和68.37％,两组差异有统计学意义(Log-rank=2.013,P＜0.05).结论 LKB1与肝癌细胞的增殖和迁移能力有关,低表达LKB1患者术后复发率明显增加.
作者：万百顺；张玲；王效谦；贺涛；张珉 刊期： 2019年第01期
目的 观察黄芩素对肝癌耐药细胞株应用5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗后增殖及凋亡诱导作用的影响.方法 通过培养人肝癌耐5-Fu细胞株Be17402/5-Fu,将细胞分为对照组、5-Fu组、黄芩素组、黄芩素+ 5-Fu组,采用噻唑蓝实验检测细胞增殖,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭双染色流式细胞术实验检测细胞凋亡,明确黄芩素对耐药细胞增殖和凋亡的影响.结果 黄芩素+5-Fu组与5-Fu组比较,黄芩素浓度为100 μmol/L时,能显著的增加5-Fu抑制增殖能力约为3.87倍,采用金正均Q值法评估联合用药效果发现均＞1.15,两者联合用药抑制细胞活力具有协同效应;细胞总凋亡率由(7.5±0.23)％提高至(35.6±3.58)％(P＜0.01),早期凋亡细胞的比例(2.2±0.06)％提高至(21.8±2.31)％(P＜0.05),凋亡比例增加与黄芩素浓度呈剂量依赖性.结论 黄芩素联合5-Fu可明显抑制肝癌耐药细胞增殖,促进其凋亡,逆转细胞对5-Fu的耐药.
作者：郭瑛；李君；田红卫；李真真；田静；张栩锐；张淑群；李宗芳 刊期： 2019年第01期
目的 观察肾盂压力(IPP)增高对幼年猪肾脏造成的影响.方法 采用贵州小型猪作为研究对象,建立IPP模型.将IPP设置为0、30、60、90 mmHg 4个水平.在各个压力水平下,静脉注射超声造影剂后,使用超声造影(CEUS)测量左侧肾脏肾皮质血流灌注水平5min,计算峰值强度(PI)和曲线下面积(AUC)定量计算肾脏皮质血流灌注量.超声造影测量肾皮质血流灌注完毕后,随后在每个压力水平下,在同侧肾脏用超声造影行逆行肾盂造影5 min.后将左侧肾脏取下送病理学检查.统计学分析在各个压力水平下肾脏血流变化.结果 10例猪肾脏模型中,4个IPP水平下的PI不全相同(F=58.947,P＜0.01),其中30 mmHg与0mmHg两组无差异统计学意义(t=1.984,P＞0.05);60 mmHg与0mmHg两组有差异统计学意义(t=5.332,P＜0.01),且PI(0 mmHg)＞PI(60 mmHg);90 mmHg与0 mmHg两组有差异统计学意义(t=10.507,P＜0.01),且PI(0 mmHg)＞ PI(90 mmHg).秩和检验和显示4个IPP水平下的曲线下面积(AUC) (x2=28.876,P＜0.01)不全相同.其中30 mmHg与0 mmHg两组有差异统计学意义(Z=-2.497,P＜0.05);60 mmHg与0 mmHg两组有差异统计学意义(Z=-2.701,P＜0.05),;90 mmHg与0mmHg两组有差异统计学意义(Z=-2.803,P＜0.05),且AUC(0 mmHg)＞ AUC(90 mmHg).PI和AUC均提示肾脏血流随着IPP的增高迅速下降.逆行肾盂造影显示60％的实验对象出现了造影剂穿入肾脏皮质的现象,病理显示肾皮质出现小裂伤.病理提示70％的肾小囊内出现了纤维素渗出.但是所有的大体标本未见到明显的肾破裂现象.结论 在明显的肾脏损伤出现之前,增高的IPP已经对肾脏的生理出现了影响,并造成了微小病理性的隐匿性损伤和病理上的改变.对于小儿患者来说,此种隐匿性损伤尤其应当引起临床医师的足够重视.微创治疗肾结石已经成为临床医生的主流选择,目前主要包括输尿管软镜和经皮肾镜碎石取石术.使用这两种微创技术治疗小儿肾结石近年来也出现增长.
作者：李彦生；于泽兴；韩修武；张鑫；朱绪辉；李涛；张鹏；陈元浩；李高；张小东 刊期： 2019年第01期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-26a对三阴性乳腺癌细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法 通过噻唑蓝(MTT)实验及集落形成实验检测miR-26a对细胞增殖能力的影响,应用流式细胞技术检测miR-26a对细胞周期的影响.利用数据库miRTarBase预测miR-26a靶基因,在数百种靶基因中,筛选出与细胞周期及肿瘤转移密切相关的靶基因c-Myc作为研究对象.通过Westernblot实验检测miR-26a过表达后细胞中c-Myc及其下游靶基因细胞周期蛋白D2(Cyclin D2)、细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)蛋白水平的表达.结果 MTT实验显示,miR-26a模拟物(mimic)转染组细胞的增殖活力显著低于miR-mimic阴性对照(NC)转染组的细胞.集落形成实验显示,miR-26a mimic转染组细胞的克隆增殖能力显著低于miR-mimic NC转染组的细胞[(55.67 ±5.86)个比(144.33±5.03)个;(62.00±3.00)个比(107.67±2.52)个,P＜0.01].流式细胞技术显示,miR-26a mimic转染组细胞处于G1期的细胞比例明显高于miR-mimic NC转染组的细胞[(59.39±1.04)％比(46.91±1.04)％;(76.91±1.43)％比(63.21±1.61)％,P＜0.01].Western blot实验显示,细胞中miR-26a表达上调后,c-Myc及其下游靶基因Cyclin D2、Cyclin E1的蛋白表达水平显著降低.结论 miR-26a可抑制三阴性乳腺癌的增殖,其机制可能是miR-26a通过靶向癌基因c-Myc来发挥抑癌作用.
作者：解荣；李继勇；喻远航；张悦；廖晗；张波 刊期： 2019年第01期
目的 观察黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(DCVS)的作用.方法 将雄性SD大鼠分为Sham组(A)、SAH+ AS-Ⅳ组(B)、SAH组(C)、SAH+vehicle组(D).采用枕大池二次注血法制作蛛网膜下腔出血后DCVS模型.造模后1～5 d,每天给予B组5％酒精助溶的AS-Ⅳ混悬液20 mg/kg;D组大鼠等体积的5％酒精;A、C组大鼠等体积的生理盐水.采用苏木素-伊红(HE)染色法观察脑基底动脉的形态学改变;原位缺口末端标记法(TUNEL)检测基底动脉内皮细胞和血管平滑肌细胞凋亡;免疫组织化学染色测定基底动脉上裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的表达;采用Western blot检测颅底血管B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、cbaved Caspase-3的表达.结果 与Sham组大鼠比较,B、C、D组的基底动脉管壁增厚,管腔横截面积变小;基底动脉上bcl-2表达减少(P＜0.05),bax和Cleaved Caspase-3的表达增加(P＜0.05).给予AS-Ⅳ干预后,与SAH+ vehicle、SAH组比较,SAH+ AS-Ⅳ组中大鼠的bel-2表达增加(P＜0.05),bax和cleaved Caspase-3的表达减少(CleavedCaspase-3:0.030 8±0.003 2比0.0704±0.0060、0.0690±0.005 7,P＜0.05).结论 AS-Ⅳ可缓解大鼠SAH后DCVS,其机制可能与bcl-2、bax、Caspase-3介导的凋亡信号通路有关.
作者：黄昌恒；赵文可；何一川；姚自同；于耀宇 刊期： 2019年第01期
目的 观察米诺环素对大鼠脑出血后神经细胞凋亡及Dickkopf-1(DKK-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达的影响.方法 采用随机数字法将54只成年雄性SD大鼠分成假手术组(n=18)、脑出血组(n=18)及米诺环素组(n=18).通过颅内注射Ⅶ型胶原酶制作脑出血模型.采用平衡木行走实验、转身实验进行脑出血模型评估,并利用免疫组织化学检测大鼠脑组织中bcl-2、bax及DKK-1蛋白表达水平.利用原位缺口末端标记法(TUNEL)凋亡实验检测大鼠脑出血周围脑组织的细胞凋亡水平.结果 脑出血组(4.11±0.75)及米诺环素组(4.28±0.86)大鼠平衡木行走得分及转身实验百分比均高于假手术组(0.50±0.51,P＜0.01).与假手术组比较,各时间点(1、3、7d)脑出血组的大鼠脑出血部位周围脑组织bcl-2(P ＜0.05)、bax(均P＜0.01)及DKK-1(均P＜0.01)表达升高;与假手术组比较,各时间点(1、3、7d)脑出血组的大鼠脑出血部位周围脑组织bcl-2(36.50±1.54、49.15±2.71、18.76±1.36,P＜0.05),bax(41.75±2.46、62.15±1.24、26.54±3.86,P＜0.05)及DKK-1(56.48±3.25、70.74±3.23、41.12±2.50,P＜0.05)表达也升高.而与脑出血组比较,米诺环素组大鼠出血部位周围脑组织bcl-2表达升高(P＜0.05),而bax(P ＜0.05,P＞0.05,P＜0.05)及DKK-1 (P＜0.05)表达下降.与假手术组比较,各时间点(1、3、7d)脑出血组大鼠出血部位周围脑组织凋亡细胞镜下计数升高[(32.54±5.23)、(45.64±4.84)、(28.26±2.79)个,均P＜0.01],而经米诺环素治疗后脑出血部位周围脑组织凋亡细胞显著下降[(15.43±3.04)、(23.15±2.49)、(17.68±4.54)个,P＜0.05],同时伴有行为学功能改善:转身运动测验评分(1、3、7d)优于脑出血组(均P＜0.01).结论 米诺环素通过减少神经细胞凋亡对大鼠脑出血发挥脑保护作用,其分子机制可能是通过减少DKK-1表达来促进bcl-2和抑制bax表达有关.
作者：岳赛超；郭付有；孙逸杰；王国庆；宋来君 刊期： 2019年第01期
目的 观察姜黄素对脑胶质瘤细胞U87的作用及对半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)的影响.方法 姜黄素溶液干预脑胶质瘤细胞U87,使用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖率,使用流式细胞仪检测细胞凋亡率,使用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中的Caspase-3和Caspase-8水平,使用Western blot检测细胞中bcl-2和bax蛋白表达水平.结果 姜黄素低剂量组24、48 h细胞的增殖率[(8.48±1.19)％、(11.89±1.39)％]和高剂量组24、48 h细胞的增殖率[(16.04±1.58)％、(25.63±1.66)％]均低于空白对照组24、48 h细胞的增殖率[(1.47±0.10)％、(1.39±0.19)％,P＜0.05],姜黄素高剂量组24、48 h细胞的增殖率均低于姜黄素低剂量组(P＜0.05),姜黄素高剂量组和姜黄素低剂量组48 h细胞的增殖率均低于同组24 h(P ＜0.05);姜黄素低剂量组细胞凋亡率[(9.53±1.21)％]和姜黄素高剂量组细胞凋亡率[(20.52±2.35)％]均显著高于空白对照组细胞凋亡率[(2.22±0.14)％,P＜0.05],姜黄素高剂量组细胞凋亡率显著高于姜黄素低剂量组(P＜0.05);姜黄素低剂量组细胞培养上清液中Caspase-3和Casepase-8水平[(156.35±29.63)、(158.35±25.36)) ng/ml]和姜黄素高剂量组细胞培养上清液中Caspase-3和Casepase-8水平[(252.52±35.21)、(225.61±30.66) ng/ml]均显著高于空白对照组细胞培养上清液中Caspase-3和Casepase-8水平[(50.63±10.36)、(78.23±11.35) ng/ml,P＜0.05],姜黄素高剂量组细胞培养上清液中Caspase-3和Casepase-8水平显著高于姜黄素低剂量组(P＜0.05);姜黄素低剂量组细胞U87中bcl-2蛋白表达水平(0.61±0.10、0.67±0.09)和姜黄素高剂量组细胞U87中bcl-2蛋白表达水平(0.42±0.08、0.88±0.11)显著低于空白对照组细胞U87中bcl-2蛋白表达水平(0.88±0.16、0.33±0.04),bax蛋白表达水平显著高于空白对照组(P＜0.05),姜黄素高剂量组细胞U87中bcl-2蛋白表达水平显著高于姜黄素低剂量组,bax蛋白表达水平显著高于空白对照组(P＜0.05).结论 姜黄素对脑胶质瘤细胞U87的增殖具有抑制作用,凋亡具有促进作用,作用机制可能为促进细胞中的Caspase-3和Caspase-8的表达,并同时改变细胞中bcl-2和bax的表达水平.
作者：万学锋；王廷贺；刘献志 刊期： 2019年第01期
血管性痴呆(VD)是一类脑卒中后导致的认知和行为障碍的疾病,临床上较为常见.相关流行病学研究认为,其普通人群发病率在3％左右[1].海马区解剖位置在大脑丘脑和内侧颞叶之间,属边缘系统,其与记忆方向等位等高级中枢神经活动有关.该区域的功能损失与血管性痴呆存在一定的相关性.为半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3是细胞凋亡过程中的重要剪切酶,其高表达提示细胞凋亡水平增高.我们应用改良四血管阻断法制备血管性痴呆大鼠模型,探讨VD大鼠脑海马区Caspase-3蛋白表达与血管性痴呆的关系.
作者：赵宏军；张晓苹；王黎萍；吴承龙；郑东明 刊期： 2019年第01期
本实验旨在探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在体外循环(CPB)术后肺组织氧化应激损伤中发挥的保护作用及其机制.一、材料与方法1.分组:雄性Wistar大鼠144只,体重250 ～ 350 g.分为A组(n=48)、B组(n=48)和C组(n=48).A组给予生理盐水,B组给予钴原卟啉(CoPP),C组给予CoPP+锌原卟啉(ZnPP).
作者：生伟；李颖；池一凡；孙龙 刊期： 2019年第01期
先天性巨结肠(HD)又称先天性无神经节细胞症,HD的发病率为20/10万左右,患儿主要表现为胎便排出延迟,顽固性便秘腹胀、营养不良发育迟缓、巨结肠伴发小肠结肠炎等[1].我们分析我院收治的HD手术患儿的临床资料,采用Logistic回归的方法探讨HD术后并发肠炎的危险因素.一、资料与方法
作者：文艺；董玉斌 刊期： 2019年第01期
我们以磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3 K/Akt)通路为切入点,探讨姜黄素对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制.一、材料与方法1.细胞增殖:加入终质量浓度分别为0、10、25、50、100 μmol/L的姜黄素溶液干预24 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率.2.细胞周期:药物干预24h后,消化并收集细胞,离心,去除上层液体,并加入1ml预冷的70％乙醇,4℃固定过夜,流式细胞仪上机检测.
作者：陈卓；蒋征奎 刊期： 2019年第01期
膝关节骨性关节炎是一种以退行性病理改变为基础的疾病,好发于中老年女性.其临床症状主要表现为膝盖红肿痛、坐起立行时膝部酸痛不适等.其发病与关节内炎性因子异常表达导致关节软骨及滑膜损伤修复平衡被打破所致.我们以我院接受胫骨高位截骨术治疗的单纯内侧间室膝骨关节炎患者22例为研究对象,探讨该术式的临床疗效及对术后关节滑液中炎性因子的影响.
作者：张国栋；鲁兴 刊期： 2019年第01期
肿瘤相关钙信号转导蛋白2(TACSTD2)在恶性肿瘤发生发展中起重要作用.我们检测TACSTD2在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达,分析其意义.一、材料与方法1.材料:选取2015年3月至2018年3月收治的105例PTC患者PTC组织及相应癌旁组织石蜡标本.其中男30例,女75例;年龄14 ～76岁,中位年龄47岁.根据AJCC第8版甲状腺癌TNM分期系统,Ⅰ期48例,Ⅱ期25例,Ⅲ期29例,Ⅳ期3例.
作者：黄东航；李峰；曾焕虹；谢文焌；陈旭；林强 刊期： 2019年第01期
周围神经损伤一直是临床常见的难题.我们选取可吸收明胶海绵作为细胞载体搭载脂肪干细胞来源的施旺样细胞进行体外混合培养,探讨其生物相容性,为其进行体内移植修复神经奠定基础[1].一、材料与方法1.实验材料:无特定病原体(SPF)级健康雄性SD大鼠4只,低糖杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)培养基(Hyclone),β-巯基乙醇(2-ME,Sigma公司),全反式维甲酸(RA,Sigma公司),腺苷酸环化酶激活剂(Peprotech,US公司),重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF,Peprotech,US公司),重组血小板源性衍生因子(PDGF,Peprotech,US公司),神经胶质营养因子(Peprotech,US公司),S-100抗体(Abcam,UK公司),GFAP抗体(Abcam,UK公司)等.
作者：刘然然 刊期： 2019年第01期
