目的 观察CD147拮抗肽-9(AP-9)及多西环素(DOX)分别及联合用药对胆囊癌细胞(GBC-SD)的增殖、凋亡、CD147表达和基质金属蛋白酶(MMP)-9活性的影响.方法 将AP-9(50、100、200、400 μg/ml)、DOX(5、10、20、40 μg/ml)和联合用药(AP-9 200 μg/ml±DOX 20 μg/ml)作用于胆囊癌细胞12、24、48 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖,Western blot法检测CD147表达,明胶酶谱法检测MMP-9活性,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)染色法流式细胞仪检测早期凋亡率,结果采用t检验.结果 不同浓度AP-9处理组的早期凋亡率(2.13±0.10)％、(2.92±0.19)％较对照组(1.58±0.08)％升高(P=0.002、P=0.001);MMP-9活性(320.08±33.90、249.59±33.63、259.63±34.08、172.31 ±35.20)较对照组(446.08±42.42)降低(P=0.013、0.002、0.003、0.001);增殖抑制率较对照组升高(P均=0.001)且呈时间和剂量依赖趋势.不同浓度多西环素处理组的早期凋亡率(3.25±0.12)％、(3.63±0.24)％较对照组(1.58±0.08)％明显升高(P均=0.001);MMP-9活性(203.52±18.25、175.22±23.30、147.86±22.83、109.99±29.22)较对照组(446.08±42.42)降低(P均=0.001);增殖抑制率较对照组升高(P均=0.001),CD147表达(0.97±0.12、0.80±0.10、0.69 ±0.11、0.51±0.12)较对照组(2.04±0.15)明显降低(P均=0.001).联合用药后较单独用药,细胞增殖抑制率(38.78±0.39)％、(43.76±0.71)％、(52.00±0.91)％升高(P =0.001、P=0.003),MMP-9活性(110.19 ±24.74)降低(P =0.001、P=0.024),早期凋亡率(3.73±0.29)％升高(P =0.001、P=0.048).结论 DOX可减少胆囊癌细胞CD147表达,AP-9和DOX单独或联合用药均可以抑制胆囊癌细胞增殖、抑制MMP-9活性,促进细胞凋亡,且联合用药后抑制作用增强.
作者：王世行；刘超；黄涛；刘新江；罗乾坤；庞志刚 刊期： 2017年第07期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-25靶向大型肿瘤抑制因子2(LATS2)对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 选取人结肠癌细胞HT29,转染Neg-miR、pre-miR-25、anti-miR-25,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miR-25表达,Western blot检测LATS2蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡.双荧光素酶报告基因实验验证miR-25与LATS2的靶向关系.结果 与Neg-miR组比较,pre-miR-25组miR-25表达上调(0.37 ±0.08比0.78±0.14)(t=3.871,P=0.028),LATS2蛋白表达降低(157.32±32.11比56.47±11.35)(t=4.012,P=0.026);anti-miR-25组miR-25表达降低(0.37±0.08比0.11±0.04)(t=4.275,P=0.025),LATS2蛋白表达增高(157.32±32.11比382.74±55.28)(t=4.663,P=0.021).与Neg-miR组比较,pre-miR-25组细胞增殖活性增高(0.37 ±0.04比0.48±0.02,0.62±0.05比0.90±0.02,0.89±0.03比1.10±0.04)(t=2.998、3.372、3.012,P=0.045、0.035、0.041),同时凋亡率降低[(8.52±1.11)％比(2.94±0.81)％,t =4.425,P=0.018];anti-miR-25组细胞增殖活性降低(0.37±0.04比0.30 ±0.03,0.62±0.05比0.42±0.04,0.89±0.03比0.50±0.05)(t=2.895、3.237、4.002,P=0.048、0.038、0.021),同时凋亡率降低[(8.52±1.11)％比(15.01±2.53)％,t=4.518,P=0.016].miRNA靶基因预测软件检测结果显示,miR-25能作用于LATS2 3'端非编码区域(3'UTR).与转染Neg-miR比较,共转染pre-miR-25与LATS2-wt可使HT29荧光素酶活性降低(t=3.285,P=0.033).结论 miR-25可通过靶向LATS2调控结肠癌细胞增殖及凋亡.
作者：吴万庆；崔小兵；傅聿铭；吴刚；陈广法 刊期： 2017年第07期
目的 探讨微小RNA-520e (miR-520e)对肺癌细胞株A549细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺癌细胞A549和正常肺上皮细胞BEAS-2B中miR-520e的表达差异,转染miR-520e模拟物(miR-520emimics)获得miR-520e过表达细胞株,迁移实验及Transwell实验检测miR-520e对A549细胞迁移和侵袭的影响.生物信息学预测miR-520e靶向锌指蛋白367(ZNF367)基因,通过双荧光素酶报告体系进行验证.Western blot检测miR-520e过表达对ZNF367蛋白表达的影响,采用小干扰RNA(siRNA)研究ZNF367对A549细胞迁移和侵袭的影响.结果 RT-PCR结果显示,相对于BEAS-2B细胞(1.000±0.135),A549细胞中miR-520e表达量为0.342±0.214(P =0.000).转染miR-520e mimic后,相对空白对照(NC)组(1.000±0.273),mimic组miR-520e过表达(2.617±0.124,P=0.000).划痕培养24 h后,与NC组[(100.000±12.347)％]相比,mimic组细胞迁移率为[(43.727±16.746)％],scramble组细胞迁移率为[(91.722±7.631)％],过表达miR-520e抑制肺癌细胞迁移(P =0.000).侵袭实验结果显示,mimic组发生侵袭的细胞数[(36.458 ±21.301)％]与miR-520e scramble组[(93.783±9.125)％]和NC组[(100.000±15.114)％]比较减少(P=0.000).荧光素酶报告基因结果显示,转染miR-520e mimics抑制荧光素酶的活性(0.374±0.241,P=0.000).RT-PCR和Western blot发现miR-520e mimics下调ZNF367的表达(0.426±0.153,P=0.000;0.368±0.127,P=0.000).进一步实验发现,miR-520e靶向ZNF367基因调控肺癌细胞的迁移和侵袭.结论 miR-520e通过调控ZNF367抑制肺癌A549细胞的迁移和侵袭.
作者：徐本玲；秦鹏；陈广玉；袁鹏；王振雷；润增慈；赵鹏；袁龙 刊期： 2017年第07期
目的 探讨大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(DCVS)及神经功能缺损的发生机制.方法 建立大鼠SAH后DCVS模型,苏木素-伊红(HE)染色光镜下测量大脑中动脉内径及血管壁厚度;免疫组织化学染色后检测各组大鼠大脑皮层组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1 α)、血管内皮生长因子(VEGF)的变化;并分别采用硝酸还原酶法和酶联免疫吸附试验法测量动脉血浆、脑脊液一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)浓度.结果 对照组和实验组A的大脑中动脉内径[(218.4±27.8),(212.7 ±29.6) μm]显著的高于实验组B[(133.9±17.5) μm]和实验组C[(163.7±14.8) μm];对照组和实验组A的大脑皮层中HIF-1α、VEGF的值(0.00091 ±0.00053、0.00108±0.00037和0.00258 ±0.00063、0.00267 ±0.00059)均显著低于实验组B和实验组C(0.01428 ±0.00042、0.00139±0.00044和0.027 96±0.000 98、0.00379±0.00072);对照组和实验组A的血浆、脑脊液中ET-1值[(26.47 ±4.82),(28.81 ±5.16)和(64.32±9.47),(67.86±10.24) ng/L]均显著低于实验组B和实验组C[(63.44 ±6.73),(41.35±6.06)和(108.62 ±8.26),(89.46 ±8.15) ng/L];对照组和实验组A的血浆、脑脊液中NO值[(49.28±1.69),(48.96±1.60)和(29.65±1.20),(29.05±1.17) μmol/L]均显著高于实验组B和实验组C[(24.57 ±1.73),(33.42±1.59)和(15.73±1.06),(20.83±1.16) μmol/L].结论 大鼠SAH后微循环障碍、大脑皮层中HIF-1α和VEGF的表达增加、NO水平降低、ET-1水平升高,可能与DCVS及神经功能缺损的发生机制有关.
作者：曹艳丽；李毅；王俊宽；孙红卫 刊期： 2017年第07期
目的 提取并培养小鼠骨骼肌内肌源性干细胞(MDSCs),观察其在Toll样受体4(TLR4)激活后,对转化生长因子-β31(TGF-β1)介导的骨骼肌纤维化作用的影响.方法 细胞培养:采用差速贴壁法获得小鼠肌源性干细胞,传代培养.所得细胞分为3组,A组作为阴性对照,B组在培养液中加入重组人TGF-β1(rhTGF-β1),C组加入重组人TGF-β1和TLR-4激动剂热休克蛋白60(Hsp60).上述各组细胞培养3d后,分别行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、免疫荧光染色.检测各组细胞核因子(NF)-κB表达差异,明确B组细胞TLR-4是否被激活,再通过比较各组MDSCs在TLR-4激活后结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅰ型胶原的表达水平.动物实验:取雄性小鼠24只(体重15～18 g),随机分为D、E、F3组(每组8只).每周一分别于左侧腓肠肌内侧头注射生理盐水(阴性对照)、rhTGF-β1、rhTGF-β1加Hsp60混合溶液,连续4周.第28天切取左侧腓肠肌内侧头测量肌湿重,Von Geison染色比较肌肉组织纤维化程度.结果 细胞培养:RT-PCR测定A、B、C3组所得核转录因子κB(NF-κB)相对表达量分别为:0.852 ±0.121、0.987±0.084、1.304±0.171(P =0.031).CTGF相对表达量分别为:0.756±0.205、0.977±0.188、1.308±0.302 (P=0.022).Ⅰ型胶原相对表达量分别为:0.767±0.148、0.998±0.138、1.261±0.327 (P=0.016).Western blot测定A、B、C3组NF-κB与内参的吸光度比值依次为:0.784±0.133、0.887±0.066、0.994±0.171(P=0.026).CTGF与内参的吸光度比值依次为:0.644 ±0.125、0.863±0.109、0.998 ±0.512(P=0.018).Ⅰ型胶原与内参的吸光度比值依次为:0.347±0.133、0.761±0.086、0.868±0.167(P =0.045).与Western blot结果相对应,免疫荧光染色结果显示在A、B、C3组CTGF和Ⅰ型胶原的表达依次增强,差异有统计学意义(P=0.025,P=0.012).动物实验:D、E、F3组测得腓肠肌内侧头湿重值分别为(0.015±0.002)、(0.014±0.002)、(0.012 ±0.003)g,3组所测值依次降低,差异有统计学意义(P =0.037).PDvs.E=0.033,PDvs.F=0.029,PEvs.F=0.016.D、E、F 3组Von Geison染色测得腓肠肌胶原纤维累积光密度比值分别为100.8±10.3、112.7±11.1、131.9±12.5.3组所测值依次升高,总体差异有统计学意义(P=0.013,PDvs.E=0.041,PDvs.F=0.027,PEvs.F =0.010).结论 小鼠骨骼肌肌源性干细胞表面TLR-4激活可促进TGF-β1介导的骨骼肌纤维化进程.
作者：聂铭博；鲍远；张滋洋；施佳；康皓 刊期： 2017年第07期
目的 通过构建体内及体外炎症模型,证明前动力蛋白2(PK2)在溃疡性结肠炎中的作用.方法 构建促癌剂甲基偶氮甲烷(AOM)/促炎剂葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结直肠肿瘤模型,在疾病的不同发展阶段,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测PK2mRNA表达情况,Western blot法检测其蛋白水平表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测结肠组织匀浆中蛋白表达;脂多糖(LPS)诱导NCM460细胞株激活炎症信号通路,分别从mRNA及蛋白水平检测细胞中PK2的表达.结果 在AOM/DSS诱导的炎症相关性结直肠肿瘤模型中,PK2 mRNA及蛋白水平随疾病的进展逐步增加;在LPS诱导的细胞炎症模型中,PK2mRNA及蛋白水平均增加[PK2mRNA升高约3.42倍,P=0.013;PK2蛋白的表达升高约2.10倍,(78.2±5.2) pg/ml比(163.8±8.4)pg/ml;P=0.029].结论 PK2随着炎症的进展表达水平升高,PK2/前动力蛋白受体1(PKR1)信号通路可能在溃疡性结肠炎的发病中发挥重要功能.
作者：汪昕；杨俊；段栩飞；黄茂华；卞红强；杨虎；朱旭 刊期： 2017年第07期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-83a表达对体外骨髓间充质干细胞(BMSC)的诱导分化和生物学功能的影响.方法 将实验分为3组:A组:PEF-miR-83a和PSV2neo共转染组;B组:未转染组;C组:PEF和PSV2neo共转染组.A组为实验组,B、C两组为对照组.按照说明书进行转染,加入400μg PmlG419筛选,经3周后形成阳性克隆,扩增培养,应用基因转录方法检测miR-83a表达对体外BMSC的抗分化作用和生物学功能的影响;通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测miR-83a在细胞中的表达,Real-time PCR测定转染后A549细胞中Ras、Raf、蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK) mRNA水平表达变化,并通过噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、苏木素-伊红(HE)染色、显微镜等观察比较转染miR-83a的细胞的的迁移能力,诱导分化和形态学改变.结果 Real-time PCR和免疫组织化学检查结果证实转染后细胞中miR-83a稳定表达;阿辛兰染色结果:培养第7天,诱导分化组细胞内充满了大量的棕色特异性染色颗粒,未诱导分化组未见特异性染色颗粒.Real-time PCR结果:A组细胞Ras、Raf、Akt mRNA相对表达量分别为0.97 ±0.27、0.54±0.18和0.99 ±0.31,B组细胞为1.79±0.36、1.70 ±0.33和2.06±0.42,C组细胞为1.68±0.30、1.58±0.25和1.89±0.31.和B、C组比较,A组细胞中Ras、Raf和Akt mRNA水平显著降低(t=1.531、1.838,P=0.016、0.011).MTT结果表明随着miR-83a与细胞效靶作用时间延长,抑制率明显增强,作用24、48、72 h后,细胞的凋亡率分别为(23.49±4.64)％、(45.73±8.72)％和(59.25±13.16)％,不同作用时间比较差异有统计学意义(x2 =5.203、2.146,P=0.013、0.045).划痕实验结果显示:miR-83a转染的细胞迁移能力低于正常细胞.miR-83a作用于细胞24 h后,形态学观察细胞发生凋亡或坏死.结论 miR-83a转染对体外BMSC具有抑制分化和促进凋亡作用,它可能是通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)和EGFRvⅢ信号传导通路中的RAS-RAF-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷酸肌醇3激酶(PI3K)-Akt两条重要信号通路分子的活性来发挥作用.
作者：刘建坤；王强松；邓树才；孙桂明；赵合元 刊期： 2017年第07期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-422a表达水平对骨肉瘤细胞增殖抑制的影响.方法 选择健康雄性SD大鼠40只,分别制备骨肉瘤MG63与U2OS细胞株荷瘤鼠模型,采用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)双染色法转染miR-422a模拟物和抑制物调节miR-422a的表达,分析miR-422a高表达和低表达环境下骨肉瘤细胞的增殖、凋亡,并分析miR-422a表达对不同细胞周期骨肉瘤细胞的抑制作用.结果 转染miR-422a模拟物后48 h,MG63和U2OS细胞的增殖出现明显抑制,在转染miR-422a抑制物48 h后,MG63和U2OS的细胞增殖被促进,差异均有统计学意义(P =0.068、0.035、0.016、0.004;0.072、0.028、0.019、0.003);转染miR422a模拟物后MG63细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.3±0.1)％、(5.2±0.1)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.3±0.5)％、(5.4±0.4)％,U2OS细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.2±0.2)％、(5.3±0.2)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.5±0.1)％、(5.2±0.1)％,转染miR-.422a模拟物进行饥饿处理48 h后MG63细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.2±0.4)％、(28.6±0.7)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.5±0.2)％、(48.5±2.4)％,U2OS细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(6.2±0.3)％、(18.7±3.1)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(6.2±0.2)％、(39.8±3.2)％,与阴性对照组比较,转染miR-422a模拟物96 h后,骨肉瘤细胞的凋亡比例未出现显著改变,但在转染miR-422a模拟物进行诱导凋亡处理48 h后,与阴性对照组比较,骨肉瘤细胞凋亡数量明显增加,不同细胞生长周期细胞数量比较,转染miR-422a模拟物后G0/G1期细胞数明显增加,而S期和G2/M期细胞数明显降低.结论 miR-422a高表达能够有效抑制骨肉瘤细胞的增殖,提高骨肉瘤细胞在恶劣环境中的凋亡比例.
作者：孙新志；廖鹰；寇红伟；郭俊杰；刘宏建 刊期： 2017年第07期
目的 探讨CD29和CD49f对乳腺癌中肿瘤干细胞转移的影响.方法 用流式分选技术分离CD24/CD29/CD49f亚群细胞.以伤口愈合、肿瘤细胞侵袭实验检测各标志物对肿瘤干细胞体外迁移分化的影响.以实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫荧检测在裸鼠瘤分离得到的肿瘤细胞上的标志物.结果 CD29和CD49f在癌症转移中具有重要作用,且两个蛋白的功能具有互补的特点.CD24+/CD29+双阳性细胞表达大量的间质型肿瘤细胞标志.CD24-/CD29-双阴性细胞则表达大量的上皮型肿瘤细胞标志.结论 CD29和CD49f可能依赖于基质信号通路调节肿瘤干细胞间的基质连接并因此增强了肿瘤干细胞存活、分化和转移的能力.
作者：姜丽娜；王顺昌；张连平；李江涛 刊期： 2017年第07期
目的 检测甲状腺乳头状癌(PTC)组织中微小RNA(miRNA,miR)-449的表达水平,观察miR-449对PTC细胞株TPC1生物学行为的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测PTC及癌旁组织中miR-449的表达.细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测miR-449对TPC1细胞增殖影响.流式细胞术检测miR-449对TPC1细胞凋亡的影响.结果 miR-449在PTC组织中的相对表达水平(0.665 5±0.0498)显著低于癌旁组织(1.4050±0.0794),随着TNM分期的增加,miR-449表达水平明显降低(P=0.036).CCK-8实验显示与空白对照(NC)及miR-scramble组比较,miR-449组细胞增殖能力明显受到抑制(P=0.000).流式细胞术结果显示miR-449组细胞凋亡[(15.13±0.52)％]明显增加(P =0.009).结论 miR-449对PTC细胞生物学行为有重要影响,其在PTC发生发展过程中起抑癌基因的作用.
作者：宋青山；卢秀波；樊玉霞；刘洋；史阳；谌童童 刊期： 2017年第07期
目的 建立一种简便、快速、可靠的收集前列腺按摩液(EPS)的新方法.方法 35条Beagle犬,随机分为7组,每组5条.构建尿路感染模型,收集尿液、EPS和前列腺组织进行细菌培养和白细胞镜检,同时取尿道和前列腺组织进行组织病理和电镜检查及尿道黏膜刺激性评估.结果 细菌学检查:EPS结果表明第3组阳性,其余4组均阴性;尿液结果第1～2组均为阴性,第3～5组均为阳性.EPS白细胞镜检,第6组白细胞计数[(3.60 ±0.55)个/高倍镜视野]与第7组[(3.33±0.41)个/高倍镜视野]比较差异无统计学意义(t=0.871,P=0.409).组织病理和电镜检查证实上述结果.尿道黏膜刺激性评分结果显示,洁悠神(JUC)对黏膜具有极轻微刺激性.结论 经JUC尿道膜收集的EPS可以排除被尿道污染(假阳性)以及被尿道膜干扰(假阴性)的可能性,“一杯法”具有可行性.
作者：何玮；李路；袁红方；陈志强；徐华；蓝儒竹；余淦；叶章群 刊期： 2017年第07期
目的 观察尿道下裂子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化现象,探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)导致尿道下裂的机制.方法 取孕SD大鼠,随机分为DBP组和对照组.于怀孕第13 ～ 19天,DBP组按照800 mg/kg体重DBP溶入玉米油(DBP和玉米油总剂量为3 ml/kg体重)后灌胃,对照组按照3 ml/kg体重玉米油灌胃.怀孕19 d取出子鼠,鉴别出DBP组中发生尿道下裂的雄性子鼠及对照组中的雄性子鼠并分为尿道下裂组和正常对照组,提取两组子鼠的生殖结节.用组织块法原代培养子鼠生殖结节中的成纤维细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,划痕实验检测细胞迁移能力变化,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达,Western blot检测E-cadherin、Vimentin的蛋白表达.结果 对照组的尿道开口于生殖结节顶端,而尿道下裂组的尿道开口于生殖结节腹侧,肛门生殖结节距离[(1.43±0.04) mm]明显小于对照组[(2.27±0.09) mm,P=0.023].子鼠尿道下裂发生率为40.5％.与对照组比较,尿道下裂组生殖结节成纤维细胞形态发生了变化,细胞呈多边型,丝状伪足变短,细胞排列较紧密,平均迁移距离缩短[12 h:(0.17±0.04) mm比(0.14±0.03) mm、24 h:(0.26±0.05) mm比(0.20±0.04) mm,P=0.041],E-cadherin的mRNA和蛋白相对表达量增加、Vimentin的mRNA和蛋白相对表达量降低(E-cadherin、Vimentin mRNA相对表达量:1.00±0.00比1.43±0.31(P =0.034)、1.00 ±0.00比0.51±0.12(P =0.031);E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量:0.15 ±0.06比1.59 ±0.84(P =0.005)、1.88 ±0.45比0.30±0.13(P =0.003).结论 DBP在诱导子鼠发生尿道下裂的过程当中,促进了子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化作用,这可能与导致尿道下裂的发生有关.
作者：李晋昊；李祥；张亚；周云 刊期： 2017年第07期
目的 探讨微小RNA-204(miR-204)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响和对B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)的靶向作用机制.方法 以45例非小细胞肺癌组织、A549细胞株为研究对象,通过实时定量聚合酶链反应检测miR-204在NSCLC中的表达;转染miR-204模拟物和抑制剂,用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell、划痕实验、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性检测细胞增殖、迁移、凋亡能力变化;构建含有bcl-2 3'-非编码区野生型和突变型的双荧光素酶报告载体,并通过功能恢复实验,验证miR-204与bcl-2的靶向关系.结果 miR-204在非小细胞肺癌组织中的表达(1.28±0.31)较对照正常组织(3.75±0.27)明显降低(P=0.000),bcl-2在癌组织中表达明显增高(3.46 ±0.40比0.78±0.48,P=0.000),与TNM分期呈显著负相关,与年龄、性别关系差异无统计学意义;miR-204能明显抑制A549细胞的增殖、迁移,并促进细胞凋亡能力(P=0.000).共转染miR-204和bcl-2野生型3'非编码区双荧光素酶表达载体的A549细胞荧光活性为0.12±0.02,较对照组(0.29±0.03)显著下降(P=0.000),miR-204对细胞的增殖、凋亡、迁移能力的影响可以被过表达bcl-2所恢复.结论 miR-204在非小细胞肺癌中表达下调,可能通过靶向调控bcl-2的表达影响非小细胞肺癌的增殖、迁移、凋亡能力.
作者：吴昊；梅闪闪；叶艺旺；乌达；牟志民；陈保坤；刘继先 刊期： 2017年第07期
目的 观察四硫化四砷(As4S4)通过磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用.方法 利用噻唑蓝(MTT)法分别检测0、20、40、60、80μmol/L的As4S4处理24、48、72 h及10 μmol/L LY294002处理48 h后MCF-7细胞的增殖;细胞划痕实验及Transwell实验检测As4S4处理48 h对MCF-7细胞迁移及侵袭的影响;流式细胞仪检测As4S4及10 μmol/L LY294002处理48 h对MCF-7细胞凋亡的影响;Western blot检测As4S4及10 μmol/L LY294002处理48 h对MCF-7细胞PI3 K/Akt/mTOR通路相关蛋白PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、mTOR表达的影响.结果 与0μmol/L处理比较,20 μmol/LAs4S4处理24 h时对细胞增殖无明显抑制(P =0.065),处理48、72 h时对细胞增殖具有明显抑制作用(P =0.033),抑制率分别达到11.1％和14.3％.As4 S4浓度为40、60、80 μmol/L时对MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用(P =0.002),处理72 h后,抑制率分别达到47.9％、58.8％、67.1％.As4S4的抑制作用与时间、浓度呈正相关.和对照组比较,60 μmol/L As4S4作用48 h后,MCF-7细胞迁移及侵袭能力下降42.4％,差异有统计学意义(P=0.005);细胞的凋亡率增加至(19.56±1.12)％,差异有统计学意义(P=0.009),PI3K的表达无明显变化,p-Akt的表达显著下降64.3％,mTOR的表达显著下降58.7％(P=0.008).As4S4处理后MCF-7的增殖与凋亡与抑制剂LY294002处理结果一致.结论 As4S4可能通过抑制PI3 K/Akt/mTOR信号通路抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖及转移,促进细胞凋亡.
作者：白睿敏；苏静；李孟圈 刊期： 2017年第07期
目的 探讨气管切开插管留置大鼠不同时间段β-防御素-2(rBD2)及相关免疫指标的变化及其规律.方法 将无特定病原体(SPF)级健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠分成正常对照组(A)、气管切开插管留置模型组(B)各24只.制备大鼠气管切开插管留置模型.在造模成功后第24、72、168小时3个时段处死大鼠,观察体重及肺组织形态学改变.采集肺部及外周血标本,检测rBD2 mRNA的表达、白细胞介素-2(IL-2)及T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)的含量.结果 (1)B组大鼠肺组织rBD2 mRNA在第24小时表达为2.230±0.521,与A组(0.767±0.269)比较明显升高,而后随着时间的延长其表达(0.229±0.098)逐渐下降,并低于A组(0.909±0.342)水平,至第168小时达到本时间段内低值(0.107±0.054).(2)B组外周血CD3+含量在第24小时为(10.190±0.876)％,与A组含量(14.390±1.393)％比较明显下降,在第72小时含量(14.040±1.331)％,又恢复至A组大鼠(14.090±1.440)％水平,此后再没有改变.(3)血清IL-2及外周血CD4+、CD8+的含量,两组比较在3个时间段没有差异,同一组内在3个不同时间段之间的比较也没有差异.(4)B组大鼠体重随着时间的延长逐渐下降,并在第168小时下降明显[(198.500±8.440)g].(5)肺组织出现不同程度病变.结论 气管切开插管留置大鼠免疫功能变化以肺部局部功能下降为主,这种变化可能与气管切开后肺部损伤和营养不良有关.
作者：朱翠香；潘宇政；彭玲玲；罗艳 刊期： 2017年第07期
本研究旨在探讨高尔基体膜蛋白Ⅱ(GOLPH2又称GP73)在胆囊癌中的表达及意义,现报道如下.一、材料与方法收集郑州大学第一附属医院病理科2012年1月至2013年12月手术切除标本存档蜡块88例,其中胆囊腺癌58例,胆囊息肉30例.采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测GOLPH2在各组织中的表达,采用SPSS 17.0统计分析软件分析处理.
作者：刘星雨；朱广灿；张劲夫；范正军 刊期： 2017年第07期
本研究旨在观察小泛素样修饰物特异性蛋白酶1(SENP1)对人胆管癌细胞株QBC939增殖与侵袭能力的影响.一、材料与方法1.材料:人胆管癌细胞株QBC939由第三军医大学王曙光教授惠赠;SENP1过表达质粒和敲低SENP1表达质粒由上海交通大学医学院程金科教授惠赠.2.细胞培养及转染:待单层细胞融合度达80％ ～ 90％时,以X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent(μl)与质粒DNA(μg)比例为2∶1进行转染.
作者：石志源；董阳民；欧阳玲；李明；李凤鸣；李文岗 刊期： 2017年第07期
本实验旨在研究神经调节素(NRG-1β)对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及机制.一、材料与方法48只SD大鼠分为对照组(n=16)、缺血再灌注模型组(n=16)、NRG-1β治疗组(n=16),采用改良Zivin法[1]复制动物模型,根据改良Tarlov评分标准[2]进行神经功能评分.再灌注3、6、12、24 h取材(每个时间点4只),观察大鼠神经功能评分、病理变化及脊髓组织基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1蛋白和mRNA的表达.
作者：张同星；井万里；张涛；姜文学；高中玉；许财元；张辉 刊期： 2017年第07期
我们通过对肝硬化大鼠移植间充质干细胞(MSCs),观察肝纤维化以及自噬蛋白表达.一、材料与方法1.材料:四氯化碳(CCl4)、Masson染色试剂盒购于美国Sigma公司;自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ等抗体购自英国Abcam公司.健康Wistar大鼠64只购于南京医科大学动物房,体重320 ～ 350 g,随机平均分为对照组、肝硬化组、MSCs对照组和MSCs+肝硬化组,具体方法参照文献[1],所有操作在南京医科大学动物房进行,并遵守动物伦理法,获得南京医科大学伦理委员会批准(批准号:NJMU-AEARIA-4001-20120401).
作者：王云；熊轩轩；田庆中 刊期： 2017年第07期
我们将肌源性干细胞(MDSCs)移植至大鼠脊髓损伤区域,探讨其是否具有保护受损脊髓的作用.一、材料与方法1.材料:SD大鼠乳鼠河南科技大学医学院实验动物中心提供[合格证号:SCXK(豫)2010-0002],原位缺口末端标记法(TUNEL)试剂盒(美国Chemicon公司)、转录试剂盒(大连宝生物公司).
作者：刘世琼；董娜；梅晰凡；崔永光；熊明月 刊期： 2017年第07期
肌萎缩患者普遍存在于临床中,尚无有效治疗方式;而电磁场的生物学效应已被证实.我们通过研究脉冲电磁场对成肌诱导因子Myf5与Pax7表达研究肌萎缩治疗.一、材料与方法1.自制低频电磁场等.2.细胞处理:常规C2C12细胞培养、传代、分组即对照组(A组,0 mT)、B组(0.5 mT)、C组(1.0 mT)、D组(1.5 mT),定期取样送检.
作者：韩福军；毕佳琦；李卫；曲志伟；孟庆刚 刊期： 2017年第07期
我们采用了一种新的可调弯输送鞘在食管超声引导下经颈内静脉途径封堵房间隔缺损,取得了良好的手术效果,现将结果报道如下.一、资料与方法1.一般资料:选取2015年8月至2015年12月在河南省儿童心脏中心经超声心动图诊断为房间隔缺损(ASD)的患者,参考先天性心脏病经导管介入治疗指南[1],从中筛选出适合封堵者,共23例,男9例,女14例;年龄(9.5±8.7)岁;体重(29.1±17.1)kg.
作者：宋书波；范太兵；韩宇；李斌；梁维杰；董好举；吴开元；周司杰 刊期： 2017年第07期
本实验旨在观察R-钙黏蛋白(R-cadherin)对胃癌细胞生物学特性及上皮-间充质转化(EMT)的影响.一、材料与方法1.稳转细胞株构建:慢病毒三质粒共转染,获得靶向目的基因的病毒颗粒,浓缩感染,获得稳转细胞株.分组:(1)对照组:正常上皮细胞株GES-1/人胃癌细胞株BGC-823;(2)空载体组:pLK0.1-puro/pLV-CS2.0;(3)干扰组:si-钙黏蛋白(CDH)4;(4)过表达组:pLV-CDH4.
作者：庄伊凡；骆启聪；游剑虹；徐贻佺；蔡建春 刊期： 2017年第07期
男性球海绵体括约肌反射(BCR)与大小便及性功能相关,本研究旨在探讨公兔BCR的刺激和记录方法,记录公兔BCR的正常值并观察其在骶髓缺血后的变化.一、材料与方法1.材料:Epoch XP神经电生理监测设备(美国Axon公司);3％戊巴比妥钠(中国医药上海化学试剂公司,批号:F200220915)等.
作者：彭飞；宋启民；陈春美；张健 刊期： 2017年第07期
脊髓损伤(SCI)是一种常见损伤,研究结果显示诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与生长相关蛋白43(GAP43)的表达与SCI密切相关[1].我们利用Western blot技术比较SCI后iNOS和GAP43表达时程.一、材料与方法24只成年雄性C57 BL/6J小鼠参照文献[2]方法建立SCI模型,假手术组于实验第15天,各模型组分别于实验第4、8、15天处死小鼠取脊髓标本.
作者：程强；刘刚 刊期： 2017年第07期
黑色素瘤是死亡率高的一种皮肤癌.其发病率已占新发生肿瘤的4％ ～5％[1],与前列腺癌、大肠癌并列成为男性三大常见恶性肿瘤之一[2].本研究旨在观察微小RNA(miRNA,miR)-411对黑色素瘤增殖与侵袭的影响.一、材料与方法利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测黑色素痣组织及不同病理分级的黑色素瘤组织中的miR-411的表达水平.随后,我们用miR-411模拟物转染黑色素瘤细胞株A375及M14.在确定miR-411模拟物已转染成功后,利用噻唑蓝(MTT)及Transwell实验分别检测miR-411对上述两种细胞增殖及侵袭能力的影响.
作者：李秀洁；余道江；伍丽君；孙卫；王玉英；张华；赵天兰 刊期： 2017年第07期
人类长寿保障基因2/肿瘤转移抑制基因1(LASS2/TMSG-1)基因是近年来新年来新发现的一种肿瘤转移抑制基因,目前关于LASS2/TMSG-1基因对肿瘤细胞影响的研究多在肝癌、前列腺癌、乳腺癌,而对于肺癌的研究较少[1-3].因此为验证LASS2/TMSG-1基因对人肺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,本课题采用人肺巨细胞癌高转移潜能细胞亚系95D细胞,使LASS2/TMSG-1基因过表达,而后进行相关生物学功能实验.
作者：李时荣；伊日贵；左华楚；徐晓艳 刊期： 2017年第07期
应用染料淋巴示踪剂可提高淋巴结的检出率,其注射方法主要有黏膜下注射和浆膜下注射两种[1-2].纳米碳示踪剂技术在开腹结直肠癌根治术中有良好的效果[3-4].我院胃肠结直肠肛门外科2016年6月至2016年12月进行腹腔镜直肠癌根治术患者40例通过随机数字表法,随机分为标记组、对照组,分别进行研究,探讨纳米碳标记在腹腔镜直肠癌根治术中的应用价值.
作者：马连君；时景伟；陈林；冯雪飞；李畅 刊期： 2017年第07期
miRNA-29c表达异常减少是导致一些恶性肿瘤细胞无限增殖及肿瘤发生、发展的重要因素.Senqupta等[1]采用基因芯片技术研究结果显示微小RNA(miRNA,miR)-29c表达的浓度仅为正常鼻咽上皮细胞的1/5.本研究旨在观察miR-29c在体外对鼻咽癌细胞增殖侵袭能力的影响及体内对肿瘤生长的抑制作用.
作者：金巧智；叶文蔚；蔡志毅；孟易禹；黄栋栋；李志海 刊期： 2017年第07期
我们通过微创球囊导管技术,探讨兔脊髓压迫损伤模型制备的方法及效果.一、材料与方法1.方法:实验经新疆医科大学动物实验医学伦理委员会批准实施(20160730).24只兔采用简单随机抽样-抽签法随机分为3组.兔麻醉后,将T8一侧椎板切除,A组不置入球囊(北京博隆乾盛有限公司,规格:NC Sprinter 3.5 mm×8.0 mm);B组置入球囊后不扩张;C组将球囊置入到T10水平,使其占据椎管前后径30％.各组每日分别记录兔体重下降值及饮食量,术后48 h行双后肢改良Tarlov评分,安乐死行病理观察后,每组各留取3只作留观.
作者：周建；车立新；李洪伟；王淑勉；李坤；周圣泉；史新春；甘凤莲；赵红 刊期： 2017年第07期
目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,探讨联合检测E-cadherin和Vimentin对其预后的判断价值.方法 选择94例NSCLC术后留取的蜡块及临床资料作为观察组,选择80例正常肺组织作为对照组,采用免疫组织化学染色技术检测E-cadherin和Vimentin在两组中表达,对NSCLC患者进行术后随访,进行生存分析,分析两者在NSCLC中表达的相关性和预后价值.结果 E-cadherin主要表达于细胞膜,也可以表达在细胞质.在80例正常组中有62例E-cadherin阳性表达,阳性表达率为77.50％,显著高于NSCLC组的41.49％(39/94),差异有统计学意义(x2=26.235,P=0.000).E-cadherin在NSCLC中的阳性表达与无胸膜侵袭(x2 =7.799,P=0.005)、无淋巴结转移(x2=17.094,P=0.000)、淋巴结转移个数少于4个(x2=4.309,P=0.038)、增殖细胞核抗原(PCNA)阳性率低于25％(x2=10.331,P=0.000)、高中分化程度(x2=17.355,P=0.000)、无脉管侵袭(x2=9.174,P=0.002)有关.Vimentin表达于细胞质.在80例正常组中,仅有6例呈阳性表达,阳性表达率为7.50％;显著低于NSCLC组的44.68％(42/94),两组比较差异有统计学意义(x2=43.236,P=0.000).Vimentin在NSCLC组中的表达与有胸膜侵袭(x2=8.945,P=0.003)、有淋巴结转移(x2=7.694,P=0.006)、淋巴结转移个数多于4个(x2 =4.941,P =0.026)、PCNA阳性率高于25％(x2=5.991,P=0.014)、低分化程度(x2 =6.479,P=0.011)和有脉管侵袭(x2=8.666,P=0.003)有关.经线性相关分析结果显示,NSCLC组中Vimentin及E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.793,P=0.000);生存期相关性分析结果显示,E-cadherin低表达、Vimentin高表达的患者预后差(P=0.017).结论 NSCLC组织中E-cadherin低表达、Vimentin高表达在肿瘤的侵袭和转移过程中起到了重要的调控作用,预示了患者预后不良,在临床上联合检测两种蛋白的表达有助于判断NSCLC的预后.
作者：周海英；吴爱萍；董洪超；何珺；王宝杰；张逊 刊期： 2017年第07期
目的 探讨缺氧诱导因子-1 α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和微血管密度(MVD)在膀胱癌的表达及临床意义.方法 选择我院泌尿外科经尿道膀胱肿瘤切除术(TUR-BT)或开放术式治疗的膀胱癌患者51例,另选30例非膀胱癌患者正常膀胱标本作为阴性对照.采用免疫组织化学方法对各组患者HIF-1α、MMP-9和MVD在膀胱组织中的表达进行评估.结果 膀胱癌组织中HIF-1α、MMP-9阳性率均显著高于正常膀胱组织[60.78％ (31/51)比0.00％(0/30),P=0.000;70.58％ (36/51)比16.67％ (5/30),P=0.000];膀胱癌组织中HIF-1α、MMP-9表达评分均显著高于正常膀胱组织[(4.31±1.03)比(1.12 ±0.07)分,P=0.000;(4.64±0.98)比(1.53±0.21)分,P =0.000].膀胱癌组织中MVD显著高于正常膀胱组织[(38.06±9.04)比(19.17±5.19)条;t=11.946,P=0.000].肿瘤直径超过3 cm的膀胱癌组织HIF-1α、MMP-9表达和MVD数目显著高于肿瘤直径在3 cm以内的膀胱癌组织(P=0.025、0.009、0.011).浸润型膀胱癌组织中HIF-1α、MMP-9表达和MVD数目显著高于浅表型膀胱癌组织(P=0.000、0.000、0.035).Spearman等级相关分析结果表明HIF-1 α,MMP-9表达强度与MVD表达量均呈显著正相关(P=0.000、0.001).结论 HIF-1α、MMP-9和MVD在膀胱癌中表达均显著上调,有助于评估肿瘤直径、临床分期和病理分级.
作者：李岗；牛慧敏；王宇；常建兰；吴洪涛 刊期： 2017年第07期
目的 探讨肝癌缺失基因-1(DLC-1)和Fascin在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达.方法 采用免疫组织化学法检测94例NSCLC患者手术切除的癌组织和癌旁组织中DLC-1和Fascin表达水平.结果 DLC-1在NSCLC癌组织中表达率明显低于癌旁组织(40.43％比82.98％,t=36.015、P=0.000),Fascin在NSCLC癌组织中表达率明显高于癌旁组织(72.34％比12.77％,t=68.237、P=0.000);DLC-1表达水平与NSCLC的TNM分期、淋巴结转移、组织学分化程度明显相关(分别为f=5.942、P=0.015,t=7.690、P=0.006,t=19.615、P=0.000),Fascin表达水平与NSCLC的TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=5.708、P=0.017,t=6.970、P=0.008).结论 NSCLC癌组织中DLC-1低表达和Fascin高表达,DLC-1和Fascin可作为NSCLC预后的相关参考指标.
作者：姜文波；刘言；张秀枫；陆平 刊期： 2017年第07期
目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-29在膀胱癌组织、癌旁膀胱组织、膀胱乳头状瘤组织中的表达,探讨miR-29在膀胱癌进展中的意义.方法 利用区组随机化方法收集我院通过手术治疗的膀胱癌患者32例、膀胱乳头状瘤患者30例作为研究对象,应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测32例膀胱癌组织、癌旁膀胱组织及30例膀胱乳头状瘤组织中miR-29的表达,应用R.3.3.1统计软件进行统计分析,计量资料采用Z检验.结果 相对于癌旁膀胱组织(0.90±0.08,|Z| =1.414,P＞0.05),miR-29在膀胱乳头状瘤组织中的表达(0.86 ±0.01,|Z|=10.955,P＜0.05)降低,在膀胱癌组织中的表达水平(0.62±0.02,|Z|=73.539,P＜0.05)明显降低.结论 miR-29可能作为抑癌基因参与膀胱癌的进展,上调miR-29的表达有利于膀胱癌的治疗和预后.
作者：魏燕；魏金星；王丽琴；杨景勋 刊期： 2017年第07期
目的 探讨人退变性颈椎病颈椎间盘退变的机制.方法 采用全基因组测序找到退变性颈椎病相关的基因,并用GenBank进行注释;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测相关基因的mRNA表达水平;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测退变性颈椎病相关细胞因子水平.结果 根据基因组测序结果,得到退变性颈椎间盘表达的主要差异基因包括凋亡相关基因、胶原蛋白基因、细胞因子、骨生成相关基因等;退变相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、FAS、Ⅰ型胶原α2链(COL1 A1)、X型胶原α1链(COL10A1)、基质金属蛋白酶(MMP)-3基因mRNA水平退变组均是对照组的3倍以上(2.249比0.650,2.386比0.582,2.339比0.731,2.433比0.695,2.348比0.616,t =23.410,P =0.002;t=30.208,P=0.001;t=6.172,P=0.025;t=5.476,P=0.032;t=5.509;P =0.031);退变相关细胞因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、转化生长因子(TGF)-α水平和创伤性患者比较,差异有统计学意义(802.35比500.87,158.26比53.91,1 183.56比124.25,238.64比78.16,t =56.282,P =0.000;=48.383,P =0.000;t=16.223,P =0.004;t24.564,P=0.002).结论 退变性颈椎病病变过程包括髓核细胞凋亡,胶原蛋白减少,骨生成减少,炎性因子增多等过程.
作者：朱宇；陈清汉；张明生；张仲宁 刊期： 2017年第07期
目的 探讨直肠癌新辅助放化疗前后肿瘤相关性中性粒细胞(TANs)在肿瘤组织中的浸润及其临床意义.方法 选取47例进展期中低位直肠癌(术前评估cT3-4NxM0,肿瘤下缘距肛缘＜ 10 cm)患者新辅助放化疗前的术前活检和新辅助放化疗后的术后石蜡病理标本.采用光镜结合免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测TANs在新辅助放化疗前后肿瘤组织中的浸润.统计分析TANs在肿瘤组织中的浸润与患者对新辅助治疗的敏感性及其预后的关系.结果 术前活检标本中TANs的浸润数量显著高于术后病理标本[(43.87±4.65)个,n=47比(10.39±1.62)个,n=47;P=0.003].术前活检标本中TANs浸润数量与新辅助放化疗的反应敏感性无明显相关(按ypT分期x2=0.430,P=0.662;按Grade分级x2 =0.060,P=0.806).新辅助放化疗后术后病理标本中TANs较低的浸润数量与良好的预后有关(3年无瘤生存率:83.9％比25.0％,P=0.015);同时,新辅助放化疗后的ypT分期也是直肠癌患者预后的独立预测因子.结论 新辅助放化疗可以显著降低直肠癌中TANs的浸润数量.新辅助治疗后肿瘤中TANs较低的浸润数量与良好的预后有关.
作者：苏昌业；陈纲；杜峻峰；袁强 刊期： 2017年第07期
目的 探讨医用交联高分子透明质酸钠凝胶预防腰椎术后硬膜外粘连的疗效.方法 选择我院治疗的腰椎退变性疾病患者92例,按手术及处理方法分为A组:腰后路减压植骨内固定术+交联高分子透明质酸钠凝胶组,52例;B组:腰后路减压植骨内固定术+生理盐水组,40例.两组均采用腰后路经椎间孔椎体间融合术(TLIF),A组在减压处硬膜囊及神经根处予以交联高分子透明质酸钠凝胶处理,B组予以生理盐水.分析比较两组的手术时间、术中出血量、术后引流量.临床疗效比较两组术前、术后及末次随访时腰痛和下肢活动疼痛视觉模拟评分(VAS)及Oswestry功能障碍指数(ODI)评分.影像学评价采用腰椎磁共振成像(MRI)测量比较术前及随访MRI手术节段椎管矢状径、硬膜囊面积.结果 92例患者均顺利完成手术,术中无明显并发症;两组患者一般资料无明显差异,两组患者手术时间(t=1.736,P=0.086)、术中出血量(t=1.084,P=0.281)、术后引流量(=0.816,P=0.417)差异无统计学意义.所有患者均获随访;两组术后、末次随访时VAS、ODI评分均较术前差异有统计学意义;A组术后、末次随访下肢疼痛VAS评分[(2.50±1.21)、(2.21±1.16)分]与B组[(2.98±0.95)、(2.70±1.07)分]比较差异有统计学意义,而腰痛VAS评分两组差异无统计学意义;两组术后、末次随访ODI评分差异无统计学意义.两组术前椎管矢状径、硬膜囊面积差异无统计学意义,A组术后随访MRI椎管矢状径[(15.52±0.98) mm]与B组[(15.13 ±1.07) mm]差异无统计学意义(t=1.841,P=0.069),A组术后随访MRI硬膜囊面积[(181.58 ±8.19) mm2]优于B组[(169.03 ±6.02) mm2],差异有统计学意义(t=0.814,P=0.000).结论 腰后路减压植骨内固定术联合减压处应用交联高分子透明质酸钠凝胶比单纯减压手术能更好的预防椎管内粘连,减轻临床症状,减少术后下肢疼痛,具有较好的临床疗效.
作者：王成；王德国；尚凯 刊期： 2017年第07期
目的 探讨外周血CD4+ CD25+ CD127l0w/-调节性T细胞(Treg)计数、肺癌标志物(TM)水平及相关临床病理特征预测非小细胞肺癌(NSCLC)治疗疗效的研究.方法 采用流式细胞术检测Treg计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肺癌TM浓度;结合资料分析Treg计数、TM水平及相关临床病理特征对NSCLC患者治疗疗效的预测作用.结果 NSCLC患者Treg计数明显高于健康对照组[(7.02±2.31)％比(4.53±0.86)％,t=6.949,P=0.000].在肺癌中,Treg含量与分化程度(F=15.229,p=0.000)、肿块大小(t=-2.972,P=0.003)、TNM分期(t=4.856,P=0.001)、有无脉管癌栓(t=-0.653,P=0.000)等有关.临床治疗有效组的Treg计数及血清TM水平低于临床治疗无效组,差异有统计学意义[Treg:(5.77±1.71)％比(7.02±2.02)％,t=-3.983,P =0.001;非小细胞肺癌相关抗原21-1 (CYFRA21-1):2.88(2.13 ～4.44)比4.76(2.82 ～8.95),t=4.032,P=0.000;癌胚抗原(CEA):2.72(1.54 ～4.01)比3.53(1.99 ～8.42),t=2.385,P=0.017;糖类抗原125(CA125):9.90(6.50 ～ 14.70)比19.20(11.50 ～ 57.25),t=5.148,P=0.000].采用Logistic回归对肺癌患者的治疗疗效进行分析,发现仅治疗前外周血Treg细胞和TNM分期为其独立的预测因子[Treg:比值比(OR)=3.993,P=0.001;TNM:OR=1.742,P=0.000].结论 Treg计数与NSCLC严重程度密切相关,治疗前外周血Treg计数和TNM分期可用于NSCLC综合治疗疗效的预测.
作者：熊娟；陈文虎；张毅敏；余昶；陶开义 刊期： 2017年第07期
目的 探讨过表达平足蛋白(PDPN)的肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)和肿瘤浸润血小板在乳腺癌预后判断中的作用.方法 收集行乳腺癌根治术的164例浸润性乳腺导管癌患者,通过D2-40和CD61单抗免疫组织化学法分别检测CAFs中PDPN和肿瘤组织中血小板浸润的表达,并获取所有患者术前血小板计数,统计学分析这些指标在乳腺癌预后判断中的作用.结果 免疫组织化学显示72例(44％)患者的CAFs中存在PDPN的表达(CAF+),而在57例(35％)患者中显示有血小板的浸润(CD61+).相关分析显示有多个因素间呈显著性相关,其中CAF+与临床分期明显相关(P=0.049),CD61+与术前血小板计数(P =0.004)和CAF+与CD61+ (P =0.048).单因素生存分析显示CAF+,CD61+和术前血小板计数大于280×109/L组的无病生存期(DFS)明显低于对照组,P值分别为0.001、0.024和0.027.而在多因素生存分析中显示CAF+是一个独立的不良预后因素[风险比(HR)值=3.928;P =0.005].结论 CAF+和CD61+均是浸润型乳腺导管癌的不良预后因素,同时CD61+与术前外周血血小板的计数明显相关.
作者：蔡东焱；孟东；李励琦；华东 刊期： 2017年第07期
目的 探讨长链非编码RNA(lcnRNA) HOXA末端转录本反义RNA (HOTTIP)和谷氨酸代谢型受体1(mGluR1)在胰腺癌组织中表达的临床意义及其对患者预后的影响.方法 收集我院47例胰腺癌患者,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺癌组织和癌旁组织中HOTTIP和mGluR1 mRNA的表达水平,Western blot法检测HOTTIP和mGluR1蛋白的表达,免疫组织化学法定量分析HOTTIP和mGluR1蛋白的表达,分析HOTTIP和mGluR1表达的临床意义、对患者预后的影响及其两者的相关性.结果 胰腺癌组织中HOTTIP和mGlUR1 mRNA和蛋白的表达水平明显上调,与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P=0.000).在47例肿瘤样本中,32例(68.09％)样本中HOTTIP蛋白表达呈阳性,30例(63.83％)样本中mGlUR1蛋白呈阳性,其中对应的癌旁组织中HOTHP和mGlUR1蛋白的阳性率分别是31.91％和36.17％,与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P=0.000),并且HOTTIP和mGluR1的表达水平与胰腺癌的淋巴结转移、分化程度和TNM分期有关(P值分别为0.000、0.004、0.000).HOTHP和mGluR1表达呈阳性的患者生存时间明显低于阴性患者,两者差异有统计学意义(P =0.029、0.047).Cox比例风险模型多因素分析结果表明,淋巴结转移、分化程度、TNM分期、HOTHP和mGlUR1表达水平是影响胰腺癌患者预后的独立危险因素(P值分别为0.022、0.048、0.026、0.000、0.002).HOTTIP和mGluR1在胰腺癌患者中表达呈明显正相关(r =0.689,P=0.002).结论 HOTTIP和mGluR1的高表达与胰腺癌的发生、发展和预后有关.
作者：丁月超；马超；余伟；王谦；蒙博；韩风；黄涛 刊期： 2017年第07期
目的 分析Ⅸ型胶原蛋白A2(COL9A2)基因的单核苷酸多态性(SNP),用调查表对椎间盘退变性疾病(DDD)可能的危险因素(劳动强度、吸烟史、同类疾病家族史等),探讨COL9A2基因与环境因素对中国汉族人DDD发病的相关性,并评价其与椎间盘退变严重程度的相关性.方法 200例中国汉族DDD患者与80例对照组.所有研究对象均行腰椎磁共振成像(MRI)检查,提取全部研究对象的外周血DNA,采用病例-对照研究方法,对COL9A2基因在326位的氨基酸位置处的两个突变位点SNP1(rs7533552)和SNP2(rs2077871)进行基因检测.结合腰椎间盘退变危险因素的调查表,观察家族史、吸烟、劳动强度和与腰椎间盘退变的相关性.结果 吸烟、劳动强度、DDD的家族史,与DDD相关.病例组中,rs2077871(SNP2)的TT和CT基因型频率显著高于对照组.其中TT在病例组的携带率(15/200,15.0％),显著高于对照组(1/80,1.3％),两组比较差异有统计学意义[比值比(OR)=0.982,P=0.001].进一步对候选基因与不同的椎间盘退变程度进行关联分析中,rs2077871(SNP2)的TT基因型频率与椎间盘退变程度明显相关.结论 DDD与环境因素(如劳动强度、吸烟等)以及阳性家族史均明显相关;以COL9A2基因为候选基因,发现其rs2077871的基因多态性与椎间盘退变性疾病明显相关;程度严重的椎间盘退变与候选基因多态性明显相关,高于程度较低的退变.
作者：张学利；宋海峰；朱如森；袁建军；江泽华 刊期： 2017年第07期
目的 检测核转运蛋白a2(KPNA2)基因KPNA2和抑制转录共激活因子TAZ在胃癌组织中的表达,分析两者的临床意义.方法 应用免疫组织化学法检测66例胃癌组织和癌旁组织中KPNA2和TAZ表达水平,并结合临床资料进行分析.结果 KPNA2在胃癌组织的表达率为62.12％ (41/66),明显高于癌旁组织表达率22.73％(15/66),两者差异有统计学意义(t=20.966、P=0.000),KPNA2表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=6.340、P=0.012,t=8.285、P=0.004);TAZ在胃癌组织的表达率为75.76％ (50/66),明显高于癌旁组织表达率19.70％ (13/66),两者差异有统计学意义(t=41.571、P=0.000),TAZ表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=6.398、P=0.011,t=9.718、P=0.002,t=4.846、P =0.028).结论 KPNA2和TAZ的表达水平可能与胃癌的发生发展有关.
作者：刘争杨；李双齐；张秀枫；陆平 刊期： 2017年第07期
目的 观察CXC趋化因子配体16(CXCL16)/CXC趋化因子受体6(CXCR6)在结肠癌中的表达及其对结肠癌增殖、侵袭、转移的影响.方法 免疫组织化学方法检测CXCL16/CXCR6在结肠癌组织、癌旁组织及3种结肠癌细胞SW480、LoVo、HCT116的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CXCL16和CXCR6mRNA的表达;通过CXCR16-RNA慢病毒载体转染SW480细胞,利用噻唑蓝(MTT)实验及Transwell实验分析CXCL16/CXCR6对结肠癌细胞增强、侵袭、转移能力等影响.结果 在56例结肠癌组织中,CXCL12阳性表达48例,CXCR6阳性表达47例,阳性表达率分别为85.7％、83.9％,远高于癌旁组织(26.7％、33.3％),差异有统计学意义(2=18.542,P=0.005;x2=19.464,P=0.005).CXCL16和CXCR6在结肠癌细胞株SW480、LoVo、HCT116均呈阳性表达,差异无统计学意义.RT-PCR结果显示,CXCL16 mRNA、CXCR6mRNA表达在癌组织的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.592,P=0.008;t =2.364,P=0.003).CXCL16 mRNA、CXCR6mRNA在3种癌细胞株中均呈高表达,差异无统计学意义(P =0.232).经慢病毒载体转染后,MTT实验结果显示,CXCL16-短发卡RNA(shRNA)实验组增殖显著降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P =0.002).Transwell实验结果显示,实验组、对照组中迁移至下室的细胞数分别为(14.2±1.68) ×105、(28.7 ±2.02) ×105个,差异有统计学意义(t=3.022,P=0.001).结论 CXCL16/CXCR6可能参与结肠癌的增殖、侵袭转移过程.
作者：付焱；李恒；黄东；刘全 刊期： 2017年第07期
目的 观察早期不同液体输注速度对非停跳冠状动脉搭桥患者血流动力学稳定性的影响.方法 选择非停跳冠状动脉搭桥术的冠状动脉心脏病(以下简称冠心病)患者46例随机分为观察组和对照组,每组各23例.对照组患者持续给予2 ～3 ml/(kg·h)生理盐水输注,观察组患者进入手术室至乳内动脉被成功游离前,选择的5 ～7 ml/(kg·h)的速度进行液体输注,待乳内动脉游离完毕后,选择2 ～3 ml/(kg·h)的速度进行液体输注.结果 观察组平均动脉压(MAP)、心率(HR)、心排血量(CO)、每搏变异度(SVV)、中心静脉压(Gyp)等血流动力学指标在手术期间显著优于对照组.观察组患者在搭桥期间去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素(E)总用量显著低于对照组,排尿量显著高于对照组(t =3.908、7.452,P=0.043、0.002).观察组在T3时静脉血氧分压(PvO2)和中心静脉血氧饱和度(ScvO2)水平显著高于对照组,乳酸水平和氧摄取率显著低于对照组(t=4.099、3.679、4.208、2.214,P=0.046、0.037、0.032、0.049).观察组在进入监护室后乳酸峰值和肌酐峰值均显著低于对照组(t=3.709、2.311,P=0.038、0.048).对照组术后24 h BNP水平显著高于观察组(t=4.911,P=0.041).观察组在术后24 h cTn Ⅰ水平较游离乳内动脉前显著降低(t=7.224,P=0.011),而对照组在手术后24 h cTn Ⅰ水平比较差异无统计学意义(t=1.097,P=0.087).结论 在非停跳冠状动脉搭桥术中早期适当补充盐溶液,并在搭桥术期间限制入液量,有效稳定了血流动力学状态,改善组织氧合状态,减轻了心肌损伤.
作者：高海涛；魏润生；陈晓伟 刊期： 2017年第07期
目的 观察恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清微小RNA(miRNA,miR)-17-5p的表达,以及miR-17-5p对恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251的体外作用.方法 通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清miR-17-5p的表达水平;将U87MG和U251细胞用化疗药物20 μmol/L顺铂(DDP),50 μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理后检测miR-17-5p表达变化;将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,并用无血清培养,检测miR-17-5p在无血清条件对细胞存活的作用;将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,测定其细胞增殖、细胞迁移、集落形成以及肿瘤蛋白p53可诱导核蛋白1(TP53INP1)、Tripartite基序蛋白8(TRIM8)和含BTB结构域的锌指蛋白(ZBTB4)蛋白表达量的变化.结果 通过RT-qPCR检测可见恶性胶质瘤患者肿瘤组织(7.40±1.55)和血清(2.70 ±0.55) miR-17-5p的表达较癌旁组织和健康人血清明显升高(P =0.019和P=0.028),同时采用化疗药物20 μmol/L DDP、50 μμmol/L替莫唑胺或30Gy伽马射线处理U87MG和U251细胞后,其miR-17-5p的表达量也明显上升(P=0.001).将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,并用无血清培养结果表明,miR-17-5p能够促进U87MG和U251在无血清条件下的细胞存活,同时检测显示miR-176P在低浓度(2.5％)血清下可以促进U87MG和U251细胞迁移[(20.50±2.33) mm和(14.50±1.35) mm],促进U87MG和U251集落形成[(225±45)个和(312±58)个],而在高浓度血清(10％)条件下,miR-17-5p并不能促进U87MG和U251细胞迁移,反而会抑制细胞增殖,表明miR-17-5p能够降低抑癌基因TP53INP1、TRIM8和ZBTB4蛋白表达.结论 恶性胶质瘤患者血清和组织miR-17-5p表达增加,同时miR-17-5p对于恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251在不良环境中的细胞生存具有促进作用.
作者：张风江；周金桥；赵新炜；郭杨；保建基；翟广；刘献志 刊期： 2017年第07期
目的 研究磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路在人类膀胱癌中的表达情况,并观察其与膀胱癌干细胞的关系,探讨PI3K/Akt信号通路在膀胱癌发生发展中的意义.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测人膀胱癌中PI3K、磷酸化Akt (p-Akt)蛋白及mRNA的表达;采用免疫荧光双标技术检测膀胱癌干细胞标志物CD133在膀胱癌组织中的表达及其与p-Akt的共表达.结果 在膀胱癌组织中,PI3K、p-Akt蛋白(PI3K:1.05±0.03,p-Akt:1.21 ±0.04)及PI3K mRNA (0.68±0.03)水平表达明显高于正常膀胱组织(PI3K蛋白:0.68±0.04,p-Ak蛋白:0.71 ±0.02,PI3K mRNA:0.42 ±0.02),膀胱癌干细胞标志物CD133在膀胱癌组织中有表达;p-Akt与CD133的共表达呈阳性.结论 PI3 K/Akt信号通路在膀胱癌组织中被激活,并且p-Akt与膀胱癌组织中膀胱癌干细胞标志物CD133存在共表达,推测通过干扰PI3 K/Akt信号通路抑制膀胱癌干细胞异常分化可防治膀胱癌的发生发展.
作者：吴晓鸣；何屹；吴建惠；陈昊；徐东亮 刊期： 2017年第07期
胰岛移植被认为是治疗1型糖尿病的理想方式.然而,胰岛供体来源缺乏限制了该技术在临床的广泛应用.更多的研究者将目光转向异种胰岛移植.猪作为首要替代胰岛来源,面临的异种排斥反应比同种移植更为剧烈,传统的免疫抑制策略无法满足长期脱离胰岛素的要求.近几年基因修饰技术不断进步,推动了改良基因猪胰岛在异种胰岛移植方面的发展,并取得显著成果.本文就通过基因修饰改良供体猪胰岛使其能在受体内长期存活保持功能的研究进展进行综述.
作者：杨建蕾；张流；张雷 刊期： 2017年第07期
静脉移植血管疾病(SV GD)是冠状动脉旁路移植术(CABG)后发生的一种特殊类型血管疾病,它的发生严重影响CABG术近、远期效果,增加了心脏主要不良事件发生可能性.明确SVGD风险预测因素,对于SVGD高危人群识别以及靶向预防和治疗的实施,具有重要意义.现综述国内外报道SVGD的新型风险标志物研究进展,为SVGD早期诊断和治疗提供参考.
作者：李杰；高静；李玉明 刊期： 2017年第07期
目的 建立抗体介导的小鼠肾移植急性排斥动物模型.方法 6～8周雄性C3H(H2k)小鼠和BALB/c (H2d)小鼠,分别作为皮肤移植或肾移植供体和受体.分2组.抗体介导的排斥反应(AMR)组:C3 H→ BALB/c小鼠皮肤移植预致敏术后7d,行C3 H→ BALB/c小鼠肾移植(n=10).细胞介导的排斥反应对照(CMR)组:无皮肤移植预致敏,行C3 H→BALB/c小鼠肾移植(n=10).正常BALB/c小鼠作为对照(n=3).记录受体存活时间,监测移植肾功能血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平.肾移植术后5d行移植肾病理Banff诊断,检测移植肾组织小鼠IgG、补体片段C3d沉积及循环供体特异性抗体[(DSA)-IgG、IgM]水平.结果 AMR组受体平均存活(4.4±1.1)d,肾移植术后2d移植肾功能Cr[(415.6 ±25.6) μmol/L]和BUN[(2 394.0 ±94.0)pmol/L]水平显著升高.对照组CMR受体平均存活＞60d,术后60d时移植肾功能Cr[(77.8±7.2)μmol/L]和BUN[(1 343.0±233.9) pmol/L]仍正常.肾移植术后5d处死小鼠取标本,AMR组移植肾明显肿大,CMR组移植肾形态正常.AMR组同CMR组比较,循环DSA-IgG水平显著增高,平均荧光强度(MFI)值为223.0±29.0比134.5 ±39.6.DSA-IgM水平变化不显著,MFI值为9.2±0.1比10.0±0.7.移植肾病理提示管周毛细血管(PRC)扩张,PTC炎,肾小球炎,肾小球、肾小管坏死,同时伴间质炎、出血、水肿.移植肾内IgG、C3d广泛沉积.CMR组病变轻微,同正常对照无显著差异.结论 采用供体皮肤预致敏受体1周,成功建立典型的抗体介导C3 H→BALB/c小鼠肾移植急性排斥动物模型,与无皮肤预致敏组差异非常显著.
作者：赵大强；李思雯；廖涛；赵坤；周静；华学锋；孙启全 刊期： 2017年第07期
目的 观察携带人黑色素瘤分化相关基因(MDA)-7/白细胞介素(IL)-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24对各种不同转移潜能肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02的作用.方法 将携带人MDA-7/IL-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24分别感染人肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞IL02,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western blot检测MDA-7/IL-24基因的表达,噻唑蓝(MTT)观察肝癌细胞的生长抑制,Hoechst 33258和流式细胞仪(FCM)检测细胞的凋亡,FCM检测细胞周期.结果 RT-PCR和Western blot显示MDA-7/IL-24在肝癌细胞和正常肝细胞中高效表达,ELISA提示细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白也明显增加.MTT和FCM提示MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞的生长[生长抑制率分别为(75.0±2.5)％、(85.0±2.0)％、(86.0±3.5)％,HepG2:F=5.860,Hep3B:F=7.210,SMMC7721:F=7.980,均P=0.000],促进肝癌细胞凋亡[凋亡抑制率分别为(56.5±4.0)％、(34.4±2.0)％、(43.3±2.5)％,HepG2:F=203.400,Hep3B:F=313.200,SMMC7721:F=130.500,均P=0.000],阻滞肝癌细胞在G2/M期[G2/M期阻滞分别为(35.4±4.2)％、(47.3±6.2)％、(40.5±5.0)％],而对正常肝细胞没有明显的促进凋亡和增殖阻滞作用.结论 溶瘤腺病毒SG600-IIL24能选择性杀伤不同转移潜能人肝癌细胞和诱导凋亡,促进肝癌细胞增殖阻滞,而对正常肝细胞无明显促进凋亡和增殖阻滞作用.
作者：肖朝文；王从俊；李明杰；蔡常春；郑建伟；申铭 刊期： 2017年第07期
目的 探讨可溶性环氧化物水解酶(sEH)在肝硬化门静脉高压症大鼠肝纤维化病理过程中发挥的作用.方法 利用多道生物分析仪测定鼠门静脉压力;Western blot和免疫组织化学法证实大鼠肝脏组织sEH蛋白表达水平的变化;Western blot法检测大鼠肝纤维化蛋白标志表达;液相-质谱/质谱法分析各组大鼠肝内环-二十碳三烯酸含量.结果 各组大鼠平均门静脉压力分别为(6.65±0.82)、(5.94±0.91)、(16.54±1.42)、(12.62±1.31) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa). sEH抑制剂t-AUCB处理可使sEH、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原蛋白(COL Ⅰ)蛋白表达水平显著降低.门高压大鼠环氧二十碳三烯酸(EET)/二羟基二十碳三烯酸(Dhet)比值显著升高经过t-AUCB处理后降低.结论 四氯化碳致肝硬化门静脉高压症大鼠肝内sEH含量增高,促进抗肝纤维化物质EET降解,抑制sEH可恢复肝内EET含量,α-SMA及COL Ⅰ蛋白表达水平明显减少,门静脉压力降低.
作者：秦骏；何越；罗蒙；钱海鑫 刊期： 2017年第07期
目的 探讨照射后微环境对残存的肝癌细胞转移能力影响及分子机制.方法 分离大鼠肝脏非实质细胞(NPCs),贴壁后进行照射,然后收集培养上清液与照射过的大鼠肝癌细胞McA-RH7777-6 Gy共培养.经不同培液上清共培养McA-RH7777-6 Gy细胞得到RH 6 Gy(与未照射NPCs上清液共培养)和RH 6 Gy-R(与照射后NPCs上清液共培养)细胞株.采用基因芯片技术检测RH 6 Gy和RH 6 Gy-R细胞中基因的表达.通过生物信息学对显著变化的基因进行分析,并利用DAVID数据库对这些变化的基因进行功能富集分析(GO-analysis)和信号转导通路富集分析(KEGG-analysis,BIOCARTA-analysis).进行细胞划痕实验,比较RH6Gy细胞和RH 6 Gy-R细胞的运动迁移能力.结果 基因芯片检测结果显示,RH 6 Gy-R与RH 6 Gy细胞比较,周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、丝裂原活化蛋白激酶9(MAPK9)、细胞周期蛋白(Cyclin)A、Toll/白细胞介素-1受体相关蛋白(TIRAP)、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1/2(PDK1/2)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)等15个肿瘤发生发展相关基因的表达都显著高于未照射上清共培养组,且这些表达差异显著的基因多数富集在肿瘤转移相关通路,如腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、磷脂酰肌醇信号通路、Ras信号转导通路等.体外划痕实验显示,细胞划痕培养48 h后,RH 6 Gy细胞面积愈合率为(9.00±1.35)％,RH 6 Gy-R细胞面积愈合率为(41.30 ±6.32)％.结论 经照射后的残存的肝癌表现出更强的转移能力,可能与其微环境中的NPCs相关,我们推测照射后的NPCs释放的某些细胞因子促进了肝癌残存细胞转移相关mRNA的表达,从而激活相关癌转移通路.
作者：周乐源；张勇；姚苏芮；殷媛；李杰；黄朝晖 刊期： 2017年第07期
目的 探讨CXC趋化因子配体12(CXCL12)及其CXC趋化受体4/7(CXCR4/7)在肝硬化脾亢大鼠模型巨脾组织中的表达及意义.方法 将50只雄性SD纯系大鼠,随机分成模型组(n=40)和对照组(n=10).对照组采用0.9％生理盐水灌胃,剂量为0.3 ml/100 g,每周2次,共8周;模型组则采用40％四氯化碳(CCL4)花生油溶液灌胃,剂量0.3ml/100 g,每周2次,共8周.经病理学和血常规检查证实制成肝硬化脾亢模型后,用Masson三色染色观察脾脏组织纤维化程度,用免疫组织化学,Western blot和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)三方法检测脾脏组织中趋化轴CXCL12-CXCR4/CXCR7的表达水平,并与对照组进行比较.结果 Masson三色染色显示:肝硬化脾亢大鼠脾脏纤维面积[(11.17±4.85)％]显著高于对照组[(2.83±0.90)％],两组比较差异有统计学意义(t=7.939,P=0.000).模型组脾脏指数[(3.14±0.98) mg/g]高于对照组[(2.33 ±1.03) mg/g],两者比较差异有统计学意义(=2.351,P =0.025).免疫组织化学检测:模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7的平均吸光度值分别为(8.89 ±4.89)×10-3、(8.78±4.67)×101、(8.47 ±3.97) ×10-3,显著高于对照组(2.89±1.11) ×10-3、(2.03±0.45)×10-3、(1.81±0.69) ×10-3,差异有统计学意义(=4.126,P=0.001;t=4.973,P=0.000;t =5.644,P=0.000);模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7阳性细胞率分别为(31.02±9.03)％、(33.22±8.31)％、(28.89±8.40)％,显著高于对照组(20.62±8.88)％、(18.81±6.23)％、(10.49±2.99)％,差异有统计学意义(t=3.112,P=0.004;t=4.170,P=0.001;t=6.293,P=0.000).Western blot检测:模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7蛋白相对表达量分别为1.71±0.98、1.01±0.57、1.15±0.77,显著高于对照组0.39±0.13、0.32±0.11、0.51±0.31,差异有统计学意义(t=6.366,P=0.000;t=5.550,PD =0.000;t=3.348,P=0.002).RT-qPCR检测:模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7 mRNA相对表达量分别为3.48±0.90、1.99±0.34、2.53±0.59,显著高于对照组1.05 ±0.10、1.00±0.18、1.02±0.02,差异有统计学意义(t=9.607,P=0.000;t 10.460,P=0.000;t9.259,P=0.000).Pearson 相关分析显示:,CXCL12蛋白相对表达量(1.31±1.02)、CXCR4的蛋白相对表达量(0.80±0.57)、CXCR7的蛋白相对表达量(0.96±0.72)与脾脏纤维面积(8.65±5.62)％呈正相关(r=0.688,P=0.001;r =0.711,P=0.001;r=0.579,P=0.009).CXCL12 mRNA相对表达量(2.74±1.37)、CXCR4 mRNA相对表达量(1.69±0.55)、CXCR7 mRNA相对表达量(2.07±0.87)、与脾脏纤维面积(8.65±5.62)％呈正相关(r=0.694,P=0.001;r =0.647,P=0.003;r =0.609,P=0.006).结论 CCL4致肝硬化脾亢大鼠巨脾中CXCL12-CXCR4/CXCR7的表达异常增高,且与脾脏纤维面积呈正相关,可能参与了肝硬化脾亢大鼠脾脏纤维化的过程.
作者：黎业娟；吕云福；韩晓玉；刘宁；邓杰；李晴晴 刊期： 2017年第07期
目的 探讨小分子生存素(Survivin)抑制剂YM155对肝癌细胞的作用及其分子机制,为肝癌治疗提供可能的理论依据.方法 YM 155(0～ 60 nmol/L)处理肝癌细胞株SK-Hep-1细胞,噻唑蓝(MTT)检测24、48 h细胞增殖抑制率,锥虫蓝拒染法检测60 h死细胞率;20 nmol/L YM155作用于SK-Hep-1细胞12、24 h,Western blot检测Beclin 1、LC3 Ⅰ/Ⅱ和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、髓样细胞白血病-1(Mcl-1)的表达.结果 MTT结果显示,YM 155(0～ 60 nmol/L)对肝癌细胞增殖抑制率呈时间和浓度依赖性;锥虫蓝拒染法结果显示,相对于对照组[二甲基亚砜(DMSO)],2、4 nmol/L YM155作用肝癌细胞60 h,死细胞率分别为45％、90％,差异有统计学意义(P=0.025).20 nmol/L的YM155作用肝癌细胞12、24 h后,Western blot结果显示,Beclin 1、LC3Ⅱ蛋白表达增加,Mcl-1明显下调,bcl-2表达变化不明显.结论 Survivin抑制剂YM155抑制肝癌细胞的增殖,可能与抑制Mcl-1表达,诱导肝癌细胞发生自噬性细胞死亡有关.
作者：郭文治；张嘉凯；王智慧；杨翰；潘洁；史晓奕；曹胜利；温培豪；金强；张水军 刊期： 2017年第07期
目的 观察胆管组织内B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)及B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白表达,探讨缺血后处理诱导肝脏缺血再灌注损伤过程中胆管细胞凋亡的机制.方法 健康雄性SD大鼠24只,随机分为假手术(SO)组、缺血再灌注(IR)组、缺血后处理(IPO)组,每组8只.缺血后处理的方法:再灌注之前,预再灌注10 s、停灌注10 s,反复6次.检测血清中γ-谷氨酰胺转酞酶(γ-GT)活性,免疫组织化学法测定胆管组织中bcl-2和bax蛋白表达.用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测胆管细胞凋亡指数.结果 与IR组(34.64 ±3.28) U/L比较,IPO组血清内γ-GT活性(26.30±3.32) U/L降低,差异有统计学意义(P=0.001);与IR组[(42.67±3.73)％]比较,IPO组胆管组织bcl-2蛋白[(77.94±5.25)％]表达增高,bax蛋白表达[(70.10±4.27)％比(90.17±2.12)％]减少,差异均有统计学意义(P=0.000).IPO组凋亡指数(AI)[(58.90±2.75)％]较IR组[(79.31±1.12)％]下降(P=0.000),胆管细胞病理形态学损伤减轻.结论 缺血后处理通过促进bcl-2蛋白表达、抑制bax蛋白表达,减少SD大鼠肝脏缺血再灌注过程中胆管细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注对胆管细胞的损伤.
作者：郭怀斌；刘小帅；暴雷；王春城；王兰辉；张万星 刊期： 2017年第07期
目的 利用肿瘤基因组数据库(TCGA)探索多梳基因(PcG)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达.方法 从TCGA数据库中下载PcG在HCC中表达的RNA测序数据,其中包含HCC样本371例和其中与其对应的癌旁正常肝组织样本50例,多梳家族抑制复合物1(PRC1)基因20个,多梳家族抑制复合物2(PRC2)基因11个,共计31个PcG的RNA测序结果,分组整理后利用统计软件进行统计分析各基因在肝癌组织和癌旁正常肝组织中的表达差异.结果 PRC1基因中表达上调的基因有11个,下调的有5个,表达没有变化的4个;PRC2基因中表达上调的基因有8个,下调的有1个,表达没有变化的2个.结论 PcG在HCC中的表达变化复杂,以表达上调为主.利用TCGA数据库探索不同基因在肿瘤中的表达是一个快速而有效的筛查方法,有利于临床医生快速有效筛查感兴趣的目的研究基因.
作者：姚文敏；袁观斗；何松青 刊期： 2017年第07期
目的 探讨抗人类表皮生长因子受体-2(Her-2)单链抗体(scFv)抑制高表达Her-2的肿瘤细胞生长增殖,探讨其应用于Her-2阳性肿瘤治疗的可行性.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术从携带Her-2-scFv片段的质粒pUC57-Her-2-scFv获得目的基因,双酶切法将目的基因Her-2-scFv插入质粒载体pET28a构建表达质粒,转化入Rosetta大肠杆菌诱导表达,获得目的蛋白,并复性、纯化.Western blot证实表达.噻唑蓝(MTT)法检测目的蛋白对肿瘤细胞T6-17增殖的抑制作用.将肿瘤细胞T6-17在裸鼠皮下成瘤,观察抗Her-2单链抗体抑制肿瘤细胞生长.结果 经基因测序鉴定,重组质粒pET28a-Her-2-scFv构建成功.转化入Rosetta菌表达并分离纯化,可获得纯度约为90％的目的蛋白.MTT法测定发现,抗Her-2-scFv组对T6-17细胞的的生长抑制率为33.52％,曲妥珠单抗治疗组的生长抑制率为34.79％,两组比较差异无统计学意义(P =0.429),而与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.000).进而检测Her-2-scFv对裸鼠肿瘤模型生长抑制作用发现,Her-2-scFv各浓度治疗组均表现出抑瘤效应,100、250、500 ng/kg组的抑瘤率分别为33.7％、27.2％、63.3％,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.027、0.035、0.000).赫赛汀组抑瘤率为70.2％,与500 ng/kg组比较,差异无统计学意义(P =0.643).结论 抗Her-2单链抗体在体内外均可显著抑制Her-2阳性肿瘤细胞T6-17的生长增殖.
作者：周扬；刘宁波；黄飞；张国敬；李若彤；李卫东；付蔚华 刊期： 2017年第07期
目的 探讨肿瘤抑制因子候选基因1(TUSC1)在肝细胞肝癌患者中的表达及其临床意义.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测TUSC1在58例肝细胞肝癌患者中的表达,分析其表达与患者临床生物学特征的关系.结果 TUSC1 mRNA表达水平在肝癌中低于相应的癌旁组织表达量(0.31±0.02比0.98±0.03,P=0.002),并且TUSC1 mRNA的表达量与患者的分化程度、肝内转移及门静脉癌栓(PVTT)等病理因素差异有统计学意义(x2=17.030、15.730、18.770,P=0.002、0.001、0.001).而Western blot结果显示,TUSC1在癌组织中蛋白表达量显著低于癌旁组织(120.21±12.35比1000.31±30.12,P=0.001),其表达水平与患者的病理分化程度、肝内转移和门静脉癌栓明显相关(x2=4.613、4.650、6.470,P=0.032、0.031、0.011).TUSC1 mRNA的表达与其蛋白表达具有明显的相关性(x2=10.084,P=0.001).结论 TUSC1在肝癌中表达降低,与患者病理分化程度、肝内转移和门静脉癌栓相关.
作者：陈皓；曹胜利；张嘉凯；王智慧；唐红卫；陶晓坤；王纳；钱慧宇；张增梅 刊期： 2017年第07期
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对布-加综合征(B-CS)大鼠的作用及其机制.方法 采用雄性SD大鼠,手术缩窄肝上段下腔静脉的30％,4周后建成B-CS大鼠模型.实验分为假手术组(A组,n=15)、B-CS+ VEGF组(B组,n=12)和B-CS+生理盐水组(C组,n=12).B组持续尾静脉注射VEGF 6 μg/(kg·d),A、C两组注射等量生理盐水4周.于术后8周测定门静脉压力,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化,免疫组织化学染色定量肝内外血管密度.结果 大鼠B-CS成模率约60％,B-CS大鼠均出现肝后下腔静脉及主肝静脉梗阻,肝、脾淤血肿大,肠系膜淤血水肿,腹壁静脉和门静脉扩张,门静脉压力升高[A组:(10.00±0.38) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa);B组:(15.50±0.59) mmHg;C组:(17.25±0.48) mmHg].对比生理盐水组(2.80±0.38),VEGF组(8.20±0.53)增加B-CS大鼠肝内及食管胃底周围侧枝血管新生(P=0.000),明显降低B-CS门静脉压力,减少腹水(P=0.016),减轻肝细胞气球样变性(P=0.007)和肝脾淤血(P=0.028).结论 VEGF可通过促进肝内外侧枝血管新生,改善B-CS大鼠门静脉高压症.
作者：张开明；朱荣涛；黄帅；王维杰；秦文杰；孙玉岭 刊期： 2017年第07期
目的 探讨超声实时组织弹性成像不同参数检测脑死亡所致肝脏损伤的特异性与敏感性,以及与肝组织超微结构改变的相关性.方法 巴马小型猪11头(雌雄不限,体重30 ～ 35 kg),用颅内渐进加压法建立脑死亡模型,分别于脑死亡前、脑死亡0、3、6、9h进行肝脏超声实时弹性成像定量分析,以脑死亡前为对照组,利用单因素方差检验分析不同时间组超声弹性成像11个参数的统计学差异,与肝组织电镜超微结构检测结果进行相关分析;利用受试者工作特征(ROC)曲线分析超声弹性成像评价脑死亡所致肝脏损伤的各参数临界值.结果 在超声弹性成像检测结果的1 1个参数中,应变均值(MEAN)、标准偏差(SD)、蓝色区域百分比(％AREA)、复杂度(COMP)、偏度(SKEW)、相关性(CORR)6个参数在不同时间组间差异均有统计学意义(P=0.000),其中MEAN随脑死亡时间延长逐渐由117.20 ±8.74降至93.30±3.76;电镜检测肝组织超微结构结果显示随脑死亡时间延长,肝组织逐渐出现不可逆性的损伤,脑死亡后9h与0h差异有统计学意义(P=0.027);超声弹性成像6个参数与电镜检测结果具有相关性,其中MEAN与其相关性高(r=0.59,P=0.000);以脑死亡后9h为时间截点,利用ROC曲线分析得到MEAN评价脑死亡所致肝脏损伤的临界值为99.82.结论 脑死亡状态导致的肝脏损伤是缓慢渐进的,超声组织弹性成像技术作为一种无创的检查方法可初步评价脑死亡肝脏损伤,且与肝组织超微形态学具有良好的相关性.
作者：赵静雯；唐缨；牛宁宁；于慧敏；刘洋 刊期： 2017年第07期
目的 探讨白细胞介素-22(IL-22)对成人左半肝切除术后残肝功能和再生的情况、恢复的作用及肝再生情况的相关性,以及相关不同临床因素对IL-22表达的影响.方法 60例左半肝切除患者纳入本研究,利用逐步回归分析比较术后不同时间点IL-22与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肝脏再生率(LRR)及临床因素的相关关系.结果 术前、术后3、7、14 d的ALT[(98±10)、(360±39)、(135±21)、101±19) U/L]、AST[(179±35)、(435±188)、(251±22)、(171±25) U/L]水平与IL-22(0.145±0.049、0.193±0.050、0.177±0.083、0.149±0.073)的表达水平呈正相关(R=0.712、0.854,P=0.037、0.022);术后3、7、14d残肝LRR[(13±6)％、(29±12)％、(38±17)％]的差异有统计学意义(P =0.009),以术后7d以内增长幅度大,之后为缓慢增长;残肝是否保留肝中静脉IL-22表达的差异无统计学意义(P=0.555、0.528、0.378).结论 肝切除术后IL-22大量表达,促进残肝功能的修复及对肝脏的再生可能具有一定的相关性,而术式对IL-22表达的影响甚小.
作者：崔子林；刘子荣；刘晓龙；王建；史瑞；王连江；李阳；吴迪；田青；张雅敏 刊期： 2017年第07期
目的 探讨紫檀芪(PTER)调节转移相关基因1(MTA1)表达抑制肝癌生长的机制.方法 应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测MTA1基因在78例肝癌组织以及相应的癌旁组织中的表达,分析其表达与肝癌临床病理特征的关系.同时PTER作用于SSMC-7721细胞24 h,Western blot及噻唑蓝(MTT)检测其蛋白表达和细胞活力.结果 (1)肝癌组织及癌旁组织中MTA1的阳性表达率分别为92.3％(72/78)和84.6％(66/78,P=0.000).MTA1在肝癌TNM分期中Ⅲ～Ⅳ期癌组织中的表达明显高于肝癌分期Ⅰ～Ⅱ期癌组织;MTA1在肝癌组织的表达水平与肝内转移、门静脉浸润明显相关.(2) PTER解析MTA1/组蛋白去乙酰化酶蛋白复合物,PTER处理后HCC的Acp53/p53为0.64,肝癌细胞活性与PTER剂量呈反比(P=0.000).(3) MTA1的表达与肝癌的增殖、转移和临床分期有关;与肝癌TMN分期呈正相关.结论 PTER通过抑制MTA1的表达来阻滞肝癌细胞的生长和进展.
作者：尹建勋；王玲；孙华朋；廖晓锋；李锟 刊期： 2017年第07期
目的 观察转化生长因子-[β1(TGF-β1)抗体对活化的肝星状细胞(HSC)中纤维性胶原、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的影响.方法 把培养的大鼠肝星状细胞株HSC-T6接种于6孔板上.设正常空白对照组,TGF-β1(1μg/L)干预组,及在TGF-β1(1μg/L)干预的基础上加入用培养基倍比稀释的TGF-β1抗体(1∶100、1∶200、1∶400、1∶800),在24 h后收集细胞,用反转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别测定各组的Ⅰ型胶原及TIMP-1的基因表达水平.结果 TGF-β1组Ⅰ型胶原及TIMP-1的基因表达水平较正常空白对照组均明显升高,且差异有统计学意义(0.740±0.048比0.405 ±0.063,P=0.004、0.925±0.051比0.613±0.068,P=0.003),在TGF-β1抗体1∶100组干预后,Ⅰ型胶原及TIMP-1的基因表达水平较TGF-β1组下降,且差异有统计学意义(0.557±0.047比0.740±0.048,P=0.005;0.703±0.063比0.925±0.051,P=0.004),但仍高于正常空白对照组,差异有统计学意义(P=0.008,P=0.008),TGF-β 1抗体1∶200、1∶400、1∶800组干预后,Ⅰ型胶原及TIMP-1的基因表达水平较TGF-β 1组差异无统计学意义(P=0.086,P=0.112,P=0.137,P=0.069,P=0.097,P=0.128).结论 TGF-β1使Ⅰ型胶原和TIMP-1的基因表达水平升高,加入滴度为1∶100的TGF-β 1抗体后可在一定程度上抑制Ⅰ型胶原和TIMP-1的基因表达水平.
作者：李书香；王爱民 刊期： 2017年第07期
环状RNA (circRNA)由RNA前体可变剪接产生,比线性RNA稳定性更强,是近几年RNA研究领域的热点.circRNA与多种疾病的发生发展密切相关,可通过调控miRNA、蛋白及其亲本基因和编码蛋白,从而发挥特定的生物学功能.近年来circRNA与肝脏疾病的研究逐渐增加,circRNA可能成为新的生物学标志物发挥诊断和预后的作用.本文主要介绍了circRNA在肝细胞性肝癌等肝脏疾病中的研究进展.
作者：付航玮；陈平 刊期： 2017年第07期
肝癌被认为是异质性强的肿瘤之一.肝癌的异质性包括肿瘤间异质性和肿瘤内异质性,两者既相互区别又紧密联系,其中既有遗传异质性又有微环境异质性.肿瘤异质性提示了“单次活检所得的遗传特征和微环境信息”的不足,它所强调的多样性和动态变化,对研究个体肝癌发展史、攻克耐药性及实现真正意义上的个体化精准治疗有着重要的理论价值和临床意义.
作者：高强；樊嘉 刊期： 2017年第07期
