目的:探讨白介素-4(IL-4)、白介素-13(IL-13)以及β2肾上腺素能受体(ADRβ2)基因多态性与我国汉族慢性阻塞性肺病(COPD)发生之间的相关性.方法:本研究采用病例对照性研究,通过聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测106例COPD患者和72例健康对照者IL-4[-589 C/T、-33 C/T、可变数目串联重复序列(VNTR)]、IL-13(-1111 C/T、-2044 G/A)以及ADRβ2(-46 A/G及-79 C/G)的基因多态性,同时以Taq-Man等位基因识别技术检测单倍型频率、基因型以及等位基因频率.结果:COPD组与对照组的ADRβ2-79 C/G基因型的频率分布存在显著性差异(P=0.002).同时,2组间单倍型基因频率(IL4-589 C/T:ADRβ2-79 C/G以及IL4 VNTR:ADRβ2-79 C/G)也存在显著性差异(P值分别为0.033与0.001).结论:ADRβ2-79 C/G基因多态性及单倍型可能参与COPD的发病机制.
作者:曹霞;李清泉;陈国忠;胡克 刊期: 2009年第02期
通过报道1例典型的月经前哮喘(PMA),结合复习相关文献,讨论PMA的患病率、发病机制和治疗.40%左右女性哮喘患者月经前出现哮喘加重,但经平喘治疗后仍每次月经前均发作或加重的典型PMA仍少见,PMA的发病机制尚不清楚,可能与体内性激素改变有关,其治疗除哮喘防治指南中常用药物外还包括白三烯调节剂、黄体酮肌肉注射、口服避孕药、促性腺激素释放激素类似物等甚至包括双侧卵巢切除等,国外多种特殊治疗疗效不一,缺乏大量临床实验,所以有待更多相关研究.
作者:杨澄清;胡苏萍;袁竹青;李晓尘;王慎临 刊期: 2009年第02期
目的:研究中西医结合对痛风的治疗作用.方法:将160例痛风患者分为2组.治疗组:中西医结合,苯溴马隆片50 mg/d,威草胶囊2粒/次,3次/d;对照组:苯溴马隆片50 mg/d,1次.结果:①治疗组与对照组总有效率分别为95%、70%,两组有统计学意义(P<0.05).②治疗组血β2-M明显下降(P<0.01),对照组无变化(P>0.05),治疗组血红蛋白较治疗前明显改善(P<0.01),两组有明显统计学意义(P<0.01),24h尿蛋白治疗组治疗后有显著改善(P<0.01),对照组无统计学意义(P>0.05),两组均能改善pH值(P<0.01).组间比较无统计学意义(P>0.05).③两组均能降低血尿酸,但治疗组更为明显(P<0.01).④对BUN、Scr、Ccr,血脂治疗组治疗前后有显著改善(P<0.01),对照组无变化(P>0.05),两组比较有明显统计学意义.结论:中西医结合能显著降低血尿酸及血脂,改善肾功能,减少蛋白尿.
作者:程虹;宋恩峰;任开明 刊期: 2009年第02期
目的:对局麻下低温等离子射频治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的疗效进行观察,为该手术的选择提供理论依据.方法:选用低温等离子射频于局麻下分别对138例OSAHS患者进行腭咽成形术治疗,术后随访6个月和12个月.根据手术前后PSG监测结果,得出治疗有效率,并比较睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)及低血氧饱和度(LSaO2)改善情况.结果:术后6个月、12个月总有效率分别为85.7%和79.7%,平均AHI分别降低56.2%(P<0.01)及50.5%(P<0.05),平均LSaO2分别升高15.5%(P<0.05)及14.0%(P<0.05).术后12个月与6个月比较,疗效差异无统计学意义,P>0.05.所有病例无术后呼吸道梗阻、无大出血等严重并发症.结论:局麻下低温等离子射频治疗OSAHS疗效确切,手术安全.在病例选择合适时,用局麻下行低温等离子射频腭咽成形术方法可达到全麻下行UPPP手术效果,在病例选择合适时用局麻方法可达到全麻手术效果.该术式可以成为OSAHS患者手术治疗的选择之一.
作者:罗志宏;蔡林利;陈金辉;陶泽璋 刊期: 2009年第02期
目的:探讨早期骨移植对四肢开放性骨折骨缺损治疗的临床疗效.方法:21例开放性骨折骨缺损患者,早期分别采用自体骨移植(13例,占61.9%)和局部骨膜瓣转位加自体骨移植(8例,占38.1%)治疗,其中13例行一期清创并植骨,8例在急诊清创后8-12 d内闭合伤口并同时植骨.结果:所有病例经3-8个月随访(平均6.4个月),20例伤口一期愈合(占95.2%),1例发生创面感染经换药治疗后愈合.所有病例骨折均愈合,骨缺损修复时间为12-26周,平均18.6周.结论:早期骨移植治疗四肢开放性骨折骨缺损可取得较好的治疗效果.
作者:吴仕斌;喻爱喜;邓凯;漆白文 刊期: 2009年第02期
目的:探讨子宫内膜异位症患者腹腔液中炎性因子IL-6对在位子宫内膜容受性的影响.方法:取子宫内膜异位症患者(20例)和非子宫内膜异位症患者(15例)腹腔液及窗口期子宫内膜,进行IL-6ELASA法和整和素αvβ3免疫组化方法测定,并进行比较.结果:子宫内膜异位症患者子宫内膜表面上皮、腺上皮细胞和间质细胞中整合素αvβ3的表达低于对照组(P<0.05);而腹腔液中IL-6的浓度明显高于对照组(P<0.05);且随IL-6浓度增高时整合素αvβ3的表达进一步减少,呈负相关.结论:子宫内膜异位症患者腹腔液中IL-6浓度增高,同时在位子宫内膜在移植窗口期整合素αvβ3的表达减少,且二者呈负相关性,表明高浓度的IL-6抑制了整合素αvβ3的表达,从而影响了子宫内膜的容受性.
作者:李小丹;杨菁;尹太郎;罗金;李星;徐望明 刊期: 2009年第02期
目的:探讨臣噬细胞集落刺激因子(M-CSF)在骨巨细胞瘤中的表达与肿瘤病理学分级及生物学行为的相关性.方法:对58例骨巨细胞瘤进行Jaffe分级;采用组织学方法观察出血坏死、侵袭血管或周围组织,病例随访6月-6年确认是否复发;免疫组化SP法检测M-CSF在骨巨细胞瘤中的表达,半定量分析它们与肿瘤病理Jaffe分级及生物学行为之间的相关性.结果:Jaffe分级与肿瘤生物学行为无明显相关性;M-CSF表达与肿瘤的出血坏死、侵袭存在一定的相关性,而与肿瘤的复发无明显相关性;M-CSF表达强度与病理Jaffe分级呈负性相关关系.结论:通过检测骨巨细胞瘤中M-CSF的表达,可以协助进行肿瘤病理Jaffe分级,推断肿瘤的生物学行为并判断预后.
作者:韩艳久;彭昊;方洪松;杨二平 刊期: 2009年第02期
目的:探讨陈-施呼吸(CSR)对慢性充血性心衰(CHF)患者超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、脑钠肽(BNP)水平的影响.方法:将入选的心衰患者进行整夜多导睡眠监测,根据监测结果分为有CSR组和无CSR组.分别对两组的睡眠呼吸相关情况、心脏形态及功能、血液生化指标及BNP、hs-CRP值进行比较,并探讨伴有CSR心衰患者的中枢性睡眠呼吸暂停低通气指数(CAHI)与上述指标的相关性.结果:伴有CSR的CHF患者睡眠呼吸紊乱各指标均高于对照组,夜间低血氧饱和度(SaO2)更低,SaO2<90%时间百分比更长.存在CSR组BNP高于无CSR组,左室射血分数低于对照组,升主动脉内径和左心房内径均明显高于对照组,两组间hs-cRP没有统计学差异.结论:睡眠呼吸障碍在心衰患者中有很高的发生率,特别是当出现了CSR时,可以加重心衰患者的心功能下降程度、加重心脏结构的改变并引起很多其他血液生化改变,导致心衰患者症状加重,预后更差.
作者:胡克;刘丹;何静雅;刘旭;李晓尘 刊期: 2009年第02期
目的:研究血浆氧化低密度脂蛋白(OxLDL)、高敏C反应蛋白(hsCRP)与动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死之间的关系.方法:选取75例经头颅MRI确诊的动脉粥样硬化性脑梗死住院患者,腔隙性脑梗死、心源性栓塞性脑梗死及病因不明性卒中均不在收集范围;同时选取同期体检年龄、性别一致的健康人群32例作为对照组.采用ELISA试剂盒检测血浆OxLDL水平,高敏c反应蛋白采用免疫比浊法检测,其他脑梗死危险因素如年龄、性别、血脂等数据也一并收集.由同一名神经科专业医师参照美国国立卫生院卒中量表对病例组进行神经功能缺损评定即NIHSS评分.结果:病例组血脂、血浆OxLDL水平以及血清hsCRP含量均显著高于对照组(P<0.05),且血浆OxLDL水平、血清hsCRP水平与NIHSS(national institutes of healthy stroke scale)评分呈正相关(r=0.685,r=0.673;P<0.05),而血脂水平与NIHSS评分则无相关关系.结论:血浆OxLDL水平、血清hsCRP与动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死严重程度有一定关系.
作者:方晓霞;周珂 刊期: 2009年第02期
目的:探讨自慰在未婚慢性前列腺炎患者中的治疗价值.方法:对67例未婚男性青年(20-25岁)患有慢性前列腺炎患者,均口服依诺沙星0.2 g 2次/d,那妥25 mg 1次/d 8周,随机抽取其中40例指导每周自慰1次,其中10人不遵医嘱每周自慰超过3次,共分为3组.8周后对3组的治疗效果比较.结果:在慢性前列腺治疗8周后,自慰组的治疗效果明显优于另两组.结论:自慰可以释放性冲动,减少性冲动时会阴部的充血,自慰达到性高潮时,可有利于前列腺液的排出,解除前列腺液在腺体内淤积所造成的一系列症状,对慢性前列腺炎的治疗是有价值的.
作者:刘加元;贾波;邓思文;夏涛;钱海洋;姚俊波 刊期: 2009年第02期
目的:分析希佩尔-林道病(VHL)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)在家族性腺瘤性息肉病中的表达,并探讨其在腺瘤形成以及癌变过程中的可能作用机制.方法:收集我科2003年3月到2007年8月10例家族性腺瘤性息肉患者手术切除标本,分别取正常肠黏膜组织、≥1 cm的腺瘤性息肉以及癌变腺瘤组织,采用SP法免疫组化方法检测VHL和VEGF在这些标本组织中的表达.结果:VHL阳性信号呈棕黄色主要表达于胞质内,VEGF阳性表达为棕黄色,主要表达于肿瘤细胞胞质.VHL在正常肠黏膜组织和≥1 cm的腺瘤性息肉中的表达均较强,两者相差并不显著(x2=2.4,P>0.05),但明显高于VHL基因在癌变腺瘤中的表达,差异具有统计学意义(x2=7.2,P<0.05;x2=14.4,P<0.05);VEGF在正常肠黏膜细胞、≥1 cm的腺瘤性息肉到癌变腺瘤组织中阳性表达率不断升高,差异具有统计学意义(x2=5.051,-P<0.05;x2=11.52,P<0.05).结论:VHL可能作为肿瘤抑制基因参与了家族性腺瘤性息肉的发展,VHL和VEGF血管内皮生长因子的异常表达与腺瘤到癌变的过程密切相关.
作者:陶琦;钱群 刊期: 2009年第02期
目的:探讨检查性官腔镜在助孕治疗失败后要求再次进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的患者中的应用价值.方法:回顾性分析曾行IVF-ET失败要求再次行IVF-ET患者159例,根据是否在第2次IVF-ET前接受官腔镜检查分为A、B两组,根据官腔镜检查情况将A组分为官腔形态正常组(A1组)与官腔形态异常组(A2组),分析A组官腔镜检查情况,并比较在A1组、A2组和B组在重复IVF-ET周期中优质胚胎率、着床率、临床妊娠率.结果:宫腔镜检查53.8%官腔形态正常,46.2%发现官腔内微小病变,包括子宫内膜息肉、子宫内膜炎、官腔轻度粘连、子宫黏膜下肌瘤、子宫内膜增殖和子宫内膜发育不良;经过官腔镜检查后的A组临床妊娠率与着床率明显较未行官腔镜检查的B组高,A1组临床妊娠率和着床率较B组低,但其结果无统计学差异;A2组临床妊娠率和着床率显著高于B组.结论:宫腔镜可以发现存在于宫腔内的微小病变;IVF-ET失败患者应放宽官腔镜检查指征,以提高重复周期的临床妊娠率和着床率.
作者:徐兰萍 刊期: 2009年第02期
目的:探讨骨桥蛋白(OPN)在硬皮病患者局部皮损表达和分布情况.方法:采用免疫组化SABC法分别检测硬皮病皮损20例(系统性硬皮病12例,局限性硬皮病8例)和正常皮肤10例中OPN蛋白的表达情况.结果:OPN蛋白在硬皮病患者皮损真皮层的成纤维细胞中表达明显增高,而正常对照组仅少数呈微弱表达(P<0.01),其在系统性硬皮病患者和局限性硬皮病患者之间表达无明显差异(P>0.05).结论:OPN蛋白在硬皮病患者皮损成纤维细胞内明显高表达,提示OPN可能参与了硬皮病的发病机制,对纤维化的形成发挥一定的作用,并对局限性和系统性硬皮病有相似的作用机制.
作者:黄茜;段逸群;王玮蓁;李东升 刊期: 2009年第02期
目的:研究腋淋巴结阴性乳腺癌(ALNNBC)血管内皮生长因子(VEGF)血清浓度与乳腺癌微转移关系.方法:采用巢式RT-PCR方法,检测62例ALNNBC外周血人类乳腺珠蛋白(hMAM)mRNA的表达,阳性表达者判定为乳腺癌微转移;ELISA方法检测患者VEGF血清浓度.分析hMAM mRNA表达及VEGF血清浓度与相关临床病理因素间的关系,VEGF血清浓度与微转移及复发转移的关系.结果:ALNNBC中c-erbB2阳性表达者hMAM mRNA阳性表达率高(P<0.05);hMAM mRNA阳性表达提示乳腺癌存在微转移;ER阴性、P53阳性、c-erbB2阳性、hMAM mRNA阳性表达组VEGF血清浓度高(P<0.05或者P<0.01);高VEGF浓度组无复发生存率较低(P<0.05).结论:ALNNBC外周血血清VEGF高浓度与微转移及临床复发和转移密切相关,血清VEGF浓度可能是ALNNBC预后预测因子.
作者:胡卫东;林从尧;胡名柏;毛明 刊期: 2009年第02期
目的:探讨人类白细胞抗原-G(HLA-G)在原发性皮肤黑色素瘤(CMM)中的表达情况及其与孕激素受体(PR)表达的关系.方法:以免疫组化法检测35例原发性CMM、12例痣细胞痣(6例炎性痣细胞痣,6例普通痣细胞痣)HLA-G及PR的表达,并结合临床及组织病理学资料进行分析.结果:HLA-G与PR均在CMM中选择性表达.HLA-G蛋白表达与肿瘤微环境炎细胞浸润显著相关.PR表达在女性、年龄≤55岁、病程>1年、溃疡以及非肢端型组织亚型的阳性比例增高,但均无统计学意义.HLA-G与PR在CMM中的表达无显著相关.结论:HLA-G在CMM中的表达调节可能与肿瘤微环境中宿主抗肿瘤免疫反应有关,而与孕激素无关.
作者:方险峰;鲍五一;李家文 刊期: 2009年第02期
目的:探讨聚乙烯醇(PVA)涂层对电极植入脑皮层后神经胶质酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法:22只Wistar大鼠采用左右脑自身对照,分别植入纯硅胶电极(对照)和有PVA共聚物膜涂层的硅胶电极.植入后4周、8周进行病理检查,并用免疫组化方法观察脑组织GFAP的表达.结果:4周时,50-100μm及100μm外PVA涂层电极GFAP表达较对照电极少(P<0.05);8周时,PVA涂层电极在电极组织界面0-50μm、50-100μm及100μm外GFAP表达均较对照电极减少(P<0.05).两组电极各自8周50-100μm及100μm外的GFAP表达均较自身4周时少.结论:PVA涂层可减少电极组织界面GFAP的表达强度,改善植入电极的生物兼容性.
作者:叶明;李涛;段晏文;曹余良;鲁艺;李承晏 刊期: 2009年第02期
目的:探讨配体活化的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制结肠癌细胞生长,及诱导细胞凋亡的作用.方法:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫杂交(Western-blot)法测定PPARγ在SW480和LS174T结肠癌细胞中的表达.MTT法检测PPARγ激动剂15脱氧前列腺素J2(15 d-PGJ2)和吡格列酮(Pioglita-zone,PGZ)对结肠癌细胞生长的抑制作用.流式细胞术检测细胞凋亡率,电镜观察凋亡细胞形态.免疫细胞化学法检测凋亡相关分子Fas、bcl-XL蛋白表达的变化.结果:PPARγ在SW480和LS174T结肠癌细胞株中均有表达,15 d-PGJ2和PGZ对两种细胞的生长均有抑制作用,并呈剂量依赖效应.15 d-PGJ2和PGZ显著诱导结肠癌细胞凋亡率增加(P<0.05或P<0.01),电镜显示凋亡细胞特有的形态学改变.免疫细胞化学结果显示,PPARγ激动剂诱导Fas蛋白表达明显增多(P<0.01),bcl-XL蛋白表达显著降低(P<0.01),该改变与凋亡程度呈正相关.结论:PPARγ经配体活化后,通过诱导凋亡抑制结肠癌细胞增殖,该作用可能与促凋亡基因Fas抗原表达上调以及凋亡抑制基因bcl-XL表达下调相关.
作者:沈丹;邓长生 刊期: 2009年第02期
目的:观察逆转录酶抑制剂叠氮胸苷(齐多夫定,Azidothymidine,AZT)联合放射线对人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法:建立人喉鳞癌荷瘤裸鼠模型,应用AZT联合放射线治疗人喉鳞癌裸鼠移植瘤,观察其对肿瘤体积、端粒酶活性、hTERT蛋白表达效率及凋亡的影响.结果:与对照组相比,放射组和AZT+放射组肿瘤生长速度受到明显抑制(P<0.05),提示放疗、AZT联合放疗均能抑制肿瘤生长,且后者抑瘤率显著高于前者(P<0.05).端粒酶活性(TA)及hTERT蛋白检测结果一致,即放射组>对照组>AZT+放射组>AZT组,提示低剂量放疗能够引起肿瘤细胞端粒酶活性的升高,而AZT能够有效抑制抑制辐射所致的端粒酶活性增高.凋亡指数为AZT+放射组(9.60±0.97%)>单纯放射组(6.91±1.65%)>AZT组(5.17±0.71%)>对照组(0.77±0.27%).结论:AZT联合放射线能有效的抑制人喉癌裸鼠移植瘤的生长,AZT能增加肿瘤的放射敏感性.
作者:刘艳屏;周福祥;徐禹;张喜梅;黄成虎;廖正凯;谢丛华;刘诗权;周云峰 刊期: 2009年第02期
目的:研究大黄对尿酸性肾病大鼠肾组织碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和环氧合酶2(COX-2)的作用及探讨大黄治疗肾脏病的作用机制.方法:将32只SD雄性大鼠随机分为4组,即正常对照组、模型组、大黄组、别嘌呤醇组,用酵母和腺嘌呤合用造模,造模成功后分别给予生理盐水、大黄、别嘌呤醇灌胃,治疗2周后,检测各组大鼠血中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA),应用免疫组织化学技术检测大鼠组织bFGF和COX-2的表达情况.结果:与正常对照组比,模型组血UA、BUN、Cr均明显升高(P(0.05),COX-2、bFGF在肾组织表达明显增加(P<0.01);与用药前比,用药后,大黄组和别嘌呤醇组大鼠血UA、BUN、Cr均明显降低(P<0.05),大黄组血UA、BUN及Cr水平与别嘌呤醇组比,差异无显著性(P>0.05),而大黄组肾组织bFGF与COX-2表达明显低于别嘌呤醇组(P<0.01).结论:大黄能降低bFGF、COX-2在尿酸性肾病大鼠模型肾组织中的表达,从而减轻肾脏损害,保护肾功能.
作者:倪晴帆;胡家才 刊期: 2009年第02期
目的:探讨小檗碱预防颈动脉粥样硬化形成的作用机制.方法:将24只雄性新西兰大白兔随机分成3组:正常组、颈动脉粥样硬化组(模型组)、小檗碱预防组(小檗碱组).正常组给予正常饮食,模型组行高脂饲料喂养加颈动脉内膜空气干燥术建立颈动脉粥样硬化模型,小檗碱组在给予模型组相同处理的同时灌服小檗碱.术后4周麻醉处死,取颈动脉组织行HE染色、NF-κB P65免疫组织化学染色、RT-PCR法测NF-κB P65 mRNA表达水平.结果:模型组血管病变以泡沫细胞为主,有动脉粥样斑块形成;小檗碱组血管主要显示内膜明显增厚,有少量泡沫细胞;小檗碱组NF-κB P65阳性细胞数密度高于正常组(P<0.05),明显低于模型组(P<0.05);RT-PCR半定量分析发现,小檗碱组NF-κB P65/β-actin扩增带吸光度值比值高于正常组(P<0.05),而明显低于模型组(P<0.05).结论:小檗碱可能通过抑制NF-κB活性,降低组织中NF-κB含量,预防颈动脉粥样硬化形成.
作者:王建;何国厚;李承晏;刘勇 刊期: 2009年第02期
目的:观察妊娠状态下大鼠肝脏外源物代谢相关酶活性的变化,探讨其可能带来的临床意义.方法:雌性大鼠分为未受孕和受孕(妊娠21 d)两组.测定两组大鼠肝脏外源物代谢相关酶(包括Ⅰ相酶、Ⅱ相酶和抗氧化酶)活性.结果:受孕组大鼠肝微粒体Ⅰ相酶--细胞色素P450(CYP450)1A1、1A2、1B1、2B1、2El和3A活性分别下降至未孕组的62.3%(P<0.01)、43.8%(P<0.01)、75%(P<0.05)、80%、64.6%(P<0.05)和87.8%,而Ⅱ相酶葡萄糖醛酸转移酶(UGT)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性分别增加至未孕组的1.23倍(P<0.05)和1.17倍(P<0.05).受孕组大鼠肝细胞质超氧化物歧化酶(SOD)活性增加至未孕组的1.31倍(P<0.01),而谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(Cat)活性下降至未孕组的81.2%(P<0.01)和47.5%(P<0.01).谷胱甘肽还原酶(GSH-Re)活性没有显著差异.结论:妊娠状态下,大鼠肝脏外源物代谢酶活性均发生变化.这酶活性改变可能是母体对妊娠时期机体生理学变化的一种适应性保护作用,该变化将影响妊娠母体的药物代谢能力及临床疗效.
作者:郭喻;肖凤琴;王婷;汪晖;潘晓靓;李婧婷 刊期: 2009年第02期
目的:研究灯盏花素从细胞凋亡方面对病毒性心肌炎的治疗作用.方法:建立病毒性心肌炎的模型.40只Balb/c雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、病毒感染组(n=15)和灯盏花素组(n=15),在感染后第9天处死小鼠,取其心脏进行检测.用HE染色法观察其心肌病理变化,免疫组化法观察Caspase-3情况,用TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况.结果:①治疗组心肌病理变化改变减轻(P<0.01);②治疗组Caspase-3的表达较感染组低(P<0.05);③治疗组心肌细胞凋亡少于感染组(P<0.01).结论:细胞凋亡在病毒性心肌炎中发挥重要作用,灯盏花素对病毒性心肌炎有治疗作用.
作者:黄星原;陈莉琼;王世红;蔡珊珊 刊期: 2009年第02期
目的:探讨缺血后处理、缺血预处理及两者联合应用对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织超微结构及热休克蛋白70(HSP70)的影响及其可能的机制.方法:采用改良的四血管法制造大鼠全脑缺血模型,实验分5组,假手术A组、缺血再灌注B组、缺血预处理C组、缺血后处理D组,联合处理E组,各组动物分别于再灌注结束后(6,8,24 h)断头处死.采用免疫组织化学染色的方法测定大鼠脑组织中HSP70灰度值;电镜观察脑组织超微结构的变化.结果:缺血再灌注损伤后,各组脑组织HSP70表达增强,在各时间点E组HSP70表达明显高于B组、C组、D组,差异有显著性(P<0.01),C组与D组在各时间点无明显差异(P>0.05);电镜下观察B组脑组织损伤重.E组脑组织损伤轻,C组和D组优于B组.结论:短暂脑缺血再灌注损伤可诱导HSP70表达,有利于脑缺血再灌注后损伤神经元的修复.
作者:胡玲;许喜泳 刊期: 2009年第02期
目的:探讨核因子kB(NF-kB)的亚单位RelA反义寡核甘酸对人细胞滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2,-9表达的影响.方法:离体培养人早孕期细胞滋养细胞(CTB),将反义和正义RelA寡核酸片断分别瞬时转染CTB,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶-2,-9的mR-NA和蛋白表达.结果:CTB转染RelA反义寡核甘酸后,MMP-9的mRNA和蛋白的水平均下降(P<0.05),而MMP-2 mRNA和蛋白水平均无显著变化(P>0.05).结论:RelA反义寡核甘酸可以调节细胞滋养细胞MMP-9的表达,提示RelA可能通过调节MMP-9的表达参与胚泡着床过程中滋养细胞对子宫内膜的侵袭.
作者:江平;谢青贞 刊期: 2009年第02期
目的:观察肺炎支原体(MP)诱导A549细胞产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的相关性,为MP肺炎的临床诊治提供依据.方法:体外培养A549细胞和MP,用感染复数为1:20的MP加入到A549细胞中共同孵育,采用双抗体夹心ELISA法检测不同刺激时间的MP作用A549细胞后分泌TNF-α和IL-8的含量.结果:MP能显著诱导A549细胞分泌TNF-α和IL-8(均P<0.01),经相关回归分析,其产生的水平与刺激时间具有依赖性(r=0.821,0.911,P<0.01),且二者之间具有量的正相关(r=0.942,P<0.01).结论:MP诱导A549细胞产生的炎性细胞因子TNF-α和IL-8具有量的正相关性.
作者:吴小兰;刘先洲;汤纪路;陈艳才 刊期: 2009年第02期
目的:采用破骨细胞与多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)体外混合培养方法,观察其对PCCC的降解作用.方法:从新生SD大鼠长骨骨髓中分离出破骨细胞,与PCCC材料混合培养,分别于48 h及96 h终止培养并观察.结果:在倒置显微镜下见破骨细胞体呈圆形或椭圆形,多核,胞质伸出许多细微突起.抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性.扫描式电子显微镜观察见在PCCC表面出现许多散在分布的吸收空隙,直径一般50 μm,破骨细胞位于其中.96 h见吸收空隙增大.结论:破骨细胞在体外培养条件下对PCCC材料有明显吸收降解作用.
作者:杨帆;谭金海;邢林卿;熊亮;雷鹏程 刊期: 2009年第02期
目的:研究地昔帕明预处理对大鼠急性心肌缺血后交感神经重构的影响,并探讨室颤阈值的变化.方法:60只SD大鼠随机分为3组:心肌缺血组夹闭左冠状动脉前降支30 min;地昔帕明预处理组先单次静脉给予地昔帕明0.8 mg/kg,5 min后夹闭左冠状动脉前降支30 min;地昔帕明组夹闭左冠状动脉前降支10 min后再给予地昔帕明.喂养1周后开胸测定室颤阈值,免疫组化法观察大鼠心室肌中生长相关蛋白43(GAP43)和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经纤维的分布和密度.结果:心肌缺血组的神经纤维分布紊乱,密度明显高于预处理组和地昔帕明组(P<0.05);其室颤阈值(7.2±1.30)V较预处理组的(11.0±2.65)V显著降低.预处理组的室颤阈值与地昔帕明组的(10.4±3.05)V相比无显著差异(P>0.05),神经纤维密度却明显降低(P<0.05).结论:地昔帕明预处理能够改善心肌缺血后的交感神经重构,提高室颤阈值,发挥抗心律失常作用.
作者:何勃;江洪;吴校林;余锂镭;赵冬冬;张元元 刊期: 2009年第02期
目的:探讨不同浓度的盐酸壳聚糖眼液对兔角膜上皮损伤的修复作用.方法:将42只新西兰大白兔随机分成5组,其中2只制作角膜上皮损伤模型后裂隙灯荧光素染色照相后处死,其余40只(每组10只),分别为A组:0.5%盐酸壳聚糖组;B组:1.5%盐酸壳聚糖组;C组:贝复舒组(阳性对照组);D组:生理盐水组(阴性对照组).将4组兔双眼角膜中央置入直径7.00 mm的环钻,其内滴入20%乙醇约60 s后用角膜刮匙刮去角膜上皮,制作角膜上皮缺损模型,术后每组滴用眼液频率均为3次/d,各组分别于术后12,24,36,48及72 h行裂隙灯下荧光素染色照相及海德堡共焦激光角膜显微镜检查后各处死2只兔,取角膜做病理切片同时应用计算机图像处理系统测量角膜损伤后愈合面积.结果:A,B,C,D各组角膜上皮愈合速率分别为17.22,23.63,22.53,11.16 mm2/d.B组及C组作用稍强,但BC组间差异无显著性,且4组均未见显著的炎症反应及眼球刺激症状.结论:0.5%及1.5%盐酸壳聚糖眼液对角膜上皮损伤的愈合有明显的促进作用,且无副作用.
作者:徐永红;邢怡桥;张少维;陈效;伍志琴;陈曦 刊期: 2009年第02期
目的:观察丁酸钠对结肠癌细胞株SW480的生长抑制、凋亡情况以及对生成素(Survivin)表达水平的影响,探讨其预防结肠癌的作用机制.方法:人传代结肠癌细胞株SW480经不同浓度丁酸钠处理后,在不同时段收集细胞,分别用四唑蓝法检测肿瘤细胞生长增殖率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化,免疫细胞化学技术观察对Survivin基因和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平.结果:随着培养液中丁酸浓度的不断升高和培养时间的延长,SW480细胞的生长逐渐受到抑制.G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少,细胞凋亡率逐渐增高.Sur-vivin基因和VEGF随着丁酸浓度的不断升高而表达下降.结论:丁酸钠能抑制SW480细胞株增生,诱导凋亡,并抑制Survivin基因和VEGF表达.
作者:刘敏;朱尤庆;张锦 刊期: 2009年第02期
结直肠癌肝转移涉及许多分子机制,参与结直肠癌肝转移的有二十多个分子因子,这些分子因子基于其功能分成4个部分:蛋白质水解、黏附、血管生成和细胞生存.通过理解其中许多复杂的分子机制,有望发现一些新的检测和治疗靶点,以期达到预防转移和提高病人生存率的目的.
作者:程伏林;熊斌;周云峰 刊期: 2009年第02期
本文主要综述了与骨骼肌细胞能量代谢相关的丝裂原活化蛋白激酶信号系统(MAPKs)在运动中对骨骼肌细胞的意义,以及运动对其的影响.通过了解.MAPKs的研究进展,为能更深入研究运动与骨骼肌细胞能量代谢相互作用的机制,加快运动训练与骨骼肌机能的研究进展.
作者:唐苏娜;刘瑞峰;李世想 刊期: 2009年第02期
目的:建立人喉鳞癌(Hep-2)裸鼠移植模型,比较两种建模方法成瘤效果.方法:将裸鼠随机分成两组,每组8只,两组分别于皮下接种人喉鳞癌细胞悬液和改良法皮下接种瘤块建立动物模型,观察接种成瘤率、肿块大小、生长速度;免疫组化检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达.结果:接种3 d后,改良瘤块接种法组裸鼠可见皮下隆起瘤体,接种1周后,皮下接种瘤细胞法和改良瘤块接种法成瘤率分别为75%、87.5%,比较第1周瘤体体积,P<0.05,但成瘤后肿瘤生长方面无明显的差别(比较第3周瘤体体积,P>0.05),两种方法成瘤后的瘤块hTERT蛋白表达阳性率相同.结论:采用改良瘤块接种法成瘤率高,生长速度快,且裸鼠皮下肿瘤较好的继承了人喉鳞癌细胞的重要生物学特点,该法能较好建立了人喉鳞癌裸鼠移植模型,为后续以端粒酶为靶点的体内抗肿瘤研究奠定良好基础.
作者:王伟锋;周福祥;於海军;黄成虎;谢丛华;周云峰 刊期: 2009年第02期
目的:优化流式细胞术(FCM)检测肿瘤耐药细胞中P-糖蛋白(P-gP)的细胞前处理方法,提高细胞中P-gP的检出率.方法:采用抗原决定簇在细胞膜内的单抗JSB-1,以阳性百分比为优化指标,耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/A为模型细胞,对FACSTM透化溶液的有无、FACSTM透化溶液的浓度、FACSTM透化溶液处理细胞的时间、鼠抗JSB-1抗体的孵育时间、羊抗鼠IgG-FITC(GAMIF)抗体的孵育时间、JSB-1抗体工作液的保存条件、以及细胞数量进行优化.结果:上述细胞处理方法对MCF-7/A的阳性百分比均有不同程度的影响;相对佳的细胞处理方法为:5×10 5-20×10 5个细胞用FACSTM透化溶液的6倍稀释液处理10 min,37℃下与JSB-1抗体孵育75min、与GAMIF抗体孵育30 min,JSB-1抗体工作液于4℃保存或新鲜配制.结论:对FCM检测前的细胞处理方法进行优化,能显著提高肿瘤耐药细胞中P-gp的检出率,因而更能真实、客观地反映肿瘤耐药细胞的P-gP表达水平及耐药程度.
作者:陈家宽;肖玉秀;汪明 刊期: 2009年第02期
目的:利用PCR产物靶向克隆法构建人癌-睾丸抗原NY-ESO-1的原核表达载体.方法:从人新鲜的食管癌组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增NY-ESO-1基因3'端的340 bp片段,采用靶向克隆法将目的基因插入到原核表达载体pET-15b中,得到重组表达质粒pET-15b-NY-ESO-1,经过筛选,挑选出阳性克隆进行Xho Ⅰ和BamHⅠ双酶切图谱分析、PCR检测和扩增产物核苷酸序列分析等,鉴定所构建的原核表达载体.结果:扩增得到NY-ESO-1基因片段,经测序证实与GenBank公布的序列一致,重组的质粒经过PCR,酶切鉴定获得了一个大小为340 bp的特征性片段,证明重组质粒中已成功的插入了目的基因NY-ESO-1.结论:靶向克隆法可快速、高效地构建人NY-ESO-1基因的原核表达载体,为制备pET-15b-NY-ESO-1融合蛋白奠定了基础.
作者:俞远东;徐少勇;王斌;王家宁;黄永章 刊期: 2009年第02期
目的:构建APOBEC3G真核表达载体,在体外初步探讨APOBEC3G对HBV复制表达的影响.方法:应用RT-PCR法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3G基因,分子克隆法构建表达APOBEC3G蛋白的真核表达载体pcDNA3.1-APOBEC3G,并脂质体法转染HepG2 2.2.15细胞.Western-blot鉴定细胞中APOBEC3G蛋白的表达.ELISA法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg水平,实时定量PCR检测HBV DNA和HBV mRNA水平.结果:经酶切鉴定及测序证实APOBEC3G真核表达载体被成功构建,APOBEC3G蛋白可在HepG2 2.2.15细胞中表达.转染APOBEC3G重组质粒的HepG2 2.2.15细胞的HBsAg、HBeAg、HBV DNA及HBV mRNA水平均明显低于未转染重组质粒的HepG2 2.2.15细胞.结论:APOBEC3G明显抑制了HepG2 2.2.15细胞中HBV的复制与表达,成功构建APOBEC3G真核表达载体,为深入研究APOBEC3G抗HBV的作用机制奠定实验基础.
作者:王鲁文;楮小刚;刘艳红;曹廷华;龚作炯 刊期: 2009年第02期
目的:在靶向克隆酶的作用下,利用PCR靶向克隆构建携带人神经生长因子的重组腺病毒穿梭质粒pShuttle-hNGFβ-EGFP.方法:按PCR引物设计原则设计两条引物,分别在上下游引物的5'端加上12个碱基与线性化载体切口两端同源载体序列,引物合成后PCR反应扩增目的基因hNGF-β,提纯后与EcoRV酶切的穿梭质粒pShuttle-IRES-hrEGFP在靶向克隆酶(LP Recco enzyme)的作用下37℃孵育15 min,转化感受态大肠杆菌,碱裂解法制备及纯化质粒DNA.结果:EcoRV酶切鉴定证实pShuttle-hNGFβ-EGFP构建成功.结论:在不需要限制性内切酶的情况下用靶向克隆酶连接可快速、准确得到穿梭质粒pShuttle-hNGFβ-EGFP.
作者:谢华;王清秀;王家宁;肖敏;黄永章 刊期: 2009年第02期